1、葡葡 萄萄 球球 菌菌一、生物学特性一、生物学特性1、形态与染色:、形态与染色:球形、葡萄状排列、球形、葡萄状排列、G+2、抵抗力:、抵抗力:在无芽胞的细菌中抵抗力最强。在无芽胞的细菌中抵抗力最强。 80。C30min才被杀死才被杀死v干燥的脓汁、痰液存活干燥的脓汁、痰液存活2-3个月个月v对碱性染料敏感(对碱性染料敏感(1/101/20万单位龙胆紫)万单位龙胆紫)v易产生耐药性:易产生耐药性:青霉素类抗生素;青霉素类抗生素; 万古霉素万古霉素v(1)液体培养基(肉汤):呈均匀混浊生长)液体培养基(肉汤):呈均匀混浊生长v(2)普通固体培养基:油状菌落(金黄色、白色、柠檬色)普通固体培养基:油
2、状菌落(金黄色、白色、柠檬色)v(3)血平板:致病性葡萄球菌菌落周围有完全溶血环()血平板:致病性葡萄球菌菌落周围有完全溶血环(溶血)溶血)v4、抗原结构:、抗原结构:v 重要的主要是重要的主要是葡萄球菌葡萄球菌A蛋白蛋白(SPA):细细胞壁的一种表面蛋白。胞壁的一种表面蛋白。v 作用:作用:抗吞噬、损伤血小板、超敏反应等。抗吞噬、损伤血小板、超敏反应等。 SPA + IgG Fc 巨噬细胞不能结合巨噬细胞不能结合v参与协同凝集反应参与协同凝集反应 此试验简易、快速,临床上已广泛用此试验简易、快速,临床上已广泛用于多种微生物抗原的检测。于多种微生物抗原的检测。vSPA + IgG Fcv Ig
3、G Fab+抗原抗原 凝集块凝集块三种葡萄球菌的主要性状三种葡萄球菌的主要性状性性 状状 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素菌落色素 金黄色金黄色 白色白色 白色白色/柠檬色柠檬色血浆凝固酶血浆凝固酶 + - -溶血素溶血素 + - -SPA + - -致病性致病性 强强 较弱较弱 无无5、分类、分类二、致病性二、致病性(一)致病物质(一)致病物质1、血浆凝固酶:血浆凝固酶: 鉴定葡萄球菌有无致病性的重要标志。鉴定葡萄球菌有无致病性的重要标志。 2、葡萄球菌、葡萄球菌溶血素:血平板溶血素:血平板溶血环溶血环3、杀白细胞素、杀白细胞素4、肠毒
4、素:、肠毒素:刺激呕吐中枢刺激呕吐中枢5、表皮剥脱毒素:、表皮剥脱毒素:裂解棘状颗粒层裂解棘状颗粒层(细胞间(细胞间桥小体)桥小体)6、毒性休克综合症毒素、毒性休克综合症毒素1(TSST-1):):发热、发热、休克、脱屑性皮疹,多器官功能紊乱。休克、脱屑性皮疹,多器官功能紊乱。 致病物质总结:致病物质总结:v一酶:一酶: 血浆凝固酶血浆凝固酶 v二素:二素: 葡萄球菌溶血素葡萄球菌溶血素 杀白细胞素杀白细胞素v三毒素:肠毒素三毒素:肠毒素 表皮剥脱毒素表皮剥脱毒素 毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素-1 (二)所致疾病(二)所致疾病1、侵袭性疾病、侵袭性疾病v皮肤及软组织感染皮肤及软组织感染
5、:其脓汁:其脓汁黄黄而粘稠,化脓而粘稠,化脓灶多局限,与周围组织界限明显。灶多局限,与周围组织界限明显。v内脏器官感染:内脏器官感染:呼吸道、心内膜炎等呼吸道、心内膜炎等v尿路感染:尿路感染:大多由表皮葡萄球菌引起。大多由表皮葡萄球菌引起。v全身感染:全身感染:败血症、脓毒血症中金葡菌引起败血症、脓毒血症中金葡菌引起占首位。占首位。2、毒素性疾病、毒素性疾病v食物中毒食物中毒v假膜性肠炎:假膜性肠炎: 抗生素抗生素菌群失调性肠炎。菌群失调性肠炎。 假膜:假膜:炎性渗出物、坏死肠粘膜、细菌。炎性渗出物、坏死肠粘膜、细菌。 症状:症状:顽固性腹泻顽固性腹泻v烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症 皮肤弥
6、漫性红斑、水疱、脱落,无化脓皮肤弥漫性红斑、水疱、脱落,无化脓性炎症表现。性炎症表现。v毒性休克综合症毒性休克综合症(三)免疫性(三)免疫性v有一定的天然免疫力,只有当宿主局部或有一定的天然免疫力,只有当宿主局部或全身免疫力低下时才会发生感染。全身免疫力低下时才会发生感染。v病愈后可获得一定的免疫力,但不强,可病愈后可获得一定的免疫力,但不强,可再次发生感染。再次发生感染。(四)微生物学检查(四)微生物学检查标本:脓汁、血液、呕吐物、可疑食物、标本:脓汁、血液、呕吐物、可疑食物、 粪便粪便1、直接镜检、直接镜检2、分离培养和鉴定、分离培养和鉴定(五)防治原则(五)防治原则防防 注意注意消毒隔离
7、消毒隔离 注意注意个人卫生个人卫生 防止防止医源性感染医源性感染 防止防止耐药性产生耐药性产生治治 抗菌素抗菌素药敏试验药敏试验自身菌苗疗法自身菌苗疗法头部脓肿性毛囊周围炎疖:疖:一个毛囊及其所属皮脂腺的急性化脓性感染。一个毛囊及其所属皮脂腺的急性化脓性感染。痈:痈:痈是多个相邻的毛囊及其所属皮脂腺或汗痈是多个相邻的毛囊及其所属皮脂腺或汗 腺的急性化脓性感染,或由多个疖融合而成。腺的急性化脓性感染,或由多个疖融合而成。毛囊炎须疮脓疱疮金黄色葡萄球菌烫伤样皮炎综合征金黄色葡萄球菌烫伤样皮炎综合征抗原抗原协同试验协同试验金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌1 1、葡萄球菌致急性胃肠炎的致病因素是、葡萄球菌
8、致急性胃肠炎的致病因素是 A.A.杀白细胞素杀白细胞素 B.B.溶血毒素溶血毒素 C.C.肠毒素肠毒素 D.D.血浆凝固酶血浆凝固酶 E.E.红疹毒素红疹毒素 2 2、SPASPA在致病中的作用是在致病中的作用是 A.A.抑制吞噬细胞的吞噬作用抑制吞噬细胞的吞噬作用 B.B.因其有抗原性因其有抗原性 C.C.是一种毒素是一种毒素 D.D.能破坏吞噬细胞能破坏吞噬细胞 E.E.在菌体表面形成保护层在菌体表面形成保护层3 3、引起烫伤样皮肤综合症的微生物是、引起烫伤样皮肤综合症的微生物是 A.A.回归热螺旋体回归热螺旋体 B.B.衣原体衣原体 C.C.产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 D.D.肺炎球菌肺炎
9、球菌 E.E.金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 (一)生物学性状(一)生物学性状 G G大杆菌,有鞭毛,大杆菌,有鞭毛,芽胞芽胞呈圆形,位于呈圆形,位于菌体的顶端、呈菌体的顶端、呈鼓槌状。鼓槌状。 一、破伤风梭菌一、破伤风梭菌 (二)致病性:(二)致病性: 1 1、致病条件、致病条件厌氧伤口厌氧伤口 伤口窄而深(如刺伤),有泥土或异物伤口窄而深(如刺伤),有泥土或异物污染。污染。 大面积创伤、烧伤,坏死组织多,局部大面积创伤、烧伤,坏死组织多,局部组织缺血。组织缺血。 有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口。有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口。v2 2、致病物质:、致病物质: 破伤风痉挛毒素(外毒素)
10、破伤风痉挛毒素(外毒素)v3 3、所致疾病所致疾病:破伤风病破伤风病破伤风杆菌破伤风杆菌伤口局部生长,繁殖,产生伤口局部生长,繁殖,产生破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素 脑干、脊髓前角、与神经节苷酯结合脑干、脊髓前角、与神经节苷酯结合 封闭抑制性突触、阻止抑制性中间神封闭抑制性突触、阻止抑制性中间神经元和经元和RenshawRenshaw细胞释放抑制性介质细胞释放抑制性介质 骨骼肌兴奋性增强骨骼肌兴奋性增强 苦笑面容、牙关紧闭、角弓反张苦笑面容、牙关紧闭、角弓反张,呼吸困,呼吸困难,窒息死亡难,窒息死亡“锁口风锁口风” ” 早期典型表现早期典型表现 牙牙 关关 紧紧 闭闭苦苦 笑笑 面面 容容角弓
11、反张v典型的症状典型的症状苦笑面容苦笑面容角弓反张角弓反张其它其它免疫性免疫性v破伤风免疫属外毒素免疫,主要是抗毒素发破伤风免疫属外毒素免疫,主要是抗毒素发挥中和作用(毒素与中枢神经组织结合非常挥中和作用(毒素与中枢神经组织结合非常牢固,一旦结合,则抗毒素随之失效)牢固,一旦结合,则抗毒素随之失效)v病后不会获得牢固免疫力病后不会获得牢固免疫力v获得有效抗毒素的途径是人工免疫获得有效抗毒素的途径是人工免疫防治原则防治原则v防止创口厌氧微环境的形成防止创口厌氧微环境的形成v特异性预防:注射破伤风特异性预防:注射破伤风类毒素类毒素 三联疫苗三联疫苗 免疫程序:免疫程序:3 3、4 4、5 5月月
12、3 3次次 2 2、7 7岁加强岁加强 2 2次次 特殊情况特殊情况 1 1次次v紧急预防:注射紧急预防:注射破伤风抗毒素破伤风抗毒素 (tetanus antitoxintetanus antitoxin,TATTAT) 150015003000u im3000u im AST AST( )v特异性治疗:早期足量使用特异性治疗:早期足量使用抗毒素及抗生素。抗毒素及抗生素。二、产 气 荚 膜 梭 菌(C.perfringens)-气性坏疽 食物中毒 生物学性状-有助于疾病诊断有助于疾病诊断(一)形态学特点(一)形态学特点早期诊断价值早期诊断价值 深部创口渗液涂片染色,镜下特点深部创口渗液涂片染
13、色,镜下特点 1 1、两端钝圆及有荚膜的革兰阳性大杆菌、两端钝圆及有荚膜的革兰阳性大杆菌 2 2、白细胞甚少且形态不典型、白细胞甚少且形态不典型 3 3、并伴有其它杂菌、并伴有其它杂菌 (二)培养特性与生化反应(二)培养特性与生化反应确诊价值确诊价值 本菌的特点:本菌的特点: 1 1、“汹涌发酵现象汹涌发酵现象” ” 2 2、双层溶血环、双层溶血环汹涌发酵现象汹涌发酵现象 内层内层 外层外层 ( (毒素毒素) ) ( (毒素毒素) )双层溶血环双层溶血环u 芽胞在无糖培养基易形成芽胞在无糖培养基易形成(三)分型:按毒素分型(三)分型:按毒素分型 A A、B B、C C、D D、E E型型 A
14、A型型 - - 气性坏疽气性坏疽 C C、D D型型 - - 食物中毒食物中毒 毒素 生物学作用 毒素分型 A B C D E 主要毒素 (alpha) 卵磷脂酶, 增加血管通透性, 溶血和坏死作用 + + + + + (beta) 坏死作用 - + + - - (epsilon) 增加胃肠壁通透性 - - - + - (iota) 坏死作用,增加血管通透性 - - - - + 次要毒素 (delta) 溶血素 - + - - (theta) 溶血素,细胞毒素 + + + + (kappa) 胶原酶、明胶酶、坏死作用 + + + + + (lambda) 蛋白酶 - + - + + (mu)
15、透明质酸酶 + (nu) DNA 酶 + + 神经氨酸酶 改变神经节苷脂受体 + + + + + 其它 肠毒素 肠毒素、细胞毒素 + nt + + t + 大多菌株产生; 某些菌株产生;-不产生;nt 未研究 致病性与所致疾病致病性与所致疾病v气性坏疽气性坏疽1.1.严重创伤感染性疾病严重创伤感染性疾病2.2.致病条件同破伤风梭菌致病条件同破伤风梭菌3.3.细菌多侵入臀部、大腿、肩胛等肌肉较厚细菌多侵入臀部、大腿、肩胛等肌肉较厚部位部位 4. 4.主要致病物质为主要致病物质为毒素及多种侵袭酶毒素及多种侵袭酶 毒素具有卵磷脂酶活性毒素具有卵磷脂酶活性 5 5. .临床表现:临床表现: 组织水肿气
16、肿,触诊有捻发感组织水肿气肿,触诊有捻发感 肌肉坏死肌肉坏死 气性气性坏疽坏疽(四)(四) 微生物学检查法微生物学检查法 1 1、直接涂片染色镜检、直接涂片染色镜检 2 2、细菌学检测、细菌学检测 3 3、动物试验、动物试验 (五)防治原则(五)防治原则 1 1、预防:清创扩创、严格格离、灭菌、预防:清创扩创、严格格离、灭菌 2 2、治疗:气性坏疽多价抗毒素、治疗:气性坏疽多价抗毒素 高压氧舱高压氧舱 切除坏死组织切除坏死组织 青霉素等抗菌药物青霉素等抗菌药物炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 形态与染色形态与染色 炭疽杆菌芽孢(复红、炭疽杆菌芽孢(复红、美蓝染色美蓝染色 400400)炭疽芽孢杆菌炭疽
17、芽孢杆菌10001000(荚膜)(荚膜)G G+ +、短链状、竹节状、无鞭毛、短链状、竹节状、无鞭毛抵抗力抵抗力 芽胞对外界因素的抵抗力强:芽胞对外界因素的抵抗力强: 在室温干燥环境存活在室温干燥环境存活2020余年,在皮革中能生余年,在皮革中能生存数年。牧场一旦被污染,传染性可维持存数年。牧场一旦被污染,传染性可维持20203030年。煮沸年。煮沸10min10min,干热,干热140 3h140 3h才能破坏芽胞。才能破坏芽胞。芽胞对化学消毒剂的抵抗力也很强。芽胞对化学消毒剂的抵抗力也很强。v 对碘较敏感,对碘较敏感,1 1:25002500碘液经碘液经10 min10 min即可破即可破
18、坏芽胞。坏芽胞。v 本菌对青霉素、红霉素、氯霉素均敏感。本菌对青霉素、红霉素、氯霉素均敏感。 抗原结构抗原结构1 1荚膜抗原荚膜抗原 具有抗吞噬作用,与毒力有关。无种属具有抗吞噬作用,与毒力有关。无种属特异性。特异性。v2 2菌体抗原菌体抗原 为多糖抗原,由于为多糖抗原,由于耐热耐热AscoliAscoli热沉热沉淀反应。淀反应。v3 3芽胞抗原芽胞抗原 由芽胞的外膜、皮质等组成的芽胞特异由芽胞的外膜、皮质等组成的芽胞特异性抗原,具有免疫原性和血清学诊断价值。性抗原,具有免疫原性和血清学诊断价值。v4 4炭疽毒素炭疽毒素 由保护性抗原(由保护性抗原(PAPA)、致死因子()、致死因子(LFLF
19、)和水肿因子(和水肿因子(EFEF)三种蛋白质组成的复合物。)三种蛋白质组成的复合物。炭疽毒素具有抗吞噬作用和免疫原性。其相炭疽毒素具有抗吞噬作用和免疫原性。其相应抗体对宿主有一定的保护作用。应抗体对宿主有一定的保护作用。 致病物质致病物质 荚膜荚膜 具有抗吞噬作用,有利于细菌在机体组织内繁殖与具有抗吞噬作用,有利于细菌在机体组织内繁殖与扩散。扩散。炭疽毒素炭疽毒素 保护性抗原(保护性抗原(PAPA) 致死因子(致死因子(LFLF) 水肿因子(水肿因子(EFEF)毒性作用主要是毒性作用主要是直接损伤直接损伤微微血管的内皮细胞,使血管通血管的内皮细胞,使血管通透性增加,有效循环血量不透性增加,有
20、效循环血量不足,微循环灌注量明显减少,足,微循环灌注量明显减少,血液呈高凝状态,易形成感血液呈高凝状态,易形成感染性休克和弥散性血管内凝染性休克和弥散性血管内凝血(血(DICDIC)所致疾病所致疾病 主要通过接触病畜及其皮毛等:主要通过接触病畜及其皮毛等:皮肤炭疽:皮肤炭疽: 细菌由手、颈、颜面部小伤口侵入,最多见。细菌由手、颈、颜面部小伤口侵入,最多见。 经经121236h36h局部出现水泡、脓疱,最后坏死溃局部出现水泡、脓疱,最后坏死溃疡,形成特有的疡,形成特有的黑色焦痂黑色焦痂,故名炭疽,轻者,故名炭疽,轻者2 23 3周治愈,重者死于败血症。周治愈,重者死于败血症。 肠炭疽:肠炭疽:
21、食入未煮熟的病畜肉类、病畜奶或污染食入未煮熟的病畜肉类、病畜奶或污染食物引起。食物引起。 出现连续性呕吐、肠麻痹及血便,以全出现连续性呕吐、肠麻痹及血便,以全身中毒为主,身中毒为主,2 23d3d死于毒血症;死于毒血症;v肺炭疽:肺炭疽: 吸入含有大量病菌芽胞的尘埃可发生,吸入含有大量病菌芽胞的尘埃可发生,又称羊毛工人病。又称羊毛工人病。 表现呼吸道症状,很快出现全身中毒症表现呼吸道症状,很快出现全身中毒症状,状,2 23d3d死于中毒性休克。死于中毒性休克。免疫性免疫性 感染炭疽(包括隐性感染和显性感染)感染炭疽(包括隐性感染和显性感染)或接种疫苗后,均可获得持久的免疫力。或接种疫苗后,均可
22、获得持久的免疫力。 免疫作用主要与抗毒素及吞噬细胞的吞免疫作用主要与抗毒素及吞噬细胞的吞噬作用增强有关。噬作用增强有关。 直接涂片镜检:直接涂片镜检:见到有荚膜的典型竹节状见到有荚膜的典型竹节状G+G+大杆菌,大杆菌, 结合临床症状可作出初步诊断。结合临床症状可作出初步诊断。 分离培养分离培养 血琼脂平板和碳酸氢钠琼脂平板血琼脂平板和碳酸氢钠琼脂平板标本标本 观察菌落特征,并做青霉素串珠试验、动物试验、观察菌落特征,并做青霉素串珠试验、动物试验、 噬菌体裂解试验等鉴定。噬菌体裂解试验等鉴定。 AscoliAscoli试验试验 免疫荧光法检查病人的荚膜抗体,用免疫荧光法检查病人的荚膜抗体,用EL
23、ISAELISA检查保护性抗体。检查保护性抗体。微生物学检查法微生物学检查法 1 1、关键关键是加强家畜的管理及其炭疽病的是加强家畜的管理及其炭疽病的防治,对易感家畜进行预防接种。防治,对易感家畜进行预防接种。 病畜应病畜应严格隔离或处死深埋。严格隔离或处死深埋。 死畜死畜严禁剥皮或煮食,严禁剥皮或煮食,必须焚毁或深埋于必须焚毁或深埋于2m2m以下并加大量石灰。对可疑污染的动物皮毛、以下并加大量石灰。对可疑污染的动物皮毛、用具等必须彻底消毒处理。用具等必须彻底消毒处理。 防治原则防治原则 2 2、对易感人群预防接种、对易感人群预防接种 对易感者,主要是牧民、屠宰牲畜人员、对易感者,主要是牧民、屠宰牲畜人员、兽医、制革工人等应进行特异性预防,用炭兽医、制革工人等应进行特异性预防,用炭疽减毒活疫苗或炭疽纯化菌苗,皮上划痕、疽减毒活疫苗或炭疽纯化菌苗,皮上划痕、皮下注射或气溶胶吸入接种,一般接种后半皮下注射或气溶胶吸入接种,一般接种后半月产生免疫力,可维持月产生免疫力,可维持1 1年。年。v 3 3、使用抗生素、使用抗生素 治疗炭疽病以治疗炭疽病以青霉素青霉素为首选,四环素、为首选,四环素、氯霉素、强力霉素、磺胺药物等也有效。也氯霉素、强力霉素、磺胺药物等也有效。也可采用抗生素、磺胺药物及抗炭疽血清的综可采用抗生素、磺胺药物及抗炭疽血清的综合疗法。合疗法。