1、 开 题 报 告专业：呼吸专业专业：呼吸专业 学校：包头医学院学校：包头医学院年级：年级：2014级级 姓名：王思萱姓名：王思萱导师：王慧敏导师：王慧敏 包头医学院第一附属医院包头医学院第一附属医院 论文题目论文题目支气管哮喘患者外周血中支气管哮喘患者外周血中CD152、CD137调节性调节性T细胞的表达细胞的表达Expression of CD152 and CD137 on T regulatory cells in peripheral blood of bronchial asthma patients 包头医学院第一附属医院主要内容主要内容1 1 选题依据选题依据2 2 研究目的及意
2、义研究目的及意义3 3 研究方法研究方法4 4 创新点及查新报告创新点及查新报告5 5 经费预算及实验可行性经费预算及实验可行性6 6 研究进度研究进度7 7 部分参考文献部分参考文献 包头医学院第一附属医院选题依据选题依据支气管哮喘的高发病率支气管哮喘的高发病率哮喘的发病机制十分复杂哮喘的发病机制十分复杂CD152、CD137调节性调节性T 细胞细胞 包头医学院第一附属医院选题依据u 哮喘是一种常见的呼吸道疾病，全球约有3亿患者，我国约有2千万。近20年来，许多国家和地区哮喘的发病率和病死率均呈逐渐上升趋势，给患者家庭和社会造成了沉重的负担。u 目前一些研究结果对Th1/Th2平衡失调学说提
3、出质疑，认为它尚不能完全解释哮喘的发病机制u Treg是指能够控制或抑制其他细胞功能的T细胞群体，可以对效应性T细胞产生强大的抑制作用，在自身抗原耐受及预防自身免疫性疾病，调节过敏性疾病过度免疫反应中均起重要作用，是目前免疫学领域研究的热点。u 有研究发现CD152（CTLA-4）未能及时上调负性调控T淋巴细胞从而导致T淋巴细胞功能紊乱，可能是哮喘发作的原因之一。u CD137（4-1BB）是近年新发现的肿瘤坏死因子受体超家族的新成员，是一种新的共刺激信号分子，它参与T细胞的活化、分化、增殖、凋亡、信号传导及细胞外粘附。CD137的异常表达与免疫疾病的发生存在某种关系。 包头医学院第一附属医院
4、研究目的及意义研究目的及意义哮喘治疗新方向哮喘治疗新方向控制症状，改善患者生活质量控制症状，改善患者生活质量支气管哮喘早期预防及诊断支气管哮喘早期预防及诊断降低疾病发生率降低疾病发生率 包头医学院第一附属医院研究的目的及意义研究的目的及意义u基于基于CD152CD152、CD137CD137调节性调节性T T细胞的表达水平与哮喘的发病细胞的表达水平与哮喘的发病机制相关，哮喘目前最有前景的治疗方法可能是通过调机制相关，哮喘目前最有前景的治疗方法可能是通过调整调节性整调节性T T细胞数量来重新达到免疫稳态。细胞数量来重新达到免疫稳态。u我们可以推测，通过调节患者体内我们可以推测，通过调节患者体内C
5、D152CD152、CD137CD137调节性调节性T T细胞数量可能使哮喘患者获得症状的控制，诱导或抑制细胞数量可能使哮喘患者获得症状的控制，诱导或抑制TregTreg生成，可望成为哮喘治疗的一个新方向。生成，可望成为哮喘治疗的一个新方向。u检测外周血检测外周血CD152CD152、CD137TregCD137Treg水平，或许可较好的反应水平，或许可较好的反应出气道炎症的反应过程，利于哮喘的早期诊断，对早期出气道炎症的反应过程，利于哮喘的早期诊断，对早期干预治疗可能具有一定的价值干预治疗可能具有一定的价值 包头医学院第一附属医院研究方法研究方法 研究对象研究对象 研究方案研究方案 资料整理
6、资料整理 数据分析数据分析 结论探讨结论探讨 包头医学院第一附属医院研究对象u 选择2015年12月-2016年5月就诊于包头医学院第一附属医院呼吸科门诊的支气管哮喘患者60例（男性30例，女性30例）u 根据全球哮喘防治倡议（GINA）标准进行严重程度分级u 并行哮喘控制问卷调查（ACQ）和肺功能检查，包括未使用支气管舒张剂前的第一秒用力呼吸占预计值的百分比FEV1（%预计值）和FEV1变异率。u 按照严重程度分为间歇-轻度组，中重度组。 包头医学院第一附属医院研究对象u 所有病例在入选前一个月内未口服或静脉应用糖皮质激素和其他免疫抑制剂u 一周内无急性感染，无其他慢性病史。u 选择同时期的
7、30例健康志愿者作为对照组，男性15例，女性15例u 同期门诊健康体检者，经问诊及常规体格检查排除全身各系统急、慢性疾病，无过敏性疾病史，无长期用药史，肺功能正常。 包头医学院第一附属医院研究方案研究方案u据据GINAGINA标准分级，检查肺功能，完成哮喘控制问卷标准分级，检查肺功能，完成哮喘控制问卷调查调查u抽取研究对象的外周静脉血抽取研究对象的外周静脉血10ml10ml，肝素钠抗凝，在，肝素钠抗凝，在超净工作台下提取外周血单个核细胞（超净工作台下提取外周血单个核细胞（PBMCPBMC）uCD152CD152、CD137CD137调节性调节性T T细胞染色：取细胞于流式专细胞染色：取细胞于流
8、式专用试管中，依次加入胞外抗体用试管中，依次加入胞外抗体CD152-PECy7CD152-PECy7、CD137-PECy7CD137-PECy7荧光标记单抗进行标记。荧光标记单抗进行标记。u利用流式细胞仪检测外周血利用流式细胞仪检测外周血 CD152 CD152、CD137CD137调节性调节性T T细胞的分布细胞的分布 包头医学院第一附属医院研究方案研究方案u采用采用SPSS 17.0SPSS 17.0统计软件包进行数据处理统计软件包进行数据处理 符合正态分布的计量以（符合正态分布的计量以（ ）表示）表示 多组间比较采用单因素方差分析多组间比较采用单因素方差分析 组间两两比较采用组间两两比
9、较采用SNK-qSNK-q检验检验 相关分析采用线性相关分析相关分析采用线性相关分析 以以P0.05P0.05为差异有统计学意义为差异有统计学意义 u得出实验结论，分析不同程度哮喘患者其调节性得出实验结论，分析不同程度哮喘患者其调节性T T细胞的细胞的表达频率，研究其相关性。表达频率，研究其相关性。sx 包头医学院第一附属医院课题创新点课题创新点p新视角研究哮喘的发病机制p多角度交叉分析其相关性p为哮喘早期防治，降低其发生率开辟新道路p国内外相关研究缺乏 包头医学院第一附属医院查新结果查新结果在国内中文文献系统中，在国内中文文献系统中，未见与课题相同的研究报告未见与课题相同的研究报告 包头医学
10、院第一附属医院 支出科目支出科目金额金额(万元万元)计算根据及理计算根据及理由由1.论文课题调研费论文课题调研费0.1查新、文献检查新、文献检索索2.实验材料费实验材料费0.4实验试剂实验试剂3.仪器设备费仪器设备费0.3流式细胞仪流式细胞仪4.学位论文答辩费学位论文答辩费0.1论文打印、装论文打印、装订、专家劳务订、专家劳务费费 5.不可预见费用不可预见费用0.1交通通讯费等交通通讯费等 包头医学院第一附属医院实验的可行性实验的可行性包头医学院第一附属医院是一所集医、教、研于一体的大型综合性三级甲等医院，综合实力雄厚，患者来源广，涵盖了包头及周边地区，为实验的顺利进行提供了基础。我院的中心实
11、验室，拥有较为完善的实验仪器及设备，为此课题研究提供了先进的实验设备及条件，保证此次实验的顺利进行。 包头医学院第一附属医院研究进程研究进程l2015.07-2015.12 检索、立题、课题设计检索、立题、课题设计l2015.12-2016.08 收集实验标本、整理材料、预实验收集实验标本、整理材料、预实验l2016.08-2017.05 收集整理数据，统计学处理，总结收集整理数据，统计学处理，总结 归纳，撰写论文归纳，撰写论文 l2017.05-2017.06 毕业论文答辩、整理论文发表毕业论文答辩、整理论文发表 包头医学院第一附属医院部分参考文献部分参考文献1Rojas-Ramos E,
12、Martnez-Jimnez NE,Verdejo-Hernndez B, Vzquez G.Expression of CD152 and CD137 on T regulatory cells in rhinitis and bronchial asthma patientsJ.Revista Alergia Mxico,2015,62(2):118-124.2Bakr SI, Mahran MZ, Soliman DA.Role of regulatory CD4+CD25+ Foxp3 T cells in bronchial asthma in Egyptian childrenJ.
13、The Egyptian journal of immunology,2013,20(2):29-38.3Del-Valle-Acosta C1, Rodrguez CM, Menso-de Ezcurra E, et al.CD4+CD25+CD127low (Treg) cell numbers in patients with allergic rhinitis with and without immunotherapyJ.Revista Alergia Mxico,2015,58(4):192-199.4Lou W1, Wang C, Wang Y,et al.Responses o
14、f CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) and IL-10-secreting type I T regulatory cells to cluster-specific immunotherapy for allergic rhinitis in childrenJ.Pediatr Allergy and immunology,2012,23(2):140-149.5Stelmaszczyk-Emmel A, Zawadzka-Krajewska A, Szypowska A,et al.Frequency and activation of CD4+CD25 FoxP3+ re
15、gulatory T cells in peripheral blood from children with atopic allergyJ.International archives of allergy and immunology,2013,162(1):16-24.6蔡惠娇. 变应性鼻炎和支气管哮喘患者CD4+CD25+调节性T细胞与总IgE表达的比较及其相关性研究J. 疾病监测与控制,2015,10:695-696.7柯务,陈广湛,李月弟,许燚滢. 支气管哮喘患者外周血CD_4+CD_(25)+调节性T细胞的临床研究J. 中国当代医药,2015,21:25-27. 谢谢！请各位老师予以批评指正！
