1、23.5.121第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查 第一节第一节 概述概述（杂质和杂质的限量检查）（杂质和杂质的限量检查）第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 第三节第三节 特殊杂质检查方法特殊杂质检查方法3、甚至、甚至对人体健康有害对人体健康有害的的物质。物质。1、药物中存在的、药物中存在的无治疗作用无治疗作用2、影响药物的、影响药物的疗效疗效和和稳定性稳定性杂质杂质影响药物质量影响药物质量反应药物生产过程中反应药物生产过程中存在的问题存在的问题杂质杂质杂质检查杂质检查鉴别鉴别真伪真伪纯度纯度杂质检查的杂质检查的目的目的：保证用药的保证用药的安全有效安全有效；为生产、流
2、通过程的质量保证和企业管为生产、流通过程的质量保证和企业管理提供依据。理提供依据。药物研究药物研究设计、设计、开发开发实施实施工厂工厂 企管企管药品原料药品原料药典检验药典检验药品剂型药品剂型药典检验药典检验药品使用药品使用安全、有效安全、有效6第一节第一节.概述概述 杂质和杂质的限量检查杂质和杂质的限量检查一、药物纯度的概念与要求一、药物纯度的概念与要求二、药物中杂质的来源与种类二、药物中杂质的来源与种类三、杂质的限量三、杂质的限量一、药物纯度的概念与要求一、药物纯度的概念与要求 概念概念 杂质来源杂质来源 杂质危害杂质危害 检查杂质要求与纯度控制检查杂质要求与纯度控制 药物杂质（或纯度）与
3、新药研究药物杂质（或纯度）与新药研究 纯度控制纯度控制81、纯度（纯度（Purity）：药物药物纯净纯净的的程程度度。它是判定药品质量优劣的一个重它是判定药品质量优劣的一个重要指标。对药物纯度的要求是随着要指标。对药物纯度的要求是随着生产工艺的生产工艺的改进改进、变化以及分离分、变化以及分离分析析技术的发展技术的发展而不断而不断提高提高、完善完善的。的。一、药物的纯度要求一、药物的纯度要求 生产生产 贮藏贮藏过程中引入过程中引入 过程中引入过程中引入使用使用试剂试剂、原料原料 光光、热分解热分解中间体中间体、副产物副产物例例:(1)aspirin中中salicylic acid (2)生产中的
4、生产中的 HCl,H2SO4 胃刺激胃刺激变色变色 氯化物氯化物 硫酸盐硫酸盐 无毒无毒,但使药物含量降低但使药物含量降低 肠溶片肠溶片 没有治疗作用没有治疗作用 影响药物的疗效、稳定性影响药物的疗效、稳定性 对人体健康有害对人体健康有害检查杂质、控制纯度必要性检查杂质、控制纯度必要性 确保用药安全、有效，保证药品质量确保用药安全、有效，保证药品质量11对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在按按既定工艺进行生产既定工艺进行生产和和正常贮藏过程正常贮藏过程中中可能含有可能含有或产生并需要控制的杂质或产生并需要控制的杂质（如残留溶剂、有关物（如残留溶剂
5、、有关物质等）；质等）；改变生产工艺改变生产工艺时需另考虑增、修订有关时需另考虑增、修订有关项目。项目。中国药典凡例中国药典凡例药品质量标准中的杂质药品质量标准中的杂质不包括不包括变更生产工艺或变变更生产工艺或变更原辅料而产生的新的杂质，更原辅料而产生的新的杂质，也不包括也不包括参入或污参入或污染的外来物质。染的外来物质。4、杂质检查要求与纯度控制、杂质检查要求与纯度控制12药物性状药物性状理化常数理化常数含量测定等含量测定等主要主要指标指标杂杂质质杂质检查项目名称杂质检查项目名称检查方法检查方法杂质允许限量杂质允许限量其它其它指标指标纯度评价纯度评价收载在“检查”项下“氯化物氯化物”“”“砷
6、盐砷盐”“”“有关物质有关物质”综合整体评价综合整体评价药物纯度药物纯度13 药物纯度、稳定性药物纯度、稳定性 新药质量研究的重要组成部分新药质量研究的重要组成部分可能引入杂质？可能引入杂质？影响药物变质的因素？影响药物变质的因素？分离，结构？分离，结构？变质的过程？变质的过程？毒性？毒性？分解的产物？分解的产物？控制的方法？控制的方法？选择选择适合适合的贮藏条件的贮藏条件5、药物杂质（或纯度）与新药研究、药物杂质（或纯度）与新药研究分析技术分析技术的发展的发展14杂质杂质制剂制剂安全性安全性有效性有效性药理学、微生物药理学、微生物学、免疫学、生学、免疫学、生物化学等物化学等质量标准中检查项质
7、量标准中检查项药物分析药剂学药剂学杂质检查和质量标准的关系杂质检查和质量标准的关系不能用不能用试剂代试剂代替药品替药品药物的纯度与化学试剂的纯度药物的纯度与化学试剂的纯度 药物的纯度考虑杂质的药物的纯度考虑杂质的生理生理作用，药品只作用，药品只有两个等级：有两个等级：合格合格或不合格。或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（纯（GR）、分析纯（）、分析纯（AR）、化学纯（）、化学纯（CP）、）、色谱纯、光谱纯。色谱纯、光谱纯。二、药物中杂质的二、药物中杂质的来源和种类来源和种类杂质的主要来源杂质的主要来源 (一一)生产过程生产过程中引入中引入 原料
8、药生产原料药生产（合成：未反应完的（合成：未反应完的原料、反应的中间体、副产物、残留原料、反应的中间体、副产物、残留溶剂；溶剂；提取：提取：药物结构、性质相近的药物结构、性质相近的物质、残留溶剂）物质、残留溶剂）制剂生产制剂生产*注意注意：生产设备也可能引入杂质：生产设备也可能引入杂质例例:1.残留溶媒残留溶媒 2.生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质金属杂质金属杂质 3.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因注射剂注射剂水解、高温灭菌水解、高温灭菌对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸;二二乙氨基乙醇乙氨基乙醇(二二)贮藏过程贮藏过程二、药物中杂质的二、药物中杂质的来源和分类来源和分类杂质的
9、主要来源杂质的主要来源 (一一)生产过程生产过程中引入中引入易发生易发生水解水解的结构：的结构：环酰胺、苷类、酯、内酯、酰胺环酰胺、苷类、酯、内酯、酰胺易发生易发生氧化氧化的结构：的结构：醛基、长链共轭双键、酚羟基、醛基、长链共轭双键、酚羟基、巯基、亚硝基巯基、亚硝基(二二)贮藏过程贮藏过程(外界条件，微生物外界条件，微生物)温度温度 湿度湿度日光日光 空气空气水解、氧化、分解、异构化、水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发晶型转变、聚合、潮解、发霉霉有关物质有关物质181）按杂质来源）按杂质来源：一般杂质和特殊杂质。：一般杂质和特殊杂质。一般杂质一般杂质：自然界分布广泛、在多种药
10、物自然界分布广泛、在多种药物的生产和储藏过程中容易引入的杂质。的生产和储藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质特殊杂质：指在特定药物的生产和贮藏：指在特定药物的生产和贮藏 过程中过程中容易容易引入的杂质。引入的杂质。2）按杂质理化性质）按杂质理化性质：无机杂质，有机杂：无机杂质，有机杂质和残留溶剂。质和残留溶剂。3）按杂质毒性）按杂质毒性：信号杂质和毒性杂质。：信号杂质和毒性杂质。（三）杂质的种类（三）杂质的种类杂质分类杂质分类 一般杂质：一般杂质：自然界分布较广泛，容易引入自然界分布较广泛，容易引入酸、碱、水分、酸、碱、水分、来源来源 氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属检查方
11、法检查方法中国药典附录中国药典附录 特殊杂质：特殊杂质：个别药物的生产和贮藏过程中引入个别药物的生产和贮藏过程中引入检查方法收藏在该药检查方法收藏在该药 质量标准中质量标准中 无机杂质：无机杂质：氯化物、硫酸盐、硫化物、氰化物、重金属氯化物、硫酸盐、硫化物、氰化物、重金属性质性质 残留溶剂残留溶剂 有机杂质：有机杂质：有机药物中引入原料、中间体、副产物、分解产物有机药物中引入原料、中间体、副产物、分解产物 异构体异构体 信号杂质：信号杂质：一般无害，含量多少一般无害，含量多少药物纯度水平，药物纯度水平，氯化物、硫酸盐氯化物、硫酸盐毒性毒性 毒性杂质：毒性杂质：重金属、砷盐、氰化物重金属、砷盐、
12、氰化物应严格控制，保证用药安全应严格控制，保证用药安全说明：说明：1.药典未规定的杂质：一般不需药典未规定的杂质：一般不需要检查。要检查。2.遇特殊情况：需要进一步追踪、遇特殊情况：需要进一步追踪、检查。检查。如：改变了原料、生产方法。如：改变了原料、生产方法。3.新药研究：要对纯度、稳定性新药研究：要对纯度、稳定性进行考察。进行考察。药典中药物药典中药物杂质检查项目的前提：杂质检查项目的前提：GMP按既定工艺生产按既定工艺生产按正常条件贮藏按正常条件贮藏药典中药物杂质检查项目未列入的杂质药典中药物杂质检查项目未列入的杂质含量极少含量极少临床限量允许较宽临床限量允许较宽从生产实践到检验方从生产
13、实践到检验方法，认识不够法，认识不够时代发展时代发展22三、杂质的限量三、杂质的限量*1杂质限量的概念杂质限量的概念 在在不影响药物疗效不影响药物疗效和和不发生毒性不发生毒性的前提下，的前提下，药物中所含药物中所含杂质的最大允许量杂质的最大允许量，叫做，叫做杂质限量杂质限量。通常用百分之几（）或百万分之几（通常用百分之几（）或百万分之几（ppmppm）来来表示。表示。药物中杂质的检查，一般也不要求测定其药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而含量，而只检查只检查杂质的量杂质的量是否超出限量是否超出限量杂杂质质限量检查限量检查（Limit Test)Limit Test)杂质量杂质量 杂质限
14、量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格23.5.12242.杂质限量制定杂质限量制定砷：不超过百万分之一砷：不超过百万分之一重金属：不超过百万分之五十重金属：不超过百万分之五十依据：依据：杂质自身的性质杂质自身的性质生产能达到的水平生产能达到的水平参照各国药典惯例参照各国药典惯例3.杂质限量的检查杂质限量的检查1）与杂质对照品溶液进行对比）与杂质对照品溶液进行对比2）以检测条件下正反应的灵敏度控制）以检测条件下正反应的灵敏度控制23.5.12253.杂质限量的检查杂质限量的检查1）与杂质对照品溶液进行对比）与杂质对照品溶液进行对比一定量被检杂质的对照品一定量被检杂质的对照
15、品溶液溶液一定量供试品一定量供试品溶液溶液相同相同条件：条件：平行原则平行原则试剂试剂相同、相同、反应温度反应温度相同、相同、放置时间等放置时间等相同相同颜色颜色浑浊浑浊色斑色斑比色比色比浊比浊比较色斑比较色斑特点特点：不需知道杂质的准确含量：不需知道杂质的准确含量2）以检测条件下正反应的灵敏度控制）以检测条件下正反应的灵敏度控制 在供试品溶液中加入试剂，在一定条件下反应，观在供试品溶液中加入试剂，在一定条件下反应，观察察有无有无正反应出现，以正反应出现，以不出现正反应为不出现正反应为合格，即以该合格，即以该检测条件下反应的检测条件下反应的灵敏度灵敏度来控制杂质限量。来控制杂质限量。例：纯化水
16、中检查例：纯化水中检查氯化物氯化物，是在，是在50ml水中加入硝酸与水中加入硝酸与硝酸银试液，硝酸银试液，不得发生浑浊不得发生浑浊。由于。由于50ml水中含有水中含有0.2mg的的CL-时，所显浑浊已比较明显，所以此检查限时，所显浑浊已比较明显，所以此检查限制了纯化水中氯化物的含量小于制了纯化水中氯化物的含量小于0.2mg/50ml=0.004mg/ml，4ug/ml。23.5.1227 供试品量杂质的最大允许量杂质限量100供试品量标准溶液体积杂质标准溶液浓度100SVC%100SVCL4杂质限量的计算杂质限量的计算28示例示例：例例1.1.茶苯海明中的氯化物的检查茶苯海明中的氯化物的检查取
17、本品取本品0.30g0.30g置置200ml200ml量瓶中，加水量瓶中，加水50ml50ml时、氨试液时、氨试液3ml3ml和和10%10%硝酸溶液硝酸溶液6ml6ml时，置水浴上加热时，置水浴上加热5min5min，加硝，加硝酸银试液酸银试液25ml25ml，摇匀，再置水浴上加热，摇匀，再置水浴上加热15min15min，并时，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，放置放置15min15min，滤过，取滤过，取续滤续滤液液2525mlml置纳氏比色管中，加稀置纳氏比色管中，加稀硝酸硝酸1 10ml0ml，加水稀释成加水稀释成50ml50ml，摇匀，在暗
18、处放置，摇匀，在暗处放置5min5min，与标准氯与标准氯化钠溶液化钠溶液（10gCL/ml10gCL/ml）1.5ml1.5ml制成的对照液比较，制成的对照液比较，求氯化物的限量。求氯化物的限量。29例例1.1.茶苯海明中的氯化物的检查茶苯海明中的氯化物的检查已知：已知：S=0.3gS=0.3g25/20025/200；C=10g/mlC=10g/ml；V=1.5mlV=1.5ml求：求：L=L=？解：解：%04.0%100200253.05.110/10%1006gmlmlgSVCL*注意注意:单位要统一单位要统一23.5.1230例例2 2谷氨酸钠中重金属的检查谷氨酸钠中重金属的检查取取
19、本品本品1.0g.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，加醋酸溶解后，加醋酸盐缓冲液（盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml2ml，依法检查，与，依法检查，与标准铅溶液（标准铅溶液（10gPb/ml10gPb/ml）所显颜色相所显颜色相比较，不得更深比较，不得更深重金属限量为百万分之重金属限量为百万分之十，求取标准铅溶液多少毫升？十，求取标准铅溶液多少毫升？31例例2 2谷氨酸钠中重金属的检查谷氨酸钠中重金属的检查已知：已知：S=1.0gS=1.0g；C=10g/mlC=10g/ml；L=10L=101010-6-6求：求：V=V=？解：解：)(0.1/10100.1101066mlmlgg
20、CSLVSVCL23.5.1232第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法氯化物检查法氯化物检查法硫酸盐检查法硫酸盐检查法铁盐检查法铁盐检查法重金属检查法重金属检查法砷盐检查法砷盐检查法溶液颜色检查法溶液颜色检查法一般杂质广泛存在于药物中，中国药典把一般杂质广泛存在于药物中，中国药典把检查方法收载于检查方法收载于附录附录中中易炭化物检查法易炭化物检查法溶液澄清度检查法溶液澄清度检查法炽灼残渣检查法炽灼残渣检查法干燥失重测定法干燥失重测定法水分测定法水分测定法残留溶剂测定法残留溶剂测定法一般杂质检查规则一般杂质检查规则 药品检验操作标准药品检验操作标准规定：规定：1.遵循平行操作原则遵
21、循平行操作原则（1）仪器的配对性）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品的同步操作）对照品与供试品的同步操作 2.正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过不超过2%，1g不超过不超过1%3.正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法 4.检查结果不符合规定或在限度边缘检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份时应对供试管和对照管各复查二份 原理原理中国药典检查中国药典检查 方方法法实验实验条件条
22、件注意注意事项事项Cl-（样品）样品）+AgNO3 HNO3 AgCl（白色浑浊液白色浑浊液）与标准氯化钠溶液与标准氯化钠溶液（一（一定量），定量），相同条件下生成相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，的氯化银浑浊液比较，判断供试品中的氯化物判断供试品中的氯化物是否超过了限量是否超过了限量见讲义见讲义标准氯化钠溶液标准氯化钠溶液10 g Cl-/ml 5ml8ml50 g 80 g Cl-/50ml 此范围氯化物所显此范围氯化物所显浊度明显浊度明显HNO3供试品供试品溶液不溶液不澄清澄清过滤过滤带颜色：带颜色：内消色内消色法；化法；化学方法学方法排除排除有机氯有机氯破坏破坏 Cl-一、氯化物一、氯
23、化物(Chloride)的检查法的检查法23.5.1236一、氯化物的检查法一、氯化物的检查法1 1原理原理*氯化物在氯化物在硝酸酸性硝酸酸性溶液中与溶液中与硝酸银硝酸银试液作试液作用，产生用，产生氯化银白色浑浊液氯化银白色浑浊液，与，与一定量一定量标标准氯化钠溶液相同条件下生成的氯化银浑准氯化钠溶液相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，判断供试品中的氯化物是否超浊液比较，判断供试品中的氯化物是否超过了限量过了限量白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 VC2.2.方法：方法：Ch.PCh.P药典附录药典附录 除另有规定外，取各药品项下
24、规定量的供除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成试品，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液；溶液如不澄清，应滤过；置如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加纳氏比色管中，加水使成约水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使，加水使成成40m1，摇匀，即得对照浴液。，摇匀，即得对照浴液。于供试溶液与对照溶液中，于供试溶液
25、与对照溶液中，分别分别加入加入硝酸银硝酸银试液试液1.0m1，用水稀释使，用水稀释使成成50m1，摇匀，在，摇匀，在暗处暗处放置放置5分钟，分钟，同置同置黑色黑色背景上，从比色管上方向下背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得观察，比较，即得23.5.12393 3条件控制条件控制*：(1)(1)标准液：标准液：NaClNaCl标准液（每标准液（每1ml1ml相当于相当于10g10g的的CLCL）(2)(2)所加试剂试液的作用和目的：所加试剂试液的作用和目的：稀硝酸酸性溶液稀硝酸酸性溶液50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜氯化物检查氯化物检查避免弱酸银盐（碳酸避免弱酸银盐（碳酸银，磷酸银），
26、及氧银，磷酸银），及氧化银沉淀形成而干扰化银沉淀形成而干扰加速氯化银沉淀的生加速氯化银沉淀的生成并形成较好的乳浊成并形成较好的乳浊(3)(3)操作：观察前操作：观察前避光避光（暗处暗处放置放置5 5 minmin）避免光线使单质银析出避免光线使单质银析出(4)(4)观察方法：氯化银沉淀为白色，观察方法：氯化银沉淀为白色，黑色背景，从比色管上向下黑色背景，从比色管上向下 (5)(5)供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀(6)(6)取样原则：便于观察或测量结果取样原则：便于观察或测量结果(50g50g80g80g)/50ml CL/50ml CL-，即标准液，即标准液
27、5 5 8ml，浑浊梯度明显浑浊梯度明显。）根据。）根据这个量选择供试品的量。这个量选择供试品的量。氯化物检查氯化物检查414 4供试品处理供试品处理*目的：排除干扰目的：排除干扰方法：方法：（1 1）供试品液混浊：过滤，用含硝酸的水洗供试品液混浊：过滤，用含硝酸的水洗滤纸，以保证氯化物的完全转移。滤纸，以保证氯化物的完全转移。（2 2）供试品有色：供试品有色：氯化物检查氯化物检查根据药物的化学根据药物的化学性质，设计适当性质，设计适当的排除干扰的方的排除干扰的方法。法。两份供试品溶液：两份供试品溶液：1.加过量硝酸银加过量硝酸银洗涤沉淀洗涤沉淀无氯化无氯化物的有色溶液物的有色溶液加入标准氯化
28、钠加入标准氯化钠对对照品。照品。2.按规定方法检查。按规定方法检查。23.5.12424 4供试品处理供试品处理*目的：排除干扰目的：排除干扰方法：方法：（3 3）有机药物中氯化物的检查有机药物中氯化物的检查溶于水的溶于水的有机药物有机药物 不不溶于水的溶于水的有机药物有机药物氯化物检查氯化物检查（4 4）有机氯杂质：先破坏，再检查有机氯杂质：先破坏，再检查 （注意与有机药物中的氯化物区别）（注意与有机药物中的氯化物区别）直接检查直接检查加水振摇加水振摇氯化物溶解氯化物溶解滤除不溶物滤除不溶物加热溶解供试品加热溶解供试品冷冷沉淀沉淀过滤过滤取滤液取滤液药物在稀乙醇或丙酮药物在稀乙醇或丙酮 中溶
29、解中溶解检查检查二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法 原理原理 中国药典检查方法中国药典检查方法实验实验条件条件注意注意事项事项SO42-+BaCl2 HCl BaSO4（白色浑浊白色浑浊）标准标准K2SO4溶液溶液见讲义见讲义标准标准K2SO4溶液溶液 1ml 0.1mg SO42-,50ml中含中含0.1mg0.5mg SO42-,标准标准K2SO4溶液溶液 1ml5ml,此范围内浊此范围内浊度梯度明显度梯度明显HCl酸性酸性同氯同氯化物化物检查检查法法23.5.12441.1.原理原理*硫酸盐在硫酸盐在盐酸酸性盐酸酸性溶液中与溶液中与氯化钡氯化钡试液作用，试液作用，产生产生硫酸钡白色浑浊液硫
30、酸钡白色浑浊液，与，与一定量一定量标准硫酸标准硫酸钾溶液相同条件下生成的浑浊比较，判断供钾溶液相同条件下生成的浑浊比较，判断供试品中的硫酸盐是否超过了限量试品中的硫酸盐是否超过了限量2.2.方法方法：讲义或：讲义或ChCh.P P硫酸盐硫酸盐白色浑浊药物：4HCl224BaSOBaClSO白色浑浊）、（对照：4HCl242BaSOBaClSOKVC453.3.条件控制条件控制：标准硫酸钾溶液（每标准硫酸钾溶液（每1ml1ml相当于相当于0.1mg0.1mg的的SOSO4 42-2-），每），每50ml50ml溶液中含溶液中含0.1mg0.1mg 0.5mg 0.5mg 的的SOSO4 42-2
31、-）浑浊明显，相当于）浑浊明显，相当于1.0ml1.0ml 5.0ml5.0ml的标准溶液。的标准溶液。酸度（酸度（pH1pH1）、）、稀盐酸稀盐酸防止碳酸钡或磷酸钡沉淀的产生防止碳酸钡或磷酸钡沉淀的产生硫酸盐硫酸盐加入氯化钡试液后，应立即充分摇匀加入氯化钡试液后，应立即充分摇匀防止局部过浓，影响产生浑浊的程度防止局部过浓，影响产生浑浊的程度4 4供试品处理供试品处理目的：排除干扰目的：排除干扰方法：与氯化物类似方法：与氯化物类似供试品如果需要过滤，用加入供试品如果需要过滤，用加入盐酸盐酸的酸性的酸性水洗涤滤纸上的硫酸盐水洗涤滤纸上的硫酸盐三、铁盐检查法三、铁盐检查法 原理原理 中国药典检查法
32、中国药典检查法实验实验条件条件Fe3+6SCN-H+Fe(SCN)63-红色红色FeNH4(SO4)212H2O 标准铁溶液（硫酸铁铵）标准铁溶液（硫酸铁铵）10 g/ml见讲义见讲义50ml含含5 g90 g A C 线性线性50ml含含10 g50 gFe3+标准铁溶液标准铁溶液15ml 易于辨别易于辨别HCl酸性酸性23.5.1248铁盐检查法铁盐检查法1 1原理原理（一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法*铁盐在铁盐在盐酸酸性盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成溶液中与硫氰酸铵生成红色红色可溶性可溶性硫氰酸铁硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁配位离子，与一定量标准铁溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品
33、溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品铁盐是否超限铁盐是否超限 红色药物：36HClFeFeFeSCNFe6SCN3o23红色、对照：36HCl3SCNFe6SCNFeVC 2.2.方法：讲义或方法：讲义或Ch.PCh.P，药典附录药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成成25ml，移置，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg，用水稀释使成，用水稀释使成35m1后，加后，加30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml，再加，再加水适量稀释成水适量稀释成50ml，摇匀；如显色，
34、立即与标准铁溶液一定量，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，置制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸，加稀盐酸4ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg，用水稀释使成用水稀释使成35m1后，加后，加30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量，再加水适量稀释成稀释成50ml，摇匀）比较，即得。，摇匀）比较，即得。23.5.12503.3.条件控制：条件控制：标准铁溶液：硫酸铁铵标准铁溶液：硫酸铁铵FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O
35、标准铁溶液（每标准铁溶液（每1ml1ml相当于相当于10ug10ug的的FeFe3+3+），），每每50ml50ml溶液中含溶液中含5ug5ug 90ug 90ug 的的FeFe3+3+时，溶液时，溶液的的吸收度与浓度吸收度与浓度呈良好呈良好线形线形关系。关系。目视目视比色，以比色，以50ml50ml溶液中含溶液中含10ug10ug 50ug 50ug 的的FeFe3+3+浑浊明显，易于区别。浑浊明显，易于区别。513.3.条件控制：条件控制：标准铁溶液：硫酸铁铵标准铁溶液：硫酸铁铵FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O供试品反应加入试液作用：供试品反应加入试
36、液作用：增加生成配位离子稳定性增加生成配位离子稳定性 +硫酸，防止铁盐水解硫酸，防止铁盐水解盐酸盐酸防止防止FeFe3+3+水解水解50ml50ml中加入稀盐酸中加入稀盐酸4ml4ml过硫酸铵（氧化剂）过硫酸铵（氧化剂）氧化氧化 FeFe2+2+成成 FeFe3+3+防止由于光线使硫防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解氰酸铁还原或分解过量硫氰酸铵过量硫氰酸铵提高反应灵敏度提高反应灵敏度 消除氯化物等的干扰消除氯化物等的干扰23.5.12524 4供试品处理供试品处理方法：方法：（1 1）色调不一致或颜色较浅色调不一致或颜色较浅 加正丁醇或异戊醇提取加正丁醇或异戊醇提取分别取醇层分别取醇层比色。比色
37、。硫氰酸铁配位离子在正丁醇等中的溶解度大硫氰酸铁配位离子在正丁醇等中的溶解度大增加酸度；增加硫氰酸铵的量；用正丁醇提取后比色增加酸度；增加硫氰酸铵的量；用正丁醇提取后比色（2 2）其它能与其它能与FeFe3+3+或或SCNSCN-反应的酸根阴离子，反应的酸根阴离子，CLCL-、枸橼酸根、枸橼酸根（3 3）某些有机药物实验条件下某些有机药物实验条件下不溶解不溶解炽灼炽灼残渣残渣依法检查。依法检查。23.5.1253（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法*方法灵敏度高，试剂较贵方法灵敏度高，试剂较贵试剂试剂巯基醋酸巯基醋酸还原还原 FeFe3+3+Fe Fe2+2+，在，在氨碱性氨碱性溶液中进一步与溶液
38、中进一步与 FeFe2+2+作用生成作用生成红色红色配位离配位离子，与一定量标准铁溶液经同法处理后产子，与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色进行比较，以限制铁的量。生的颜色进行比较，以限制铁的量。四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法 原理原理 实验条件实验条件重金属重金属指在实验条件下能指在实验条件下能与与S S2-2-(硫代乙酰胺硫代乙酰胺或或硫化硫化钠钠)作用显色的金属杂质作用显色的金属杂质，如如AgAg、PbPb、HgHg、CuCu、CdCd、SnSn、SbSb、BiBi等，等，其中其中Pb生产中遇到机会多，生产中遇到机会多，易在人体内蓄积中毒。易在人体内蓄积
39、中毒。检查时检查时以铅以铅Pb作为代表作为代表。标准铅溶液：硝酸铅标准铅溶液：硝酸铅注意注意：配制与贮存用的玻：配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅璃容器均不得含铅 显色剂：显色剂：H2S试液（试液（1990版药典前）版药典前）硫代乙酰胺试液（硫代乙酰胺试液（1990版版药典后）药典后）硫化钠试液（硫化钠试液（JP）重金属检查法重金属检查法第第一一法法硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 适用于实验条件下，供试液澄清、无适用于实验条件下，供试液澄清、无色，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。色，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。CH3CSNH2+H2O CH3CONH2+H2S 适宜目视比色范围
40、适宜目视比色范围 H2S+Pb2+pH3.5(醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液)PbS +2H+10 g20 g Pb/27ml 黄色黄色棕黑色硫化物均匀混悬液棕黑色硫化物均匀混悬液 标准铅标准铅10 g Pb/1ml第第二二法法用于在水中难溶或能与重金属离子形成配位化合物而影响检查的有用于在水中难溶或能与重金属离子形成配位化合物而影响检查的有机药物机药物将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼残渣项下遗留的残渣进行检查将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼残渣项下遗留的残渣进行检查第第三三法法适于磺胺类、巴比妥类等难溶于稀酸，但溶于碱水溶液的药物。适于磺胺类、巴比妥类等难溶于稀酸，但溶于碱水溶液的药物。取规定量的供试
41、品，加取规定量的供试品，加NaOH试液试液5ml，水水20ml，溶解后，加硫化钠试溶解后，加硫化钠试液液5滴，再与一定量标准铅溶液经同样处理比色。滴，再与一定量标准铅溶液经同样处理比色。第第四四法法微孔滤膜法微孔滤膜法适用于含适用于含 2 5 g 重金属杂质检查。重金属杂质检查。限量低时，硫化物颜色太浅，需富集。限量低时，硫化物颜色太浅，需富集。56第一法、硫代乙酰胺法第一法、硫代乙酰胺法 2.2.原理和方法原理和方法 对照法对照法1.1.适用范围适用范围在实验条件下，供试液在实验条件下，供试液澄清澄清、无色无色，对检，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。即查无干扰或经处理后对检查无干扰
42、的药物。即溶于水、稀酸和乙醇的药物。重金属检查重金属检查SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黄色棕黑色药物：PbSSHPbpH3.522 黄棕黑、对照：PbSSHNOPbpH3.5223VC 方法方法：讲义或：讲义或Ch.PCh.P，药典附录药典附录 除另有规定外，取除另有规定外，取25ml25ml纳氏比色管两支，甲纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml后，加水或各药品项下规定的溶剂后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释使成稀释使成25m125m1，乙管加入按各药品项下规定方，乙管加入按
43、各药品项下规定方法制成的供试液法制成的供试液25m125m1；再在甲乙两管中；再在甲乙两管中分别分别加加硫代乙酰胺试液各硫代乙酰胺试液各2ml2ml，摇匀，放置摇匀，放置2min2min，同置，同置白纸上，白纸上，自上向下自上向下透视，透视，乙管中显出的颜色与乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。甲管比较，不得更深。（1）标准硝酸铅溶液（每（每1ml1ml相当于相当于10ug10ug的的Pb2+）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸硝酸防止防止Pb2+水解）水解），临用前加水稀释，临用前加水稀释而成而成。适宜比色范围为27ml溶液中含1020g的Pb2+，相当于加入标准
44、铅溶液相当于加入标准铅溶液12ml。3.条件控制（2）pH值为33.5硫化铅沉淀完全 本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液的弱酸性弱酸性。供试品如果用强酸溶解、或用过强酸处供试品如果用强酸溶解、或用过强酸处理过理过氨水氨水酚酞中性（无色）酚酞中性（无色）3.条件控制60重金属重金属4.4.供试品处理供试品处理(1)(1)供试品有色：外消色法消除（供试品有色：外消色法消除（在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。）内消色法。(2)(2)供试品有微量供试品有微量FeFe3+3+FeFe3+3+会氧化硫化氢生成单质硫，干会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，扰比色，加加抗坏血酸（抗坏血酸
45、（VcVc）或盐酸羟胺或盐酸羟胺（0.51.0g）使使FeFe3+3+还原成还原成FeFe2+2+离子，离子，消除干扰消除干扰再检查再检查。(3)(3)供试品为铁盐供试品为铁盐 在相对密度在相对密度1.1031.1031.1051.105的盐酸中使大部分的盐酸中使大部分 FeFe3+3+生成生成 再加氨试液，使溶液成碱性，用氰化钾掩再加氨试液，使溶液成碱性，用氰化钾掩蔽残留的微量铁盐后，加硫化钠试液检查铅盐蔽残留的微量铁盐后，加硫化钠试液检查铅盐(4)(4)供试品本身也能生成不溶性硫化物供试品本身也能生成不溶性硫化物 根据具体情况特殊处理。根据具体情况特殊处理。若药物本身能生成不溶若药物本身能
46、生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4中重中重金属的检查，要在碱性下加金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽掩蔽Zn2+后，再依第后，再依第三法检查三法检查-26HFeCl重金属重金属23.5.1262第二法、第二法、炽灼后的硫代乙酰胺法炽灼后的硫代乙酰胺法 2.2.原理原理 1.1.适用范围适用范围在水、乙醇中难溶，或能与重金属离在水、乙醇中难溶，或能与重金属离子形成配位化合物的有机药物。子形成配位化合物的有机药物。将供试品破坏后（如将供试品破坏后（如炽灼残渣项下遗炽灼残渣项下遗留的残渣）留的残渣），加硝酸加热处理，使有，加硝酸加热处理，使有机
47、物分解、破坏完全后，再按第一法机物分解、破坏完全后，再按第一法进行检查进行检查重金属重金属依一法检查氯化物残渣置坩埚中样品：缓冲液左右调节至、炽灼残渣 mlS0.25.3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法检查对照：空坩埚缓冲液溶液）（标准、ml0.25.3pHNOPbOHOHNHHClHNOSOH23223342操作方法操作方法重金属重金属23.5.12643.3.注意事项注意事项重金属重金属1）炽灼温度：）炽灼温度：5006002）加入试剂的干扰：硝酸、盐酸）加入试剂的干扰：硝酸、盐酸3）特殊药物对容器的腐蚀）特殊药物对容器的腐蚀含钠及氟的有机药物应使用含钠及氟
48、的有机药物应使用铂坩埚铂坩埚、石英坩、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）入大量重金属）65第三法、第三法、硫化钠法硫化钠法 2.2.原理原理 1.1.适用范围适用范围适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使PbPb2+2+生成生成PbSPbS微粒的混悬液，与一定量的标准铅溶液经同法处理微粒的混悬液，与一定量的标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较进行检查后所呈颜色比较进行检查重金属重金属黄色棕黑色药物：PbSSNaPbNaOH22 黄棕黑、
49、对照：PbSSNa)Pb(NONaOH223 VC23.5.1266第三法、第三法、硫化钠法硫化钠法 3.3.注意事项注意事项硫化钠对玻璃有一定的腐蚀性；溶硫化钠对玻璃有一定的腐蚀性；溶液放置过久会产生絮状物，试液应液放置过久会产生絮状物，试液应临用新制。临用新制。重金属重金属23.5.1267第四法、第四法、微孔滤膜法微孔滤膜法 使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量的标准铅溶液经同法比较供试品和一定量的标准铅溶液经同法处理后所产生的处理后所产生的色斑色斑深浅，确定重金属是深浅，确定重金属是否超限。否超限。1.1.适用范围适用范围适用于
50、适用于2 5 g重金属杂质检查，重金属杂质检查，提高灵提高灵敏度敏度。2.2.原理原理 重金属重金属第一法：第一法：10-20ug23.5.12683.3.注意事项注意事项供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜进行预滤进行预滤 ；滤膜污染，；滤膜污染，换滤膜换滤膜 A A：滤器上盖部分：滤器上盖部分B B：连接头；：连接头；C C：垫圈：垫圈D D：孔径：孔径3.03.0mm的滤膜的滤膜E E：尼龙垫网：尼龙垫网(孔径不限孔径不限)F F：滤器下部：滤器下部 重金属重金属23.5.1269*五、砷盐五、砷盐(Arsenic)检查法检查法 砷盐砷盐生产过程使用无机试剂引入生
