1、2022-5-261医学分子生物学Medical Molecular Biology 第一章第一章 绪论绪论 Chapter 1 IntroductionChapter 1 Introduction2022-5-2622022-5-2632.2.分子生物学的研究内容分子生物学的研究内容1.1.分子生物学的定义分子生物学的定义 3.3.分子生物学与生物技术分子生物学与生物技术4.4.分子生物学与医学分子生物学与医学内容概要内容概要2022-5-264 一、分子生物学的定义2022-5-265从整体水平到分子水平示意图从整体水平到分子水平示意图分子水平分子水平细胞水平细胞水平整体水平整体水平 生命
2、科学的发展过程生命科学的发展过程：2022-5-266 生命科学的研究内容：生命科学的研究内容： 生命物质的结构与功能，生物与生物之生命物质的结构与功能，生物与生物之间及生物与环境之间相互关系。间及生物与环境之间相互关系。 生命科学的前沿领域：生命科学的前沿领域： 分子生物学分子生物学、分子遗传学、细胞生物学、分子遗传学、细胞生物学、发育生物学和神经生物学，而分子生物学是发育生物学和神经生物学，而分子生物学是生命科学的核心前沿。生命科学的核心前沿。 生命科学是研究生命现象和生命活动生命科学是研究生命现象和生命活动规律的一门综合性学科。规律的一门综合性学科。2022-5-267 分子生物学分子生
3、物学从分子水平从分子水平研究生命现象及其规律的一门新研究生命现象及其规律的一门新兴学科。兴学科。 它是生命科学中发展最快并它是生命科学中发展最快并且与其他学科广泛交叉和渗透的且与其他学科广泛交叉和渗透的前沿领域。前沿领域。2022-5-268 由于分子生物学以其崭新的观由于分子生物学以其崭新的观点和技术对其他学科的全面渗透，点和技术对其他学科的全面渗透，推动了细胞生物学、遗传学、发育推动了细胞生物学、遗传学、发育生物学和神经生物学向分子水平的生物学和神经生物学向分子水平的方向发展，使这些学科已不再是原方向发展，使这些学科已不再是原来的经典学科，而成为生命科学的来的经典学科，而成为生命科学的前沿
4、。前沿。2022-5-269 1950 1950年，年，AstburyAstbury在一次讲演中首在一次讲演中首先使用先使用 “ “分子生物学分子生物学”这一术语这一术语, , 用用以说明它是研究生物大分子的化学和以说明它是研究生物大分子的化学和物理学结构。物理学结构。 现代分子生物学的建立2022-5-2610DNA的X光衍射照片1952年5月拍摄罗沙琳德弗兰克林（Rosalind Franklin，19201958）英国 DNA双螺旋结构模型的建立2022-5-2611DNA双螺旋结构模型的建立诺贝尔医学与生理学奖 1962年2022-5-2612Watson JDWatson JD和和C
5、rick FHCCrick FHC的的“双螺旋结构双螺旋结构模型模型” ” 启动了分子生物学及重组启动了分子生物学及重组DNADNA技技术的发展。确立了核酸作为信息分子的术的发展。确立了核酸作为信息分子的结构基础；提出了碱基配对是核酸复制、结构基础；提出了碱基配对是核酸复制、遗传信息传递的基本方式，最终确定了遗传信息传递的基本方式，最终确定了核酸是遗传的物质基础。核酸是遗传的物质基础。2022-5-2613 分子生物学技术：分子生物学技术： 例如：例如：DNADNA及及RNARNA的印迹转移、核酸分子杂的印迹转移、核酸分子杂交、基因克隆、基因体外扩增、交、基因克隆、基因体外扩增、DNA DNA
6、 测序等，测序等，形成了独特的重组形成了独特的重组DNADNA技术及其相关技术。技术及其相关技术。 由生物化学、生物物理学、细胞生物学、由生物化学、生物物理学、细胞生物学、遗传学、应用微生物学及免疫学等遗传学、应用微生物学及免疫学等各专业技术各专业技术的渗透、综合的渗透、综合而成，而成，并在此基础上发明和创造并在此基础上发明和创造了一系列新的技术。了一系列新的技术。2022-5-2614分子克隆分子克隆 (molecular cloning) 重组重组DNA (recombinant DNA)技术是近技术是近代分子生物学技术的核心。代分子生物学技术的核心。 基因操作基因操作 (gene man
7、ipulation) 基因克隆基因克隆 (gene cloning)基因工程基因工程 (gene engineering)2022-5-2615分子医学分子医学（molecular medicinemolecular medicine）： 由于分子生物学渗透进入生物学由于分子生物学渗透进入生物学和医学和医学的每一分支领域，全面推动了生命科学和医的每一分支领域，全面推动了生命科学和医学的各个方面的发展，如疾病的发病机理研学的各个方面的发展，如疾病的发病机理研究、疾病的诊断和治疗，使医学进入了一个究、疾病的诊断和治疗，使医学进入了一个崭新的时代。崭新的时代。 2022-5-2616 遗传性状改变或
8、治疗疾病遗传性状改变或治疗疾病 可能从某一生物体的基因组中分离出某一特定可能从某一生物体的基因组中分离出某一特定功能基因，导入到另一种生物的基因组。功能基因，导入到另一种生物的基因组。 基因工程和蛋白质工程基因工程和蛋白质工程 外源外源DNADNA与载体在体外进行连接，或在基因水与载体在体外进行连接，或在基因水平上进行有目的的定向诱变。平上进行有目的的定向诱变。 生物技术进入了分子水平，基因（或生物技术进入了分子水平，基因（或DNADNA）也）也进入了社会生产和人们生活的方方面面。进入了社会生产和人们生活的方方面面。 2022-5-2617 按照自己的意愿和社会需求改造基因，制备按照自己的意愿
9、和社会需求改造基因，制备各种具有生物活性的大分子。各种具有生物活性的大分子。 DNADNA、RNA RNA 和蛋白质成为人类治病、防病的一和蛋白质成为人类治病、防病的一类新型的生物制品或药物。类新型的生物制品或药物。 生物技术在农业上用于快速育种，改良品种，生物技术在农业上用于快速育种，改良品种，提高农作物的产量、质量以及抗病虫害，抗干旱提高农作物的产量、质量以及抗病虫害，抗干旱等能力。等能力。2022-5-2618二、分子生物学的研究内容二、分子生物学的研究内容2022-5-2619分子生物学的分子生物学的主要主要研究内容研究内容 生物大分子的生物大分子的结构、功能，生物大分结构、功能，生物
10、大分子之间的相互作用及其与疾病发生、发展子之间的相互作用及其与疾病发生、发展的关系。的关系。2022-5-2620 核酸的分子生物学主要研究核酸的结构核酸的分子生物学主要研究核酸的结构及其功能。核酸的主要作用是携带和传递遗及其功能。核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此形成了分子遗传学。传信息，因此形成了分子遗传学。（一）（一） 核酸分子生物学：核酸分子生物学： 分子遗传学：分子遗传学：形成了比较完整的理论体形成了比较完整的理论体系和研究技术，它是目前分子生物学中内容系和研究技术，它是目前分子生物学中内容最丰富、研究最活跃的一个领域。最丰富、研究最活跃的一个领域。2022-5-26211.
11、1. 核酸的发现 早在1868年，Miescher从脓细胞中分离出细胞核，用稀碱抽提再加入酸，得到了一种含氮和磷特别丰富的物质 ， 当 时 称 其 为 核 素（nuclein）。 1872年，他又在鲑鱼精子细胞核中发现了大量的这类物质。由于这类物质都是从细胞核中提取出来的，而且又是酸性，故称其为核酸（nucleic acid）。Friedeich Miescher 2022-5-2622 自核酸被发现以来的相当长时期内，自核酸被发现以来的相当长时期内，对它的生物学功能几乎毫无所知。对它的生物学功能几乎毫无所知。 1928年年( (Frederick GriffithFrederick Grif
12、fith) )以后，核酸功能以后，核酸功能研究取得了重大进展。研究取得了重大进展。2022-5-2623In 1928, an experiment of Frederick Griffith using pneumonia bacteria and mice2022-5-2624 1952 1952年，年， Hershey ADHershey AD和和 Chase MChase M用用 3535S S和和 3232p p分别标记分别标记T2T2噬菌体的蛋白质和核酸，噬菌体的蛋白质和核酸，感染大肠杆菌。在大肠杆菌细胞内增殖的感染大肠杆菌。在大肠杆菌细胞内增殖的噬菌体中都只含有噬菌体中都只含有3
13、232P P而不含而不含3535S, S, 这表明噬这表明噬菌体的增殖直接取决于菌体的增殖直接取决于DNADNA而不是蛋白质。而不是蛋白质。2. 核酸功能研究的重大进展核酸功能研究的重大进展 1944 1944年，年，Avery OTAvery OT等首次证明肺炎双等首次证明肺炎双球菌的球菌的DNADNA与其转化和遗传有关。与其转化和遗传有关。 2022-5-2625In 1952, Alfred Hershey and Martha Chase did an experiment which is so significant, it has been nicknamed the “Hers
14、hey-Chase Experiment”. 2022-5-2626In 1952, Alfred Hershey and Martha Chase did an experiment which is so significant, it has been nicknamed the “Hershey-Chase Experiment”. 2022-5-2627The Meselson-Stahl experiment （1958）showed that DNA is replicated semi-conservativelyDNA semi-conservative duplicatio
15、n 3. DNA复制模型2022-5-2628DNA复制模型2022-5-2629 1961年，年，Nirenberg、Ochoa以及以及Khorana等几等几组科学家的共同努力，破译了组科学家的共同努力，破译了RNA上编码合成蛋白质上编码合成蛋白质的遗传密码，证明的遗传密码，证明DNA分子中的遗传信息是以三联密分子中的遗传信息是以三联密码的形式贮存。码的形式贮存。 遗传密码在生物界具有通用性。遗传密码在生物界具有通用性。2022-5-26302022-5-26312022-5-26324. 中心法则的建立中心法则的建立 19581958年，年，CrickCrick提出了分子生物学的中提出了分
16、子生物学的中心法则（心法则（central dogmacentral dogma）。）。 中心法则是分子遗传学基本理论体系中心法则是分子遗传学基本理论体系。2022-5-26332022-5-2634 19701970年，年，TeminTemin和和BaltimoreBaltimore从鸡从鸡RousRous肉瘤病毒肉瘤病毒(Rous sarcoma virus(Rous sarcoma virus，RSV)RSV)颗粒中发现了以颗粒中发现了以RNARNA为模为模板合成板合成DNADNA的逆转录酶，进一步补充了遗传信息传递的逆转录酶，进一步补充了遗传信息传递的中心法则。的中心法则。 2022-
17、5-26355DNA序列分析技术： 双脱氧末端终双脱氧末端终止法止法: :19771977年，年，剑 桥 大 学剑 桥 大 学Sanger F等等发发明。明。 化学裂解法化学裂解法: : 美 国美 国 M a x a m I和和Gilbert W发明。发明。2022-5-26362022-5-2637 对对DNA片段的一级结构进行分析，导致一片段的一级结构进行分析，导致一系列重大发现：系列重大发现：4. 4. 从从cDNAcDNA序列推导出蛋白质的一级结构；序列推导出蛋白质的一级结构； 1. 1. 断裂基因断裂基因(split gene)(split gene)的发现，证明真核细胞的的发现，证
18、明真核细胞的 基因不是连续的基因不是连续的DNADNA片段；片段；2. 2. 前体前体mRNAmRNA分子的拼接，去除内含子序列，连接成分子的拼接，去除内含子序列，连接成 成熟成熟mRNAmRNA；3. 3. 发现单基因遗传病的基因结构的变异；发现单基因遗传病的基因结构的变异；5. 5. 根据根据DNADNA序列合成基因，并与载体连接，使之在细序列合成基因，并与载体连接，使之在细 菌中表达，合成活性蛋白质，开创了基因工程。菌中表达，合成活性蛋白质，开创了基因工程。2022-5-26386. 6. 基因的人工合成基因的人工合成 19781978年体外首次成功地人工合成第一个完年体外首次成功地人工
19、合成第一个完整基因。整基因。 直接证实了直接证实了Mendel GMendel G在在18651865年发现的遗传年发现的遗传因子因子( (基因基因) )的化学本质，就是的化学本质，就是 DNADNA分子。分子。 DNADNA分子是多种多样生命现象的物质基础。分子是多种多样生命现象的物质基础。2022-5-26397.基因组研究的进展 基因组（基因组（genomegenome）: : 一个物种遗传信息的总和。一个物种遗传信息的总和。 基因结构与功能研究已经从单个基因发展到生物体整个基因结构与功能研究已经从单个基因发展到生物体整个基因组。基因组研究已从简单的低等生物到真核生物，从基因组。基因组研
20、究已从简单的低等生物到真核生物，从多细胞生物到人类。多细胞生物到人类。2022-5-2640 19771977年年:Sanger:Sanger测定了测定了X174 DNAX174 DNA全部全部5375bp5375bp核苷酸序列；核苷酸序列； 19781978年年:Fiers:Fiers等测出环状等测出环状SV40 DNASV40 DNA全部全部5243bp5243bp核苷酸序列；核苷酸序列； 1980 1980年代年代:噬菌体噬菌体DNADNA全部全部4850248502碱基对的序列被测出；一些碱基对的序列被测出；一些 小的病毒包括乙型肝炎病毒、艾滋病毒等基因组的全小的病毒包括乙型肝炎病毒、
21、艾滋病毒等基因组的全 序列也陆续被测定序列也陆续被测定; ; 1996 1996年底年底: :大肠杆菌基因组大肠杆菌基因组DNADNA的全部序列长的全部序列长4 410106 6碱基对；碱基对； 19961996年底年底: :完成了真核生物酵母（完成了真核生物酵母（Saccharomyces erevisiaeSaccharomyces erevisiae） 的基因组全序列测定；的基因组全序列测定；19981998年底年底: :长达长达100Mb100Mb的线虫的基因组序列测定也已全部完成。的线虫的基因组序列测定也已全部完成。 这是第一个完成的多细胞生物体的全基因组序列测定。这是第一个完成的多
22、细胞生物体的全基因组序列测定。2022-5-2641 人类基因组计划（人类基因组计划（human genome project, HGPhuman genome project, HGP） 美国科学家、诺贝尔奖获得者美国科学家、诺贝尔奖获得者Dulbecco RDulbecco R于于19861986年在美国年在美国 Science Science 杂志上发表的短文中率先提出，并认为这是加快癌杂志上发表的短文中率先提出，并认为这是加快癌症研究进程的一条有效途径。症研究进程的一条有效途径。 主要的目标是绘制遗传连锁图、物理图、转录图，并完成人主要的目标是绘制遗传连锁图、物理图、转录图，并完成人类
23、基因组全部核苷酸序列测定。测出人体细胞中类基因组全部核苷酸序列测定。测出人体细胞中2424条染色体上全条染色体上全部部3030亿对核苷酸的序列，把所有人类基因都明确定位在染色体上，亿对核苷酸的序列，把所有人类基因都明确定位在染色体上，破译人类的全部遗传信息。破译人类的全部遗传信息。 HGPHGP是人类自然科学史上与曼哈顿原子弹计划和阿波罗登月计是人类自然科学史上与曼哈顿原子弹计划和阿波罗登月计划相媲美的伟大科学工程。划相媲美的伟大科学工程。2022-5-2642 研究结果表明，人类基因数量仅有研究结果表明，人类基因数量仅有3 3万个左右，比万个左右，比此前估计的要少得多。通过研究还发现男女可能
24、存在巨此前估计的要少得多。通过研究还发现男女可能存在巨大遗传差异，男性染色体减数分裂的突变率是女性的两大遗传差异，男性染色体减数分裂的突变率是女性的两倍。在已经分析的序列中，找到很多与遗传病有关的基倍。在已经分析的序列中，找到很多与遗传病有关的基因，包括乳腺癌、遗传性耳聋、中风、癫痫症、糖尿病因，包括乳腺癌、遗传性耳聋、中风、癫痫症、糖尿病和各种骨骼异常的基因。和各种骨骼异常的基因。2022-5-2643 8.基因表达调控机制的研究 19611961年，年，JacobJacob和和MonodMonod提出操纵子学说，提出操纵子学说，认识了原核生物基因表达调控的一些规律。认识了原核生物基因表达调
25、控的一些规律。 80 80年代开始，人们逐步认识到年代开始，人们逐步认识到真核基因组真核基因组结构和调控的复杂性。结构和调控的复杂性。 真核基因的真核基因的顺式调控元件与反式作用因子、顺式调控元件与反式作用因子、核酸与蛋白质间的分子识别与相互作用。核酸与蛋白质间的分子识别与相互作用。小分子反义小分子反义RNARNA、核酶、核酶、siRNAsiRNA等。等。2022-5-2644（二）蛋白质分子生物学：（二）蛋白质分子生物学： DNA DNA 储存生命活动的各种信息。储存生命活动的各种信息。 蛋白质蛋白质生命活动的执行者生命活动的执行者。 蛋白质的分子生物学主要研究蛋白质蛋白质的分子生物学主要研
26、究蛋白质的结构与功能。的结构与功能。2022-5-2645 蛋白质结构与功能的研究进展蛋白质结构与功能的研究进展 1956 1956年，年，AnfinsenAnfinsen和和 WhiteWhite根据对酶蛋白的变性和复根据对酶蛋白的变性和复性实验，提出性实验，提出蛋白质的三维空间结构是由其氨基酸序列来蛋白质的三维空间结构是由其氨基酸序列来确定的确定的。 1958 1958年，年，IngramIngram证明正常的血红蛋白与镰状细胞溶血证明正常的血红蛋白与镰状细胞溶血症病人的血红蛋白之间，在其亚基的肽链上仅有一个氨基症病人的血红蛋白之间，在其亚基的肽链上仅有一个氨基酸残基的差别。酸残基的差别。
27、 1969 1969年，年，WeberWeber开始应用开始应用 SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量；定蛋白质分子量；2020世纪世纪6060年代先后分析了血红蛋白、核年代先后分析了血红蛋白、核糖核酸酶糖核酸酶A A等一批蛋白质的一级结构。等一批蛋白质的一级结构。 中国科学家在中国科学家在19651965年人工合成了牛胰岛素；年人工合成了牛胰岛素； 19731973年又年又用用1.8A X1.8A X射线衍射分析法测定了牛胰岛素的空间结构。射线衍射分析法测定了牛胰岛素的空间结构。 2022-5-2646 构成生物体的每一个细胞的分裂与分化及其构成生物体的每一
28、个细胞的分裂与分化及其他各种生物学功能，均依赖于外界环境所产生的他各种生物学功能，均依赖于外界环境所产生的各种信号。在这些外源信号的刺激下，细胞可以各种信号。在这些外源信号的刺激下，细胞可以将这些信号通过第二信使转变成一系列的生物化将这些信号通过第二信使转变成一系列的生物化学变化。学变化。 主要研究内容主要研究内容： 研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。阐明这些变化的分子机制，明确每一条信号转导阐明这些变化的分子机制，明确每一条信号转导途径及参与该途径的所有分子间的相互作用和调途径及参与该途径的所有分子间的相互作用和调节方式。节方式。（三）（三） 细胞信
29、号转导机制研究细胞信号转导机制研究2022-5-2647 19651965年又提出第二信使学说。年又提出第二信使学说。 19771977年，年，RossRoss等用重组实验证实等用重组实验证实G G蛋白的存在蛋白的存在和功能，将和功能，将G G蛋白与腺苷环化酶的作用联系起来。蛋白与腺苷环化酶的作用联系起来。 癌基因、抑癌基因和酪氨酸蛋白激酶的发现及癌基因、抑癌基因和酪氨酸蛋白激酶的发现及其结构与功能的深入研究，使得细胞信号转导的研其结构与功能的深入研究，使得细胞信号转导的研究有了很大的进展。究有了很大的进展。 19571957年，年，SutherlandSutherland发现了发现了cAMP
30、cAMP。 2022-5-26482022-5-2649三、分子生物学与生物技术三、分子生物学与生物技术2022-5-2650生物技术的定义： 按照美国生物技术产业组织下的按照美国生物技术产业组织下的定义，生物技术定义，生物技术(biotechnology)(biotechnology)是是指指“利用细胞和分子过程来利用细胞和分子过程来解决问解决问题或制造产品题或制造产品的技术的技术” ” 。2022-5-2651古代生物技术 酿酒、制醋、制酪、面包发酵； 人畜排泄物循环利用； 动、植物杂交育种，嫁接等。2022-5-2652 2020世纪以来，分子生物学的发展，世纪以来，分子生物学的发展，产
31、生了重组产生了重组DNADNA技术，推动生物技术深技术，推动生物技术深入发展，而导致现代生物技术作为一入发展，而导致现代生物技术作为一门交叉学科的产生。转基因细胞、转门交叉学科的产生。转基因细胞、转基因动物和基因剔除动物的出现，是基因动物和基因剔除动物的出现，是现代分子生物学技术在生物技术领域现代分子生物学技术在生物技术领域的应用与发展。的应用与发展。2022-5-2653 现代生物技术现代生物技术主要包括两个方面：基因主要包括两个方面：基因工程和蛋白质（酶）工程。工程和蛋白质（酶）工程。 应用现代分子生物学、微生物学、细应用现代分子生物学、微生物学、细胞生物学、生物化学和生物加工等学科的胞生
32、物学、生物化学和生物加工等学科的理论和技术，并相互交叉和渗透。现代生理论和技术，并相互交叉和渗透。现代生物技术是分子生物学技术在生物加工过程物技术是分子生物学技术在生物加工过程中的应用。中的应用。2022-5-2654 1972 1972年，年，SV40SV40病毒病毒DNADNA片段转化大肠杆菌，使本来在真片段转化大肠杆菌，使本来在真核细胞中合成的蛋白质能在细菌中合成，核细胞中合成的蛋白质能在细菌中合成，打破了种属界限打破了种属界限，开创了利用基因工程技术在原核细胞中表达真核基因产物开创了利用基因工程技术在原核细胞中表达真核基因产物的时代。的时代。 人工合成的生长激素释放抑制因子人工合成的生
33、长激素释放抑制因子1414肽的肽的DNADNA片段与质片段与质粒重组，在大肠杆菌中合成得到这种粒重组，在大肠杆菌中合成得到这种1414肽。肽。 19781978年，人生长激素年，人生长激素191191肽在大肠杆菌中表达成功。肽在大肠杆菌中表达成功。 19791979年，人工合成的人胰岛素基因经过重组后导入大肠年，人工合成的人胰岛素基因经过重组后导入大肠杆菌，在大肠杆菌中合成了人胰岛素。杆菌，在大肠杆菌中合成了人胰岛素。 运用基因定向诱变技术和重组运用基因定向诱变技术和重组DNADNA技术改造酶或蛋白质技术改造酶或蛋白质的结构，使其具有更高的效能和更好的稳定性，以满足人的结构，使其具有更高的效能
34、和更好的稳定性，以满足人类社会的需求。类社会的需求。生物技术进展2022-5-2655 用转基因动物获取治疗人类疾用转基因动物获取治疗人类疾病的重要蛋白质。如，导入了凝血病的重要蛋白质。如，导入了凝血因子因子基因的转基因绵羊分泌的乳基因的转基因绵羊分泌的乳汁中含有丰富的凝血因子汁中含有丰富的凝血因子，能有，能有效地用于血友病的治疗。效地用于血友病的治疗。 转基因动物和基因剔除动物转基因动物和基因剔除动物2022-5-2656 在转基因植物方面取得重大进在转基因植物方面取得重大进展，比普通西红柿保鲜时间更长的展，比普通西红柿保鲜时间更长的转基因西红柿投放市场。转基因西红柿投放市场。 转基因玉米、
35、转基因大豆相继转基因玉米、转基因大豆相继投入商品生产。投入商品生产。 我国科学家将蛋白酶抑制剂基我国科学家将蛋白酶抑制剂基因转入棉花，获得抗棉铃虫的棉花因转入棉花，获得抗棉铃虫的棉花株。株。 转基因植物和转基因食品转基因植物和转基因食品2022-5-2657四、分子生物学与医学四、分子生物学与医学2022-5-2658 1.1.从从机体表型机体表型来认识疾病来认识疾病, ,即根据现象和检即根据现象和检查所获知的症状与体征。查所获知的症状与体征。 2.2.从从组织细胞的病理、生理变化组织细胞的病理、生理变化来分析和来分析和诊断疾病。诊断疾病。 使人类积累了十分丰富的医学资料。但都使人类积累了十分
36、丰富的医学资料。但都不能从本质上真正认识疾病发生的根本原因，更不能从本质上真正认识疾病发生的根本原因，更不能从根本上治愈疾病和阐明疾病的发病机制。不能从根本上治愈疾病和阐明疾病的发病机制。人类对疾病的认识：2022-5-2659 现代现代分子生物学已经对医学的各个领域产分子生物学已经对医学的各个领域产生了全面而深刻的影响，并逐步形成了一系列生了全面而深刻的影响，并逐步形成了一系列以分子冠名的交叉学科。以分子冠名的交叉学科。 如如分子遗传学、分子免疫学、分子病理分子遗传学、分子免疫学、分子病理学、分子血液学、分子肿瘤学、分子病毒学、学、分子血液学、分子肿瘤学、分子病毒学、分子流行病学分子流行病学
37、等。等。 由于生命本质的高度一致性，由于生命本质的高度一致性，使得这些使得这些学科可以使用同一套理论、同一套技术，来解学科可以使用同一套理论、同一套技术，来解释和研究不同的病理、生理现象，甚至治疗不释和研究不同的病理、生理现象，甚至治疗不同的疾病同的疾病。2022-5-2660 由于分子生物学的发展和渗透，各种生理和由于分子生物学的发展和渗透，各种生理和病理现象都可能从基因水平找到答案。病理现象都可能从基因水平找到答案。 肿瘤发生与癌基因和肿瘤抑制基因。肿瘤发生与癌基因和肿瘤抑制基因。 表明生物机体各种各样的生命现象及生理和表明生物机体各种各样的生命现象及生理和病理表现，几乎无一不与基因有关。
38、病理表现，几乎无一不与基因有关。 药物的耐药性与抗药基因。药物的耐药性与抗药基因。 2022-5-2661 由于分子生物学在医学上的不断渗透由于分子生物学在医学上的不断渗透和影响，导致基础医学和临床医学从基和影响，导致基础医学和临床医学从基因水平来探讨多种多样的生命现象，基因水平来探讨多种多样的生命现象，基因诊断和基因治疗的开展是分子生物学因诊断和基因治疗的开展是分子生物学在医学领域中应用的典范。在医学领域中应用的典范。2022-5-2662（一）分子生物学在基础医学中的应用 基础医学是整个医学科学的基石，基础医学是整个医学科学的基石，分子生物学不仅是生命科学的前沿，也分子生物学不仅是生命科学
39、的前沿，也是整个基础医学的前沿。今后总的发展是整个基础医学的前沿。今后总的发展趋势仍然是分子生物学向医学，特别是趋势仍然是分子生物学向医学，特别是基础医学广泛交叉、渗透和影响。基础医学广泛交叉、渗透和影响。2022-5-2663 1.1.对人的生理功能和疾病机制的研究对人的生理功能和疾病机制的研究, , 已由整体水平、器官水平进入到细胞和已由整体水平、器官水平进入到细胞和分子水平；对生命的了解，由表面现象分子水平；对生命的了解，由表面现象观察进入了本质的探讨。观察进入了本质的探讨。2022-5-2664 2.2.基础医学中不断出现新的边缘学科，基础医学中不断出现新的边缘学科，如如分子分子生理学
40、、生理学、分子分子药理学、药理学、分子分子病病理学、理学、分子分子遗传学、遗传学、分子分子免疫学、免疫学、分分子子病毒学、病毒学、分子分子肿瘤学、肿瘤学、分子分子神经生神经生物学等等。物学等等。 2022-5-2665 3. 3.传统上按传统上按“形态形态”和和“机能机能”来进来进行基础医学各个学科划分的界限已日行基础医学各个学科划分的界限已日益模糊益模糊, ,出现了各学科在分子水平上进出现了各学科在分子水平上进行整合的趋势。行整合的趋势。2022-5-2666 4.4.开始改变传统生物学的研究方开始改变传统生物学的研究方法和策略，形成了直接从基因水法和策略，形成了直接从基因水平入手平入手,
41、, 研究基因型和表型的相研究基因型和表型的相互关系。互关系。2022-5-2667（二）分子生物学在病理学中的应用 由于分子生物学向病理学的渗透由于分子生物学向病理学的渗透, ,出现出现“分子病理分子病理学学”这样一个新学科。这样一个新学科。 分子生物学理论和技术彻底改变了病理学和实分子生物学理论和技术彻底改变了病理学和实验医学的面貌验医学的面貌, ,开始从基因水平来进行疾病诊断。应开始从基因水平来进行疾病诊断。应用于分子病理学的基因检测技术，揭示了疾病发生的用于分子病理学的基因检测技术，揭示了疾病发生的分子事件。分子事件。2022-5-2668（三）基因诊断 由于重组由于重组DNADNA技术
42、的问世技术的问世, ,人们对于许多疾病人们对于许多疾病的认识的认识, ,已经深入到基因水平。一种从基因水平对已经深入到基因水平。一种从基因水平对疾病进行诊断的新技术疾病进行诊断的新技术基因诊断技术得以诞基因诊断技术得以诞生和发展。生和发展。 基因诊断：在基因诊断：在DNADNA水平或水平或RNARNA水平水平, ,应用核酸应用核酸分子杂交技术、限制性内切酶长度多态性（分子杂交技术、限制性内切酶长度多态性（RFLPRFLP）连锁分析、连锁分析、PCRPCR技术、技术、DNADNA序列分析技术以及近年序列分析技术以及近年发展起来的发展起来的DNADNA芯片技术等芯片技术等, ,对人类疾病进行诊断。
43、对人类疾病进行诊断。2022-5-2669 基因诊断基因诊断技术技术核酸分子杂交：核酸分子杂交： Southern Southern 印迹印迹杂交杂交技术：技术：19751975年，年，Southern EMSouthern EM发明。发明。 从生物体的细胞中提取基因组从生物体的细胞中提取基因组DNADNA，并从中鉴别出某一特，并从中鉴别出某一特异的核苷酸序列。异的核苷酸序列。 Northern Northern印迹杂交技术：印迹杂交技术：19771977年年Alwine JCAlwine JC等发明。等发明。 用于样品中某种用于样品中某种mRNAmRNA分子的定量，分子量大小的测定。分子的定
44、量，分子量大小的测定。 原理：原理：RNARNA分子在变性琼脂糖凝胶中电泳，按分子量大小分子在变性琼脂糖凝胶中电泳，按分子量大小不同而相互分离，其原理与不同而相互分离，其原理与SouthernSouthern转移技术的方法类似。转移技术的方法类似。细胞原位杂交技术：细胞原位杂交技术：19691969年，年，ParduePardue等建立。等建立。2022-5-2670基因诊断技术基因诊断技术聚合酶链式反应聚合酶链式反应 (polymerase chain (polymerase chain reaction, PCR) reaction, PCR) ：19851985年，年，Mullis KM
45、ullis K首首创。创。 体外模拟细胞内体外模拟细胞内DNADNA复制过程，进行体复制过程，进行体外基因扩增。外基因扩增。2022-5-2671基因诊断技术基因诊断技术基因芯片（基因芯片（Gene chipsGene chips）技术：）技术： 基因芯片技术基因芯片技术: 将大量探针固定于支持物上，与标记将大量探针固定于支持物上，与标记的样品进行杂交。可一次性对样品中大量序列进行检测的样品进行杂交。可一次性对样品中大量序列进行检测和分析。和分析。 解决了传统核酸杂交技术操作繁杂、检测效率低的解决了传统核酸杂交技术操作繁杂、检测效率低的问题。问题。 通过设计不同的探针阵列和使用特定的分析方法，
46、通过设计不同的探针阵列和使用特定的分析方法，使该技术具有多种不同的应用价值。使该技术具有多种不同的应用价值。 如基因表达谱分析、基因突变检测、多态性分析、如基因表达谱分析、基因突变检测、多态性分析、基因诊断等。基因诊断等。2022-5-2672叠加图：绿色代表下调；红色代表上调 ；黄色无差异。正常样品Cy3标记待测样品Cy5标记叠加石奕武，胡维新等：多发性骨髓瘤的基因表达谱分析，湖南医科大学学报，2003，28（3）：2012052022-5-26732022-5-26742022-5-2675基因诊断的其它技术：基因诊断的其它技术：DNADNA序列分析技术（序列分析技术（DNA sequen
47、cingDNA sequencing）；）；限制性内切酶长度多态性（限制性内切酶长度多态性（RFLPRFLP）；）；PCR-SSCPPCR-SSCP等。等。2022-5-2676 在法医学中利用在法医学中利用DNADNA指纹图谱技术进行刑事指纹图谱技术进行刑事侦破和亲子鉴定。侦破和亲子鉴定。 临床上对遗传病、传染病及常见疾病（如临床上对遗传病、传染病及常见疾病（如肿瘤、心血管疾病等）的诊断。肿瘤、心血管疾病等）的诊断。 基因分型。基因分型。 基因诊断是通过直接检测目的基因（或该基因诊断是通过直接检测目的基因（或该基因的转录产物）的存在状态对疾病作出诊断基因的转录产物）的存在状态对疾病作出诊断的
48、方法。的方法。基因诊断的用途2022-5-2677 基因诊断技术不仅用于出生后人群的疾病诊断基因诊断技术不仅用于出生后人群的疾病诊断, ,而而且还应用于产前基因诊断和着床前诊断，这样可大大且还应用于产前基因诊断和着床前诊断，这样可大大减少有先天性疾病或携带遗传性疾病基因的胎儿出世，减少有先天性疾病或携带遗传性疾病基因的胎儿出世，促进优生优育，提高人口素质。促进优生优育，提高人口素质。产前基因诊断和着床前诊断产前基因诊断和着床前诊断2022-5-2678 基因诊断技术也为流行病学调查以及基因诊断技术也为流行病学调查以及食品卫生检验和环境卫生监测等工作开食品卫生检验和环境卫生监测等工作开创了崭新的
49、领域创了崭新的领域, , 使诊断技术进入一个使诊断技术进入一个新的、更高的水平新的、更高的水平, ,从而刷新了医学诊断从而刷新了医学诊断的面貌。的面貌。2022-5-2679(四)基因治疗(gene therapy) 基因治疗是分子生物学理论与技术的基因治疗是分子生物学理论与技术的飞速发展给医学带来新的希望和新的治飞速发展给医学带来新的希望和新的治疗手段，开辟了治疗学疗手段，开辟了治疗学(therapeutics)(therapeutics)的新纪元。基因治疗是临床医学中发展的新纪元。基因治疗是临床医学中发展起来的新领域，发展十分迅速。起来的新领域，发展十分迅速。2022-5-2680 基因治
50、疗技术的发展与整个医学科学的发展以及基因治疗技术的发展与整个医学科学的发展以及许多分子生物学新理论、新技术、新方法的应用密许多分子生物学新理论、新技术、新方法的应用密切相关。切相关。 临床基因治疗研究已经得到了迅速发展，基因治临床基因治疗研究已经得到了迅速发展，基因治疗的范围从单基因缺陷遗传病扩大到多基因遗传病疗的范围从单基因缺陷遗传病扩大到多基因遗传病（恶性肿瘤、心血管病、免疫性疾病等）以及传染性（恶性肿瘤、心血管病、免疫性疾病等）以及传染性疾病（如肝炎、艾滋病等）。疾病（如肝炎、艾滋病等）。2022-5-2681 狭义基因治疗狭义基因治疗：目的基因导入靶细胞：目的基因导入靶细胞后与宿主细胞
