1、板块五 以应用为前提的选修一、选修三 专题十一专题十一 生物技术实践生物技术实践 1 构建网络串联知识 2 要点整合自测排查 3 核心素养强化训练 4 高考模拟探视考向 返回导航 构建网络串联知识 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 返回导航 要点整合自测排查 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 微 生 物微 生 物 的培养与利用的培养与利用 考点一考点一 一一、理教材理教材 固基固基 础础 1图解识记微生图解识记微生 物的培养物的培养、分离与计数分离与计数 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 2熟记微生物分离
2、与计数的两个实例熟记微生物分离与计数的两个实例 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数： 筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。 过程：土壤取样过程：土壤取样制备培养基制备培养基样品稀释样品稀释涂布平板涂布平板培养与观培养与观 察察菌落计数菌落计数。 鉴定方法：含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基鉴定方法：含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基细菌细菌 指示剂变红指示剂变红，则该菌能分解尿素则该菌能分解尿素。 返回导航 高考
3、二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (2)分解纤维素的微生物的分离：分解纤维素的微生物的分离： 实验原理：实验原理： 即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程：土壤取样流程：土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释涂布平板涂布平板挑选菌落挑选菌落。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 3微生物计数的微生物计数的“两两”种方法种方法 (1)直接计数法：显微镜直接计数法直接计数法：显微镜直接计数法。 (2)间接计数法：稀释涂布平板法间接计数法：稀释涂布平板法(活菌计数法活菌计数法)，统计的菌落数往往统计的
4、菌落数往往 比活菌的实际数目低比活菌的实际数目低。 4归纳细菌培养和计数方法的归纳细菌培养和计数方法的4个易错易混点个易错易混点 (1)制备固体培养基最后要将平板倒置制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖其主要目的是防止培养皿盖 上的水珠滴入培养基造成污染上的水珠滴入培养基造成污染。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (2)平板划线法中的平板划线法中的“连续划线连续划线”及稀释涂布平板法中的及稀释涂布平板法中的“系列稀系列稀 释释”目的是一样的目的是一样的，都是为了保证菌种在培养基中单个分布都是为了保证菌种在培养基中单个分布(平板划线平板划线 法
5、中最后一次划线的末端一般为单个分布法中最后一次划线的末端一般为单个分布)。 (3)稀释涂布平板法能分离细菌稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数也能计数(结果偏小结果偏小)。平板划线法平板划线法 只能纯化细菌只能纯化细菌，不能计数不能计数。 (4)显微计数法：不能区分细菌死活显微计数法：不能区分细菌死活(计数结果偏大计数结果偏大)。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 二二、做真题做真题 明考向明考向 1(2020 全国卷全国卷)某种物质某种物质S(一种含有一种含有C、H、N的有机物的有机物)难以降难以降 解解，会对环境造成污染会对环境造成污染，只有某些细菌能降解只有某
6、些细菌能降解S。研究人员按照下图所研究人员按照下图所 示流程从淤泥中分离得到能高效降解示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株的细菌菌株。实验过程中需要实验过程中需要 甲甲、乙两种培养基乙两种培养基，甲的组分为无机盐甲的组分为无机盐、水和水和S，乙的组分为无机盐乙的组分为无机盐、 水水、S和和Y。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 回答下列问题：回答下列问题： (1)实验时实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用盛有水或培养基的摇瓶通常采用_的方的方 法进行灭菌法进行灭菌。乙培养基中的乙培养基中的Y物质是物质是_。甲甲、乙培养基均属于乙培
7、养基均属于 _培养基培养基。 (2)实验中初步估测摇瓶实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为中细菌细胞数为2107个个/mL，若要在每若要在每 个平板上涂布个平板上涂布100 L稀释后的菌液稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不且保证每个平板上长出的菌落数不 超过超过200个个，则至少应将摇瓶则至少应将摇瓶M中的菌液稀释中的菌液稀释_倍倍。 (3)在步骤在步骤的筛选过程中的筛选过程中，发现当培养基中的发现当培养基中的S超过某一浓度时超过某一浓度时， 某菌株对某菌株对S的降解量反而下降的降解量反而下降，其原因可能是其原因可能是_ _(答出答出1点即可点即可)。 琼脂琼脂 选择选择 104 S的
8、浓度超过某一值时的浓度超过某一值时 会抑制菌株的生长会抑制菌株的生长 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 取淤泥加入无菌水取淤泥加入无菌水，涂布涂布(或稀释涂布或稀释涂布)到乙培养基上到乙培养基上，培养后计数培养后计数 (4)若要测定淤泥中能降解若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数的细菌细胞数，请写出主要实验步骤请写出主要实验步骤 _。 (5)上述实验中上述实验中，甲甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能但都能 为细菌的生长提供为细菌的生长提供4类营养物质类营养物质，即即_。 【解析解析】 (1)常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养
9、基的摇瓶常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙乙 为固体培养基为固体培养基，故需要加入故需要加入Y琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解 S的菌株的菌株，故均属于选择培养基故均属于选择培养基。 水水、碳源碳源、氮源和无机盐氮源和无机盐 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (2)若要在每个平板上涂布若要在每个平板上涂布100 L稀释液后的菌液稀释液后的菌液，且每个平板上长且每个平板上长 出的菌落数不超过出的菌落数不超过200个个，则摇瓶则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为中的菌液稀释的倍数至少为 21071 00010020011
10、04倍倍。(3)当培养基中的当培养基中的S超过某一浓度超过某一浓度 后后，可能会抑制菌株的生长可能会抑制菌株的生长，从而造成其对从而造成其对S的降解量下降的降解量下降。(4)要测定要测定 淤泥中能降解淤泥中能降解S的细菌的细胞数的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀稀 释涂布到乙培养基上释涂布到乙培养基上，培养后进行计数培养后进行计数。(5)甲和乙培养基均含有水甲和乙培养基均含有水、无无 机盐机盐、碳源碳源、氮源氮源。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 2(2019 全国卷全国卷)已知一种有机物已知一种有机物X(仅含有仅含有C
11、、H两种元素两种元素)不易不易 降解降解，会造成环境污染会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X 的细菌的细菌(目标菌目标菌)。 号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。 号培养基：氯化钠号培养基：氯化钠(5 g/L)/L)，硝酸铵硝酸铵( (3 3 g/g/L)，其他无机盐其他无机盐(适适 量量)，X(15 g/L)。 号培养基：氯化钠号培养基：氯化钠(5 g/L)/L)，硝酸铵硝酸铵( (3 3 g/g/L)，其他无机盐其他无机盐(适适 量量)，X(45 g/L)。 返回导航 高考二轮总
12、复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 牛肉膏牛肉膏、蛋白胨蛋白胨 回答下列问题回答下列问题。 (1)在在号培养基中号培养基中，为微生物提供氮源的是为微生物提供氮源的是_。 、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。 (2)若将土壤悬浮液接种在若将土壤悬浮液接种在号液体培养基中号液体培养基中，培养一段时间后培养一段时间后，不不 能 降 解能 降 解 X 的 细 菌 比 例 会的 细 菌 比 例 会 _ ， 其 原 因 是其 原 因 是 _ _。 (3)号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养若要以该固体培
13、养 基 培 养 目 标 菌 并 对 菌 落 进 行 计 数基 培 养 目 标 菌 并 对 菌 落 进 行 计 数 ， 接 种 时接 种 时 ， 应 采 用 的 方 法 是应 采 用 的 方 法 是 _。 X 下降下降 不能降解不能降解X的细菌因的细菌因 缺乏碳源不能增殖缺乏碳源不能增殖，而能降解而能降解X的细菌能够增殖的细菌能够增殖 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 能量能量 (4)假设从假设从号培养基中得到了能高效降解号培养基中得到了能高效降解X的细菌的细菌，且该菌能将且该菌能将X 代谢为丙酮酸代谢为丙酮酸，则在有氧条件下则在有氧条
14、件下，丙酮酸可为该菌的生长提供丙酮酸可为该菌的生长提供_ 和和_。 【解析解析】 (1)号培养基中含有牛肉膏号培养基中含有牛肉膏、蛋白胨和有机物蛋白胨和有机物X等等，其其 中中X仅含有仅含有C、H两种元素两种元素，故为微生物提供氮源的是牛肉膏故为微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白蛋白 胨胨。、号培养基中除无机盐外号培养基中除无机盐外，还含有有机物还含有有机物X，故为微生物提供故为微生物提供 碳源的有机物是碳源的有机物是X。(2)因因号液体培养基中的有机碳源只有号液体培养基中的有机碳源只有X，故培养故培养 一段时间后一段时间后，不能降解不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能
15、降解而能降解X的细的细 菌能够增殖菌能够增殖，故不能降解故不能降解X的细菌比例会下降的细菌比例会下降。 合成其他物质的原料合成其他物质的原料 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (3)对微生物分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法对微生物分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，但其中只但其中只 有稀释涂布平板法能够计数有稀释涂布平板法能够计数。(4)能高效降解能高效降解X的细菌能将的细菌能将X代谢为丙酮代谢为丙酮 酸酸，丙酮酸在有氧条件下被降解时能释放出大量能量丙酮酸在有氧条件下被降解时能释放出大量能量，故丙酮酸可为该故丙酮酸可为该 细菌的生长提供能量细菌的生长提供
16、能量。丙酮酸还可以为该细菌中其他物质的合成提供原丙酮酸还可以为该细菌中其他物质的合成提供原 料料。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 W 3(2019 全国卷全国卷)物质物质W是一种含氮有机物是一种含氮有机物，会污染土壤会污染土壤。W在在 培养基中达到一定量时培养基表现为不透明培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛某研究小组欲从土壤中筛 选出能降解选出能降解W的细菌的细菌(目标菌目标菌)。回答下列问题回答下列问题。 (1)要从土壤中分离目标菌要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是所用选择培养基中的氮源应该是_。 返回导航 高考二
17、轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 乙乙 (2)在从土壤中分离目标菌的过程中在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲发现培养基上甲、乙两种细菌乙两种细菌 都能生长并形成菌落都能生长并形成菌落(如图所示如图所示)。如果要得到目标菌如果要得到目标菌，应该选择应该选择_菌菌 落 进 一 步 纯 化落 进 一 步 纯 化 ， 选 择 的 依 据 是选 择 的 依 据 是 _ _。 (3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计若要设计 实验进一步确定甲实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源乙菌能否利用空气中的氮气
18、作为氮源，请简要写出请简要写出 实 验 思 路实 验 思 路 、 预 期 结 果 和 结 论预 期 结 果 和 结 论 ， 即即 _ _ _。 乙菌落周围出现透明圈乙菌落周围出现透明圈，说说 明乙菌能降解明乙菌能降解W 将甲将甲、乙菌分别接种在无氮源乙菌分别接种在无氮源 培养基上培养基上，若细菌能生长若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮 源源 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 缓冲液缓冲液 (4)该小组将人工合成的一段该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生使大肠杆菌产生 能降解能降解W
19、的酶的酶(酶酶E)。为了比较酶为了比较酶E与天然酶降解与天然酶降解W能力的差异能力的差异，该小组该小组 拟进行如下实验拟进行如下实验，请完善相关内容请完善相关内容。 在含有一定浓度在含有一定浓度W的固体培养基上的固体培养基上，A处滴加含有酶处滴加含有酶E的缓冲的缓冲 液液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加处滴加_，三处三处 滴加量相同滴加量相同。 一段时间后一段时间后，测量透明圈的直径测量透明圈的直径。若若C处没有出现透明圈处没有出现透明圈，说明说明 _；若；若A、B处形成的透明圈直径大小相近处形成的透明圈直径大小相近，说明说明 _。 缓冲液不能降解
20、缓冲液不能降解W 酶酶E与天然酶降解与天然酶降解W的能力相近的能力相近 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 【解析解析】 (1)物质物质W是一种含氮有机物是一种含氮有机物，要分离能够降解物质要分离能够降解物质W的的 细菌细菌，需用以物质需用以物质W为唯一氮源的选择培养基进行筛选为唯一氮源的选择培养基进行筛选。(2)由题图可由题图可 知知，甲菌落周围没有透明圈甲菌落周围没有透明圈，说明甲菌不能降解物质说明甲菌不能降解物质W，乙菌落周围出乙菌落周围出 现透明圈现透明圈，说明乙菌能降解物质说明乙菌能降解物质W，故要得到目标菌故要得到目标菌，应选择乙菌落进应选择乙菌落进 一
21、步纯化一步纯化。(3)要鉴定甲要鉴定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，则培养则培养 基中不能添加氮源基中不能添加氮源，所以应将甲所以应将甲、乙菌分别接种在无氮源的培养基上乙菌分别接种在无氮源的培养基上 (其他条件相同且适宜其他条件相同且适宜)，若细菌能生长若细菌能生长，则说明细菌能利用空气中的氮则说明细菌能利用空气中的氮 气作为氮源气作为氮源。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (4)实验目的是比较天然酶和酶实验目的是比较天然酶和酶E降解物质降解物质W的能力的能力，做实验时要设做实验时要设 计空白对照计空白对照，所以所以C处应滴
22、加缓冲液处应滴加缓冲液。C处没有出现透明圈处没有出现透明圈，说明缓冲说明缓冲 液不能降解物质液不能降解物质W，A、B处透明圈的出现说明物质处透明圈的出现说明物质W被降解被降解，若两个若两个 透明圈直径大小相近透明圈直径大小相近，则说明酶则说明酶E与天然酶降解物质与天然酶降解物质W的能力相近的能力相近。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 命命 题题 方方 向向 基础类基础类 1.培养基的成分、种类及作用，如第培养基的成分、种类及作用，如第1题题(1)、(5)，第，第 2题的题的(1)小题，第小题，第3题的题的(1)小题；小题； 2微生物纯化培养的方法，如第微生物纯化
23、培养的方法，如第2题的题的(3)小题。小题。 理解类理解类 1.选择培养的原理和应用，如第选择培养的原理和应用，如第1题的题的(3)小题，第小题，第3 题的题的(2)(3)(4)小题；小题； 2微生物的计数方法、步骤和结果分析，如第微生物的计数方法、步骤和结果分析，如第1题题 的的(4)小题。小题。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 复习复习 方向方向 1.记忆培养基的成分、培养基配制的过程、记忆培养基的成分、培养基配制的过程、 消毒和灭菌的方法、原理等。消毒和灭菌的方法、原理等。 2重点理解消毒和灭菌的区别、微生物筛重点理解消毒和灭菌的区别、微生物筛 选的原理、
24、微生物鉴定的原理。选的原理、微生物鉴定的原理。 3微生物的分离和计数方法，特别注意实微生物的分离和计数方法，特别注意实 验误差和实验结论的分析。验误差和实验结论的分析。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 三三、练考点练考点 能迁移能迁移 1(2020 山西省高三其他山西省高三其他)某公司在新冠防疫期间推出一款新型免某公司在新冠防疫期间推出一款新型免 洗洗手凝胶洗洗手凝胶，为衡量该凝胶的清洗效果为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前研究人员检测了凝胶洗手前 后后，手部细菌的数量手部细菌的数量。凝胶洗手前后的检测流程见下图凝胶洗手前后的检测流程见下图，回答下
25、列问回答下列问 题：题： 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 无机盐无机盐 (1)在进行实验前需要配置培养基在进行实验前需要配置培养基，各种培养基的具体配方不同各种培养基的具体配方不同，但但 一般都含有水一般都含有水、碳源碳源、氮源氮源、_。如果培养乳酸杆菌如果培养乳酸杆菌，还需要还需要 在培养基中添加在培养基中添加_。 (2)为统计洗手前后手部细菌的数量为统计洗手前后手部细菌的数量，应选择的接种方法是应选择的接种方法是 _。若在若在M稀释倍数下统计出平板上的菌落数为稀释倍数下统计出平板上的菌落数为N，涂涂 布 平 板 时 所 用 的 液 体 体 积 为布 平 板
26、时 所 用 的 液 体 体 积 为 V(ml)， 那 么 每 克 样 品 中 的 菌 数 为那 么 每 克 样 品 中 的 菌 数 为 _，而实际菌数要比计算值而实际菌数要比计算值_。 维生素维生素(或生长因子或生长因子) 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 N/VM 大大 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (3)根据上图所示的步骤得出的实验结果的可信度较低根据上图所示的步骤得出的实验结果的可信度较低，为了提高实为了提高实 验结果的可信度验结果的可信度，请给出两点建议：请给出两点建议：_ _ 、 _ _。 (4) 培 养 一 段 时 间 后 可 根 据培 养 一 段 时
27、 间 后 可 根 据 _ _(至少填两项至少填两项)等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。 同一个稀释度下涂布三个平同一个稀释度下涂布三个平 板板，取三个平板上菌落数的平均值取三个平板上菌落数的平均值 设置一组未接种的空白培养基设置一组未接种的空白培养基， 排除杂菌污染对实验结果造成的干扰排除杂菌污染对实验结果造成的干扰 菌落的大小菌落的大小、形状形状(隆起程度和颜隆起程度和颜 色色) 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 【解析解析】 (1)无机盐对维持生命活动非常重要无机盐对维持生命活动非常重要，各种培养基的具体各种培养基的具体
28、 配方不同配方不同，但一般都含有水但一般都含有水、碳源碳源、氮源和无机盐氮源和无机盐。有些微生物的培养有些微生物的培养 还需要在培养基中加入生长因子还需要在培养基中加入生长因子，如培养乳酸杆菌要添加维生素如培养乳酸杆菌要添加维生素。(2)为为 统计洗手前后手部细菌的数量统计洗手前后手部细菌的数量，应选择的接种方法是稀释涂布平板法应选择的接种方法是稀释涂布平板法。 若在若在M稀释倍数下统计出平板上的菌落数为稀释倍数下统计出平板上的菌落数为N，涂布平板时所用的液体涂布平板时所用的液体 体积为体积为V(ml)，那么每克样品中的菌数为那么每克样品中的菌数为N/VM，由于计数时当两个或由于计数时当两个或
29、 几个细胞连在一起时几个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落平板上观察到的只是一个菌落，所以实际菌数要所以实际菌数要 比计算值偏大比计算值偏大。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (3)为了提高实验结果的可信度为了提高实验结果的可信度，需要检测培养基灭菌是否合格以及需要检测培养基灭菌是否合格以及 在同一稀释度下计数多个平板上的菌落数并求平均值在同一稀释度下计数多个平板上的菌落数并求平均值，即提出的建议即提出的建议 为：在同一个稀释度下涂布三个平板为：在同一个稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；取三个平板上菌落数的平均值； 设置一组未接种的空白培
30、养基设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。 (4)培养一段时间后可根据菌落的大小培养一段时间后可根据菌落的大小、形状形状(隆起程度和颜色隆起程度和颜色)等菌落特等菌落特 征初步判断培养基上菌种的类型征初步判断培养基上菌种的类型。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 2(2020 天津高三二模天津高三二模)土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物 可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图下图1表示制备固体培养表示制备固体培养 基过程中的某操作
31、基过程中的某操作，图图2是科研人员从土壤中分离出菌株是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程的部分过程 示意图示意图。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 倒置倒置 (1)图图1所示操作后所示操作后，待平板冷凝待平板冷凝，然后然后_，以防止以防止_ _。 (2)图图2所示接种方法是所示接种方法是_。在在3个平板上分别接入个平板上分别接入 0.1 mL稀释液稀释液，经适当培养后经适当培养后，3个平板上菌落数分别是个平板上菌落数分别是38、42、40， 则则1 g土壤中的活菌数约为土壤中的活菌数约为_个个。 培 养培 养 皿盖上的冷凝水落入培养基皿盖上的冷凝水落入培养基
32、 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 4107 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (3)固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解的作用下溶解，会在菌落周会在菌落周 围形成透明圈围形成透明圈(如图如图)，透明圈直径透明圈直径(D)与菌落直径与菌落直径(d)的比值的比值(D/d)代表微代表微 生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷下表是初步筛选出的三种优良解磷 菌株菌株。 菌株菌株 透明直径透明直径(D) 菌落直径菌落直径(d) M301 18.8 12.3 B356 20.7 8.0
33、T401 9.1 6.5 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 B356 根据实验结果分析根据实验结果分析，溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是 _。 【解析解析】 (1)图图1所示操作称为倒平板所示操作称为倒平板，待平板冷凝后倒置待平板冷凝后倒置，以防以防 止皿盖上的冷凝水落入培养基止皿盖上的冷凝水落入培养基，带来污染带来污染。(2)图图2所示接种方法是稀释所示接种方法是稀释 涂布平板法涂布平板法。取取1 g土壤土壤，按如图稀释后按如图稀释后，在三个平板上分别接入在三个平板上分别接入0.1 ml 稀释液后稀释液后，经适当培养后经适当培养后
34、，3个平板上的菌落数分别是个平板上的菌落数分别是38、42、40，据据 此 可 计 算 出 每 克 土 样 中 的 活 菌 数 为此 可 计 算 出 每 克 土 样 中 的 活 菌 数 为 (38 42 40)30.11010101004.0107个个。(3)根据上述分析可知根据上述分析可知， 溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是B356。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 灭菌灭菌 3(2020 河北省衡水中学高三三模河北省衡水中学高三三模)酸奶中含有双歧杆菌酸奶中含有双歧杆菌，双歧杆双歧杆 菌是一种重要的肠道有益微生物菌是一种重要的
35、肠道有益微生物，具有生物屏障具有生物屏障、促进营养吸收促进营养吸收、抗肿抗肿 瘤瘤、增强免疫力增强免疫力、改善胃肠道功能改善胃肠道功能、抗衰老等多种重要的生理功能抗衰老等多种重要的生理功能。某某 学习小组在课余时间做了培养双歧杆菌和制作酸奶的实验学习小组在课余时间做了培养双歧杆菌和制作酸奶的实验。回答下列问回答下列问 题：题： (1)制备固体培养基的步骤为计算制备固体培养基的步骤为计算称量称量溶化溶化_倒平倒平 板板。在倒平板的过程中在倒平板的过程中，如果将培养基溅在皿盖和皿底之间的部位如果将培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这这 个平板就不能用来培养微生物个平板就不能用来培养微生物，原因是原因
36、是_ _。 空气中的微生物可能在皿盖空气中的微生物可能在皿盖 与皿底之间滋生与皿底之间滋生(培养基易被空气中的微生物污染培养基易被空气中的微生物污染) 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 (2)对培养基上接种的双歧杆菌计数应该采用的接种方法是对培养基上接种的双歧杆菌计数应该采用的接种方法是 _。利用该方法进行计数时利用该方法进行计数时，得到的数值往往比真实得到的数值往往比真实 值偏值偏_(填填“大大”或或“小小”)，导致此结果的原因是导致此结果的原因是_ _ 。 培养基上接种双歧杆菌后培养基上接种双歧杆菌后，还要用空白培养基做对照还要用
37、空白培养基做对照，目的是目的是 _。 (3)学习小组筛选出合适的双歧杆菌用于制作酸奶学习小组筛选出合适的双歧杆菌用于制作酸奶，为了防止其他杂为了防止其他杂 菌污染菌污染，在牛奶中加入了抗生素在牛奶中加入了抗生素，结果在制作酸奶时没有成功结果在制作酸奶时没有成功，原因是原因是 _。 小小 两个或多个细两个或多个细 胞连在一起时胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落平板上观察到的只是一个菌落，使计数比真实值偏小使计数比真实值偏小 检验培养基灭菌是否彻底检验培养基灭菌是否彻底 抗生素杀死了双歧杆菌抗生素杀死了双歧杆菌 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 厌氧厌氧 (4)
38、在制作酸奶过程中在制作酸奶过程中，除了要对培养装置提供适宜的温度外除了要对培养装置提供适宜的温度外，还要还要 对盛有牛奶的装置加盖密封对盛有牛奶的装置加盖密封，由此可以得出双歧杆菌属于由此可以得出双歧杆菌属于_(填填 “好氧好氧”“”“厌氧厌氧”或或“兼性厌氧兼性厌氧”)菌菌。 【解析解析】 (1)制备固体培养基的步骤为计算制备固体培养基的步骤为计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌 倒平板倒平板。在倒平板的过程中在倒平板的过程中，如果将培养基溅在皿盖和皿底之间的部如果将培养基溅在皿盖和皿底之间的部 位位，这个平板就不能用来培养微生物这个平板就不能用来培养微生物，原因是空气中的微生物可能在皿原因是空气中
39、的微生物可能在皿 盖与皿底之间滋生盖与皿底之间滋生(培养基易被空气中的微生物污染培养基易被空气中的微生物污染)。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (2)对培养基上接种的双歧杆菌计数应该采用稀释涂布平板法对培养基上接种的双歧杆菌计数应该采用稀释涂布平板法。用稀用稀 释涂布平板法计数时释涂布平板法计数时，若菌落有两个或多个细胞连接在一起若菌落有两个或多个细胞连接在一起，使计数比使计数比 真实值偏小真实值偏小。培养基上接种双歧杆菌后培养基上接种双歧杆菌后，还要有空白培养基做对照还要有空白培养基做对照，检检 验培养基灭菌是否彻底验培养基灭菌是否彻底。(3)抗生素是广谱杀
40、菌药物抗生素是广谱杀菌药物，会杀死双歧杆菌会杀死双歧杆菌， 因此制作酸奶不成功因此制作酸奶不成功。(4)由由“对盛有牛奶的装置加盖密封对盛有牛奶的装置加盖密封”可知可知，双歧双歧 杆菌是严格的厌氧菌杆菌是严格的厌氧菌。 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 生物技术在其他方面的应用生物技术在其他方面的应用 考点二考点二 一一、理教材理教材 固基础固基础 1比较记忆果酒比较记忆果酒、果醋果醋、腐乳和泡菜的制作腐乳和泡菜的制作 项目项目 内容内容 果酒和果醋的制作 果酒和果醋的制作 腐乳制作腐乳制作 制作泡菜并检测亚硝制作泡菜并检测亚硝 酸盐含量酸盐含量 作用作用 菌种菌
41、种 果酒：酵母菌果酒：酵母菌 果醋：醋酸菌果醋：醋酸菌 主要是毛霉主要是毛霉 乳酸菌乳酸菌 原理原理 酵母菌在无氧条件下将葡酵母菌在无氧条件下将葡 萄糖氧化成乙醇萄糖氧化成乙醇 醋酸菌在有氧条件下将乙醋酸菌在有氧条件下将乙 醇氧化为醋酸醇氧化为醋酸 毛霉将蛋白质、毛霉将蛋白质、 脂肪分解成小分脂肪分解成小分 子有机物子有机物 乳酸菌将糖分解为乳乳酸菌将糖分解为乳 酸酸 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 项目项目 内容内容 果酒和果果酒和果 醋的制作醋的制作 腐乳制作腐乳制作 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 原料原料 选择选择 新鲜葡萄新鲜葡萄
42、( 或苹果或苹果) 豆腐豆腐 大白菜、花椰菜等新鲜干净的蔬菜大白菜、花椰菜等新鲜干净的蔬菜 实验实验 流程流程 测亚硝酸盐含量：配测亚硝酸盐含量：配 制溶液制溶液制备标准显制备标准显 色液色液制备样品处理制备样品处理 液液比色比色 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 2.图解植物有效成分的提取图解植物有效成分的提取 (1)植物有效成分的提取方法：植物有效成分的提取方法： 提取方法提取方法 方法步骤方法步骤 适用范围适用范围 蒸馏法蒸馏法 水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏分离油层分离油层除除 水过滤水过滤 适用于提取玫瑰油、薄荷油适用于提取玫瑰油、薄荷油 等挥发性强的芳香油等挥发
43、性强的芳香油 压榨法压榨法 石灰水浸泡石灰水浸泡漂洗漂洗压榨、压榨、 过滤、静置过滤、静置再次过滤再次过滤 适用于柑橘、柠檬等易焦糊适用于柑橘、柠檬等易焦糊 原料的提取原料的提取 萃取法萃取法 粉碎、干燥粉碎、干燥萃取、过滤萃取、过滤 浓缩浓缩 适用范围广，要求原料的颗适用范围广，要求原料的颗 粒要尽可能细小，能充分浸粒要尽可能细小，能充分浸 泡在有机溶剂中泡在有机溶剂中 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 (2)提取植物有效成分的实例：提取植物有效成分的实例： 玫瑰精油的提取：玫瑰精油的提取： 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 橘皮精油的提取：橘皮精油的提取： 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 胡萝卜素的提取：胡萝卜素的提取： 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 3血红蛋白的提取和粗分离血红蛋白的提取和粗分离 返回导航 高考二轮总复习 生物 板块五 专题十二 生物技术实践 4直接使用酶直接使用酶、固定化酶固定化酶、固定化细胞的比较固定化细胞的比较 项目项目 直接使用酶直接使用酶 固定化酶固定化酶 固定化细胞固定化细胞 酶的种数酶的种数 一种或几种一种或几种 一种一种 一系列酶
