1、血型复检规则及案例分析2014.5.82014.5.8 正确的血型鉴定是保证临床输血安全的首要条件。复检规则复检规则 仪器不能成功判读 正定型4+和(或)反定型2+正反定型不一致 RhD阴性仪器不能成功判读不能判读原因不能判读原因缩写缩写反应孔为空EW细胞过少FC细胞过多TMC混合视野或纤维蛋白(正定型实验)MF顶端线型或纤维蛋白(反定型)FIB溶血或黄疸反应 HEM不确定反应或未成功评级结果?错误液面 WLL柱中检测到气泡 BUB找不到反应孔 WNF光线太暗 LTL光线太强 LTH功能超出范围OUT仪器不能成功判读正定型EW原因:样本有凝块反定型EW原因:频繁出现,加样注射泵漏气,加样不准,
2、厂家维护处理。仪器不能成功判读FIB原因:抗凝不充分,纤维蛋白析出。(外观可见)高纤维蛋白血症或高球蛋白血症。(外观不可见)试管法复查,加盐水可消除干扰HEM:标本溶血MF:1、异型输血 2、骨髓移植 3、白血病 4、亚型仪器不能成功判读不轻易报亚型在备注内注明抗原减弱TMC:红细胞过多FC:红细胞过少反定型A亚亚/B亚亚 B AB亚型亚型 A1 A1BPCOCBCA1BC抗-H2+W3+S2+1+反应结果介于Bc和A1Bc之间 此鉴定目的主要与B(A)相区别:B(A)与抗H呈强阳性反应3-4+,相当于O细胞反 应强度。ABO亚型-案例1综上所述:红细胞上有很弱的A抗原,正常B抗原,血清中有不
3、规则抗A1。可定为A亚B型与临床沟通:该患者曾在A院住过院,患者自己不清楚既往的血型。与A院联系:该患者2012年在A院的血型鉴定为B型。?为进一步确定A抗原的存在,进行吸收放散试验。吸收放散试验的检测原理:由于A抗原很弱用常规血清学方法鉴定很弱或未能鉴定出来时,可通过抗A血清来吸收待检红细胞,如果存在A抗原,就会将血清中的抗A吸附在红细胞上,然后再将红细胞上的抗A放散下来,将放散液再与A型试剂红细胞反应,如果有凝集,证实A抗原的存在,如果阴性,不能证实A抗原的存在。同时用O细胞做阴性对照ABO亚型-案例1吸收放散,抗A血清的选择1、单抗 效价高,需稀释,另需验证(能与亚型红细胞反应)2、多抗
4、(人源),可以用于亚型的鉴定和吸收,但效价低。选择:上血 抗A,4倍稀释 献血者B型血浆作为人源抗A吸收放散试验吸收放散试验 PC OC(对照)4 1h离心吸出上清4NS洗涤6次56热放散10min立即离心吸出上清液(放散液)再次离心单-A与AC反应,离心看结果AcPC放OC放二次2+0证明有A抗原存在 吸收放散试验吸收放散试验 PC OC(对照)4 1h离心吸出上清4NS洗涤6次56热放散10min立即离心吸出上清液(放散液)再次离心放散液中加入AC,4 过夜人-A离心看结果AcPC放OC放IS004过夜00未能成功吸收未能成功吸收ABO亚型-案例1人-A吸收前后效价对比:无明显差异吸收前效
5、价:16吸收后效价:8考虑人源抗A效价太低,未能成功被弱A抗原吸收,但单抗A能被成功吸收,放散阳性。结论结论:A亚B,血清中有不规则抗A1。输血或备血建议:O型或B型洗涤红;AB型血浆ABO亚型-案例2正反定型不一致,首先排除不规则抗体。病例介绍:CCU患者 634582 男,58岁,入院诊断为冠心病、高血压,无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。抗体筛查阴性,排除ABO系统以外的抗体。ABO亚型-案例2试管法复查试管法复查反应条件正定反定-A-BAcBcOc自身cIS2+W4+3+000多次2+4+3+0004*10min2+S4+A抗原减弱,血清中有不规则抗A?AB的亚型?AxB?
6、或或B(A)?B(A)l 同cisAB的遗传方式相似,是一种罕见的ABO亚型,cisAB是在1964年发现,B(A)是在1985年发现;l 分子机理:被认为是遗传学上的B型,在B基因基础上发生错义突变,由于单碱基突变,变异的B基因具有编码双功能活性酶的能力,血清学除了表现为B抗原特异性外,还表现为少量A抗原特异性。l 血清学特点:较弱的A抗原和接近正常的 B抗原特异性,血清中有较强的抗-A。抗血清试剂红细胞-A-B-AB-A1-HA1A2BOB(A)2+4+4+04+1-3+1+00AxBw4+4+0w/0w000同 同异异同进一步排除AXB,AXB与A2细胞不反应,此点是鉴别B(A)与AXB
7、最有价值的依据之一-HPCOCBCABCIS3+w3+w1+1+二次3+3+1+s1+AXB与抗-H呈弱凝集,而B(A)与抗-H呈强凝集,排除AXBA2CPS-A1(阴性对照)-A(阳性对照)IS004+多次1+W04+PC-A1-AIS04+多次04+红细胞与抗A1不反应,符合B(A)特征。ABO亚型-案例2结论:根据以上血清学实验,初步定为B(A)亚型,须经分子生物学实验进一步确认。基因检测结果:B(A)02/O 700CG家系调查:患者儿子、姐姐、小妹和大妹ABO亚型-案例2患者儿子姐姐小妹大妹血清型B(A)B(A)AB3AAB3基因型B(A)02/OBA02/O02A101/B(A)0
8、2A101/OA101/B(A)02ABO亚型-案例2姐姐儿子大妹妹小妹妹B(A)AB3A型AB3冷自身抗体病例介绍:CCU患者 679896 男,56岁,入院诊断为心梗,无输血史。入院常规检测血型发现正反定型不一致。弱阳性抗筛阴性冷自身抗体试管法复查试管法复查反应条件正定反定-A-BAcBcOc自身c二次4+00.5+3+1+1+37*30min02+00抗体筛选抗体筛选IS二次二次37*30min2+2+S02+2+S02+S3+W0自身细胞1+1+S0确定为冷自身抗体冷自身抗体DAT结果结果多抗2+S单抗IgG0.5+单抗C32+S卡(多抗)4+124816326412825651210
9、24204840964+4+4+4+3+3+w2+s2+1+s1+1+0.5+0冷抗体效价测定:1:1024结论:A型,冷自身抗体导致正反定型不一致。DAT阳性很强,主要以抗C3为主,是冷自身抗体的一个特性,考虑效价也很高。冷自身抗体冷自身抗体输血治疗:保温输注,血液加温、肢体保温心外科手术:慎重选择体外实验:不同温度下的反应情况:RT、30、32 、35 、37 外科决定该患者是否可以进行手术:如不能,进行原发病治疗,待抗体低度下降后再安排手术。如可以,手术CPB温度的选择CPB 深低温、中低温、浅低温、常温根据手术类型及复杂程度决定RH阴性阴性病例介绍:C28 患者 677312 女,55
10、岁DATIgM(试管)试管)IgG(抗人球卡)抗人球卡)IgG(经典经典IAT)004+3+W结论:D变异型测序结果:与RHD*00101参考序列相比较,第1、2、3、5、6、7、8、9、10外显子无突变,第4外显子491位点发生纯合子突变AT.复检记录复检记录 所有复检,均需在血型复检记录表上进行登记,如有疑难血型,还需在输血相容性检测疑难标本实验记录表上进行试验记录。1-4月份血型复检分析月份血型复检分析类型类型例数(比例)例数(比例)抗体减弱或无52(47.7%)EW(标本有凝块)7(6.4%)EW(反定未加样)10(9.2%)RhD阴性17(15.6%)TMC4(3.7%)FIB5(4.6%)FC1(0.9%)自身抗体干扰2(1.8%)抗筛阳性7(6.4%)HEM1(0.9%)假阳性2(1.8%)卡干涸1(0.9%)合计109血型鉴定总测试:6809,复检例数109例,复检率:1.6%40Thank you