专题一基因工程知识点汇总.doc

1、专题一 基因工程知识点汇总 11 DNA重组技术的基本工具一、基因工程的原理：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外和，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的，因此又叫做。1.“分子手术刀” （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。（4）这类酶在生物体内能将外来的DNA切断，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作

2、用，这样可以保持细胞原有的遗传信息。2.“分子缝合针” (1)两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：相同点：都缝合 。区别：EcoliDNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的 末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合 ，但连接 的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”载体（1）基因操作过程中使用载体两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。

3、（2）现在通常使用的载体是，它是一种相对分子质量较小、独立于 之外，并具有自我复制能力的 DNA分子的环状DNA，有的细菌中有一个，有的细菌中有多个。（3）质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以复制，也可整合细菌拟核DNA中，随着拟核DNA的复制而复制。（4）其他载体还有和等。（5）作为载体必须具备以下条件：能够在宿主细胞中 ；具有多个 ，以便与外源基因连接；具有某些 ，便于进行筛选，如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。12 基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取：1、目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的。2获取目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因 基因文

4、库：将含有某种生物不同基因的许多，导入受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 种类 基因组文库：含有一种生物的 基因，用 方法构建。cDNA文库：含有一种生物的基因，用 方法构建。 目的基因的获取：根据基因的有关信息：基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。 PCR：全称为_，是一项在生物_复制_的核酸合成技术。原理： 条件：已知目的基因的序列。一对 ；四种 ；酶（酶）。 过程：目的基因DNA受热变性（90-95）形成，冷却（退火55-60）后与结合，然后在_的作用下进行延伸（70-75

5、）成DNA。 方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数）（3）人工合成法：适用于 较小，核苷酸序列已知，通过 ，用化学方法直接人工合成。二、基因表达载体的构建1.目的：表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且给下一代；使目的基因_和发挥作用。2.组成：目的基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，是 识别和结合的部位，能驱动基因 ，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的尾端。终止。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中 ，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。3、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也

6、会有所差别。三、将目的基因导入受体细胞（一）转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和过程。（二）方法1、将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法 农杆菌特点：易感染植物和裸子植物，对_植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 转化：目的基因插入 的 上，形成重组质粒农杆菌 目的基因整合到植物细胞染色体上通过 方法培养成再生植株，目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。（2） ：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。（3） ：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）2将目的基因导入

7、动物细胞（1）方法： 技术。（2）操作程序：目的基因表达载体取卵（受精卵） 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到_性动物的_内发育新性状动物。3将目的基因导入微生物细胞（1）原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。（2）转化：处理细胞细胞表达载体与感受态细胞混合 _细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 。其中把 作为探针。2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 。3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行 杂交。4.有时还需进行 的鉴定。如转基因抗

8、虫植物是否出现抗虫性状13 基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物，转基因动物作器官移植的供体（器官供体：抑制或除去抗原决定基因）。乳腺生物反应器：用基因+蛋白基因的 。3.基因工程药物。来源：利用转基因的生产药物。成果：人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 4、基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。成果：将腺苷脱氢酶基因导入患者的淋巴细胞14蛋白质工程的崛起蛋白质工程基本原理1目标：根据人们对功能的特定需求，对结构进行分析设计。2原理：基因改

9、造。3过程：预期蛋白质功能设计结构推测应有序列找到对应的序列（基因）。 专题二、细胞工程 知识点梳理填空概念：应用 和 的原理和方法，通过 或 上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 的一门综合科学技术。分类：根据操作对象不同，可分为 、 。一、植物细胞工程 理论基础（原理） 。1、全能性是指 。全能性的原因是 。2在理论上，生物的任何一个细胞都具有 ，但在生物的生长发育过程中，细胞并不表现 ，而是分化成各种 。3特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有 地表达出各种 ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同 。（一）.植物组织培养技术植物组织培养：在 和 的条件下，将 的植物器官、组

10、织、细胞，培养在人工配制的 上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完整植株。1过程：离体的 愈伤组织 胚状体、根和芽、丛芽 试管苗 此过程细胞分裂的主要方式为 。繁殖方式是 繁殖，优点 。如果培养花药属 繁殖，获得的试管苗称为 。2细胞脱分化：已 的细胞经过 后，失去其特有的 而转变成未分化细胞的过程。注意事项：培养基：物理性质是 ，要加入 。营养物质有 成分、 成分、 。光的控制：形成 之前避光，之后给予光照。 无菌：培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌，谨防 污染。并需在 条件下操作。（二）、植物体细胞杂交技术1概念：不同种植物的 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育

11、成新的 的技术。 生殖方式为 。2过程 离体的细胞不同细胞 - 融合 细胞杂种植株。3步骤1)去掉 ，分离出有活力的原生质体，目前最常用的去细胞壁的方法是 ，也就是在温和条件下用 酶、 酶去除植物细胞的细胞壁。利用酶作用的 性特点。 2)不同植物体细胞原生质体融合，必须通过 和 来诱导融合。物理方法有： 、 、 等促使原生质体融合。化学法是用 ( )作为诱导剂来诱导融合。完成融合的标志是 。4如图：1）原生质体是 形，吸水会 。原生质层是 。2）此过程分两个阶段和属于 的过程，其原理是 ；和阶段属于 ，原理是 。其中步骤相当于 ，步骤相当于 。4）植物体细胞杂交的目的是获得新的 ，使两株植物的

12、性状能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是 。 5）从理论上讲，杂种植株的育性为 。若运用传统有性杂交方法能否实现？ 理由是 。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于 。原生质体A和原生质体B含有两个染色体组，那么杂种植株含有 个染色体组，是 倍体。6）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？ 。为什么？ 。（三）应用1 植物繁殖的新途径 1）微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖2）作物脱毒：采用 组织培养来除去病毒，因为植物 附近的病毒极少或没有。3）人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄

13、膜包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节限制；方便储藏和运输2. 作物新品种培育 1）单倍体育种： a 过程：植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（ 、 、 、 四种类型）；对花粉进行花药离体培养（技术是 ）；得到 植株；对其幼苗时期进行 处理；得到了正常的 植株（ 、 、 、 四种类型） b 优点： 。 2） 突变体利用：由于培养细胞一直处于 状态，容易受到 和 的影响产生 ，通过从有用的突变体中选育出新品种。可以对愈伤组织进行 或 的诱变处理。这种育种方法为 。3.细胞产物的生产：细胞产物包括蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。通过能够产生对人们有利的产物的细胞进

14、行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。如：培养抗癌物质紫杉醇。二、动物细胞工程（一） 动物细胞培养 1概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成_ ，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞_ 和_。酶 酶2过程动物组织 单 单个细胞 制成_在_中进行 代培养出现_制成_分瓶进行 代培养。10代以内细胞能保持正常的_ 。 3条件1)无菌、无毒环境：培养液和所有 应进行_处理。添加一定量的 防 的污染；定期更换 ，以便清除 。2)合成培养基成分：_、_、_、无机盐、微量元素，通常需加入_、血浆等。3)温度和pH：适宜温度：_0.5；pH：_。4)气体环境：主要有O2和CO2，_是细胞代谢所必

15、需的，CO2作用是 维持培养液的 。4动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。（二）动物细胞核移植技术和克隆动物1动物核移植：将动物的一个细胞的_，移入一个已经去掉细胞核的_ 中，使其重组并发育成一个新的 ，这个新的胚胎最终发育为 。2种类：_移植。 _移植。难度大的是 。3过程 1)取供体_ 供体细胞培养。2)从卵巢中采集_ 在体外培养到_ 去核。为什么要用卵母细胞？答：它可以提供充足的 ；体积大易 ；细胞质含有激发 全能性的表达的物质。3)将供体细胞注入_使两细胞_供体核进人受体卵母细胞构建_。4)将胚胎_到代孕母体内生出与供体遗传物质

16、相同的个体。克隆动物的生殖方式为 。4应用1)加速家畜_进程，促进优良畜群繁育。2)保护_物种。3)医药卫生领域，转基因动物可以作为 生产_。4)转基因克隆细胞、 和 动物作为异种移植的_。 5)人的核移植的 经诱导分化，形成相应的组织器官后，用于_的移植。5、体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。（三）动物细胞融合与单克隆抗体1. 动物细胞融合比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交 用 酶去除细胞壁后诱导原生质体融合物理 化学 （PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除

17、应用植物细胞杂交手段外，还有用 诱导制备单克隆抗体2.单克隆抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体 低、纯度 、 差。 1）单克隆抗体的制备过程：a对免疫小鼠注射特定的 蛋白（目的使小鼠产生了 细胞）；b提取 细胞；同时用动物细胞培养的方法培养 细胞并提取；c促使它们细胞 （注：融合的结果有很多不符合要求的； 的、 的。所以要进行筛选）；在特定的 培养基上筛选出 细胞（特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体）；d然后对它进行 和 （筛选出能够分泌 的杂交瘤细胞）；e最后将抗体检测呈 的细胞在 做大规模培养或注射入小鼠 内增殖，从细胞 或小鼠 中可得到大量的单克隆抗体。

18、 2）单克隆抗体的优点： 强， 高，并能 。 3）单克隆抗体的应用：a作为诊断试剂：准确识别各种 物质的细微差异，并跟一定抗原发生 结合，具有准确、 、简易、 的优点。b用于治疗 和运载药物：主要用于治疗 。如果把抗癌的单克隆抗体跟放射性同位素、 、 结合制成“生物导弹”，借助于 的导向作用，能够将药物定向带到 所在的位置。下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：（1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_细胞，该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_类物质。（2）B过程是一个_过程，该过程的进行可用灭活的_或_的诱导剂。（3）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗

19、体相比，其特点是_ 。专题三 胚胎工程胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。（一）生殖细胞的发生和受精作用1.精子与卵细胞的发生过程（1）精子的发生：精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂；变形过程中，细胞核为精子头的主要部分， 发育为顶体， 演变为精子的尾， 在尾基部形成线粒体鞘膜，其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。 为精子运动提供能量（2）卵子的发生：卵原细胞演变成初级卵母细胞被卵泡细胞包围，减数第一次分裂分裂在_，形成次级卵母细胞和第一极

20、体进入 准备受精；减数第二次分裂是在_过程中完成的。（3）精子与卵细胞发生过程比较项目精子的发生过程卵子的发生过程发生场所发生时间发生过程是否连续核物质含量是否变形结果细胞质分裂2.受精作用：（1）受精场所：是母体的_（2）受精前的准备a.精子获能（在雌性动物生殖道内）；b.卵子的准备（排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到_才具备受精能力）；（3）受精过程卵子周围的结构由外到内：放射冠、透明带、卵黄膜，a顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。B_ _：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应它是防止多精子入卵受精的第一道屏障

21、；C_：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程它是防止多精子入卵受精的第二道屏障；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核注意：受精标志是_的形成；受精完成标志_（二）、动物胚胎发育的基本过程（1）胚胎发育是指受精卵发育成_的过程。（2）卵裂期：特点：细胞 分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积 。 （3）桑椹胚：特点：细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是 细胞。（4）囊胚：特点：细胞开始出现 （该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为 ，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为 。（

22、5）原肠胚：特点：有了 的分化，具 腔和 腔。（三）胚胎工程的应用1.体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养：主要方法：用 处理，使其排出更多的卵子，然后，从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。(2) 精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行 处理。(3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。(4)胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移

23、入 中继续培养，以检查 。培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到 阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植 、生理状态 的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“ ”，接受胚胎的个体称为“ ”。（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存

24、量大的品种。）地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。(2) 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。(3) 生理学基础：动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。早期胚胎在一定时间内处于 状态。这就为胚胎的收集提供了可能。受体对移入子宫的外来胚胎不发生 。这为胚胎在受体的存活提供了可能。供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。(4) 基本程序主要包

25、括：对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行 处理，用激素对供体母牛做 处理。配种或人工授精。对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到 或 阶段。直接向受体移植或放入196的液氮中保存。对胚胎进行移植。移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。3.胚胎分割(1)概念：是指采用机械方法将 切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。(2)意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于 繁

26、殖。(3)材料：发育良好，形态正常的 。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。）(4)操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将 均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。（四）胚胎干细胞及其应用1.干细胞分类(1).按照分化潜能的大小分_(例 _ _)、_（例_）、_（例_）。(2).按来源分_、_。2.胚胎干细胞(1)、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于_或_中分离出来。(2)、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为_ ；在功能上，具有 ，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以_ ，可进行冷冻保存，也可进行遗

27、传改造。(3)、胚胎干细胞的主要用途是：（了解） 可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。选修三知识点填空答案1.1DNA重组和转基

28、因技术 DNA分子水平 DNA重组技术或基因拼接技术 限制性核酸内切酶（限制酶） 原核生物 某种特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 专一性 黏性末端和平末端DNA连接酶 磷酸二酯键 大肠杆菌 黏性末端 黏性末端和平末端 平末端 单个核苷酸 两个DNA片段 质粒 细菌拟核DNA之外的 双链环状 自我 噬菌体的衍生物 动植物病毒复制并稳定保存 限制酶切点 标记基因1.2结构基因 DNA片段 储存 所有 直接分离法（或鸟枪法） 一部分 逆转录法核苷酸 染色体 转录 表达多聚酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA双链复制 核苷酸 引物 脱氧核苷酸 热稳定DNA聚合酶（Taq酶）单链 引物与单链结合 热稳定

29、DNA聚合酶（Taq酶） 基因 DNA合成仪可以遗传 能够表达 启动子 终止子 标记基因DNA片段 首端 RNA聚合酶转录出mRNA DNA短片段 转录是否含有目的基因 含有目的基因的细胞 抗生素抗性基因表达 双子叶 大多数单子叶植物 T-DNA（可转移的DNA） 土壤农杆菌Ti质粒的T-DNA 植物组织培养 基因枪法 花粉管通道法显微注射 提纯 雌 输卵管或子宫 Ca2+ 感受态 感受态 DNA 标记了的目的基因单链 分子杂交技术 蛋白质 抗体 抗原抗体 个体生物学水平1.3目的基因 乳腺蛋白基因 启动子 工程菌 1.4蛋白质 蛋白质 预期的蛋白质 氨基酸 脱氧核苷酸 细胞生物学 分子生物学

30、 细胞水平 细胞器水平 遗传物质 细胞产品植物细胞工程 动物细胞工程细胞的全能性 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能细胞中含有此生物的全套遗传物质 全能性 全能性 组织和器官 选择性 蛋白质 组织和器官无菌 人工控制 离体 培养基 愈伤组织器官组织和细胞 脱分化 再分化 有丝分裂 无性 保持母本优良性状有性 单倍体 分化 诱导 结构和功能 固体 琼脂 无机营养 有机营养 激素 愈伤组织 细菌 无菌体细胞 杂种细胞 植物体 有性生殖 原生质体 原生质体 杂种细胞壁 酶解法 纤维素 果胶 专一性 物理法 化学法离心 振动 电激 聚乙二醇（PEG） 杂种细胞再生出细

31、胞壁球 胀破 细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质 原生质体融合 细胞膜的流动性 植物组织培养 细胞的全能性 脱分化 再分化 杂种植株新植物体含有2种植物的全套遗传物质 可育 不能，因为不同种植物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和的障碍 4 四 不是 因为此过程没有发生减数分裂，孟德尔的遗传规律是在形成配子过程中发生的。分生区细胞进行组织 分生区AB Ab aB ab 花药离体培养 单倍体 秋水仙素 二倍体 AABB Aabb aaBB aabb 明显缩短育种年性，可得到纯合子 不断分生 培养条件 外界压力 突变 物理 化学 体细胞诱变育种 单个细胞 生长和增殖 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 细胞悬液

32、 培养液 原代接触抑制 细胞悬液 传 二倍体核型 培养用具 无菌 抗生素 培养液 代谢产物糖 氨基酸 促生长因子 血清 36.5 7.27.4 O2 维持培养液的pH细胞核 卵母细胞 胚胎 动物个体 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 体细胞核移植 体细胞 卵母细胞 减数第二次分裂中期 营养物质 操作 细胞去核的卵母细胞 融合 重组胚胎 移植 基本 无性生殖遗传改良 濒危 生物反应器 医用蛋白 组织 器官 供体 胚胎肝细胞 组织器官比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性、细胞全能性 用 纤维素酶和果胶 酶去除细胞壁后诱导原生质体融合物理 离心振动电激 化学聚乙二醇 （PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还有用灭活病毒 诱导制备单克隆抗体产量 低 特异性 抗原 经过免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤 骨