1、2023年福建省长汀县 新桥中学高三生物第一学期期末考试模拟试题考生请注意：1答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1下列对实验试剂及其实验效果的分析，错误的是（ ）A染色体数目加倍的细胞所占的比例与解离液处理的时间有关B茎段的生根数和生根长度与所使用的NAA浓度有关C溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短与二氧化碳的量有关D
2、洋葱鳞片叶外表皮细胞质壁分离的程度与外界蔗糖溶液浓度有关2下列关于DNA复制、转录和翻译的相关叙述，错误的是（ ）A半保留复制使子代DNA保留亲代一半的遗传信息BDNA聚合酶和RNA聚合酶结合位点均在DNA上C转录时有DNA双链解开和恢复的过程D一个mRNA可结合多个核糖体，同时进行多条肽链合成3下列关于生物技术实践的叙述，正确的是（ ）A在提取DNA时，加入冷酒精的主要作用是促进DNA的溶解B使用固定化酵母细胞进行发酵时，效率比直接使用酶的效率要高C制得的葡萄酒酸味较重，发酵装置漏气是可能的原因之一D将酶制剂加入普通洗衣粉制成加酶洗衣粉，运用了固定化酶技术4去甲肾上腺素既是一种神经递质（主要
3、由交感节后神经元和脑内肾上腺素能神经末梢合成和分泌），也是一种激素（由肾上腺髓质合成和分泌）。对此的相关说法，错误的是（ ）A神经递质与激素可以为同一种物质B正常情况下，血液中的去甲肾上腺素含量很低C由交感节后神经元分泌的去甲肾上腺素能与突触前膜上的特异性受体结合D由髓质分泌的肾上腺素一经靶细胞接受并起作用后就被灭活了5哺乳动物红细胞的部分生命历程如图所示，下列叙述正确的是（ ）A造血干细胞因丢失了部分基因，所以分化成了幼红细胞B红细胞成熟后一段时间内仍然能够合成核基因编码的蛋白质C成熟红细胞凋亡对于个体发育和生存不利D成熟红细胞没有代谢和遗传的控制中心细胞核，所以寿命较短62019诺贝尔生理
4、学或医学奖颁发给Kaelin、Ratclife及Semenza三位科学家。他们研究表明：缺氧环境下，细胞产生缺氧诱导因子HIF - 1（蛋白质），HIF -1会诱导相关基因的表达，以适应缺氧环境。下列描述不合理的是（ ）AHIF -1（蛋白质）具有信号分子的作用B缺氧时肌肉细胞无氧呼吸酶增加，促进丙酮酸转化成酒精C缺氧时细胞会产生“促红细胞生成素”，以诱导产生更多的红细胞D缺氧时机体会诱导新生血管生成，有利于氧气的运输7鸡的性别决定方式为ZW型，羽色芦花（B）对非芦花（b）为显性，基因B/b位于Z染色体上。基因D能抑制色素的合成，当基因D存在时表现为非芦花，基因d没有此效应。两只纯合的非芦花鸡
5、交配，F1全为非芦花鸡。F1的雌雄鸡自由交配，F2中芦花鸡占3/16。下列有关叙述错误的是（ ）A亲本非芦花鸡的基因型为DDZBZB、ddZbWBF1雌雄非芦花鸡共产生6种基因型的配子CF2的芦花鸡中，雄鸡：雌鸡=2：1DF2的非芦花鸡中，雄鸡：雌鸡=7：68（10分）关于DNA分子复制机制，科学家用荧光染料给Rep（DNA解旋酶中作为引擎的那部分结构，驱动复制又的移动）加上了绿色荧光蛋白从而获知被标记的分子相对于DNA分子的运动轨迹，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）ARep可以破坏相邻核苷酸之间的磷酸二酯键BDNA结合蛋白可能具有防止DNA单链重新形成双链的作用C根据材料推断Rep推
6、动复制又移动是通过水解ATP提供能量DDNA复制具有边解旋边复制和半保留复制的特点二、非选择题9（10分）科学家利用转基因技术培育了OsPHDI（水稻内原本也存在该基因过量表达的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高盐）。回答下列问题：（l）为了验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置_条件，实验结果显示_，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。（2）为了培育OsPHDI基因过量表达植株进行如下操作：利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是_。将OsPHDI基因与含有GFP（绿色荧光蛋白基因）的载体结合，此处GFP的作用是_。常用_法将表达载
7、体导入水稻细胞；若受体细胞中出现绿色荧光，能否说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，并说出理由_。最后利用_技术培育出完整的抗逆性植株，该技术利用的生物学原理是_10（14分）如图是优良种牛的繁殖路线图，据图回答下列问题：（1）牛5、牛6、牛7培育中均用到的生物工程技术有_。图中需要进行同期发情处理的牛是_。（2）可用_激素促进牛2尽可能多地排卵。保证A过程只能由1个精子进入卵细胞的生理反应是_。从牛2体内获得的卵子需要培养到_才能和获能的精子结合完成受精。（3）C过程的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加_等营养成分，以及血清等物质。（4）E过程采用的方法是_，牛7的
8、新性状是_。11（14分）为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用_技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时，分别在引物中加入上图所示酶的识别序列，这样可以用_酶处理两个基因后，得到_端（填图中字母）相连的融合基因。（2）将上述融合基因插入右图所示Ti质粒的TDNA中，构建_并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段
9、时间，此过程的目的是_，进一步筛选后培养获得转基因油菜。（4）提取上述转基因油菜的mRNA，在_酶的作用下获得cDNA，再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否_。12为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。（1）将草甘膦抗性基因作为_，与Ti质粒用相同的_和DNA连接酶处理构建基因表达载体。（2）用_处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性
10、基因的部分序列如下：5ATGGCTAGGAAC33TACCGATCCTTG5根据上述序列应选择引物_（填字母）进行PCR。A引物：5TACCGA3B引物：5GTTCCT3C引物：5AUGGCU3D引物：5ATGGCT3（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_种引物，其原因是_。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_过程，获得转基因水稻。参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】解离液的目的使组织中的细胞分开；生长素具有两重性，低浓
11、度促进生长，高浓度抑制生长。根据溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测二氧化碳的产生情况。外界溶液浓度大于细胞液浓度，细胞发生质壁分离，分离程度取决于两侧的浓度差。【详解】A、解离时细胞已经死亡，所以染色体加倍与解离时间长短无关，A错误；B、NAA为生长物类似物，低浓度促进生长，高浓度抑制生长，所以茎段的生根数和生根长度与所使用的NAA浓度有关，B正确；C、二氧化碳越多，溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间越短；二氧化碳越少，溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间越长，C正确；D、当蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，且浓度差越大，葱鳞片叶外表皮细胞质壁分离的程度越大，D正确。故选A。【点睛】本题主要考
12、查实验试剂及对应的实验效果分析，答题关键在于掌握有丝分裂、生长素的生理作用、二氧化碳检测方法、质壁分离等有关知识，建立知识网络。2、A【解析】DNA复制、转录、翻译的比较：复制转录翻译时间细胞分裂间期（有丝分裂和减数第一次分裂）个体生长发育的整个过程场所主要在细胞核主要在细胞核细胞质的核糖体模板DNA的两条链DNA的一条链mRNA原料4种游离的脱氧核苷酸4种游离的核糖核苷酸20种游离的氨基酸条件酶（解旋酶，DNA聚合酶等）、ATP酶（RNA聚合酶等）、ATP酶、ATP、tRNA产物2个双链DNA一个单链RNA多肽链特点半保留，边解旋边复制边解旋边转录一个mRNA上结合多个核糖体，顺次合成多条肽
13、链碱基配对A-T、T-A、 C-G、 G-CA-U、T-A、C-G、G-CA-U、U-A、C-G、G-C遗传信息传递DNADNADNAmRNAmRNA蛋白质意义使遗传信息从亲代传递给子代表达遗传信息，使生物表现出各种性状【详解】A、半保留复制使子代DNA保留亲代DNA分子的一条链，A错误；B、DNA聚合酶和DNA结合开始复制过程，RNA聚合酶和DNA分子结合开始转录过程，B正确；C、DNA的解旋过程发生在DNA的复制和转录过程中，转录过程需要以DNA的一条链为模板，即在RNA聚合酶的催化DNA双链解开，转录完成后双链恢复，C正确；D、一条mRNA分子上可相继结合多个核糖体，可以利用少量的RNA
14、合成多条肽链，D正确。故选A。【点睛】本题考查综合考查DNA的复制、转录和翻译的过程，考生可以结合中心法则的知识进行综合比较。3、C【解析】1、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。2、固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶优点是使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。固定化
15、细胞优点是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。3、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。4、加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力
16、。【详解】A、在提取DNA时，加入冷酒精的主要作用是溶解某些蛋白质，A错误；B、将酵母细胞进行固定化后，由于受到固定材料的影响等，催化活性比直接使用酶的效率要低，B错误；C、制得的葡萄酒酸味较重，应该是发生了醋酸发酵，菌种的代谢类型是需氧异养型，因此发酵装置漏气是可能的原因之一，C正确；D、固定化酶是利用物理或化学的方法将酶固定在一定空间内，将酶制剂加入普通洗衣粉制成加酶洗衣粉不能看出运用了固定化酶技术，D错误。故选C。【点睛】本题考查DNA的粗提取和鉴定、固定化酶和固定化细胞、果酒和果醋的制作、加酶洗衣粉的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所
17、学知识，对生物学问题作出准确的判断。4、C【解析】酶、激素、递质三者的区别（1）从概念上看：动物激素就是高度分化的内分泌细胞合成并直接分泌进入血液的化学信息物质，它通过调节各种组织细胞的代谢活动来影响人体的生理活动。而酶是活细胞产生的一类具有催化作用的有机物。神经递质是神经细胞产生的化学信息物质，通过与神经细胞的树突膜或胞体膜上的受体结合，从而导致神经细胞产生兴奋或抑制。（2）从本质上看：绝大多数酶是蛋白质，少数是RNA；而激素的种类有：蛋白质类（生长激素、胰岛素）、多肽类（抗利尿激素、垂体分泌的促激素等）、氨基酸衍生物类（甲状腺激素、肾上腺素）、固醇类（性激素、孕激素）。递质成分复杂，既有大
18、分子，又有小分子，具体种类有多少至今没有完全搞清。（3）从来源上看：酶是活细胞产生的；激素是内分泌腺的分泌物；递质是神经细胞产生的。（4）从作用、功能上看：酶是生物的催化剂，具有高效性、专一性和多样性的特点，极易受温度、酸碱度的影响。激素与神经系统关系密切，一般是通过改变细胞膜的通透性而对细胞起调节作用。一种激素往往具有多种功能，它的作用广泛而多样，有时还能影响某种酶的合成及其活性。递质只与兴奋传导有关。激素和递质与受体结合后即分解，酶可以反复多次利用。（5）从产生上看：只要是活细胞就可以产生酶，产生激素的细胞一定可以产生酶，而产生酶的细胞不一定产生激素。产生递质的细胞也能产生酶，除下丘脑外神
19、经细胞不能产生激素【详解】A、神质递质与激素可以为同一种物质，如题干中涉及的去甲肾上腺素，A正确；B、微量和高效是激素调节的特点之一，B正确；C、由交感节后神经元分泌的去甲肾上腺素能与突触后膜上的特异性受体结合，C错误；D、激素一经靶细胞接受并起作用后就被灭活了，D正确。故选C。5、D【解析】分析题图：图示表示哺乳动物红细胞的部分生命历程，造血干细胞先形成幼红细胞，幼红细胞排除细胞核后形成网织红细胞，网织红细胞丧失细胞器后形成成熟的红细胞，所以哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器。【详解】A、造血干细胞分化成幼红细胞的过程中选择性表达了部分基因，而不是丢失了部分基因，A错误；B、成熟红细
20、胞中没有核糖体，不能够合成核基因编码的蛋白质，B错误；C、细胞凋亡是遗传物质控制下的编程性死亡，对于个体的发育和生存是有利的，C错误；D、细胞核是遗传和代谢的控制中心，成熟红细胞无细胞核，所以相应生命周期较短，D正确。故选D。【点睛】本题红细胞为素材，结合以哺乳动物红细胞的部分生命历程图，考查细胞分化、细胞凋亡等知识，需要考生充分理解细胞分化的实质。6、B【解析】本题以细胞在分子水平上感受氧气的基本原理的研究机制为背景考查学生获取信息和解决问题的能力，要求学生能够正确分析获取有效信息，结合题干的条件和所学的无氧呼吸的知识点，解决问题，这是突破该题的关键。【详解】A、由题干“HIF -1会诱导相
21、关基因的表达”可知，HIF -1会调节基因的表达的表达，故HIF -1（蛋白质）具有信号分子的作用，A正确；B、肌肉细胞在缺氧时会无氧呼吸，无氧呼吸类型是乳酸型，无氧呼吸酶增加促进丙酮酸转化成乳酸，B错误；C、由题干“缺氧时HIF -1会诱导相关基因的表达，以适应缺氧环境”分析可知，HIF1细胞会产生“促红细胞生成素”， 促红细胞生成素促进人体产生红细胞，以携带更多的氧气供应组织细胞，C正确；D、由以上分析可知，缺氧时细胞会产生“促红细胞生成素”，以诱导产生更多的红细胞，也会诱导新生血管生成，有利于氧气的运输，D正确。故选B。7、D【解析】分析题意可知，鸡的性别决定方式为ZW型，即雌鸡的染色体
22、为ZW，雄鸡的染色体为ZZ，题中F1全为非芦花鸡，且F1的雌雄鸡自由交配后代中出现芦花鸡，可推断基因D/d位于常染色体上。故芦花鸡的基因型为ddZBZ- 和ddZBW。【详解】A、若亲本非芦花鸡的基因型为DDZBZB、ddZbW，F1全为非芦花鸡，基因型为DdZBW、DdZBZb，可推后代芦花鸡的比例为1/4（1/4+1/2）=3/16符合题意；若亲本非芦花鸡的基因型为DDZBW、ddZbZb，则F1全为非芦花鸡，基因型为DdZBZb、DdZbW，可推后代芦花鸡的比例为1/4（1/4+1/4）=1/8与题意不符；故基因型为DDZBZB、ddZbW的亲本基因型满足题意，A正确；B、已知F1基因型
23、为DdZBW、DdZBZb，可产生配子DZB、DW、dZB、dW、DZb、dZb共6种配子，B正确；C、F2的芦花鸡中，基因型有ddZBZB、ddZBZb和ddZBW，各个基因型所占比例均为1/16，故芦花鸡中的雌雄比例为雄鸡：雌鸡=2：1，C正确；D、F2的非芦花雄鸡占F2的雄鸡比例为3/4，F2的非芦花雌鸡占F2的雌鸡比例为7/8，故F2的非芦花鸡中雄鸡：雌鸡=6：7，D错误；故选D。8、A【解析】DNA复制时间：有丝分裂和减数分裂间期 ；DNA复制条件：模板（DNA的双链）、能量（ATP水解提供）、酶（解旋酶和DNA聚合酶等）、原料（游离的脱氧核苷酸）；DNA复制过程：边解旋边复制；DN
24、A复制特点：半保留复制；DNA复制结果：一条DNA复制出两条DNA；DNA复制意义：通过复制，使亲代的遗传信息传递给子代，使前后代保持一定的连续性。【详解】A、根据rep蛋白的功能可推断出，rep蛋白应为解旋酶，该酶能破坏氢键，A错误；B、DNA结合蛋白缠绕在DNA单链上，可防止单链之间重新螺旋化，B正确；C、根据材料推断Rep推动复制又移动是通过水解ATP提供能量，C正确；D、根据题意和图示分析可知：DNA复制具有边解旋边复制和半保留复制的特点，D正确。故选A。【点睛】本题考查DNA复制的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所
25、学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。二、非选择题9、干旱，高盐（逆境） 实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组 （需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物 作为标记基因（检测目的基因是否导人受体细胞） 农杆菌转化 不能，有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体 植物组织培养 植物体细胞具有全能性 【解析】1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受
26、体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。2、利用PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DN
27、A的核酸合成技术。原理：DNA复制条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。【详解】（l）通过个体水平上验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置干旱，高盐（逆境）条件，如果实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。（2）利用PCR技术扩增获得大量目的基因，需要加入相应的引物，故利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是合成引物。GFP（绿色荧光蛋白基因）的作用是作为标记基因，便于后期的筛选。表达载体导入植物细胞，常用农杆菌转化法；若受体细胞中出现绿色荧光，
28、不能说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，因为有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体。植物组织培养的生物学原理是植物体细胞具有全能性。故可通过植物组织培养技术培育出完整的抗逆性植株。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，只要考生识记基因工程的操作步骤，明确基因表达载体的构建是其核心步骤，注意从题干中获取有效信息。10、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术 牛2和牛4 促性腺激素 透明带反应、卵细胞膜反应 成熟 氨基酸、维生素、核苷酸、激素 显微注射法 产生出人乳铁蛋白 【解析】由图可知，A为体外受精技术、B为细胞核移植技术、C为早期胚胎培养技术、D为胚胎移植技术、E为采用基因工程技术将目的基因
29、导入受体细胞。【详解】（1）培育克隆牛5用到细胞核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术，培育试管牛6用到体外受精技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术，培育转基因牛7用到基因工程技术、体外受精技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术，因此三者培育中均用到的生物工程技术有早期胚胎培养技术、胚胎移植技术。同期发情使供体、受体母牛的生理状态相同，为被移植的胚胎提供了相同的生理环境，需要进行同期发情处理的牛是2和4。（2）通常用促性腺激素处理供体母牛2，使其超数排卵。保证体外受精过程只能由1个精子进入卵细胞的生理反应依次是透明带反应、卵细胞膜反应。采集的卵细胞需要培养成熟后才可与获能的精子受精。（3）早
30、期胚胎培养液成分：无机盐、有机盐类、氨基酸、维生素、核苷酸、激素、血清等。（4）将目的基因（人乳铁蛋白基因）导入受体细胞（奶牛受精卵1），采用显微注射法。将人乳铁蛋白基因转入奶牛后，利用牛的乳腺细胞产生出人乳铁蛋白，牛7的新性状是产生出人乳铁蛋白。【点睛】本题结合试管牛、克隆牛和转基因牛的培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程等知识。答题关键在于掌握体外受精、细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，明确核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，但胚胎移植时，需要进行同期发情处理。11、PCR Cla（限制酶）和DNA连接 A、D 表达载体（或“重组质粒”） 四环素 利
31、用农杆菌将融合基因导入油菜细胞 逆转录 转录 【解析】1、基因文库包括cDNA文库、基因组文库等。某个群体包含一种生物所有的基因的文库叫基因组文库，而用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段属于cDNA文库。2、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。同种限制酶切割能够产生相同的黏性末端，便于质粒和目的基因连接。【详解】（1）扩增目的基因常用PCR技术。切割获得酶D基因和转基因肽基因时，应该用同种限制酶，以获得相应的黏性末端。因此，可用Cla限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、
32、D端相连的融合基因。（2）将上述融合基因插入右图所示Ti质粒的T-DNA中，构建基因表达载体即重组质粒并导入农杆菌中。由于质粒上含有四环素抗性基因作为标记基因，所以将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落。（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞。（4）提取上述转基因油菜的mRNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA，再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成转录。【点睛】本题以增加油菜种子的含油量为材料背景，考查基因工程的相关知识，要求考生能够掌握目的基因获取的方法，能够结合图解中限制酶切点
33、选择合适的工具酶获得融合基因，同时掌握目的基因导入受体细胞以及目的基因检测与鉴定的方法等。12、目的基因 限制性核酸内切酶 CaCl2 潮霉素 BD 2 保证基因的两条反向平行的链都做模板，且其上碱基序列不同 表达 再分化 【解析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的
34、方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以草甘膦抗性基因作为目的基因。（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，
35、从而获得含目的基因表达载体的农杆菌。（3）根据已知草甘膦抗性基因的部分序列以及双链DNA分子的结构特点（反向平行），再结合DNA复制（PCR中）的特点，即子链合成的方向是从5到3，应选择引物B、D进行PCR扩增。（4）为使基因的两条反向平行的链都做模板，而且其碱基序列不同，所以，PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计2种引物。（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过再分化过程，获得转基因水稻。【点睛】本题主要考查基因工程的应用相关知识，识记和理解目的基因的获取、表达载体的构建以及目的基因的检测等知识是解答本题的关键。
