1、全国艾滋病检测技术规范全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版年修订版 ）2009年修订版年修订版 与与2004年版比较：年版比较： 本次主要对以下本次主要对以下 6 个方面内容进行了修改、个方面内容进行了修改、增补和完善。增补和完善。修订版（一）修订版（一） 在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血斑样品（斑样品（DBS）的采集和处理，用于）的采集和处理，用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理；唾液样品的采集和处理； 在在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，进一步明
2、确了不同情况下的化学发光法，进一步明确了不同情况下的检测策略；检测策略；修订版（二）修订版（二） 在在HIV核酸检测中，增加了核酸检测中，增加了HIV感染产妇感染产妇所生婴儿所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测方法；用于窗口期的集合核酸检测方法； 根据临床治疗需求，增加了根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药的耐药检测；检测；修订版（三）修订版（三） 进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加加符合目前艾滋
3、病防治工作的需求，更加具有可操作性；具有可操作性； 考虑到技术发展和新的需求，增加了考虑到技术发展和新的需求，增加了HIV-1新近感染检测和新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。的分离培养技术。修订后的修订后的规范规范（一）（一） 共九章共九章第一章第一章 样品的采集和处理样品的采集和处理第二章第二章 HIV抗体检测抗体检测第三章第三章 HIV-1抗原检测抗原检测第四章第四章 HIV核酸检测核酸检测第五章第五章 HIV-1耐药检测耐药检测修订后的修订后的规范规范共九章共九章第六章第六章 CD4+ 和和CD8+ T淋巴细胞检测淋巴细胞检测第七章第七章 HIV-1的分离培养的分离培养第八章第八章
4、 实验室生物安全实验室生物安全第九章第九章 艾滋病检测实验室的质量管理艾滋病检测实验室的质量管理第第一一章章 样品的采集和处理样品的采集和处理样品种类及相应的用途（一）样品种类及相应的用途（一） HIVHIV抗体检测的样品包括：抗体检测的样品包括： 全血、血清、血浆全血、血清、血浆 唾液、尿液唾液、尿液 DBSDBS样品样品样品种类及相应的用途（二）样品种类及相应的用途（二）抗凝全血可用于抗凝全血可用于CD4+和和CD8+T淋巴细胞测定。淋巴细胞测定。血浆可用于血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。基因
5、型及耐药检测。全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞（PBMC）及）及DBS样品可用于样品可用于HIV核酸的定性检核酸的定性检测。测。PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。分离培养。采集和处理样品（一）采集和处理样品（一） 血液血液 滤纸干血斑滤纸干血斑 尿液和唾液尿液和唾液采集采集和处理样品（二）和处理样品（二） 血液：抗凝全血、末梢全血、血浆、血清、血液：抗凝全血、末梢全血、血浆、血清、淋巴细胞富集液、淋巴细胞富集液、PBMC 注意：注意：根据检测要求选用适当的抗凝剂，如根据检测要求选用适当的抗
6、凝剂，如CD4+和和CD8+T淋巴细胞测定可选用淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核酸病毒分离、核酸定性定性/定量检测可选用定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠盐或钾盐或枸橼酸钠。钠。 注意：注意： 所有的血液、血清、未固定的组织和组织所有的血液、血清、未固定的组织和组织液样品，均应视为有潜在传染性，都应以液样品，均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进行操作。安全的方式进行操作。样品的保存（一）样品的保存（一） 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（短期（1周）内进行检测的可存放
7、于周）内进行检测的可存放于28， 一周以上应存放于一周以上应存放于-20以下。以下。样品的保存（二）样品的保存（二） 用于核酸检测的血浆和血细胞样品用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进天内进行检测的可存放于行检测的可存放于4，3个月以内应存放个月以内应存放于于-20以下。以下。3个月以上应置于个月以上应置于-70以下。以下。样品的保存（三）样品的保存（三） 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室，筛查阴性样品，品应及时送确证实验室，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，建议至少可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存保存12个月。特殊
8、用途或专项项目的样个月。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。品根据具体要求确定保存时间。样品的保存（四）样品的保存（四） 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样品，无论确证结果如何，均应将剩余的样品，无论确证结果如何，均应将剩余的样品保存至少品保存至少10年，特殊用途或专项项目的年，特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。样品根据具体要求确定保存时间。样品的运送样品的运送 应符合生物安全要求；应符合生物安全要求； 要获得相应部门批准并由具有资质的人员要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送；专程护送； 应采用三层容器对样品进行包装，
9、随样品应采用三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。息，并应放置在第二层和第三层容器之间。样品运送注意事项（一）样品运送注意事项（一） 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。下运送。 用于用于CD4+和和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在淋巴细胞测定的样品应在室温下（室温下（1825）或）或4（特殊要求时）运（特殊要求时）运送。送。 用于病毒载量检测的样品应在用于病毒载量检
10、测的样品应在-20以下运输。以下运输。 DBS样品应在室温下（样品应在室温下（1825）运送。）运送。 每一件包装的体积以不超过每一件包装的体积以不超过50mL为宜。为宜。样品运送注意事项（二）样品运送注意事项（二） 运送样品必须有记录。运送样品必须有记录。 特殊情况下经有关部门批准可以用特快专特殊情况下经有关部门批准可以用特快专递邮寄样品，但必须按三层包装，将样品递邮寄样品，但必须按三层包装，将样品管包扎好，严禁使用玻璃容器。管包扎好，严禁使用玻璃容器。样品的接收（一）样品的接收（一） 样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实验室内、由经过培训的、穿戴
11、防护衣、戴口罩、验室内、由经过培训的、穿戴防护衣、戴口罩、防护眼镜的工作人员在生物安全柜中打开，用防护眼镜的工作人员在生物安全柜中打开，用后的包裹应及时进行消毒。后的包裹应及时进行消毒。 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。和上一级实验室技术人员。样品的接收（二）样品的接收（二） 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂
12、过多以及黄疸等情况。如果污染过污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，应将样品安全废重或者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。弃。并将样品情况立即通知送样人。 接收样品时应填写样品接收单。接收样品时应填写样品接收单。第二章第二章 HIV抗体检测抗体检测 本章规定了本章规定了HIV抗体的检测方法、程序、结抗体的检测方法、程序、结果报告、检测策略及质量控制。果报告、检测策略及质量控制。 适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。保健
13、机构。 可作为对可作为对HIV感染者诊断和监测的实验室依感染者诊断和监测的实验室依据。据。HIVHIV抗体检测的目的抗体检测的目的 HIVHIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。 以诊断为目的的检测是为了确定个体以诊断为目的的检测是为了确定个体HIVHIV感染感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播播HIVHIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 以监测为目的的
14、检测是为了解不同人群以监测为目的的检测是为了解不同人群HIVHIV感感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。点人群和一般人群。HIV抗体检测的要点抗体检测的要点 根据目的选择检测方法及检测策略。根据目的选择检测方法及检测策略。 严格遵守实验室严格遵守实验室SOP。 筛查试验阳性，须作确证试验。筛查试验阳性，须作确证试验。 筛查试验阴性，筛查试验阴性， 不应做确证试验。不应做确证试验。 筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。 以诊断为目的的检测策略以诊断为目的的检测策略 常规常规HIV抗体检测的方法和程序抗
15、体检测的方法和程序 HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验。检）和确证试验。筛查试验筛查试验 筛查试剂筛查试剂 筛查样品筛查样品 筛查方法筛查方法 筛查程序筛查程序筛查试剂筛查试剂 必须是经国家食品药品监督管理局注册批必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批检合格。剂应批批检合格。 推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。的试剂。筛查样品筛查样品 HIV抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干血抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和
16、尿液样品。斑、唾液和尿液样品。筛查方法筛查方法 酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验化学发光或免疫荧光试验 快速检测（快速检测（RT）及其它检测试验）及其它检测试验筛查程序筛查程序 初筛试验初筛试验 复检试验复检试验 注：艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应注：艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品，确证实验室可以直接进行确证试验。的样品，确证实验室可以直接进行确证试验。 初筛和复检流程初筛和复检流程 （见图）（见图） 筛查试验结果的报告筛查试验结果的报告 筛查试验呈阳性反应样品的转送筛查试验呈阳性反应样品的转送复检试验复检试验 如果抗原抗体联合试剂
17、检测呈阳性反应，如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行行 HIV-1 p24HIV-1 p24抗原或核酸检测，必要时进抗原或核酸检测，必要时进行随访。行随访。筛查试验结果的报告筛查试验结果的报告 HIVHIV抗体筛查试验抗体筛查试验: : 阴性反应报告为阴性反应报告为“HIVHIV抗体阴性（抗体阴性（- -）”； 阳性反应报告为阳性反应报告为“HIVHIV抗体待复检抗体待复检”。HIVHIV抗体筛查检测的流程抗体筛查检测的流程样品样品初筛试验初筛试验筛查试剂筛查试剂阳性反应阳性反应阴性反应阴性反应复检试验复检试验阴性报告阴
18、性报告原有试剂原有试剂+ +另一不同原理另一不同原理( (或厂家或厂家) )试剂或另外两种试剂或另外两种不同原理不同原理( (或厂家或厂家) )试剂试剂一阴一阳一阴一阳均阳性反应均阳性反应确证试验确证试验报告阴性报告阴性均阴性反应均阴性反应确证试验（一）确证试验（一） 确证试剂确证试剂 确证样品：可采用血清、血浆、滤纸干血确证样品：可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。斑样品。 确证方法：包括免疫印迹试验（确证方法：包括免疫印迹试验（WB）、）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（）及免疫荧光试验（IFA）等。）等。 确证流程确证流程 （见图）（
19、见图）确证试验（二）确证试验（二） HIV抗体确证试验结果的判定抗体确证试验结果的判定 HIV抗体确证试验结果报告抗体确证试验结果报告 发出确证报告的同时要做好检测后咨询。发出确证报告的同时要做好检测后咨询。 HIV抗体确证报告的反馈和上报抗体确证报告的反馈和上报 疑难样本的仲裁疑难样本的仲裁HIV抗体确证试验结果的判定抗体确证试验结果的判定 HIV-1抗体阳性抗体阳性 HIV-2抗体阳性抗体阳性 HIV抗体不确定抗体不确定 HIV抗体阴性抗体阴性HIV抗体确证试验结果报告抗体确证试验结果报告(一一)注意：注意： 符合符合HIV抗体阴性判断标准，报告抗体阴性判断标准，报告“HIV抗体阴性抗体阴
20、性（）（）”。如疑似。如疑似“窗口期窗口期”感染，建议进一步感染，建议进一步做做HIV核酸检测，尽早明确诊断。核酸检测，尽早明确诊断。 符合符合HIV抗体不确定判断标准，报告抗体不确定判断标准，报告“HIV抗体不抗体不确定（确定（）”，在备注中应注明，在备注中应注明“4周后复检周后复检”。HIV抗体确证试验结果报告抗体确证试验结果报告(二二)注意：注意： 省艾滋病确证中心实验室难以确证的样品，省艾滋病确证中心实验室难以确证的样品，送国家艾滋病参比实验室确证。送国家艾滋病参比实验室确证。 同一受检对象的样品在不同实验室得到不同一受检对象的样品在不同实验室得到不一致的确证结果时，由国家艾滋病参比实
21、一致的确证结果时，由国家艾滋病参比实验室予以仲裁。验室予以仲裁。HIV抗体确证检测流程抗体确证检测流程质量控制（质量控制（QCQC） 在每次实验中必须包含有内部对照质控血在每次实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。清和外部对照质控血清。 试剂盒内部对照试剂盒内部对照 试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供的阳试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。性和阴性对照血清。 试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性，试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性，但不能作为室内质控品使用。但不能作为室内质控品使用。 每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部对每一次检测临床样品时，必须
22、有试剂盒内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。 内部对照结果无效，必须重新试验。内部对照结果无效，必须重新试验。室内质控品室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。阴性质控血清。 也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（界值（Cut-off）的）的23倍为宜。倍为宜。 外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测的有效性，因此，每次
23、实验必须包含室内质控的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。品，其结果无效，必须重新试验。 室内质控品可以是商品或实验室自行制备。室内质控品可以是商品或实验室自行制备。统计室内质控的主要表示方法统计室内质控的主要表示方法建立质控图建立质控图 最常用的质控图是最常用的质控图是Levey-Jennings质控图，质控图，该图使用累计和技术或趋势分析技术的图该图使用累计和技术或趋势分析技术的图形提供系统偏移和漂移的状况。形提供系统偏移和漂移的状况。 建立质控图参数建立质控图参数 算术平均值算术平均值 ( )( )：代表一组质控血清测定的代表一组质控血清测定的S/CO值的
24、均值。为了统计学上有显著性意义，应值的均值。为了统计学上有显著性意义，应该采用至少该采用至少20次（天）所测得的外部对照质控血次（天）所测得的外部对照质控血清清S/CO值结果计算出平均值。值结果计算出平均值。 标准差标准差(s)(s)：是描述样品与均数之间离散程度的一是描述样品与均数之间离散程度的一个指标，是与质控血清个指标，是与质控血清S/CO值均值有关的预期范值均值有关的预期范围。一组围。一组S/CO值的标准差以值的标准差以s表示表示。X变异系数（变异系数（cv） 是反映各次是反映各次S/CO值相对于均值离散程度的值相对于均值离散程度的一个指标，可以用来衡量检测的重复性或一个指标，可以用来
25、衡量检测的重复性或精密度。精密度。控制限控制限 由实验室根据对外部质控品检测结果的均由实验室根据对外部质控品检测结果的均值和标准差来确定。例如值和标准差来确定。例如2S质控规则的控质控规则的控制限为外部质控品制限为外部质控品S/CO均值加减均值加减2个标准个标准差；差；3S质控规则的控制限为外部质控品质控规则的控制限为外部质控品S/CO均值加减均值加减3个标准差。个标准差。质控图的绘制步骤质控图的绘制步骤1. 在常规条件下，对同一批外部质控血清连续在常规条件下，对同一批外部质控血清连续测定测定20次（天）或以上，获得一组次（天）或以上，获得一组S/CO值，值，求均数（求均数（ ）和标准差（）和
26、标准差（s）, 超出超出2s或或3s的的数据不应删除。数据不应删除。2. 将均值（将均值（ ）和标准差（）和标准差（s）分别在质控框架）分别在质控框架图中标示出来。以图中标示出来。以S/CO值作纵座标（值作纵座标（Y轴），轴），每一批次试验作横座标（每一批次试验作横座标（X轴），绘制质控轴），绘制质控图。图。3. 从第从第21次起，将每次质控血清的检测结果依次起，将每次质控血清的检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。XX质控图质控图绘制和分析质控图的要点（一）绘制和分析质控图的要点（一） 分析数据时，超出分析数据时，超出2s或或3s的数据不应
27、删除。的数据不应删除。 由专人负责建立质控图，每月定期召开质控分析由专人负责建立质控图，每月定期召开质控分析会，讨论本月的质量控制情况。会，讨论本月的质量控制情况。 建议长期和稳定地使用一种质量好的试剂，更换建议长期和稳定地使用一种质量好的试剂，更换不同厂家的试剂后，须重新绘制质控图。改用新不同厂家的试剂后，须重新绘制质控图。改用新批号试剂如外部质控品测定出现较大变化也应重批号试剂如外部质控品测定出现较大变化也应重新制作质控图。使用新批号或不同厂家的试剂新制作质控图。使用新批号或不同厂家的试剂,必须在质控图上注明使用日期。必须在质控图上注明使用日期。绘制和分析质控图的要点（二）绘制和分析质控图
28、的要点（二） 发现质控结果失控，应填写报告单，上交质量发现质控结果失控，应填写报告单，上交质量负责人，分析原因并决定是否发出检测报告。负责人，分析原因并决定是否发出检测报告。 使用新批次的外部质控品时，如测定值出现较使用新批次的外部质控品时，如测定值出现较大变化，须重新绘制质控图。变异系数（大变化，须重新绘制质控图。变异系数（cv）小于小于20，表示外部质控品处于稳定状态。，表示外部质控品处于稳定状态。室内质控其他方式室内质控其他方式“即刻法即刻法”质控质控 “即刻法即刻法”质控方法是在对同一批外部质控质控方法是在对同一批外部质控血清连续测定血清连续测定3次后，即可对第次后，即可对第3次检验结
29、次检验结果进行质控。果进行质控。LeveyLevey-Jennings-Jennings质控图基本的统计学含义质控图基本的统计学含义 稳定条件下，在稳定条件下，在2020个个IQCIQC结果中不应有多于结果中不应有多于1 1个结果个结果超过超过2 2SDSD（95.5%95.5%可信限）可信限）限度；在限度；在10001000个测定结果个测定结果中超过中超过3 3SDSD（99.7%99.7%可信限）可信限）的结果不多于的结果不多于3 3个。个。 如以如以3s3s为失控限，假失控的概率为为失控限，假失控的概率为0.3%0.3%。 服从正态分布的条件服从正态分布的条件 误差因素多而小，无一个占优
30、，彼此相互独立误差因素多而小，无一个占优，彼此相互独立（中心极限定理）。（中心极限定理）。 一般认为，当影响测量的因素在一般认为，当影响测量的因素在1515个以上，且个以上，且相互独立，其影响程度相当，可以认为测量值相互独立，其影响程度相当，可以认为测量值服从正态分布；若要求不高，影响因素则应在服从正态分布；若要求不高，影响因素则应在5 5个（至少个（至少3 3个）以上，也可视为正态分布。个）以上，也可视为正态分布。概率密度函数概率密度函数正态分布的密度函数正态分布的密度函数 为测量总体的数学期望，如不计系统误差，则为测量总体的数学期望，如不计系统误差，则=-即为随机误差即为随机误差 为测量总
31、体的标准差，也是为测量总体的标准差，也是=-随机误差的标随机误差的标准差准差分布的误差特性分布的误差特性单峰性：小误差出现的概率单峰性：小误差出现的概率比大误差出现的概率大。比大误差出现的概率大。对称性：正误差出现的概率对称性：正误差出现的概率与负误差出现的概率相等。与负误差出现的概率相等。抵偿性：随测量次数增加，抵偿性：随测量次数增加，算术平均值趋于零。算术平均值趋于零。正态分布的这三个特点与误差大样本下的统计特性相符。但在理论上，正态分布无界，这也是正态分布与实际误差有界性不相符之处。正态分布的某些正态分布的某些k k值的置信概率值的置信概率k3.33.02.582.01.961.6451
32、.00.6745p0.9990.99730.990.9540.950.900.6830.5 0.0010.00270.010.0460.050.100.3170.5正态分布在误差理论和实践中的地位正态分布在误差理论和实践中的地位(1)(1)经典误差理论都是建立在正态分布的基础上。凡经典误差理论都是建立在正态分布的基础上。凡是有是有3 3、5 5个以上的、差不多微小的、独立影响的个以上的、差不多微小的、独立影响的合成分布都趋近正态分布。这是被前人早已证明合成分布都趋近正态分布。这是被前人早已证明了的中心极限定理告诉我们的一个事实。了的中心极限定理告诉我们的一个事实。(2)(2)许多非正态分布可以
33、用正态分布来表示。许多非正态分布可以用正态分布来表示。(3)(3)正态分布的概率密度函数具有简单的数学形式和正态分布的概率密度函数具有简单的数学形式和优良的性质。优良的性质。(4)(4)也有不少的误差分布并不能简单地用正态分布来也有不少的误差分布并不能简单地用正态分布来描述。因而，现代误差理论及其实践需要进一步描述。因而，现代误差理论及其实践需要进一步研究非正态分布的问题。研究非正态分布的问题。 正态分布图正态分布图-0.682质控规则及其使用质控规则及其使用 告警（告警（1 2S） 失控（失控（1 3S） 漂移漂移 趋势趋势 告警（告警（1 12S2S）：当外部对照的）：当外部对照的S/CO
34、S/CO值超出值超出+ +2s2s范范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将可以继续检测需要进一步观察。若将1 12S2S做失做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。采用。 失控（失控（1 13S3S）：当外部对照的）：当外部对照的S/COS/CO值超出值超出+ +3s3s范范围时，系统处于失控状态，本次实验结果不围时，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部对照滴度下降造成。部对照滴度下降造成。 漂移：连续几
35、次（漂移：连续几次（3 3 5 5次）外部对照次）外部对照S/COS/CO值值都落在均值的一侧则称为位移，提示实验都落在均值的一侧则称为位移，提示实验条件发生了较大的变化。条件发生了较大的变化。 趋势：连续几次（趋势：连续几次（5 5 7 7次）外部对照次）外部对照S/COS/CO值值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由参数的缓慢改变引起。参数的缓慢改变引起。 出现下列情况时，应暂停检测查找原因：出现下列情况时，应暂停检测查找原因： 出现一次出现一次3s3s范围的变化范围的变化 连续两次出现同一方向连续两次出现同一方向2s2s范围的变化范围的变化 连续四次出
36、现同一方向的连续四次出现同一方向的1s1s范围的变化范围的变化 连续连续1010次结果都在次结果都在1s1s范围内，但落在均值线范围内，但落在均值线 的同一侧。的同一侧。 第三章第三章第七章第七章第三章第三章 HIV-1抗原检测抗原检测第四章第四章 HIV核酸检测核酸检测第五章第五章 HIV-1耐药检测耐药检测第六章第六章 CD4+和和CD8+T淋巴细胞检测淋巴细胞检测第七章第七章 HIV-1的分离培养的分离培养第八章第八章 艾滋病实验室生物安全艾滋病实验室生物安全HIV的生物危害的生物危害 第一类、第二类病原微生物统称为高致病第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。性病原微生物。
37、人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（HIV）属第二类病原微）属第二类病原微生物，是高致病性病原微生物。生物，是高致病性病原微生物。HIV相关检测的生物安全级别（一）相关检测的生物安全级别（一） HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检测和相关的免疫学检测应在符合测和相关的免疫学检测应在符合级生物安全实级生物安全实验室（验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。）要求的艾滋病检测实验室中进行。 HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工作，应在究工作及其它需要应用活病毒的研究
38、工作，应在级生物安全实验室（级生物安全实验室（BSL-3）中进行。）中进行。HIV相关检测的生物安全级别（二）相关检测的生物安全级别（二） HIV核酸提取和检测均应在符合核酸提取和检测均应在符合级生物安全实级生物安全实验室（验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。）要求的艾滋病检测实验室中进行。 HIV病毒株应保存在符合病毒株应保存在符合级生物安全实验室级生物安全实验室（BSL-3）要求的艾滋病实验室；）要求的艾滋病实验室；HIV阳性样品，阳性样品，包括全血、血清、血桨和其他组织（液）、核酸包括全血、血清、血桨和其他组织（液）、核酸提取物应保存在符合提取物应保存在符合BSL-2要求的艾
39、滋病实验室。要求的艾滋病实验室。生物安全相关法律法规及标准生物安全相关法律法规及标准 中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法 病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 医疗废弃物管理条例医疗废弃物管理条例 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定种或样本运输管理规定 人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录 实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则微生物和生物医学实验室生物安全通用准则实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求(GB 19489
40、-2008) 风险评估及风险控制风险评估及风险控制 实验室生物安全防护分级实验室生物安全防护分级 实验室设施和设备要求实验室设施和设备要求 管理要求管理要求BSL-2级实验室工作人员可能的暴露途径级实验室工作人员可能的暴露途径1.经口感染：在实验室吃东西、饮水或吸烟，用经口感染：在实验室吃东西、饮水或吸烟，用嘴吸液，经污染的手指或物品将病原体带入口嘴吸液，经污染的手指或物品将病原体带入口腔。腔。2.经皮肤感染：被针头或其它利器、玻璃等意外经皮肤感染：被针头或其它利器、玻璃等意外刺伤、割伤、刮擦伤。刺伤、割伤、刮擦伤。3.经眼睛感染：传染性物质溅入眼中；或经污染经眼睛感染：传染性物质溅入眼中；或
41、经污染的手指将病原体带入眼中。的手指将病原体带入眼中。4.经肺感染：经呼吸吸入含有病原体的气溶胶。经肺感染：经呼吸吸入含有病原体的气溶胶。BSL-2 实验室设施和设备要求（一）实验室设施和设备要求（一）1. 适用时，应符合本标准适用时，应符合本标准 6.1 的要求。的要求。2. 实验室主入口的门、放置生物安全柜实验实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关闭。间的门应可自动关闭。3. 实验室工作区域外应有存放大量的备用物实验室工作区域外应有存放大量的备用物品的条件。品的条件。4. 应在实验室工作区配备洗眼装置。应在实验室工作区配备洗眼装置。BSL-2 实验室设施和设备要求（二）实验室
42、设施和设备要求（二）5. 应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸汽灭菌器或其它适当的消毒设备，所配备汽灭菌器或其它适当的消毒设备，所配备的消毒设备应以风险评估为依据。的消毒设备应以风险评估为依据。6. 应在操作经空气传播致病性生物材料的实应在操作经空气传播致病性生物材料的实验间内配备生物安全柜验间内配备生物安全柜。BSL-2 实验室设施和设备要求（三）实验室设施和设备要求（三）7. 生物安全柜的安装和使用应遵循制造商的生物安全柜的安装和使用应遵循制造商的建议。如果生物安全柜的排风在室内循环，建议。如果生物安全柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使
43、用需室内应具备通风换气的条件；如果使用需要管道排风的生物安全柜，应通过独立于要管道排风的生物安全柜，应通过独立于建筑物公共通风系统的管道排出。建筑物公共通风系统的管道排出。8. 应有可靠的电力供应。必要时，重要设备应有可靠的电力供应。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备用电源。用电源。BSL1实验室设施和设备要求（一）实验室设施和设备要求（一）1. 实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。2. 应有防止节肢动物和啮齿动物进入的措施。应有防止节肢
44、动物和啮齿动物进入的措施。3. 应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处。处。4. 在实验室门口处应设存衣或挂衣装置，可在实验室门口处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与实验室工作服分开放置。将个人服装与实验室工作服分开放置。BSL1实验室设施和设备要求（二）实验室设施和设备要求（二）5.实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应平整、水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应平整、防滑，不应铺设地毯。防滑，不应铺设地毯。6.实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑
45、。7.实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。8.实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。备和物品。BSL1实验室设施和设备要求（三）实验室设施和设备要求（三）9.应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和急救。应不妨碍逃生和急救。10. 实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风，实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风
46、，应避免交叉污染。应避免交叉污染。11. 如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗。如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗。12. 实验室内应避免不必要的反光和强光。实验室内应避免不必要的反光和强光。BSL1实验室设施和设备要求（四）实验室设施和设备要求（四）13. 若操作刺激或腐蚀性物质，应在若操作刺激或腐蚀性物质，应在 30 米内设洗眼米内设洗眼设施，必要时应设紧急喷淋装置。设施，必要时应设紧急喷淋装置。14. 若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜。风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜。15. 若使用高毒
47、性、放射性等物质，应配备相应的若使用高毒性、放射性等物质，应配备相应的安全设施、设备和个体防护装备，应符合国家、安全设施、设备和个体防护装备，应符合国家、地方的相关规定和要求。地方的相关规定和要求。BSL1实验室设施和设备要求（五）实验室设施和设备要求（五）16. 若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施，若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施，应符合国家、地方的相关规定和要求。应符合国家、地方的相关规定和要求。17. 应设应急照明装置。应设应急照明装置。18. 应有足够的电力供应。应有足够的电力供应。19. 应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的
48、电源插座。应有可靠的接地系统，应在共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。BSL1实验室设施和设备要求（六）实验室设施和设备要求（六）20. 供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回流设计。流设计。21. 应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。故处理器材、急救器材等。22. 应配备适用的通讯设备。应配备适用的通讯设备。23. 必要时，应配备适当的消毒设备。必要时，应配备适当的消毒设备。BSL-2 实验室个人防护
49、基本要求（一）实验室个人防护基本要求（一） BSL-2实验室的工作人员进入实验室后应实验室的工作人员进入实验室后应穿工作服，根据操作内容确定是否需要外穿工作服，根据操作内容确定是否需要外加隔离服；加隔离服； 应戴帽子、口罩和一次性手套，必要时应应戴帽子、口罩和一次性手套，必要时应戴双层手套和防护眼镜。一次性手套不得戴双层手套和防护眼镜。一次性手套不得清洗和再次使用；清洗和再次使用；BSL-2实验室个人防护基本要求（二）实验室个人防护基本要求（二）当进行的感染性操作不可能在生物安全柜当进行的感染性操作不可能在生物安全柜内进行、必须采取外部操作时，为防止感内进行、必须采取外部操作时，为防止感染性材
50、料溅出或雾化危害，须使用面部保染性材料溅出或雾化危害，须使用面部保护装置，如护目镜；护装置，如护目镜；离开实验室时，工作服和任何防护物品必离开实验室时，工作服和任何防护物品必须脱下并留在实验室区域内，不得穿着防须脱下并留在实验室区域内，不得穿着防护用品进入办公区域或其它公共场合；护用品进入办公区域或其它公共场合；用过的防护用品及时清洁消毒。用过的防护用品及时清洁消毒。个人保健和防护（一）个人保健和防护（一）遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适于工作的情遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适于工作的情况，应暂停工作。况，应暂停工作。 皮肤的微小伤口、擦伤、皲裂等，应用防水敷料严皮肤的微小伤口、擦伤、皲
