血细胞分离技术在输血医学领域中的应用课件.ppt

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1、血液成分单采在输血医学中的应用北京军区血液中心北京军区血液中心周俊周俊北京军区总医院输血科北京军区总医院输血科 血液成分单采源于“Apheresis”,英文解释(n):a procedure in which blood is drawn and separated into its components by dialysis,some are retained and the rest are returned to the donor by transfusion中文:机采,单采,分离术该技术在输血领域一直有着重要的地位,随着医疗技术水平的发展,发挥着更大的作用,在输血领域的应用也得到拓

2、展和发挥。Principles of Transfusion Medicine,1996 Ennio C.Rossi/Toby L.Simon/Gerrard S.Moss/Steven A.Gould Rossis Principles of Transfusion Medicine,2002 Toby L Simon/Walter H Dzik/Edward L Snyder/Christopher P Stowell/Ronald G Strauss 出版社:Lippincott Williams&WilkinsRossis Principles of Transfusion Medic

3、ine,2009Toby L Simon/Walter H Dzik/Edward L Snyder/Christopher P Stowell/Ronald G Strauss 成分献血自身输血输血相关治疗主要内容成分献血成分献血成分输血人体血液是由红细胞、白细胞、血小板、血浆等成份组成,每一种成份都有其特殊的功能。成分输血,根据病人的需要,以“缺什么补什么”的原则,选择性地输注某一血液成份。是现代输血的新理念。成分输血是科学、合理有效输血的基础。成分输血的优点:提高输血治疗效率降低输血不良反应发生率减少血液浪费降低患者血液循环的受血负担减轻患者经济负担成分献血成分输血医学科学和输血技术的发

4、展,实现从血液中分离出浓度和纯度较高的血液成份制剂,然后进行成分输血。发达国家成份输血占全部用血的95%以上,并以成份输血开展程度作为衡量一个国家、地区医疗技术水平高低的重要标志之一。血液制品血液制品品种品种保存温度保存温度保存期保存期1 1 浓缩红细胞浓缩红细胞4 422ACD;21ACD;21天天;CPD28;CPD28天天;CPDA 35;CPDA 35天天2 2 去白悬浮红细胞去白悬浮红细胞4 4222424小时内输注小时内输注3 3 悬浮红细胞悬浮红细胞4 422ACD;21ACD;21天天;CPD28;CPD28天天;CPDA 35;CPDA 35天天4 4 洗涤红细胞洗涤红细胞4

5、 4222424小时内输注小时内输注5 5 冰冻红细胞冰冻红细胞4 422解冻后解冻后2424小时内输注小时内输注6 6 手工分离浓缩血小板手工分离浓缩血小板2222222424小时内输注小时内输注7 7单采浓缩血小板单采浓缩血小板222222震荡保存震荡保存5 5天天8 8 机器单采浓缩白细胞机器单采浓缩白细胞2222222424小时内输注小时内输注9 9 新鲜液体血浆新鲜液体血浆4 4222424小时内输注小时内输注10 10 新鲜冰冻血浆新鲜冰冻血浆-20-20以下以下一年一年11 11 普通冰冻血浆普通冰冻血浆-20-20以下以下四年四年12 12 冷沉淀冷沉淀-20-20以下以下一年

6、一年13 13 全血全血4 422ACD;21ACD;21天天;CPD28;CPD28天天;CPDA 35;CPDA 35天天国外成份输血概况日本:红细胞29.26%血小板40.77%血 浆28.09%全 血1.88%美国:红细胞42.89%血小板39.96%血 浆11.96%冷沉淀4.69%全血0.5%国内成份输血概况上海:红细胞32.21%血小板29.82%血浆32.80%冷沉淀4.17%白细胞0.15%全血0.86%悬浮红细胞适应证适应证 手术失血的输血;各种慢性贫血;手术失血的输血;各种慢性贫血;CO中毒;高中毒;高K+血症血症、肝、肾、心功能障碍者输血;小儿、老年人输血。、肝、肾、心

7、功能障碍者输血;小儿、老年人输血。剂量剂量 成人人(60kg体重体重)400全血制备的悬浮红细胞全血制备的悬浮红细胞200ml(2U可提高血红蛋可提高血红蛋白白(Hb)10g/L。洗涤红细胞特点特点 白细胞去除率白细胞去除率80%,血浆去除率,血浆去除率90%,RBC回收率回收率70%。12h内输注。内输注。作用及适应证作用及适应证 对血浆蛋白有过敏反应的贫血病人;自身免疫性溶血性贫血;高对血浆蛋白有过敏反应的贫血病人;自身免疫性溶血性贫血;高K+血症、心、肝、肾功能障碍者。血症、心、肝、肾功能障碍者。剂量剂量 根据病情决定用量,因制备过程中损失部分红细胞,输血用量要根据病情决定用量,因制备过

8、程中损失部分红细胞,输血用量要稍大于浓缩红细胞用量。稍大于浓缩红细胞用量。机采浓缩血小板特点特点 一个单位机采血小板为一个单位机采血小板为2.5 1011血小板血小板。适应证适应证 血小板生成障碍引起的血小板减少,如白血病等;血小板功能血小板生成障碍引起的血小板减少,如白血病等;血小板功能异常,如巨大血小板综合征等;急性血小板减少:如大量输血、异常,如巨大血小板综合征等;急性血小板减少:如大量输血、体外循环等。体外循环等。剂量剂量 每平方米体表面积输浓缩血小板每平方米体表面积输浓缩血小板1.0 1011个,每个,每1-3d输输1次,持续次,持续时间视病情而定。时间视病情而定。新鲜冰冻血浆特点特

9、点 含有新鲜血液中全部凝血因子,纤维蛋白原含有新鲜血液中全部凝血因子,纤维蛋白原0.2-0.4%,其它凝血因子,其它凝血因子0.7-1%单位单位/ml。-20保存保存1 年。年。作用及适应证作用及适应证 补充全部凝血(如严重肝病,补充全部凝血(如严重肝病,DIC);目前尚不能提取浓缩制剂);目前尚不能提取浓缩制剂的一些凝血因子缺乏;出血、创伤、手术、烧伤等。的一些凝血因子缺乏;出血、创伤、手术、烧伤等。剂量剂量 10-15ml/kg。普通冰冻血浆特点特点 含有全血中稳定的凝血因子。含有全血中稳定的凝血因子。作用及适应证作用及适应证 扩充血容量,补充血浆白蛋白,补充稳定的凝血因子缺乏;扩充血容量

10、,补充血浆白蛋白,补充稳定的凝血因子缺乏;手术、外伤、烧伤、肠梗阻等大出血或血浆大量丢失。手术、外伤、烧伤、肠梗阻等大出血或血浆大量丢失。剂量剂量 10-15ml/kg10-15ml/kg。成分献血成分输血血液成分分离制备通常说的献血是全血献血,一次采集全部血液成份的过程。采集的全血需要进行血液成分的分离制备,再按照不同血液成分的储存要求进行保存,以备临床之需。血液成分单采成份献血是借助血细胞分离技术采集某一血液成份,同时将其他血液成份回输给捐献者体内的过程。采集的血液成分即机采成分血,如血小板、红细胞、血浆、粒细胞或外周血干细胞,按要求储存起来,用于临床治疗。成分献血分类血小板单采:目前最常

11、见的成份献血是机采血小板,一个健康人捐献血小板后,3天后会恢复到原来水平。血浆单采:常见于采浆站、血站红细胞单采:香港、新加坡、国外粒细胞单采:针对性治疗需求如重症感染淋巴细胞单采:治疗需求如造血干细胞移植患者成分献血程序成份献血的程序与献全血的程序基本相同需要检测献血者体内某种血液成份的含量及其它相关指标献血的时间稍长于献全血(采血过程约需0.52小时)。成分献血基本上都是在血液成分采集机上进行,最常见的成分献血是单采浓缩血小板,每献一个浓缩血小板机单位,需要4060分钟。有些成分献血在献血前医生还会预先给献血者使用一定量的细胞动员剂,以配合成分采血。成分献血优势有目的采集,减少不必要的浪费

12、,相对全血采集,对机体影响小,采血反应少,恢复快。机采浓缩血小板采出血小板和血浆,血小板的生成周期仅为红细胞的十几分之一,存活712天,献出的血小板3天左右可恢复到献血前的水平。血浆的恢复速度要比献全血快得多。国外献机采血小板的间隔时间多数为一周或两周。日本献机采血小板的间隔时间为一周,但一年不能超过24次。国内现行的献机采浓缩血小板的间隔时间一般为两周或一个月,最短为不能少于两周。机采血浆由于血浆中各种成分的生成周期都比较短,献单采血浆的间隔日期为两周。机采红细胞成分献血条件1、符合献血者一般检查年龄,体重,血压,脉搏,体温正常,一般健康状况良好。2、献血前血液检测血型检测,血红蛋白:男12

13、0g/L;女115g/L。3、单采血小板献血者:a)红细胞比容(HCT):0.36b)采前血小板计数(PLT):150109/L且450109/Lc)预测采后血小板数(PLT):100109/L。献血量及献血间隔献血量全血献血者每次可献全血400ml,或300ml,或200ml。单采血小板献血者:每次可献1个至2个治疗单位,或者1个治疗单位及不超过200ml血浆。全年血小板和血浆采集总量不超过10 L。献血间隔全血献血间隔:不少于6个月。单采血小板献血间隔:不少于2周,不大于24次/年。因特殊配型需要,由医生批准,最短间隔时间不少于1周。单采血小板后与全血献血间隔:不少于4周。全血献血后与单采

14、血小板献血间隔:不少于3个月。成分献血注意事项1、在献血前一天和当天早晨禁食鸡、肉、鱼、蛋、豆制品、奶等高脂肪食物。2、献血前一天多饮水,当日吃清淡早餐,不得空腹献血。3、献血者在献血前一周不得服用抗血小板聚集或抑制血小板代谢的药物,如阿司匹林、维生素E、消炎痛、潘生丁、氨茶碱、氯霉素及抗过敏药物的等。4、献血前保证充足的睡眠和稳定的情绪。成分献血趋势在捐献成分血的过程中,捐献者的血液都在经严格消毒的密闭管道套材中循环和分离,每位捐血者每次使用的都是一次性全新套材,绝对不会造成交叉污染,不会对身体造成任何影响。成分献血是一种最为先进的献血方式,在西方发达国家已经被广大无偿献血者普遍接受,许多人

15、忙里抽闲或利用节假日的时间前来当地血液中心,把献成分血作为热心公益、丰富自己业余生活的一项重要内容。捐献者只需躺在采血椅上,献血过程中可以轻松地欣赏音乐或看电视节目,血液细胞分离机会自动完成采血过程,献血者不会有任何不适。自身输血Known PathogensFor which no assay is availableLeukocytesAdverse immune responses and transfusion reactionsBacteriaIntroduced during collectionEmerging/UnknownVirusesFalse NegativesLimit

16、s of detection of current assays(e.g.,window-period issue)Risks Still Exist in Blood Transfusions自身输血优势1.1.避免经血感染疾病的危险避免经血感染疾病的危险非病毒的病原体性疾病非病毒的病原体性疾病1.梅毒 syphilis2.疟疾 malaria3.巴贝虫病 Babesia4.弓形虫病 Toxoplasma5.锥虫 Trypanosoma6.丝虫 Filaria7.利什曼 Leishmania8.布鲁氏菌 Brucella9.斑疹伤寒 typhus10.沙门氏菌 salmonella11.恙虫

17、病立克次氏体 Rickettia12.麻风 epra病毒性疾病病毒性疾病1.肝炎疾病 hepatitis virus 乙型病毒、丙型病毒、庚型病毒 其他肝炎病毒2.巨细胞病毒 cytomegalovirus3.EB病毒 Epstein-Barr virus4.抗原 delta antigen5.科洛拉多蜱传热病毒 Colorado tick fever virus6.麻疹病毒 measles virus7.后天性免疫缺陷综合征病毒 AIDS virus8.成人T细胞白血病病毒 ATL virus 自身输血优势新的病原体不断出现:新的病原体不断出现:TTVTTV:献血者:献血者TTV TTV 感

18、染率感染率2%2%60%60%。SEN-VSEN-V:HIV,HBV HIV,HBV 或或 HCVHCV感染者中感染者中SEN-V SEN-V 感染者较高。感染者较高。经输血传播,供血者中经输血传播,供血者中SEN-VSEN-V感染率为感染率为 2%2%。CJD CJD 和和 vCJDvCJD:CJDCJD是人类一种传染性海绵状脑病是人类一种传染性海绵状脑病(TSEs),(TSEs),吃疯牛肉传播。吃疯牛肉传播。WNVWNV:RNA,RNA,有包膜。可经血传播。有包膜。可经血传播。SARSSARS冠状病毒:冠状病毒:RNA,RNA,有包膜。经血传播?有包膜。经血传播?自身输血优势2.2.避免因

19、输血引起的同种异体血液免疫反应,减少输血不良避免因输血引起的同种异体血液免疫反应,减少输血不良反应。反应。3.3.可以有效维持了病人的免疫功能。可以有效维持了病人的免疫功能。进入人体的异体组织细胞和蛋白最终必须被机体免疫进入人体的异体组织细胞和蛋白最终必须被机体免疫系统抵抗并清除,但这个过程会耗费大量免疫系统资源,系统抵抗并清除,但这个过程会耗费大量免疫系统资源,造成输血后病人免疫功能显著下降,这对病人,尤其是肿造成输血后病人免疫功能显著下降,这对病人,尤其是肿瘤病人非常不利。避免了输血导致的免疫功能抑制,术后瘤病人非常不利。避免了输血导致的免疫功能抑制,术后感染大幅减少。感染大幅减少。自身输

20、血优势4.4.节约血液资源。节约血液资源。5.5.解决特殊血型供血。解决特殊血型供血。6.6.减少输血意外。减少输血意外。7.7.血液新鲜,细胞活力好,功能强。血液新鲜,细胞活力好,功能强。8.8.解决宗教信仰人员的用血问题。解决宗教信仰人员的用血问题。自身输血现状自体输血率自体输血率欧美等发达国家,自体输血率80%-90%德国术前自体储血率达89%,日本术前备自体血23个单位的在80%90%国内自体输血率10%我国医疗机构用血管理办法、医院等级检查等要求,医院自体输血率在20%20%以上。自身输血分类v预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血v稀稀 释释 式式 自自 身身 输输 血血v回回

21、收收 式式 自自 身身 输输 血血预存式自身输血 预存式自身输血指在某一个体计划或可能需要施行输预存式自身输血指在某一个体计划或可能需要施行输血治疗前,有计划地采集其全血或血治疗前,有计划地采集其全血或/和血液成分并作相应保和血液成分并作相应保存,在其治疗时将预先贮存的血液及血液成分进行回输的存,在其治疗时将预先贮存的血液及血液成分进行回输的一种输血治疗方法。一种输血治疗方法。预存式自身输血-适应证(一)可能需要输血的择期手术患者,年龄:(一)可能需要输血的择期手术患者,年龄:16166565岁。岁。(二)除手术目标部位的器质性病变外,身体一般情况良(二)除手术目标部位的器质性病变外,身体一般

22、情况良好;好;(三)(三)Hb110g/LHb110g/L或红细胞比容或红细胞比容0.330.33,,血小板计数血小板计数110110109/L109/L且功能正常,未服用或停止服用抗血小板药且功能正常,未服用或停止服用抗血小板药物物2 2周以上。周以上。预存式自身输血-禁忌症(一)有疾病发作史而未被完全控制的患者采血可诱发疾病(一)有疾病发作史而未被完全控制的患者采血可诱发疾病发作。发作。(二)有献血反应史及曾发生过迟发性昏厥患者。(二)有献血反应史及曾发生过迟发性昏厥患者。(三)伴有冠心病、充血性心力衰竭、严重主动脉瓣狭窄、(三)伴有冠心病、充血性心力衰竭、严重主动脉瓣狭窄、室性心律不齐、

23、室性心律不齐、严重高血压等心脑血管疾病及重症患者。严重高血压等心脑血管疾病及重症患者。(四)血红蛋白(四)血红蛋白100g/L100g/L的患者及有细菌性感染的患者。的患者及有细菌性感染的患者。(五)服用抑制代偿性心血管反应药物患者。(五)服用抑制代偿性心血管反应药物患者。(六)一般情况下,孕妇应避免妊娠最初(六)一般情况下,孕妇应避免妊娠最初3 3个月和第个月和第7 79 9个个月间采血(相对禁忌)。月间采血(相对禁忌)。预存式自身输血-准备建议采血前一周补充铁剂,至术前一日。建议采血前一周补充铁剂,至术前一日。包括:包括:硫酸亚铁硫酸亚铁 0.3 Bid-tid 0.3 Bid-tid 琥

24、珀酸亚铁琥珀酸亚铁 0.2 0.20.4 tid0.4 tid 速力菲速力菲 100mg tid 100mg tid 力蜚能力蜚能 150 mg bid 150 mg bid 有条件者可同时应用重组人促红细胞生成素(有条件者可同时应用重组人促红细胞生成素(rh-Eporh-Epo)或或/和右旋糖酐铁。(成人和右旋糖酐铁。(成人1 1万单位,儿童:万单位,儿童:200200单位单位/kg/kg,q.o.dq.o.d)预存式自身输血-知情同意经治医师须与患者及家属说明情况,包括:经治医师须与患者及家属说明情况,包括:(一)自身输血目的、过程,涉及的危险性和可能出现的(一)自身输血目的、过程,涉及的

25、危险性和可能出现的并发症等;并发症等;(二)可能出现的不可避免的意外原因(冰箱、污染、有(二)可能出现的不可避免的意外原因(冰箱、污染、有异物凝块、过期等)而需放弃自身血液;异物凝块、过期等)而需放弃自身血液;(三)可能出现输注异体血液等。患者或(三)可能出现输注异体血液等。患者或/和家属需填写自和家属需填写自身输血申请单,并签署自身输血同意书,随病历一同保存。身输血申请单,并签署自身输血同意书,随病历一同保存。预存式自身输血 全全 血血 预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血血血 液液 成成 分分 预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血红红 细细 胞胞 预预 存存 式式 自自 身身 输输

26、 血血血血 浆浆 预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血血血 小小 板板 预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血造造 血血 干干 细细 胞胞 预预 存存 式式 自自 身身 输输 血血预存式自身输血储存自体全血储存自体全血是传统的术前自体储血方是传统的术前自体储血方式,采集的是全血,置式,采集的是全血,置4C4C 储血冰箱内保存,在术中储血冰箱内保存,在术中回输给患者。血液中的血回输给患者。血液中的血小板及不稳定的凝血因子小板及不稳定的凝血因子均全部失去其生理活性,均全部失去其生理活性,也会导致血液中大量的有也会导致血液中大量的有效成分丢失。效成分丢失。储存自体成分血储存自体成分血全新的术前

27、自体储血方式,全新的术前自体储血方式,采集的是成分血。使用全采集的是成分血。使用全自动血细胞分离技术进行自动血细胞分离技术进行术前自体储血,可以一次术前自体储血,可以一次安全采集浓缩红细胞、浓安全采集浓缩红细胞、浓缩血小板、血浆,分别按缩血小板、血浆,分别按照各血液成分的保存要求照各血液成分的保存要求分别储存,在术中回输给分别储存,在术中回输给患者。有效保存血液各成患者。有效保存血液各成分的生理活性,具有更加分的生理活性,具有更加安全、高效的优势。安全、高效的优势。预存式自身输血预存式自体输血现状预存式自体输血现状l全血预存方式l将采集的全血置4C冰箱保存存在问题存在问题l采血反应率高。l4C

28、保存,血液中大量的有效成分活性降低甚至丢失。l采血体积大,浓度低,尤其血小板。l1次采血量不超过500ml。l大量备血者需要多次采集,一般需提前7-10天,与目前医院平均住院日等指标要求相矛盾。限制自体输血的实施与推广。血液成分单采技术的应用血液成分单采技术采集成分血始于二十世纪80年代主要用于:造血干细胞采集、粒细胞采集、血浆置换、血液成分去除、采集血小板、血浆、红细胞近几年来,该技术在自体输血领域的应用也开始尝试和应用。自体输血技术与观念迫切需要进一步探自体输血技术与观念迫切需要进一步探索研究,亟待引入新观念、新技术索研究,亟待引入新观念、新技术目前临床输血工作中面临的诸多问题现有预存式自

29、体输血模式的弊端Flood O utletWhole Blood InletPlasmaRed CellsBuffy Coat单采技术用于预存式自体输血单采技术用于预存式自体输血采集浓缩红细胞 100ml浓缩红细胞200ml全血中的红细胞含量(1u)在确保患者安全的前提下,可获得较全血采集更多的红细胞。采用进出液体平衡的策略,确保患者安全。具有更加安全高效的具有更加安全高效的采集优势采集优势预存式自体成分输血关键点关键点l 预存式自体成分血采集技术,确保患者采集过程的安全。l 自体红细胞采集后红细胞保存技术,尤其是保存液的添加。优势优势p采集浓缩红细胞,红细胞预存量远高于全血采集。p采用进出液

30、体平衡的策略,确保患者安全。p添加适量的保存液,确保红细胞保存质量及输注浓度。预存式自体成分输血自体成分血的采集自体成分血的采集1.为保证自体血采集患者安全,自体成分血采集时遵循:u采集总量不超过患者总血容量10%。u理论上采集100ml红细胞可以使患者Hb降低5g/L,将患者自体血采集后Hb最低限设为100g/L,Hct 30%u对于自体红细胞采集量大于400ml的患者,采用进出液体平衡的策略 在采集过程中补充等容量0.9%Nacl,使患者血容量变化不明显。预存式自体成分输血自体成分血的保存自体成分血的保存红细胞p加入红细胞保存液,无菌接驳。p红细胞血细胞比容达到0.50-0.65(参照GB

31、18469-2012)p4C保存,有效期35天。血浆:直接冷冻保存,凝血因子保存完整血小板:22 振荡保存自体成分血的回输自体成分血的回输 同异体悬浮红细胞输注方法稀释式自身输血 稀释式自身输血是指在麻醉成功后手术开始前稀释式自身输血是指在麻醉成功后手术开始前采集一定数量的血液,同时输注一定体积的晶体溶采集一定数量的血液,同时输注一定体积的晶体溶液和胶体溶液,以补充有效循环容量维持其正常,液和胶体溶液,以补充有效循环容量维持其正常,使血液稀释,并在患者失血后回输其先前采集的血使血液稀释,并在患者失血后回输其先前采集的血液液。稀释式自身输血分分 类类 急性等容性血液稀释急性等容性血液稀释 急性高

32、容性血液稀释急性高容性血液稀释 急性非等容性血液稀释急性非等容性血液稀释回收式自身输血 回收式自身输血是指收集患者自身的出血,经过特定的回收式自身输血是指收集患者自身的出血,经过特定的处理后再回输给患者本人的一种输血方法处理后再回输给患者本人的一种输血方法。分类分类术中回收式自身输血术中回收式自身输血 术中洗净回收式自身输血术中洗净回收式自身输血 术中非洗净回收式自身输血术中非洗净回收式自身输血术后(床旁)回收式自身输血术后(床旁)回收式自身输血回收式自身输血发发 展展回收式自身输血CobeBRAT2FreseniusCATSDidecoCOMPACT ADVANCEDMedtronicSeq

33、uestra1000MedtronicautoLogHaemoneticCS-5相关治疗血液成分采集血液成分分离去除血液成分的置换治疗性血细胞分离血液成分采集外周血干细胞采集用于白血病患者,进行自身或供者外周血造血干细胞采集,进行造血干细胞移植。用于实体瘤患者,采集自身外周血造血干细胞,进行干细胞治疗。骨髓干细胞采集骨髓干细胞的采集,用于骨髓来源的干细胞移植治疗。骨科、心外科、心内科、血管外科等。骨髓红细胞的去除,用于供受者血型不合情况下的造血干细胞移植,造血干细胞的回收率90%以上。骨髓单个核分离技术的研究与应用2005年12月2007年11月来我院进行自体骨髓干细胞移植治疗缺血性股骨头坏死

34、的患者采用分离机进行单个核细胞的分离。年龄2462,男性27人,女性1人。分离的单个核细胞悬液与骨髓进行比较,分离前后细胞组成差异显著。例数例数HCT()()WBC(109/ml)Lym()()Mono()()Gran(%)分离前分离前2828.73.710.43.130.34.29.83.359.55.7分离后分离后288.73.8*26.412.7*42.310.3*18.26.6*39.413.5*表1 骨髓进行单个核细胞分离前后比较注:1HCT为红细胞压积,WBC为有核细胞计数,Lym为淋巴细胞,Mono为 单核细胞,Gran为粒细胞。2两组比较,*P 0.05,*P0.01。骨髓单个

35、核分离技术的研究与应用分析分离过程采用的主要参数,即色卡显示的比例,见表2。结果表明色卡显示比例选择23最佳。表2 不同比色卡的参数分离的结果比较HCT()()WBC(109/ml)Lym()()Mono()()Gran(%)1组,组,5415.43.1*40.520.7*30.410.1*14.26.455.313*2组,组,437.20.8#21.99.145.79.116.75.0#37.99.7#3组,组,323.80.218.83.949.23.125.81.425.03.9注:1.1组与2组比较,*P 0.05,*P0.0;2.2组与3组比较,P 0.05,P0.01;3.3组与1

36、组比较,P 0.05,P0.01。骨髓单个核分离技术的研究与应用分析参数循环次数对分离效果的影响,见表3。循环次数以79量较佳。表3不同循环次数的分离效果分组分组循环次数循环次数样本数样本数单个核细胞单个核细胞单个核细胞得率单个核细胞得率15777.7411.70*307257960.1617.854018379867.7911.60*40849646.5813.67*4014骨髓单个核分离技术的研究与应用骨髓、单个核细胞悬液中细胞组成与CD34、CD271的相关性。采用相关和偏相关分析,见图14。SPSS分析结果见表4、5。CD34主要与淋巴样细胞相关,而CD271主要与单核样细胞相关。表4

37、 SPSS相关分析结果(r)总样本总样本分离前分离前分离后分离后LymLymMonoMonoLymLymMonoMonoLymLymMonoMonoCD34CD340.8320.832*0.8010.801*0.4410.4410.4590.4590.7410.741*0.6450.645*CD271CD2710.6830.683*0.8520.852*0.0630.0630.7300.730*0.4060.4060.7740.774*骨髓单个核分离技术的研究与应用骨髓、单个核细胞悬液中细胞组成与CD34、CD271的相关性表5 SPSS偏相关分析结果(r)MonoMono(控制(控制LymL

38、ym因素)因素)LymLym(控制(控制MonoMono因素)因素)总样本总样本分离前分离前分离后分离后总样本总样本分离前分离前分离后分离后CD34CD340.3870.387*0.42210.42210.31640.31640.52180.5218*0.60400.6040*0.28670.2867CD271CD2710.69850.6985*0.72190.7219*0.79660.7966*-0.028-0.028-0.0397-0.0397-0.4693-0.4693血液成分采集淋巴细胞采集用于肿瘤患者的细胞治疗,采集自身淋巴细胞进行体外培养,如CTL、NK、DC等细胞疗法。粒细胞采集

39、粒细胞用以治疗粒细胞低下的患者,尤其是存在药物无法控制的严重感染,如造血干细胞移植后患者造血、免疫系统尚未重建发生感染时。血液成分采集红细胞采集应用羟乙基淀粉可采集年轻红细胞,用以治疗长期依赖输血的患者,如地中海贫血,镰刀壮红细胞贫血等。以延长其输血间隔,减少输血产生的不良反应,提高病人的生存质量。血液成分分离去除血液成分的去除如血小板增多症,高白细胞性白血病、对急性白血病患者进行幼稚的白血病细胞去除,减少化疗药物的用量及副作用。真性红细胞增多症等。血液成分分离与置换治疗性血浆置换或淋巴合并血浆置换风湿免疫系统疾病,如系统性红斑狼疮,类风湿性关节炎、皮肌炎、多发性硬化症、尿毒症、天疱疮或类天疱

40、疮等。血液系统疾病如特发性血小板减少性紫癜,多发性骨髓瘤,自身免疫性溶血性贫血等。神经系统疾病如重症肌无力,多发性神经根炎等。代谢系统疾病:高胆固醇症,高粘滞综合症,急性肝功能衰竭等。其他疾病如新生儿溶血病,高胆红素血症,甲状腺危象,急性药物中毒、雷诺氏病及重症肝炎等。血液成分分离与置换红细胞分离去除并置换如地中海贫血,镰刀壮贫血,蚕豆病,红细胞先天性缺乏某些酶的患者,新生儿换血,CO中毒,疟疾等。治疗性成分分离重点关注采集产品的质量不良反应的预防和处理不良反应的症状不良反应的症状枸橼酸钠反应轻度:口唇、面部或四肢末端麻木中度:肢体麻木、恶心、呕吐、胸闷、头晕、手足抽搐、肌肉震颤重度:烦躁不安

41、、心律不齐、血压下降、心颤甚至停搏低血压过敏反应输血相关性急性肺损伤不良反应的预防与处理不良反应的预防与处理 态度和蔼,缓解紧张情绪预防性静注葡萄糖酸钙在采集前或抗凝剂进入体内500ml左右时采集过程细心观察,出现轻度反应时及时静注葡萄糖酸钙,症状加重时停止采集。出现皮肤红疹、瘙痒等过敏及时给予地米治疗,症状加重时停止血液成分置换。静注10%葡萄糖酸钙时应控制速度,避免引起高钙血症,发生心跳骤停。技术设备基本原理梯度离心PlasmaPackedred cellsBuffycoatGranulocytes1.085*Monocytes1.065*Lymphocytes1.071*Platelet

42、s 1.048*Average specific gravity of cell type shown基本原理主要机型CS3000 plus(美国Fenwal)COM.TEC(德国费森尤斯)Amicus (美国Fenwal,德国费森尤斯)Cobe Spectra(美国Caridian BCT,日本泰尔茂)Trima(美国Caridian BCT,日本泰尔茂)MCS+(美国血技)小结血液成分单采技术(Apheresis)采集成分血始于二十世纪80年代,应用范围逐渐拓展。从临床的相关治疗,如:造血干细胞采集、粒细胞采集、血浆置换、血液增多成分的去除,到献血领域的应用,如成分血的采集包括血小板、血浆、红细胞等。近几年来,该技术在自体成分输血领域和细胞治疗领域开始应用和研究。因此,血细胞或血液成分分离技术在输血医学中地位,以及对学科发展的作用需要重视,是链接输血医学与临床医学的桥梁和纽带。谢 谢!

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