1、 粪便检查粪便检查长沙医学院临检教研室长沙医学院临检教研室 陈丽华陈丽华目的要求1、掌握：、掌握：大便检查标本收集及要求；一般性状检大便检查标本收集及要求；一般性状检查；显微镜检查（有形成分、寄生虫卵的形态和查；显微镜检查（有形成分、寄生虫卵的形态和意义）；隐血试验的原理及方法学评价、临床意意义）；隐血试验的原理及方法学评价、临床意义。义。2、了解：、了解：大便组成，其他有形成分、脂肪检查、大便组成，其他有形成分、脂肪检查、胆色素检查。胆色素检查。重点重点:掌握标本收集、制片、处理、常规检验方法、掌握标本收集、制片、处理、常规检验方法、隐血测定隐血测定难点难点:镜检形态镜检形态消化系统消化系统
2、 一、概述 1.正常粪便组成正常粪便组成 食物残渣、纤维素、消化道分食物残渣、纤维素、消化道分泌物、细菌、无机盐及水等组成。泌物、细菌、无机盐及水等组成。2.粪便检查目的粪便检查目的 （1）了解消化道有无炎症、肠道感染性疾病、肠了解消化道有无炎症、肠道感染性疾病、肠道寄生虫感染、恶性肿瘤等。道寄生虫感染、恶性肿瘤等。（2）了解胃肠道消化、吸收功能。）了解胃肠道消化、吸收功能。（3）分析有无致病菌及肠道正常菌群有无失调等）分析有无致病菌及肠道正常菌群有无失调等.（4）黄疸的鉴别诊断。）黄疸的鉴别诊断。3.标本收集及送检1).时间时间：采集后：采集后1h内检查完毕。内检查完毕。2).容器容器：洁净
3、、干燥。有盖、无吸水和渗漏。：洁净、干燥。有盖、无吸水和渗漏。3).部位部位：脓血、粘液等标本，外观无异常：脓血、粘液等标本，外观无异常从表面、深部多处取材，约从表面、深部多处取材，约5g。处理：处理：纸类、塑料容器纸类、塑料容器-烧毁烧毁搪瓷容器、载波片搪瓷容器、载波片-浸泡浸泡0.5%过氧乙酸、新洁尔过氧乙酸、新洁尔灭灭24h后，煮沸、冲洗、烘干。后，煮沸、冲洗、烘干。4.特殊要求 1）阿米巴原虫滋养体）阿米巴原虫滋养体-尽快、保温。尽快、保温。2）蛲虫卵）蛲虫卵-拭子晚拭子晚12时或清晨排便前肛周时或清晨排便前肛周 3）无粪便排出又必须检查时）无粪便排出又必须检查时-肛门指诊肛门指诊 4
4、）血吸虫孵化毛蚴）血吸虫孵化毛蚴-标本不少于标本不少于30g。5）化学法隐血）化学法隐血-前三日禁食肉类、肝脏及含动前三日禁食肉类、肝脏及含动 物血食品，禁服铁剂、维生素物血食品，禁服铁剂、维生素C等。等。二、粪便的一般性状检查（一）量（一）量 成人每日约成人每日约100300g。（二）颜色（二）颜色 成人呈黄褐色（粪胆素），婴儿成人呈黄褐色（粪胆素），婴儿粪便：黄绿色或金黄色糊状。粪便：黄绿色或金黄色糊状。粪便颜色常受食物、药物等因素影响。粪便颜色常受食物、药物等因素影响。（二）颜色（上消化道出血量（上消化道出血量50ml）（三）性状正常：正常：成形便，条带状，含少量粘液。异常情况：成形便，
5、条带状，含少量粘液。异常情况：菌痢（四）气味1 1、生理性气味、生理性气味 有一定臭味有一定臭味2 2、病理性气味、病理性气味 恶臭主要见于：胰腺疾病、慢性肠炎、消化道恶臭主要见于：胰腺疾病、慢性肠炎、消化道大出血、结肠或直肠癌溃烂等大出血、结肠或直肠癌溃烂等鱼腥臭味：阿米巴性肠炎鱼腥臭味：阿米巴性肠炎酸臭味：脂肪及糖类消化或吸收不良酸臭味：脂肪及糖类消化或吸收不良（五）酸碱度 1.正常正常：中性、弱酸或弱碱性（：中性、弱酸或弱碱性（pH 6.97.2）。）。2.异常异常：细菌性痢疾、血吸虫病细菌性痢疾、血吸虫病弱碱性弱碱性。阿米巴痢疾及病毒性肠炎阿米巴痢疾及病毒性肠炎弱酸性弱酸性。（六）寄生
6、虫及结石 粪便中可发现蛔虫、蛲虫、带绦虫节片。粪便中可发现蛔虫、蛲虫、带绦虫节片。过筛冲洗后可发现钩虫、鞭虫等细小虫体。过筛冲洗后可发现钩虫、鞭虫等细小虫体。钩虫钩虫蛔虫蛔虫三、粪便显微镜检查 方法：最常用生理盐水涂片法。涂片厚度以能透视方法：最常用生理盐水涂片法。涂片厚度以能透视纸上字迹为宜。纸上字迹为宜。观察顺序：观察顺序：涂片加盖片涂片加盖片 低倍镜巡视全片，观察寄生虫低倍镜巡视全片，观察寄生虫 10个个HPF观察细胞观察细胞 发报告发报告10个高倍镜视野所见个高倍镜视野所见报告方式（细胞数报告方式（细胞数/HPF）只见只见1个个偶见偶见有的视野不见，有的视野有的视野不见，有的视野最多可
7、见最多可见23个个03每个视野最少见到每个视野最少见到5个，个，最多见到最多见到10个个510（+）10个个每个视野每个视野50个（个（+）报告方式报告方式 粪便镜检细胞成分报告方式粪便镜检细胞成分报告方式（一）细 胞1.白细胞（脓细胞）（1 1）正常粪便：无或偶见白细胞。正常粪便：无或偶见白细胞。（2 2）小肠肠炎：白细胞分散存在，一般较少）小肠肠炎：白细胞分散存在，一般较少（3 3）细菌性痢疾、溃疡性结肠炎：大量白细胞或成）细菌性痢疾、溃疡性结肠炎：大量白细胞或成堆脓细胞。堆脓细胞。（4 4）肠易激综合征、肠道寄生虫病）肠易激综合征、肠道寄生虫病(尤其是钩虫病及尤其是钩虫病及阿米巴痢疾阿米
8、巴痢疾)：嗜酸性粒细胞，可伴有夏科：嗜酸性粒细胞，可伴有夏科-莱登结莱登结晶。晶。2.红细胞 正常粪便中无红细胞正常粪便中无红细胞。异常异常上消化道出血红细胞多破坏，隐血试验证实上消化道出血红细胞多破坏，隐血试验证实下消化道炎症有多少不等的红细胞。下消化道炎症有多少不等的红细胞。菌痢菌痢-红细胞少于白细胞，分散，形态多正常红细胞少于白细胞，分散，形态多正常.阿米巴痢疾阿米巴痢疾-红细胞为主，成堆存在并有残碎现象红细胞为主，成堆存在并有残碎现象.其他其他-溃疡性结肠炎外伤、肿瘤及其它出血性疾溃疡性结肠炎外伤、肿瘤及其它出血性疾病病.红细胞红细胞阿米巴痢疾阿米巴痢疾红细胞多于白红细胞多于白细胞，红
9、细胞细胞，红细胞成堆并有残碎成堆并有残碎现象。现象。红细胞红细胞细菌性痢疾细菌性痢疾白细胞多于红白细胞多于红细胞，多分散细胞，多分散存在，形态正存在，形态正常。常。3.巨噬细胞 为单核细胞为单核细胞。此种单核细胞直径为。此种单核细胞直径为1020um，比中性粒细胞大，核形态多不规则，胞质常有伪比中性粒细胞大，核形态多不规则，胞质常有伪足状突起，并吞噬有颗粒、细胞、细菌等。足状突起，并吞噬有颗粒、细胞、细菌等。粪便中见巨噬细胞是诊断急性细菌性痢疾重要粪便中见巨噬细胞是诊断急性细菌性痢疾重要依据依据，也见于急性出血性肠炎或偶见于溃疡性结，也见于急性出血性肠炎或偶见于溃疡性结肠炎。肠炎。4.肠黏膜上
10、皮细胞 为柱状上皮细胞。正常粪便中不易发现，肠道炎为柱状上皮细胞。正常粪便中不易发现，肠道炎症时，上皮细胞增多，且多与症时，上皮细胞增多，且多与WBC同时存在。同时存在。5.5.肿瘤细胞肿瘤细胞 乙状结肠癌、直肠癌病人的血性粪便涂片中可见。乙状结肠癌、直肠癌病人的血性粪便涂片中可见。（二）寄生虫卵及原虫1.寄生虫卵寄生虫卵 常见蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵、常见蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵、血吸虫卵、姜片虫卵、肺吸虫卵、肝吸虫卵、带血吸虫卵、姜片虫卵、肺吸虫卵、肝吸虫卵、带绦虫卵等。绦虫卵等。人蛔虫未受精卵人蛔虫受精卵钩虫卵钩虫卵 鞭虫卵鞭虫卵 蛲虫卵蛲虫卵华枝睾吸虫卵华枝睾吸虫卵血吸虫卵
11、血吸虫卵姜片虫卵姜片虫卵带绦虫卵带绦虫卵 2.原虫滋养体和包囊 常见：阿米巴原虫；蓝氏贾弟鞭毛虫；隐孢子虫；常见：阿米巴原虫；蓝氏贾弟鞭毛虫；隐孢子虫；人牙囊原虫。人牙囊原虫。阿米巴原虫滋养体阿米巴原虫滋养体蓝氏贾弟鞭毛虫(三）结晶 具有病理意义的结晶：具有病理意义的结晶：1.夏科夏科-雷登结晶雷登结晶。主要见于阿米巴痢疾、钩虫病主要见于阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎。及过敏性肠炎。2.血红素结晶：见于胃肠道血红素结晶：见于胃肠道出血。出血。3.脂肪酸结晶：见于阻塞性脂肪酸结晶：见于阻塞性黄疸。黄疸。夏科夏科-雷登结晶雷登结晶（四）细菌 占粪便中干重的占粪便中干重的1/3，大部分为正常菌群。，
12、大部分为正常菌群。成人：成人：大肠埃希菌、厌氧杆菌、肠球菌等，约占大肠埃希菌、厌氧杆菌、肠球菌等，约占80。产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等多为过。产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等多为过路菌，不超过路菌，不超过l0。婴儿：婴儿：双歧杆菌、拟杆菌、葡萄球菌和肠杆菌等。双歧杆菌、拟杆菌、葡萄球菌和肠杆菌等。正常粪便球菌正常粪便球菌(G+)和杆菌和杆菌(G-)比例大致为比例大致为1 10。球菌球菌 杆菌杆菌（1）肠道菌群失调症）肠道菌群失调症-长期使用广谱抗菌素、免长期使用广谱抗菌素、免疫抑制剂、慢性消耗性疾病及伪膜性肠炎，粪便疫抑制剂、慢性消耗性疾病及伪膜性肠炎，粪便中除球菌中除球菌/杆菌比值变大外，
13、还可见到白色假丝酵杆菌比值变大外，还可见到白色假丝酵母菌母菌(卵圆形、壁薄、折光性强、可生芽的酵母样卵圆形、壁薄、折光性强、可生芽的酵母样菌，革兰氏染色阳性菌，革兰氏染色阳性)。（2）霍乱）霍乱取米泔样粪便作生理盐水悬滴检查，可取米泔样粪便作生理盐水悬滴检查，可见呈鱼梭样运动活泼的霍乱弧菌，进一步确诊应见呈鱼梭样运动活泼的霍乱弧菌，进一步确诊应作血清学检查及培养鉴定。作血清学检查及培养鉴定。异常（五）食物残渣（1）淀粉颗粒）淀粉颗粒(starch grain)-为具有同心性为具有同心性线状的不规则块状物。线状的不规则块状物。正常人偶见，慢性胰腺正常人偶见，慢性胰腺炎、胰腺功能不全引起炎、胰腺功
14、能不全引起的腹泻粪便中易见到。的腹泻粪便中易见到。（2）脂肪）脂肪-正常偶见，胰腺外分泌功能不全脂肪小正常偶见，胰腺外分泌功能不全脂肪小滴明显增多。阻塞性黄疸时，粪便中可出现大量的滴明显增多。阻塞性黄疸时，粪便中可出现大量的脂肪酸。脂肪酸。脂肪小滴成大小不一、圆形折光性强的小球状，苏脂肪小滴成大小不一、圆形折光性强的小球状，苏丹丹染成橘红色染成橘红色（五）食物残渣 3.肌纤维肌纤维 增多：胰腺外分泌功能减退。增多：胰腺外分泌功能减退。4.结缔组织与弹性纤维结缔组织与弹性纤维增多：胃蛋白酶缺乏症、腹泻等。增多：胃蛋白酶缺乏症、腹泻等。5.植物细胞及植物纤维植物细胞及植物纤维增多：胃蛋白酶缺乏症、
15、肠蠕动亢进、腹增多：胃蛋白酶缺乏症、肠蠕动亢进、腹泻等。泻等。（五）食物残渣四、粪便化学及免疫学检查（一）粪便隐血试验（一）粪便隐血试验 消化道特别是上消化道少量出血消化道特别是上消化道少量出血（5ml/d)，肉眼及显微镜均不能证实的微，肉眼及显微镜均不能证实的微量出血称为量出血称为隐血隐血，检查隐血的方法称为，检查隐血的方法称为隐隐血试验血试验，可用化学法、免疫学方法测定。，可用化学法、免疫学方法测定。1.化学法：原理 Hb中的亚铁血红素具有类过氧化物酶活性，能中的亚铁血红素具有类过氧化物酶活性，能催化催化H2O2为为H2O并释放原子并释放原子O；原子原子O氧化色原物如邻甲苯胺（供氢体）由无
16、氧化色原物如邻甲苯胺（供氢体）由无色变成蓝色的邻甲偶氮苯。色变成蓝色的邻甲偶氮苯。2邻甲苯胺邻甲苯胺+2 H2O2 邻甲偶氮苯邻甲偶氮苯+4H2O过氧化物酶过氧化物酶无色蓝色1.化学法：【器材器材】消毒棉签（或滤纸）、竹签消毒棉签（或滤纸）、竹签【试剂试剂】10g/L临甲苯胺冰乙酸溶液、临甲苯胺冰乙酸溶液、3%H2O2【操作操作】用棉签粘取少许大便。用棉签粘取少许大便。滴滴2滴滴10g/L临甲苯胺冰乙酸溶液于棉签上，接着临甲苯胺冰乙酸溶液于棉签上，接着再滴再滴2滴滴3%H2O2液。液。观察结果。观察结果。【参考值参考值】阴性阴性 化学法结果判断:加试剂后 反应反应 结果判断结果判断2分钟仍不变
17、色分钟仍不变色 阴性阴性10秒后显浅蓝色秒后显浅蓝色蓝色蓝色 +显浅褐色，并逐渐加深显浅褐色，并逐渐加深 2+立即显蓝褐色立即显蓝褐色 3+立即变蓝黑色立即变蓝黑色 4+1.化学法：评价（1）灵敏度和特异性）灵敏度和特异性匹拉米洞法匹拉米洞法 中灵敏度，中特异性中灵敏度，中特异性1.化学法:评价（2）干扰因素2、免疫学方法 一般为双抗夹心法，如：胶体金法、酶联免疫吸一般为双抗夹心法，如：胶体金法、酶联免疫吸附法、免疫斑点法及胶乳凝聚法。附法、免疫斑点法及胶乳凝聚法。胶体金法原理 在乙酸纤维膜上吸附有在乙酸纤维膜上吸附有:a、胶体金羊抗人、胶体金羊抗人Hb单单抗抗，b、胶体金标记鼠胶体金标记鼠I
18、gG；试带上端包被羊抗人试带上端包被羊抗人Hb多抗和羊抗鼠多抗和羊抗鼠IgG抗体抗体 粪便悬液通过层析作用沿着试带上行；粪便悬液通过层析作用沿着试带上行；若粪便中有若粪便中有Hb，上行，最终形成，上行，最终形成 金标记抗人金标记抗人Hb单抗单抗-粪粪Hb-羊抗人羊抗人Hb多抗复合物，多抗复合物，显紫红色线（检测线）显紫红色线（检测线）;无关的金标记鼠无关的金标记鼠IgG与羊与羊抗鼠抗鼠IgG结合形成另一条紫红色线（对照线）。结合形成另一条紫红色线（对照线）。结果判断（1 1）灵敏度：高。血红蛋白为）灵敏度：高。血红蛋白为0.20.2pg/ml(0.03mg pg/ml(0.03mg Hb/gH
19、b/g粪便粪便)（2 2）特异性：）特异性：不受动物血干扰，胶体金性质比较稳定。不受动物血干扰，胶体金性质比较稳定。（3 3）后带）后带(postzonepostzone)现象：抗原（血红蛋白）过剩，外观明显现象：抗原（血红蛋白）过剩，外观明显呈柏油样，隐血试验却为阴性反应，即假阴性。呈柏油样，隐血试验却为阴性反应，即假阴性。（4 4）灵敏度高造成假阳性。）灵敏度高造成假阳性。生理情况下胃肠道排血液生理情况下胃肠道排血液0.50.51.51.5mL/dmL/d。马拉松运动员出血平均可达马拉松运动员出血平均可达4 4mL/dmL/d。服阿斯匹林服阿斯匹林2.52.5g g出血可达出血可达2 25
20、 5mL/dmL/d。（5 5）严格按操作说明操作：保存、预温）严格按操作说明操作：保存、预温2、免疫学方法：评价免疫学法隐血试免疫学法隐血试验主要检测下消化验主要检测下消化道出血，约有道出血，约有40-50%的上消化道出血的上消化道出血不能检出。不能检出。3.其他方法（1）干化学试纸法）干化学试纸法（2）卟啉荧光法血红蛋白定量试验）卟啉荧光法血红蛋白定量试验（3）同位素铬（）同位素铬（51Cr）定量法）定量法（4）大便潜血测定仪）大便潜血测定仪隐血试验质量控制 1 1化学法化学法 忌食忌食2.2.免疫学胶体金法免疫学胶体金法防止出现后带现象；必要时再稀释粪便防止出现后带现象；必要时再稀释粪便
21、5050lO0lO0倍后试验。特别要防止假阳性。倍后试验。特别要防止假阳性。3.3.及时送检（及时送检（lhlh内）内）4.4.保证试剂质量保证试剂质量 5.5.应做阴性和阳性对照试验应做阴性和阳性对照试验 隐血试验临床意义 1.正常（正常（）2.消化道出血的诊断及鉴别诊断消化道出血的诊断及鉴别诊断：胃肠道溃疡时，：胃肠道溃疡时，阳性率（阳性率（407 0）间断（）间断（+）。治疗后，粪）。治疗后，粪便颜色正常，隐血试验阳性可持续便颜色正常，隐血试验阳性可持续57天；消化天；消化道癌症时，阳性率（道癌症时，阳性率（95），呈持续（），呈持续（+）。）。3.消化道恶性肿瘤普查的一个筛选指标。消化
22、道恶性肿瘤普查的一个筛选指标。（1 1）大肠癌：早期诊断大肠癌唯一可查出的异常指标。）大肠癌：早期诊断大肠癌唯一可查出的异常指标。（2 2）胃癌：早期诊断符合率）胃癌：早期诊断符合率20%20%，晚期符合率达，晚期符合率达95%95%。（二）粪胆色素定性检查1.原理原理 胆红素在肠道内细菌作用下还原成（尿）胆红素在肠道内细菌作用下还原成（尿）胆原，再氧化成粪（尿）胆素，故正常粪便中无胆原，再氧化成粪（尿）胆素，故正常粪便中无胆红素而有粪胆原及粪胆素，可用定性检查方法胆红素而有粪胆原及粪胆素，可用定性检查方法粪胆素。粪胆素。2.参考值参考值粪胆红素定性：阴性粪胆红素定性：阴性粪胆原定性：粪胆原定性：+临床意义 多用于黄疸类型的鉴别。多用于黄疸类型的鉴别。1 1粪胆红素粪胆红素 婴幼儿因正常肠道菌群尚未建立或成人因腹泻等婴幼儿因正常肠道菌群尚未建立或成人因腹泻等肠蠕动加速，粪胆红素来不及被肠道细菌还原，肠蠕动加速，粪胆红素来不及被肠道细菌还原，粪胆红素为阳性。粪胆红素为阳性。2.2.粪胆原粪胆原 正常粪便呈阳性反应。正常粪便呈阳性反应。粪胆原测定有助于黄疽的鉴别诊断。溶血性黄疸：粪胆原测定有助于黄疽的鉴别诊断。溶血性黄疸：阳性；梗阻性黄疸：阴性；肝细胞性黄疸：不定。阳性；梗阻性黄疸：阴性；肝细胞性黄疸：不定。
