1、王飞 2012.10实验目的v 掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术v 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征，找出有丝分裂各个时期的代表性细胞，总结有丝分裂过程中染色体的动态变化。实验材料及流程v 大蒜 2n=16v 生根-取材-固定-解离-漂洗-染色-压片-镜检1.根冠根冠 2.分生区分生区 3.伸长区伸长区 水培生根（已完成）取材（已完成）根尖部位 1.5-2cm 长固定（已完成）目的：终止细胞生长过程及一切生理生化反应，维持细胞结构不变方法：Carnoy固定剂（3份95%乙醇，1份乙酸），处理2-4h原理：迅速穿透细胞致死，乙醇-脱水收缩 乙酸-膨胀解离v 目的：破坏细胞间果胶质和纤
2、维素，使细胞容易散开v 方法：1M HCl 烧杯60预热 处理5minv 注意：每组统一用纱布取根尖样本，流水漂洗数秒，转移样本到烧杯内并计时漂洗v 目的：去除残留的盐酸，恢复低渗环境v 方法：纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净，之后在平皿中浸泡待用剥离分生组织1 截取3mm左右根尖区域，置于载玻片上2滤纸吸干多余水分后用解剖针去除半透明状非分生组织，留取白色分生组织注意：宁滥毋缺染色v 染色液：石碳酸品红（卡宝品红），染色质特异染料v 步骤：1 滴加1-2滴染色液2 染色5min压片v 单侧慢放盖玻片（领取）v 滤纸吸干多余液体v 镊子轻敲使细胞分散v 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞镜检v 10倍或4倍镜锁定目标细胞v 40倍镜观察细节并绘图v 光栅、光源、镜头洁净度、细胞分散度、使用记录各个时期细胞实物图及手绘图前期前期间期间期中期中期后期后期末期末期前中期前中期注意事项v 操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤，不要溅到实验台或显微镜上v 酸解时间不要过长v 压片不要用力太猛v 显微镜使用规范实验报告要求v 课上完成实验记录（实验步骤，现象），教师签字v 课后补充完成全部实验报告（目的，原理，结果，讨论等其他细节）v 实验结果的要求：每个时期的细胞图片（照片或手绘），各时期特点v 讨论部分：针对实验过程细节及个人实验结果自由讨论、禁止抄袭！v 下次课统一由班长上交
