1、专题2 细胞工程 植物组织培养和动物细胞培养的比较 动物细胞融合与植物体细胞杂交 单克隆抗体的制备 植物细胞工程的应用 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.1技术过程 植物组织培养 脱分化 再分化 发育 外植体 愈伤组织 幼苗 植株 (根、茎、叶等) 动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动 单个细胞 细胞悬浮液 原代培养 传代培养 物的组织或器官 都需要在人工条件下进行无菌操作! 胰蛋 白酶 贴壁生长 接触抑制 1.2横向比较,辨清关系 植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养 理论基础 培养基 结果 用途 细胞全能性 细胞增殖 营养物质+激素+光照(固体) 营养物质+维生素+血清(液体)
2、获得新个体或细胞产品 产生大量细胞或细胞产物 快速繁殖名贵花和果树 培育无病毒植物、转基因植物 大规模生产药物、食品添加剂、 香料、色素等 生产蛋白质制品,如疫苗、干 扰素、单克隆抗体 检测有毒物质 用于生理、药理等方面的研究 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交 动物细胞融合 灭活的病毒 有丝分裂 不同DNA的 细胞融合 杂交细胞 两个细胞 植物体细胞杂交 细胞A 原生质体A 融合原生质体 杂种细胞 愈伤组织 植株 细胞B 原生质体B 去壁 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交 项目项目 原理原理 诱导手段诱导手段 用途用途 植物体细胞 杂交 动物细胞融 合 细胞膜的 流动性 物理:离心、震动、电
3、刺激 化学:聚乙二醇(PEG) 除物理和化学方法,还 有用灭活的病毒诱导的 方法。 克服远缘杂交不亲和性, 获得杂种植株 制备单克隆抗体 3.单克隆抗体制 备 原理: 每个浆细胞只能分泌一种特异性抗体,不同种类浆细胞分泌的抗体不同。 浆细胞在体外培养时不能无限增殖,骨髓瘤细胞能无限增殖。 浆细胞与骨髓瘤细胞的杂交细胞既能无限增殖,又能产生特异性抗体。 过程: 注射特定抗原蛋白 免疫小鼠 B淋巴细胞 B-B细胞 体外培养 瘤-瘤细胞 杂交瘤 细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 注射小鼠体内 融合 筛选 植物细胞工程的应用 植物繁殖新途径 微型繁殖:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术(保持优良性状、
4、高效快速) 作物脱毒:选取作物无毒组织进行组织培养,获得脱毒苗的技术 人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料,经过人工 薄膜包被得到的种子。 作物新品种培育 单倍体育种:通过花药培养获得单倍体植株,染色体加倍可获得稳定遗传的优良品种, 优势在于缩短育种年限,节约人力物力。 突变体的利用:组织培养过程的细胞易发生突变,可以筛选出对人们有用的突变体。 细胞产物工厂化生产:常见类型包括蛋白质(抗体、酶、干扰素等)、脂肪、糖类、 药物、香料、生物碱。 4.动植物体细胞核移植技术和克隆动物 过程 供体体细胞 细胞培养 供体细胞核 重组细胞 卵巢卵母细胞 去核 无核卵母细胞 生出与供体遗传物质相同的个体 代孕母体 胚胎 种类 体细胞核移植:分化程度高,全能性小,难度大 胚胎细胞核移植:分化程度低,全能性大,难度小