1、第三章 药物分析教研室1鉴别试验的内涵1鉴别试验的项目2鉴别试验的方法3鉴别试验的条件4药物的鉴别试验(Identification Test)根据药物的根据药物的分子结构分子结构，采用化学、物理化学或，采用化学、物理化学或生物学方法来判断其生物学方法来判断其真伪真伪。鉴别试验用方法仅用于证实鉴别试验用方法仅用于证实贮藏在有标签容器贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物，而非对未知物的鉴别。的鉴别。鉴别试验方法应专属，每个品种一般鉴别试验方法应专属，每个品种一般2 23 3条。条。原料药鉴别 制剂鉴别外观和物理常数确认外观和物理常数确认鉴别项下规
2、定的试验鉴别项下规定的试验鉴别项下规定的试验鉴别项下规定的试验1.外观外观 药物的药物的聚集状态聚集状态、晶型晶型、色泽色泽以及以及臭臭、味味等性质。等性质。V VB1B1的描述：本品为白色结晶或结晶型粉末；有微弱的描述：本品为白色结晶或结晶型粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅速吸收约的特臭，味苦；干燥品在空气中迅速吸收约4%4%的水的水分。分。一、性状（Description）反映药物特有的物理性质反映药物特有的物理性质2.溶解度溶解度 一定程度上反映了药品的一定程度上反映了药品的纯度纯度。溶剂体积(1g/ml)极易溶解10000溶解度尼莫地平 在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙
3、醇中溶在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。3.物理常数物理常数 评价药物质量的重要指标之一，用于药品鉴别，反评价药物质量的重要指标之一，用于药品鉴别，反映其映其纯杂纯杂程度。程度。药典收载的物理常数包括：药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。碘值、吸收系数。(1)熔点熔点固体熔化成液体的温度固体熔化成液体的温度熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度自自初熔初熔至至全熔全熔的一段温度
4、的一段温度(2)比旋度比旋度 在一定波长与温度下，偏振光透过长在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每且每1ml中含有旋光性物质中含有旋光性物质1g1g的溶液时测得的旋光度。的溶液时测得的旋光度。反映手性药物特性及其纯度的主要指标。反映手性药物特性及其纯度的主要指标。(3)吸收系数吸收系数 在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。中国药典收载是中国药典收载是%1cm1E二、一般鉴别试验（General Identification Test）只能证实是只
5、能证实是某一类某一类药物，而不能证实是药物，而不能证实是哪一种哪一种药物！药物！只适用于只适用于纯品纯品，混合药物或有干扰时不适用！，混合药物或有干扰时不适用！依据某一类药物的依据某一类药物的化学结构化学结构或或物化性质物化性质的特征，的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。通过化学反应来鉴别药物的真伪。中国药典附录收载项目中国药典附录收载项目 丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐、无机酸盐氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐、无机酸盐1.有机氟化物有机氟化物无机氟化物无机氟化物 茜素氟蓝茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸亚铈p
6、H 4.3蓝紫色蓝紫色络合物络合物2.水杨酸盐水杨酸盐FeCl3反应反应OHCOOH6+FeCl312HClO-COO-2Fe3Fe+弱酸性中性加稀加稀HClHCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于醋酸铵溶液。醋酸铵溶液。3.苯甲酸盐苯甲酸盐COONa73FeCl32OH-中性溶液COO6Fe3(OH)2OOC7NaCl2Cl-碱式苯甲酸铁盐（碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀赭色沉淀）FeCl3反应反应加稀加稀HClHCl，沉淀分解，生成游离沉淀分解，生成游离COOH白色三、专属鉴别试验（Specific Identification Test）是证实是证实某一种药物某一
7、种药物的依据，它是根据每一的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪。来鉴别药物真伪。鉴鉴 别别 方方 法法化学鉴别法化学鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法生物学法生物学法 色谱鉴别法色谱鉴别法 HPLC、GC鉴别法鉴别法 薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法纸色谱鉴别法 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 测定生成物的熔点测定生成物的熔点荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 紫外光谱
8、鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 1.1.紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法(Ultraviolet spectrophotometry)美法仑 测定测定maxmax，或同时测定，或同时测定minmin；测定一定浓度的供试液在测定一定浓度的供试液在maxmax处的处的A A 规定规定和和E E 规定规定 和和A A1 1/A/A2 2 经化学处理后，测定其反应产物的吸经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。收光谱特性。122.2.红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法(Infrared spectrophotometry)用于组分单一、结构明确的原料药，特别适用于组分单一、结构明确的原料
9、药，特别适合不易区别的同类药物，专属性强，应用广泛。合不易区别的同类药物，专属性强，应用广泛。Ch.PCh.P和和BPBP均采用均采用标准图谱对照法标准图谱对照法USPUSP采用采用对照品法对照品法试样制备方法：试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法压片法、糊法、膜法、溶液法 利用不同物质在不同利用不同物质在不同色谱条件色谱条件下，产生各自的下，产生各自的特征色谱行为（特征色谱行为（比移值比移值或或保留时间保留时间）进行的鉴别）进行的鉴别试验。试验。采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，并采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，并进行比较，根据两者进行比较，根据两者保留行为保留行为和和检测结果
10、检测结果是否一是否一致来验证药品的真伪。致来验证药品的真伪。1.薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法(Thin-Layer Chromatography)2.GC和和HPLC鉴别法鉴别法3.质谱鉴别法质谱鉴别法 (Mass Spectrometry)9-HO-LPT#1664 RT:9.39 AV:1 NL:5.18E6T:+c sid=-10.00 Q3MS 50.00-500.0050100150200250300350400450500m/z0102030405060708090100Relative Abundance427.17428.18432.18102.02274.21318.2359.94302.22415.1768.96129.93362.28433.21246.16218.16144.95473.23溶液的浓度溶液的温度溶液的酸碱度试验时间干扰成分22
