1、一、基因工程的概念 按照人们的意愿,把一种生物的按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状里,定向地改造生物的遗传性状 1、怎样才能将需要的基因从一段、怎样才能将需要的基因从一段DNA上上取下来呢?取下来呢?2、怎样才能将取下来的基因拼接到其它、怎样才能将取下来的基因拼接到其它DNA上?上?3、怎样才能将基因导入到受体细胞呢?、怎样才能将基因导入到受体细胞呢?思考:如此细微的基因?思考:如此细微的基因?二、基因操作的工具1、基因的剪刀、基因的剪刀限制性核酸内切酶(限制性
2、核酸内切酶(限制酶限制酶)(1)只能识别一种特定的核苷酸序列(2)只能在特定的位点上切割DNA分子磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键末端?G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割G C T T A A A A T T C G 把两种来源不同的把两种来源不同的DNADNA用同一种限制酶切割用同一种限制酶切割2、基因的针线DNA连接酶位置:磷酸二酯键思考:与DNA聚合酶的区别3、基因的运载工具运载体 (1)(1)质粒质粒 基因工程最常用的
3、运载体是质粒,最常用的基因工程最常用的运载体是质粒,最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。质粒存在于细菌、质粒是大肠杆菌的质粒。质粒存在于细菌、酵母菌等生物中,是细胞染色体、拟核外能酵母菌等生物中,是细胞染色体、拟核外能够进行自主复制的很小的环状够进行自主复制的很小的环状DNADNA分子。分子。 (2)(2)噬菌体和某些动植物病毒噬菌体和某些动植物病毒(1)能在宿主细胞中复制并稳定保存(2)具有多个限制酶的切点(3)具有某些标记基因,便于筛选作为运载体的条件(1)提取目的基因(2)目的基因与运载体结合(3)目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测和表达(三)基因工程的步骤.mRNADNA逆转录目的基因的mRNA单链DNA双链DNA逆转录合成(目的基因)蛋白质mRNADNA推测推测DNA合成仪抗虫棉抗虫棉抗抗CMVCMV甜椒甜椒基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因生长快、肉质好的转基因鱼鱼( (中国中国) )乳汁中含有人生长激素的乳汁中含有人生长激素的转基因牛转基因牛( (阿根廷阿根廷) )水母