1、优秀学习资料 欢迎下载1下图为DNA分子的切割和连接过程。(1)EcoRI是一种酶，其识别序列是，切割位点是与之间的键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。(2)不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是连接酶，此酶的作用是在与之间形成键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是。 答案：限制酶 GAATTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 黏性末端 DNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 T4DNA连接酶220XX年安徽卷）（9分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，
2、需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_和_之间。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_和_。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。答案：（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （2）启动子 终止子 （3）TaqDNA聚合酶 对干扰素基因特异性的DNA引物对 （4）增大细胞贴
3、壁生长的附着面积3.（10辽宁、宁夏卷，31）多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开，每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子，进行了下面的实验：步骤：获取该基因的双链DNA片段及其mRNA；步骤：加热DNA双链使之成为单链，并与步骤所获得的mRNA按照碱 基配对原则形成双链分子；步骤：制片、染色、电镜观察，可观察到图中结果。请回答：（1）图中凸环形成的原因是 ，说明该基因有 个内含子。（2）如果现将步骤所获得的mRNA逆转录得到DNA单链，然后该DNA单链与步骤中的单链DNA
4、之一按照碱基配对原则形成双链分子，理论上也能观察到凸环，其原因是逆转录得到的DNA单链中不含有 _序列。（3）DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有 种，分别是 。答案 （1）DNA中有内含子序列， mRNA中没有其对应序列，变性后形成的DNA单链之一与mRNA形成双链分子时，该单链DNA中无法与mRNA配对的序列能形成凸环 7（2）内含子（3）3 AU TA CG4（11年山东卷）35.（8分）【生物现代生物科技专题】 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从
5、处死的雌鼠_中获取。（2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。 （3）子代大鼠如果_和_，即可分别在水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。答案：（1）卵巢（2）目的基因 载体 同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） 限制酶切割位点（3）检测到体内有相关蛋白52013北京30（18分）斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因
6、整合到斑马鱼17号染色体上。带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行如下杂交实验。（1）在上述转基因实验中，将G基因与质粒重组，需要的两类酶是 和 。将重组质粒显微注射到斑马鱼 中，整合到染色体上的G基因 后，使胚胎发出绿色荧光。（2）根据上述杂交实验推测：亲代M的基因型是 （选填选项前的符号）。aDDggbDdgg子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括 （选填选项前的符号）。aDDGGbDDGgcDdGGdDdGg（3）杂交后，出现红绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代 （填“M”或“N”）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染
7、色体的 发生了交换，导致染色体上的基因重组。通过记录子代中红绿荧光胚胎数量与胚胎总数，可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例，算式为 。【答案】（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 受精卵 表达（2）b b、d（3）N 非姐妹染色单体 4*红绿荧光胚胎数量/胚胎总数62013福建33生物现代生物科技专题必答题(10分)克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞淍亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答：(1)图中重组细胞的细胞核来自_细胞，早期胚胎移入受体子宫继
8、续发育，经桑椹胚、囊胚和_胚最终发育为克隆猪。(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平。图中X表示_过程。从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成_用于PCR扩增，PCR过程第一轮循环的模板是_。72013广东地中海贫血症属于常染色体遗传病。一对夫妇生有一位重型地中海贫血症患儿，分析发现，患儿血红蛋白链第39位氨基酸的编码序列发生了突变（CT）。用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l，突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和
9、s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，如图11（a）。目前患儿母亲再次怀孕，并接受了产权基因诊断。家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图见图11（b）。（终止密码子为UAA、UAG、UGA。）（1）在获得单链模板的方式上，PCR扩增与体内DNA复制不同，前者通过_解开双链，后者通过_解开双链。（2）据图分析，胎儿的基因型是_（基因用A、a表示）。患儿患病可能的原因是_的原始生殖细胞通过_过程产生配子时，发生了基因突变；从基因表达水平分析，其患病是由于_。（3）研究者在另一种贫血症的一位患者链基因中检测到一个新的突变位点，该突变导致链第102位的天冬酰胺替换为苏氨酸。如果_，但_，则
10、为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有力证据。【答案】（1）高温 解旋酶 A. Aa 母亲 减数分裂 突变后终止密码子提前出现，翻译提前终止形成异常蛋白B. 该病可遗传给后代 患者的链不能被限制性酶切割8从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是A.合成编码目的肽的DNA片段B.构建含目的肽DNA片段的表达载体C.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽92013江苏15. 下列关于转基因生物安全性的叙述中,错误的是A. 我国已经对转基因食品和转基因农产
11、品强制实施了产品标识制度B. 国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害C. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提D. 目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上10、2013重庆某一单基因遗传病家庭，女儿患病，其父母和弟弟表现型均正常。（1）根据家族病史，该病的遗传方式是 ；母亲的基因型是 （用A,a表示）；若弟弟人群中表现型正常的女性结婚，其子女患病的概率是 （假设人群中致病基因频率是110.结果用分数表示。）在人群中男女的概率相等，原因是男性在形成生殖细胞时 自由组合。（2）检测发现，正常人体中一条多肽链（由146个氨基酸组成）在患
12、者体内为仅含前45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是 ，由此导致正常mRNA第 位密码子变为终止密码子。（3）分子杂交技术可用于基因诊断，其基本过程是用标记的DNA单链探针与 进行杂交。若一种探针能直接检测一种基因，对上述疾病进行产前基因诊断时，需要 种探针。若该致病基因转录的mRNA分子为“ACUUAG”,则基因探针序列为 ；为制备大量探针，可用 技术。（1）常染色体隐性遗传 Aa 133 常染色体和性染色体 （2）基因突变 46 （3）目的基因（待测基因） 2 ACTTAG（TGAATC） PCR 112013上海（六）回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。（9分） 图17表
13、示利用致病病毒M的表面蛋白基因和无害病毒N，通过基因工程制作重组M病毒疫苗的部分过程。其中表示操作流程，ah表示分子或结构。据图回答问题。56基因工程除了微生物基因工程外，还有_。在图17所示过程中，获取目的基因的步骤是流程 （用图中编号回答）；在流程中必需实施的步骤有_。57在图17所示的整个过程中，用作运载体的DNA来自分子_（用图中字母回答）。58下列关于质粒运载体的说法正确的是_（多选）。A使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解B质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞C质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的D质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则E质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达F没有限制酶就无法使用质粒运载体59据图比较结构g和结构h的异同，并解释产生差异的原因_。 56.植物基因工程、动物基因工程 、 切割质粒、将质粒与目的基因重组 57.c、d 58.A、D、F 59.相同点：遗传物质相同；不同点：表面蛋白质不同。差异的原因：因为g导入受体细胞后，目的基因得以表达，合成了致病病毒M的表面蛋白
