淋巴细胞亚群与临床课件.ppt

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资源描述

1、整理课件淋巴细胞亚群免疫表型与临床淋巴细胞亚群免疫表型与临床整理课件主要内容 概念 各类淋巴细胞的基础知识 淋巴细胞亚群检测的临床意义整理课件一、概念 淋巴细胞淋巴细胞 属白细胞的一种,由淋巴器官产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴细胞的免疫表型淋巴细胞的免疫表型 淋巴细胞的膜表面分子膜表面分子(分化群抗分化群抗原原 CD)可用于鉴定和区分其亚群和亚类,是研究淋巴细胞的重要工具。淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群 按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞。淋巴细胞的免淋巴细胞的免疫表型疫表型 淋巴细胞的膜表面分子膜表面分子(分化群抗原分化群抗原 CD)可用于

2、鉴定和区分其亚群和亚类,是研究淋巴细胞的重要工具。整理课件淋巴亚群在外周血中的比例(%淋巴细胞)T淋巴细胞 50-84%NK细胞 7-40%B淋巴细胞 5-18%整理课件各类淋巴细胞的基础知识整理课件T淋巴细胞整理课件 概念概念 来源于骨髓的淋巴样干细胞,在胸腺中成熟的淋巴细胞,故称胸腺依赖性淋巴细胞(thymus-dependentlymphocyte),简称T细胞。功能功能 负责细胞免疫功能,参与抗肿瘤、抗细胞内感染微生物、移植排斥、迟发型超敏反应;对部分体液免疫发挥辅助功能。免疫表型免疫表型:CD3,与TCR形成复合体,是T细胞识别抗原和转导信号的主要单位。CD3+/CD4+:辅助性T细

3、胞 CD3+/CD8+:杀伤性T细胞整理课件T淋巴细胞的分化发育 T细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育 T细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育整理课件T细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育 三个阶段三个阶段u双阴性阶段双阴性阶段(DN)u双阳性阶段双阳性阶段(DP)u单阳性阶段单阳性阶段(SP)三个重要事件三个重要事件uTCR基因重排基因重排u阳性选择阳性选择u阴性选择阴性选择 三个重要结果三个重要结果u获得功能性获得功能性TCRu获得获得MHC限制性限制性u获得自身耐受获得自身耐受整理课件整理课件T T细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育 初

4、始初始T细胞细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区 T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后,最终分化为具有不同效应功能的T细胞亚群,效应效应T细胞细胞和记忆记忆T细胞细胞。整理课件T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群n 按按T细胞细胞所处的活化阶段所处的活化阶段 初始初始T细胞(细胞(naive T cell)效应效应T细胞(细胞(effector T cell)记忆性记忆性T细胞(细胞(memory T cell)n 按按TCR的表型分类的表型分类 TCR+T细胞细胞 TCR+T细胞细胞n 按按T细胞的细胞的CD4和和CD8分子表型分子表型 CD4+T细胞细胞 辅助辅助T细胞细胞 CD8+T细胞细胞 杀伤杀

5、伤T细胞细胞 按按T细胞的功能分类细胞的功能分类 Th(help T cell)Tc/C TL(cytotoxic T cell)Tr(regulatory T cell)整理课件初始初始T T细胞、效应细胞、效应T T细胞和记忆细胞和记忆T T细胞细胞 初始初始T细胞细胞 表型:CD45RA+、CD62L+、CD25-(IL-2R)特点:未接触抗原的成熟T细胞,有分化潜能 效应效应T细胞细胞 表型:CD4+、CD8+迁往炎症部位,执行细胞免疫效应 记忆性记忆性T细胞细胞 表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)特点:存活期长,再次接受抗原刺激后可迅速活化整理课件整理课件整理课件Th、C

6、TL、Ts和和Treg细胞细胞n 辅助性辅助性T细胞(细胞(Th)CD4CD8-TH1,TH2 功能:具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答(促进和抑制)的作用n 细胞毒性细胞毒性T细胞(细胞(CTL)主要表面标记:CD4-CD8+CD28+功能:特异性直接杀伤靶细胞 杀伤机制:释放穿孔素,颗粒酶杀伤靶细胞 通过Fasl介导靶细胞的凋亡整理课件n 抑制性抑制性T细胞(细胞(Ts)主要表面标志:CD4-CD8+CD28-功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。n 调节性调节性T细胞(细胞(Treg)主要表面标记:CD4+CD

7、25+功能:抑制免疫应答 整理课件小结ThCTLTsTreg表面标志CD3+CD4+CD8-CD3+CD4-CD8+CD28+CD3+CD4-CD8+CD28-CD3+CD4+CD25+主要功能整理课件NK淋巴细胞整理课件 NK细胞:一种大颗粒淋巴细胞。英文全称为“natural killer cell”,也称作“自然杀伤细胞”。它是一种能直接杀伤靶细胞效应的特殊的淋巴细胞系,具有抗肿瘤抗感染免疫调节的功能,且表现为速发效应。在医学上被称作是“人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防线线”。整理课件NK细胞的表型nNK细胞表面标志物:CD3-/CD16+CD

8、56+n与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体链(P75,CD122),CD11b/CD18阳性。整理课件细胞因子细胞因子诱导杀伤细胞(杀伤细胞(CIK)CIK(cytokine-induced Killer)细胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等细胞因子在体外诱导并大量扩增的具有杀伤肿瘤活性的细胞,是一种新型、高效、广谱的免疫细胞,是目前最新的肿瘤免疫治疗手段。CIK细胞:CD3+T细胞为主的异质性细胞群体,同时表达CD3、CD56,兼CTL强大的抗瘤活性,和NK细胞非MHC限制性杀

9、瘤特点,目前所知杀伤活性最强的免疫效应细胞。整理课件CIK的表型及起源的表型及起源:表型:表型:CD3+CD56+和CD3CD56两个亚群,主要效应细胞CD3+CD56+。分布:分布:优先分布肝脏,CD3+CD56+占肝脏CD3细胞的1/3,其次外周血,占-5%。来源:来源:主要是CD3+CD56的T细胞,多数是CD4-CD8+及CD4-CD8-。整理课件B淋巴细胞整理课件nB淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞。u产生的抗体可与抗原起特异性的结合,如中和细菌的外毒素使其失去毒性作用;u抗体与抗原结合后形成的复合物易被吞噬细胞清除;u抗体与抗原结合后再结合补体清除病原体。nB细胞特异性标志物:C

10、D19、CD20等uB淋巴细胞检测时,多用CD3-CD19+来作为检测标志。整理课件B细胞的亚群 周围淋巴器官中的B细胞具有异质性 可依据CD5是否表达分为B1和B2两亚群性质B1B2初次产生时间胎儿期出生后更新方式自我更新骨髓产生特异性多反应性单特异性是否有CD5表达有无整理课件淋淋 巴巴 细细 胞胞 亚亚 群群 与与 临临 床床整理课件淋巴细胞亚群的检测内容整理课件目前常做以下项目的检测目前常做以下项目的检测n淋巴细胞亚群分析 T细胞亚群分析uT淋巴细胞(CD3+)u辅助T细胞(CD3+CD4+)u杀伤/抑制T细胞(CD3+CD8+)uCD4+/CD8+的比值 B细胞(CD3+CD19+)

11、NK细胞(CD3-CD16+56+)n活化淋巴细胞的检测整理课件TBNK检测的适用人群 肿瘤病人化疗过程中,抗癌药物对同样处于增殖状态的、对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤作用,甚至免疫功能严重损毁。活动期的自身免疫病患者,必然表现为淋巴细胞亚群绝对值和活化淋巴细胞百分比的明显异常。怀疑有免疫缺陷的病人 器官移植患者术后监测中更具有不可或缺的作用整理课件淋巴细胞亚群的正常参考值(%淋巴细胞群)项 目百分率(%)总T淋巴细胞(CD3+CD19-)50-84辅助/T淋巴细胞(CD3+CD4+)27-51抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD8+)15-44辅助/抑制T淋巴细胞比值0.71-2.78NK

12、细胞(CD3-/CD16+56+)7-40总B淋巴细胞(CD3-CD19+)5-18T淋巴细胞+NK淋巴细胞+B淋巴细胞95-105整理课件整理课件NK细胞CIK细胞B细胞整理课件淋巴细胞亚群的临床意义整理课件n 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标,它总体反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平,并可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等),分析发病机制,观察疗效及检测预后有重要意义。n 当某种细胞亚群所占百分比过高或过低,都提示存在免疫功能紊乱,但一般情况下对疾病的诊断和鉴别无特异性。整理课件淋巴细胞亚群测定的结果解释淋巴细胞亚群测

13、定的结果解释 T细胞异常 CD4细胞异常 CD8细胞异常 CD4/CD8比值异常 B细胞异常 NK细胞异常整理课件 总T、总B、NK细胞可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病,也可以用于监测移植后得免疫重建。整理课件T细胞减少细胞减少 见于先天性免疫缺陷病(例如DiGeorge综合症,胸腺发不发育)以及肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫调节药物OKT-3的患者 也常见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病(SLE和RA等)、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂资料的患者。整理课件T细胞增多细胞增多 见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等自身免疫病活动期 整理课件 CD4淋

14、巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。CD4淋巴细胞增加:可能有过强的细胞免疫反应;或某些免疫增强药物的有效结果。CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫性疾病,如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。CD8淋巴细胞减少:见于机体对各种病毒感染的免疫反应;肿瘤患者具有抗肿瘤免疫反应时。CD8细胞与CD4细胞同时减少:见于各种严重的免疫缺陷以及肿瘤患者晚期或免疫系统严重损伤后。整理课件CD4/CD8比值异常比值异常 CD4/CD82.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态,容易出现自体免疫反应,见于类风湿类风湿性关节炎关节炎、I型糖尿病等。CD4CD81

15、0称为“免疫抑制”状态,常见于(1)免疫缺陷病,如艾滋病时的比值常显著小于0.5;(2)恶性肿瘤,当发生癌转移时,CD3、CD4 细胞数明显减少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/CD8 比值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低,预后更差;(3)再生障碍性贫血、白血病;(4)某些病毒感染;CD4/CD8降到1.0以下为“倒置”,是较为明显的异常;(5)用于器官移植后监测机体的免疫状态、用药剂量的调整、抑制排斥反应的发生。若移植后CD4/CD8较移植前明显增加,则可能发生排斥反应。比值持续减低表明移植后感染,若比值0.2时应停用免疫抑制剂,以免继发严重感染而导致移植失败。注意分清主要

16、是注意分清主要是CD8细胞增多还是细胞增多还是CD4减少减少整理课件B细胞的异常 B细胞明显增加:细胞明显增加:见于淋巴组织增生失调(例如慢性淋巴细胞白血病),也见于病毒感染早期。B细胞缺如:细胞缺如:见于原发性B细胞缺陷病(如性联无丙种球蛋白血症)和重症联合免疫缺陷(T细胞同时缺如);体液免疫功能不良者则减少;在生命垂危时可呈现极度减少 整理课件NK细胞异常细胞异常 NK细胞增多:见于病毒感染,肿瘤早期患者(尚有抗肿瘤免疫反应时)NK细胞减少:免疫功能低下,免疫抑制药物使用后,肿瘤晚期 整理课件n活化淋巴细胞的检测(活化淋巴细胞的检测(CD69/HLA-DR/CD71)活化淋巴细胞的标志有CD25(IL-2R),CD69,CD71,CD38,CD95,HLA-DR。它们在 T 细胞活化的不同时期表达。整理课件整理课件 活化标志一般选择CD69、CD25、HLA-DR等 结合淋巴细胞亚群绝对值,可评估免疫功能失调 临床上将活化的CD3细胞数目过低,即视作机体免疫功能极度缺失、提示有可能继发全身感染,应当立即调整治疗方案整理课件THANKS!

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