1、高中生物选修三新增知识点练习班级 考号 姓名 总分 一、填空题1.酵母菌的纯培养：用_培养酵母菌。（1）菌落：_。一个单菌落即一个_。_通常可以用来作为鉴定菌种的重要依据。获得单菌落的方法：_和_法。（2）酵母菌的纯培养：_、_、_。制备培养基的步骤：_。_：称取_的马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用_过滤。向滤液中加入20g_（也可用蔗糖代替）、15-20g_，用蒸馏水定容至1000ml。将50ml培养基用玻璃棒转移至_中，塞上棉花塞，包上_，并用_，再放入_，在压力为_kPa、温度为_，灭菌_min。将培养皿用旧报纸包裹，放入_内，在_下灭菌_h。在灭菌前
2、， 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是_。倒平板时使培养基冷却到_ 左右，在_附近倒平板。a.培养基灭菌后为什么要冷却到50左右时开始倒平板？_。b.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？因为_。拔掉瓶塞后为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？_。c.在倒平板的过程中，若不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？_。为什么？_。d.倒平板时，能将培养皿的皿盖拿下来放在一边吗？_。应如何做？_。为什么？_。f.刚倒完平板，可以直接倒置吗？_。g.培养基冷凝后，为什么要将培养皿倒过来放置（倒置）？_二、综合题2.发酵工程生产产品的流程如图所示。回答下列问题
3、：(1)性状优良的菌种可以从_中获取，随着技术的发展，也可以通过_或_等途径获得。(2)发酵过程是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的_、_等，以了解发酵进程。(3)如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用_、_等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的_、_和_措施来获得产品。3.发酵工程在工业生产上得到广泛应用，回答下列相关问题：(1)性状优良的菌种可以从自然界获取，随着技术发展，也可以通过_或_获得。在发酵之前，还需要对菌种进行_，该过程中要严格保证_条件。(2)发酵过程是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培
4、养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，其中检测培养液中微生物数量的方法有_（答出两种）；除了了解发酵进程外，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制_（至少答出3个）与转速等发酵条件。(3)如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用_等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的_措施来获得产品。单细胞蛋白是指通过微生物发酵获得的_。4.阅读以下材料，回答相关问题。我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下图所示。其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢
5、物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵条件随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。(1)发酵工程一般包括菌种的选育、_、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面。啤酒酵母的新陈代谢类型是_。(2)在酿酒过程中常加入_（填某种植物激素）以缩短大麦发芽的时间，从而减少有机物的消耗。焙烤阶段应注意控制温度，不能使_失活。(3)发酵阶段的底物是_，发酵液和发酵设备都必须经过严格的_处理。(4)请写出一条啤酒的发酵生产过程中，可以使啤酒的产量和质量得到明显提高的工程手段_。(5)请写出一条
6、发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等领域得到广泛应用的原因_。5.下图为啤酒酿造的流程图，请回答与啤酒酿造有关的问题：(1)大麦在酿造前要经过发芽过程制备成麦芽，目的是增加大麦中水解酶的种类、_和_。但发芽时间不宜过长，原因是_。(2)麦芽粉碎和糖化可将麦芽中的非水溶性组分转化成水溶性组分，是啤酒发酵过程中的重要步骤。糖化的主要过程是水解淀粉，参与该过程的水解酶最适温度以及产物信息如下表：淀粉酶种类最适温度主要产物次要产物-淀粉酶72-75糊精麦芽三糖、麦芽糖-淀粉酶62-65麦芽糖麦芽三糖、葡萄糖其中糊精不可作为发酵底物，酵母发酵时底物使用的优先顺序是葡萄糖麦芽糖麦芽三糖，因此，若想获得低
7、乙醇含量的啤酒，糖化时温度应_。A.快速提升至62-65B.快速提升至72-75C.缓慢提升至72-75D.缓慢提升至62-65糖化完毕后，需要将麦汁煮沸，目的是_。(3)发酵早期_（填“需要”或“不需要”）保持无氧，原因是_。为避免发酵过程产生过多的代谢产物从而导致_，麦汁发酵多在低温环境下进行。此外，发酵设备还必须配有冷却装置，这是因为_。(4)啤酒倒入酒杯时会产生大量的气泡，气体的主要成分是_，其主要来源是_。6.小麦赤霉病是全球性小麦病害，严重影响小麦产量和品质。利用植物细胞工程技术可加快抗赤霉病小麦的育种进程。请根据所学内容和材料信息回答下列问题：(1)植物细胞工程是以植物的_为理论
8、基础，以_为技术支持，在细胞和亚细胞水平对植物进行遗传操作，从而实现对植物的改良和利用。(2)为了加快抗病基因型的纯合速度，可采用玉米授粉诱导小麦加倍单倍体法。抗病小麦（6n42）与玉米（2n20）杂交后，在杂交后的最初3次细胞分裂过程中，来自玉米花粉的染色体会被逐渐排除掉，最终仅剩下来自母本小麦的染色体，形成了小麦单倍体胚。该单倍体胚经培养形成幼苗后，再进行染色体加倍。杂交后最初3次细胞分裂的过程中，细胞发生了_变异。小麦单倍体胚中含_个染色体组，可用_（物质名称）对单倍体幼苗进行染色体加倍处理，处理后的抗病小麦含有_条染色体。(3)将（2）中获得的植物种子进行“幼胚离体培养”，其大致流程是
9、：用无菌水冲洗35次麦粒，在无菌条件下剥出麦粒的幼胚。将幼胚尖端向下接种在MS培养基上，放入25培养室中培养，接种4天后置于24低温条件下“春化”15天，然后移栽至盆钵中生长。接种小麦幼胚的MS培养基上应添加_等物质，幼胚培养初始阶段培养室内_（填“需要”或“不需要”）给予光照。与传统的用小麦种子在土壤中种植育种相比，育种工作中采用“幼胚离体培养技术”的优势是：_。7.香蕉束顶病是香蕉生产中的主要病害之一，由香蕉束顶病毒侵染引起，病株一般不长花蕾，蕉农称之为“不治之症”。利用植物组织培养技术培育脱毒香蕉苗，建立脱毒苗圃是防治香蕉束顶病的重要措施。请回答下列相关问题：(1)培育脱毒香蕉苗时常选用
10、植物顶端_区组织作为实验材料，原因是_。(2)在培育脱毒苗的过程中，有可能获得一些突变体，从而培育出香蕉新品种，原因是_。所得突变体的突变方向不能由人的意愿决定，是因为_。(3)为探究超低温保存对外植体的影响，某研究团队做了相关实验，结果如表。据表可得出的结论是_。外植体预处理方式外植体数量（个）外植体成活数（个）成活率（%）脱毒率（%）正常温度保存605693.326.7超低温保存603355.060.68.含有pRiA4质粒的发根农杆菌能诱导植物体长出发根，特别适合规模化生产从根中提取的物质如丹参酮，为了探究MYB98基因（丹参酮合成调控基因）对产量的影响，研究人员进行如下操作：(1)上图
11、所示的“重组”步骤中，目的基因应选择。A.丹参酮合成基因 B.链霉素抗性基因C.潮霉素抗性基因 D.MYB98基因(2)要确定图中的“导入”是否成功，_（“立即”或“培养一段时间后”）将含发根农杆菌的菌液稀释后接种于添加了_的固体培养基上，也可借助_技术检测转录的产物。(3)在“感染”步骤中，含有目的基因的发根农杆菌侵染经_“消毒”或“灭菌”）处理的丹参叶片细胞，目的基因整合到叶片细胞的_中。(4)图中的目的基因在丹参的_细胞中进行表达，该转基因即获得了成功。丹参酮具有抑菌消炎等功能，其作为丹参的_（“初生代谢物”或“次生代谢物”），并非丹参生命活动必需的物质。(5)取丹参植株叶片组织，用酶解
12、法得到大量单个细胞进行植物组织培养，该过程_（“需要”或“不需要”或“不确定”）经历愈伤组织阶段，得到的成活后代中，有一些植株茎秆特别粗壮，科研人员认为其很可能是多倍体，可通过观察_进行确定。9.2018年1月我国科研人员利用体细胞核转移（SCNT）技术克隆出了第一批灵长类动物食蟹猴。该动物可为癌症、帕金森症等人类疾病的研究提供模型。请回答相关问题：(1)从理论上分析，体细胞仍具有全能性，其原因是_；受体细胞一般选择处于_时期的去核卵母细胞。去掉卵母细胞细胞核的目的是_。(2)体外培养体细胞常用液体培养基（即培养液），其原因是_；在体细胞培养过程中，为防止杂菌污染，应采用的措施是_。(3)构建
13、猕猴模型比鼠更适合用于研究人类疾病和进行药物试验，其原因是_。10.菊花组织培养的大致过程如图所示，回答下列问题：(1)菊花的组织培养需要用到的培养基为_培养基，对培养基灭菌时应_（填“先灭菌后分装”或“先分装后灭菌”）。(2)图中B过程是_。(3)启动细胞分裂，B过程和C过程的关键性激素是_。(4)愈伤组织细胞的特点是_。(5)植物的微型繁殖技术常用于工厂化育苗，该项技术的主要特点是_（答出两点即可）。11.科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培养出克隆鼠，流程如下图所示。请回答：(1)进行细胞培养时，用_法对从黑鼠体内获得的成块组织进行处理，分散
14、成单个细胞；与成块组织相比，分散成单个细胞后容易培养，原因是_。（答出1点即可）(2)对黑鼠体细胞进行的初次培养称为_，细胞贴壁生长到一定阶段会发生接触抑制，接触抑制是指_。(3)图中重组囊胚通过_技术移入白鼠子宫内继续发育，克隆鼠的遗传特性与黑鼠相同，理由是_。(4)对iPS细胞进行定向诱导分化后可用于疾病的治疗等。若诱导iPS细胞定向分化为生殖细胞的技术发展成熟，该技术可能的应用有_。（至少答出2点）12.牛胚胎移植的基本程序如下图，请据图回答： (1)供体的主要职能是_，受体母牛需要满足的条件是_。(2)b表示受体母牛经人工激素调节后与供体母牛达到_。(3)为了获得核基因型相同的多个胚胎
15、，常采取的方法是_，处理的时期是_。(4)进行胚胎移植的优势是_。13.胚胎工程技术包含的内容很丰富。下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是本地黄牛。回答下列问题：(1)图中应用1利用了_技术，该技术的繁殖方式是_。(2)在应用2过程中，为获取更多的卵细胞，通常需对供体1用_激素处理；早期胚胎移植之前还需对受体牛进行_处理。(3)通过应用3所获取的胚胎干细胞具有_的特点。(4)在应用4获取二分胚的操作过程中需注意_胚胎移植前需进行性别鉴定，目前SRYPCR法是性别鉴定最有效、最准确的方法。操作的基本程序是从被测的囊胚中取_细胞，提取DNA，进行鉴定。(
16、5)通过各种技术获得的胚胎都必须移植给受体才能获得后代，胚胎移植技术的优势是_14.DNA的粗提取与鉴定的实验（如图）：(1)本实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡的全血，主要原因是鸡血细胞液中_含量较高，另外本实验不适合用哺乳动物的血细胞液，原因是_。(2)图中A所示加入蒸馏水的目的是_。(3)通过图中B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是_。(4)图中C所示加入蒸馏水的目的是_。(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用_试剂进行检验，在沸水浴条件下，冷却后可以看到颜色反应为_色。15.DNA粗提取和鉴定【实验原理】DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成
17、分在_中的溶解度不同，在_mol/L下，DNA的溶解度最小；同时DNA不溶于_，但是细胞中的某些蛋白质可以溶解其中。DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：_【实验材料】动物细胞选择_（填“羊成熟的红细胞”或“鸡血细胞”），原因是_【实验步骤】破碎细胞：鸡血细胞液加入_，同时用玻璃棒搅拌；切碎的洋葱中加入_。然后收集滤液。去除滤液中的杂质：先在滤液中加入_mol/L的NaCl，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液的浓度至_mol/L，析出DNA，过滤去除溶液中的杂质，最后用_mol/L的NaCl溶解DNA。DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入_的酒精溶液（体积分数为_），静置23min。DNA的
18、鉴定：用_mol/L的NaCl溶解DNA；在_条件下，DNA与_反应呈现_。【注意事项】为防止血液凝固，需要向血液中加入_。二苯胺试剂要_，否则会影响鉴定的效果。16.家畜胚胎的性别鉴定技术对畜牧业的发展具有重要意义。巢式PCR扩增反应在两次PCR反应中使用两组不同引物，先使用外引物对目标区域DNA片段进行第一次PCR扩增，产生中间产物，然后使用内引物对中间产物进行第二次PCR扩增，产生目标产物。下图一是巢式PCR工作原理示意图。请回答：图一图二 (1)巢式PCR反应体系中需加入模板_、_、引物、Mg2+、缓冲液等。(2)巢式PCR进行时，若用外引物扩增产生了错误片段，再用内引物扩增在错误片段
19、上进行引物配对并扩增的概率_，因此，相较于常规PCR获得的产物而言，巢式PCR获得产物特异性_。(3)巢式PCR通常在一个试管中进行第一阶段反应，然后将中间产物等转移到第二试管中进行第二阶段反应，不在同一试管中进行的主要原因是_ 。(4)PCR技术的原理是_。为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶的识别序列，该序列应添加在引物的_（填3端或5端）。(5)科研人员利用多重巢式PCR技术同时扩增Y染色体上的性别决定基因（SRY）和常染色体上的酪蛋白基因（CSN1S1），进行早期胚胎的性别鉴定，并将鉴定后的胚胎进行移植。下表是主要实验步骤，请完成下表：实验目的方法步骤要点胚胎样品D
20、NA提取选取囊胚的_ 细胞提取DNAPCR引物的设计和合成根据牛的SRY和CSN1S1基因序列设计合成2对引物PCR过程预变性变性_ 延伸观察扩增结果电泳分析受体牛_处理对受体牛注射激素（性激素）胚胎移植将筛选出的牛胚胎移植到受体牛的子宫内(6)电泳结果如图二所示，15号为取自不同胚胎的样品进行巢式PCR的结果，A和B条带中代表SRY的是_。可以确定15号中的3和5号胚胎为_性。(7)牛胚胎的性别鉴定除了用PCR外，下列方法也可行的是（）A.染色体核型分析的方法 B.核酸探针杂交的方法C.差速离心的方法 D.H-Y抗血清免疫学法（H-Y抗原基因位于Y染色体上）。17.研究发现，TRIM59基因
21、在肝癌细胞中存在异常表达，可用于原发性肝癌的早期诊断。TRIM59蛋白含有R、B、C和TM四个功能区，如图1所示；科研人员采用一定的技术手段，获得了TRIM59基因的cDNA，分别构建TRIM59基因过表达及TRIM59基因敲除质粒，分别转染肝癌细胞株后，过表达及敲减细胞株的增殖情况如图2所示。图1TRIM59蛋白质功能区 图2TRIM59对肝癌细胞增殖能力的影响(1)图2的实验结果表明_。(2)科研人员通过PCR扩增了图1中4种不同长度的蛋白质功能区组合片段所对应的TRIM59基因片段，并插入下图3所示的带FLAG标签序列（27bp）的载体中，与FLAG标签序列形成融合基因。FLAG是一种短
22、肽，使融合蛋白能与含有FLAG抗体的介质结合，但不影响TRIM59蛋白功能区的功能。图3PCR扩增4种不同长度TRIM59基因片段需要的引物有_种；为了使目的基因正确插入，除R对应的TRIM59基因片段以外，在目的基因上游引物的5端应插入_（“BamHI”或“EcoRI”）的识别序列，理由是_；可利用PCR技术验证融合基因是否构建成功，其实验思路是_。(3)体外实验发现TRIM59蛋白和PPM1B蛋白有结合现象。为了研究两蛋白在细胞内是否结合，科研人员分别将FLAG-TRIM59（FL）质粒、FLAG-TRIM59（R+B）质粒、FLAG-TRIM59（R）质粒、FLAG-TRIM59（R）质
23、粒与带有GFP标签的GFP-PPM1B质粒共同转染受体细胞，以单独转染GFP-PPM1B质粒的受体细胞作为对照。分别利用FLAG抗体和GFP抗体对至实验细胞裂解液中的蛋白质进行检测，结果如右图中胶片一、二所示。再利用GFP抗体对上述FLAG抗体免疫沉淀中的蛋白质进行检测，结果如胶片三所示。 图中实验结果说明_。(4)研究发现TRIM59蛋白的R功能区具有泛素化连接酶的活性，可介导泛素化途径降解PPM1B蛋白，PPM1B能够使某种蛋白去磷酸化进而抑制癌细胞的增殖和转移，据此可推测肝癌患者中TRIM59蛋白和PPM1B蛋白的量呈_相关。三、实验题18.约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物
24、，水果等发酵为含酒精的饮料。后来人们通过自然发酵或曲种传代的固体发酵方法生产了酱油、醋、豆豉、腐乳等其他发酵食品。现在人们又利用工业化的生产方式，生产啤酒、味精乃至胰岛素等药物，可以说微生物发酵与人们的生活息息相关。发酵不仅仅丰富了我们的餐桌，在医药工业、农牧业以及其他方面也有着广泛的应用。请根据所学知识回答下列问题。（1）人们在制作腐乳、酱油、泡菜等食品时，往往直接利用原材料中_的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品，这种技术一般称为_技术。该技术往往以_的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的。该技术制作的食品，是我国传统饮食文化的重要
25、组成部分。（2）在制作果酒时，有时候酒会变酸，其反应简式为_。（3）在制作泡菜、果酒、果醋等饮食的过程中，由于_差异，杂菌情况不明和发酵过程的控制缺乏标准等，往往造成发酵食品的品质不一。为缩短发酵时间，确保品质稳定，工业上大规模生产时，通常会先通过_技术获得单一菌种，再将他们接种到物料中进行发酵。（4）研究和应用微生物的前提是_，获得纯净的微生物培养物，这也是发酵工程的重要基础。无菌技术就是围绕这一点展开，主要包括_。（5）发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面，其中心环节是_。菌种选育要使用选择培养基。选择培养基指在微生物学中，允许特定种
26、类的微生物生长，同时抑制或_的培养基。许多国家以淀粉或纤维素的水解液制糖工业的废液等为原料，通过发酵来生产单细胞蛋白，单细胞蛋白指的是_。19.解脂芽孢杆菌产多种脂肪酶，后者广泛用于日用化工和食品工业，因此利用生物技术规模化生产脂肪 酶有重要意义。图 1 为解脂芽孢杆菌拟核 DNA 中某分泌型脂肪酶编码基因（LP）的定位及所用质粒 DNA 的有关信息，图中 BamH1、EcoR1、Mbo1 均为限制酶。图2 为固定化与非固定化脂肪酶的相对酶活性与温 度的关系。(1)基于上述信息，该项基因工程的目的基因是_。为了与质粒 DNA 合理重组，解脂芽孢杆菌拟核 DNA 和质粒 DNA 均应用限制酶_切
27、割。(2)由上述基因工程改造过的细菌规模化生产并提纯分泌型脂肪酶，需要加入硫酸铵使酶蛋白与其 他杂质分离，这属于酶分离提纯步骤中的_ 。(3)为了便于重复使用，上述制得的脂肪酶往往要固定化。比较图 2的两条曲线，写出固定化酶 的优势是：_；劣势是：_。四、非选择题组20.滁菊为菊科多年生草本植物：.为探究滁菊愈伤组织的培养条件，1号研究小组配制了含有两种浓度的2，4-D的培养基，然后接种初始重量相同的幼苗子叶切块并分别培养在光照及黑暗条件下，一段时间后，测量愈伤组织的生长量，结果如下图。(1)在该实验中，自变量是_。进行植物组织培养的实验，要严格控制杂菌污染的原因是_。(2)由图中实验数据分析
28、，在培养基中添加2，4-D的作用是_。(3)为大量获得该植物的愈伤组织，适宜采取_（填“黑暗”或“光照”）培养。(4)光照在培养过程中不作为愈伤组织的能量来源，原因是_。.滁菊长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。2号研究小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），根据下图表回答问题：不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响脱毒方法样本数脱除CSVd率脱除CVB率脱除（CSVdCVB）率茎尖分生组织培养7720.7844.1616.
29、88热处理结合茎尖培养7136.6263.3835.21病毒唑结合茎尖培养7146.4849.3036.62(5)试管苗_号已成功脱去CVB病毒。(6)只脱除CSVd病毒时，可选择_结合茎尖分生组织培养，效果相对更好。(7)热处理和病毒唑处理对试管苗同时脱去两种病毒的脱毒率_（有或无）显著作用，两者之间比较作用效果_（有或无）明显差异。附：参考答案：1. 马铃薯琼脂培养基 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体 种群 菌落 平板划线法 稀释涂布平板 制备培养基 接种和分离酵母菌 培养酵母菌 配制培养基 灭菌 倒平板 配制培养基 去皮 纱布 葡
30、萄糖 琼脂 锥形瓶 牛皮纸 皮筋勒紧 高压蒸气灭菌锅 100 121 1530 干热灭菌箱 160170 2 灭菌时能避免水蒸气凝结时浸湿棉塞；取出培养基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用 50 酒精灯火焰 琼脂是一种多糖，在44以下凝固，倒平板时，温度过高，太烫，不易操作；若低于50不及时操作，琼脂会凝固 酒精灯火焰附近存在着无菌区域,避免避免周围环境中微生物的污染 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基 不能 因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 不能 用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙 防止杂菌污染培养基 不能，应等培养基冷却凝固 既可防止皿盖上冷凝的水
31、滴滴入培养基造成污染;又可避免培养基表面的水分过快蒸发2.(1) 自然界 诱变育种/基因工程育种 基因工程育种/诱变育种(2) 微生物数量/产物浓度 产物浓度/微生物数量(3) 过滤 沉淀 提取 分离 纯化3.(1) 诱变育种 基因工程育种 扩大培养 无菌(2) 稀释涂布平板法、显微镜直接计数法 温度、pH和溶解氧(3) 过滤、沉淀 提取、分离和纯化 微生物菌体4.(1) 扩大培养 异养兼性厌氧型(2) 赤霉素 淀粉酶(3) 葡萄糖 灭菌(4)随时检查培养液中的酵母菌数量；产物浓度；及时添加必需的营养组分；严格控制发酵温度、发酵时间、PH、溶解氧含量、罐压和搅拌速率等发酵条件。(5)生产条件温
32、和；原料来源丰富且价格低廉；产物专一；废弃物对环境污染小、易处理5.(1) 含量 活性 发芽时间过长会造成原料/发酵底物的过度损失(2) B 灭菌和破坏酶的活性(3) 不需要 发酵早期酵母菌可利用氧气快速增殖，便于发酵中后期快速发酵 啤酒风味不佳 发酵时酵母可产生热量(4) 二氧化碳（CO2） 酵母在无氧情况下将糖代谢成酒精时产生的6.(1) 全能性 植物组织与细胞培养（或植物组织培养）(2) 染色体数量 3 秋水仙素 42(3) 蔗糖、无机盐、琼脂 不需要 可尽快打破种子休眠，加快植株生长发育，可实现在一年内培育多代小麦的育种目标7.(1) 分生 植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒(2
33、) 在植物组织培养过程中，培养的细胞一直处于不断增殖的状态，易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变 基因突变具有不定向性(3)利用超低温保存的方式处理外植体后，虽然其成活率下降，但脱毒率明显提高8.(1)D(2) 培养一段时间后 潮霉素 PCR(3) 消毒 染色体DNA（基因组）(4) 根 次生代谢物(5) 需要 分析染色体组型（观察有丝分裂中期染色体数目）9.(1) 体细胞核中含有猕猴个体发育所需要的全套基因 M 保证克隆动物的遗传物质几乎全部来自供体细胞的细胞核(2) 与动物细胞生活的液体环境相近 有利于动物细胞进行物质交换对培养液和培养用具进行无菌处理；在无菌环境下操作(3)猴与人在进
34、化上亲缘关系更近，有利于更准确地评估药效。10.(1) MS 先分装后灭菌(2)脱分化(3)生长素和细胞分裂素(4)排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞(5)可以高效快速地实现种苗的大量繁殖和保持种苗的优良遗传特性11.(1) 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶或机械） 细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出；在细胞水平操作的技术容易实现。(2) 原代培养 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会出现停止分裂增殖的现象(3) 胚胎移植 克隆鼠是由黑鼠体细胞去分化获得的诱导性多能干细胞（iPS）发育而来，其遗传物质与黑鼠相同(4)用于治疗不孕症；获得足够量的生殖细胞来进行濒危
35、物种的克隆研究；获得生殖细胞进行转基因操作，再经过受精、胚胎发育等过程来获得转基因动物。12.(1) 产生具有优良遗传特性的胚胎 有健康的体质和正常繁殖能力(2)同期发情(3) 胚胎分割移植 桑椹胚期或囊胚期(4)可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力13.(1) 核移植 无性生殖(2) 促性腺 同期发情(3)分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能(4) 将内细胞团均等分割 滋养层(5)充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力14.(1) DNA 哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核(2)使血细胞吸水胀破，释放出核物质DNA(3)使DNA溶解于NaCl溶液中(4)
36、使DNA的溶解度下降而析出(5) 二苯胺 蓝15. 不同浓度的NaCl溶液 0.14 酒精溶液 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080的高温，而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响 鸡血细胞 哺乳动物成熟的红细胞无细胞核(无DNA) 一定量的蒸馏水 一定的洗涤剂和食盐 2 0.14 2 与滤液体积相等的、冷却 95% 2 沸水加热 二苯胺试剂 蓝色 柠檬酸钠 现配现用16.(1) dNTP（原料） DNA聚合酶(2) 降低 更强(3)防止引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染(4) DNA双链复制 5端(5) 滋养层 退火 同期
37、发情(6) B 雄(7)ABD17.(1)在肝癌细胞系中，敲除TRIM59可以有效抑制细胞的增殖能力，过表达TRIM59细胞的增殖能力显著增加。(2) 5 BamH 使用EcoR会导致载体移码突变，翻译出的氨基酸序列改变 以插入FLAG-目的基因的载体为模板，使用载体引物F和目的基因下游引物进行PCR扩增，电泳检测是否扩增出DNA条带，及对应的大小(3)两蛋白在细胞内相互结合，TRIM59蛋白通过R结构与PPM1B结合(4)负18. 天然存在 传统发酵 混合菌种 图片 菌种 微生物培养 防止杂菌污染 消毒和灭菌 发酵罐内发酵 阻止其他微生物生长 微生物菌体19.(1) 脂肪酶编码基因 EcoR(2)使酶蛋白沉淀(3) 相比非固定化酶，在 0-70的条件下，固定化酶具有更好的热稳定性，能 在更高与更广的温度范围内保持较高的相对活性 相比非固定化酶，在 0-70的条件下，固定化酶的最大相对酶活性有所损失， 略低于非固定化酶20.(1) 光照的有无、2，4-D的浓度、培养天数 杂菌可以在培养基上生长争夺营养；杂菌产生的物质影响植物组织的生长(2)促进愈伤组织的生长(3)黑暗(4)愈伤组织细胞中不含叶绿体，无法利用光能进行光合作用(5)3、4(6)病毒唑 (7) 有 无13
