1、2009年5月27日西安 艾滋病检测技术规范与艾滋病检测技术规范与 HIV职业暴露预防职业暴露预防邢爱华邢爱华陕西省疾病预防控制中心陕西省疾病预防控制中心 二二OO九年五月九年五月.西安西安2009年5月27日西安内容一、艾滋病流行现状一、艾滋病流行现状二、艾滋病检测技术规范二、艾滋病检测技术规范三、艾滋病职业暴露预防措施三、艾滋病职业暴露预防措施2009年5月27日西安 第一部分第一部分 艾滋病流行现状2009年5月27日西安 什么是艾滋病什么是艾滋病(AIDS)(AIDS)？ 艾滋病艾滋病是英语是英语“AIDS”AIDS”中文名称，它是由于人中文名称，它是由于人体感染了人类免疫缺陷病毒（简
2、称体感染了人类免疫缺陷病毒（简称HIVHIV）后引起的）后引起的一种病死率极高的病毒性传染病。一种病死率极高的病毒性传染病。 A Acquired cquired I Immunommuno- -D Deficiency eficiency S Syndromesyndromes，AIDSAIDS -获得性免疫缺陷综合征 H Human uman I Immunodeficiency mmunodeficiency V Virus, irus, HIVHIV HIVHIV -人类免疫缺陷病毒2009年5月27日西安 艾滋病（艾滋病（AIDS） HIV侵犯并最终破坏人的免疫系统及功能，侵犯并最终
3、破坏人的免疫系统及功能，随着人体免疫力的降低或完全丧失，越来越随着人体免疫力的降低或完全丧失，越来越频繁地感染上各种其他致病微生物，发生机频繁地感染上各种其他致病微生物，发生机会性感染、肿瘤，最终因各种合并感染而导会性感染、肿瘤，最终因各种合并感染而导致死亡。致死亡。2009年5月27日西安艾滋病的特点艾滋病的特点1.1.潜伏期长潜伏期长2.2.传播快传播快3.3.波及面广波及面广4.4.病死率高病死率高 2009年5月27日西安 艾滋病的传播途径艾滋病的传播途径1、性行为传播、性行为传播 异性之间异性之间 同性之间同性之间2、经血传播、经血传播 血液血液/血制品血制品 静脉吸毒静脉吸毒3、母
4、婴传播、母婴传播2009年5月27日西安 艾滋病流行现状艾滋病流行现状 截至截至20082008年底，全国累计报告艾滋病感年底，全国累计报告艾滋病感染者染者/ /艾滋病病人艾滋病病人2727万多万多，其中艾滋病病人，其中艾滋病病人8 8万例万例，死亡，死亡 近近4 4万。万。 20082008年报告年报告HIVHIV 4.54.5万例万例， AIDSAIDS 1.451.45例例，死亡，死亡97489748例例。 平均每月新报告平均每月新报告HIVHIV约约38003800例。例。2009年5月27日西安20082008年陕西省感染者发现渠道年陕西省感染者发现渠道在监管场所主动在监管场所主动H
5、IVHIV筛查中发现筛查中发现4848例例, , 占占13.01%13.01% 在男同性恋人群专题调查发现在男同性恋人群专题调查发现4545例，例， 占占12.20%12.20%在自愿咨询检测在自愿咨询检测VCTVCT门诊发现门诊发现3131例，例， 占占 8.40% 8.40% 在医院手术、输血前检测发现在医院手术、输血前检测发现2525例，例， 占占 6.78% 6.78% 在医院临床可疑病人送检在医院临床可疑病人送检1515例、性病门诊例、性病门诊7 7例，占例，占 5.96% 5.96% 义务献血人群中发现义务献血人群中发现2121例，例， 占占 5.69% 5.69% HIVHIV感
6、染者配偶、性伴和子女追踪感染者配偶、性伴和子女追踪1010例，美沙酮门诊例，美沙酮门诊6 6例例产前检查和其他等检测发现产前检查和其他等检测发现5555例，例， 占占14.91% 14.91% 外省反馈外省反馈106106例，例， 占占28.73%28.73%。2009年5月27日西安 第二部分第二部分艾滋病检测实验室管理艾滋病检测实验室管理2009年5月27日西安人员要求人员要求环境要求环境要求设备要求设备要求技术要求技术要求艾滋病检测工作艾滋病检测工作艾滋病防治条例艾滋病防治条例检测技术规范检测技术规范检测工作管理办法检测工作管理办法传染病防治法传染病防治法生物安全生物安全实验室的通用要求
7、实验室的通用要求艾滋病职业暴露艾滋病职业暴露预防预案预防预案2009年5月27日西安 传染病防治法传染病防治法关于安全关于安全 第三十三条：医疗卫生机构和出入境检验检第三十三条：医疗卫生机构和出入境检验检疫机构应当按照国务院卫生主管部门的规定，疫机构应当按照国务院卫生主管部门的规定，遵守标准防护原则，严格执行操作规程和消毒遵守标准防护原则，严格执行操作规程和消毒管理制度，防止发生艾滋病医院感染和医源性管理制度，防止发生艾滋病医院感染和医源性感染。感染。2009年5月27日西安传染病防治法传染病防治法关于实验室建设关于实验室建设 第二十五条：省级以上人民政府第二十五条：省级以上人民政府卫生主管部
8、门根据医疗卫生机构布局卫生主管部门根据医疗卫生机构布局和艾滋病流行情况，按照国家有关规和艾滋病流行情况，按照国家有关规定确定承担艾滋病检测工作的实验室。定确定承担艾滋病检测工作的实验室。2009年5月27日西安 全国艾滋病检测工作管理办法全国艾滋病检测工作管理办法第一章第一章 总总 则则第一条第一条 为加强对全国艾滋病检测工作的监为加强对全国艾滋病检测工作的监督管理，规范艾滋病检测实验室的设置和验督管理，规范艾滋病检测实验室的设置和验收，确保艾滋病检测工作质量，依据收，确保艾滋病检测工作质量，依据中华中华人民共和国传染病防治法人民共和国传染病防治法、艾滋病防治艾滋病防治条例条例和国家相关法律、
9、法规的规定，特制和国家相关法律、法规的规定，特制定本管理办法。定本管理办法。2009年5月27日西安第二章第二章 艾滋病检测实验室的设置艾滋病检测实验室的设置第六条第六条 国家对艾滋病检测实验室实行分类国家对艾滋病检测实验室实行分类管理，按照实验室的职能、开展检测工作管理，按照实验室的职能、开展检测工作的性质及范围共分三类实验室，分别是艾的性质及范围共分三类实验室，分别是艾滋病参比实验室、艾滋病检测确证实验室、滋病参比实验室、艾滋病检测确证实验室、艾滋病检测筛查实验室。艾滋病检测筛查实验室。2009年5月27日西安第四章第四章 艾滋病检测工作要求艾滋病检测工作要求 第十三条第十三条 艾滋病检测
10、实验室技术人员需要经过艾滋病检测实验室技术人员需要经过相关的业务培训，经考核合格者由相关机构发给培相关的业务培训，经考核合格者由相关机构发给培训证书，持证上岗。非卫生专业技术人员不得从事训证书，持证上岗。非卫生专业技术人员不得从事艾滋病检测工作。艾滋病检测工作。 第十六条第十六条 艾滋病检测筛查实验室发现艾滋病病艾滋病检测筛查实验室发现艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品必须及时送艾滋病检毒抗体筛查呈阳性反应的样品必须及时送艾滋病检测确证实验室，不得擅自处理。测确证实验室，不得擅自处理。2009年5月27日西安第十七条第十七条 艾滋病病毒抗体确证试验结果应艾滋病病毒抗体确证试验结果应当告知本人，
11、本人为无行为能力人或者限制当告知本人，本人为无行为能力人或者限制行为能力人的，应当告知其监护人。行为能力人的，应当告知其监护人。第十八条第十八条 艾滋病检测实验室应有专人负责艾滋病检测实验室应有专人负责妥善保存检测记录和各种档案，不得擅自修妥善保存检测记录和各种档案，不得擅自修改和销毁。记录保存期不少于十年。改和销毁。记录保存期不少于十年。2009年5月27日西安 第二十条第二十条 艾滋病检测实验室工作人员不得将艾滋病检测实验室工作人员不得将艾滋病病人或感染者的姓名、住址、检测结果等艾滋病病人或感染者的姓名、住址、检测结果等有关情况向无关人员公布或传播。有关情况向无关人员公布或传播。 第二十八
12、条第二十八条 验收合格的实验室方可开展艾滋验收合格的实验室方可开展艾滋病检测工作；未经验收的实验室擅自开展艾滋病病检测工作；未经验收的实验室擅自开展艾滋病检测工作，由本级或上级卫生主管检测工作，由本级或上级卫生主管行政行政部门责令部门责令其停止工作。其停止工作。 2009年5月27日西安 全国艾滋病检测技术规范全国艾滋病检测技术规范（2004 2004 版）版）中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心2009年5月27日西安 目目 录录第一章第一章 样品的采集和处理样品的采集和处理.1第二章第二章 HIV抗体检测抗体检测.3 第三章第三章 HIV核酸定性检测核酸定性检测13 第四章第四章 HI
13、V RNA定量测定（病毒载量测定）定量测定（病毒载量测定）.17第五章第五章 CD4+和和CD8+T淋巴细胞检测淋巴细胞检测 22第六章第六章 HIV抗原检测抗原检测26第七章第七章 艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防29第八章第八章 艾滋病实验室质量管理艾滋病实验室质量管理39第九章第九章 艾滋病实验室质量考评办法艾滋病实验室质量考评办法46第十章第十章 HIV诊断试剂临床质量评估方案诊断试剂临床质量评估方案 502009年5月27日西安附表附表1 HIV抗体筛查报告抗体筛查报告 53附表附表2 HIV抗体复检化验单抗体复检化验单 54附表附表3 HIV抗体
14、确认检测报告单抗体确认检测报告单. 55附表附表4 HIV感染流行病学监测疫情报告单感染流行病学监测疫情报告单 56附表附表5 HIV抗体替代策略检测报告单抗体替代策略检测报告单 . 57附表附表6 HIV抗体检测数季报表抗体检测数季报表 58附表附表7 艾滋病职业暴露个案登记表艾滋病职业暴露个案登记表 59附表附表8 艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表 622009年5月27日西安 第一章第一章 样品的采集和处理样品的采集和处理.1 1 范围范围 1 2 规范性引用文件规范性引用文件.1 3 操作步骤操作步骤.1 3.1 样品的采集和处理样品的采集和处理
15、.1 3.2 样品的保存样品的保存.1 3.3 样品的运送样品的运送.2 3.4 样品的接收样品的接收.22009年5月27日西安一、样品的采集和处理一、样品的采集和处理（一）常用的样品常用的样品: 血清、血浆和全血；抗凝血（血清、血浆和全血；抗凝血（EDTA 等）等） （二）采集方法：（二）采集方法：1、按临床采血技术规范、按临床采血技术规范2、建议采用真空采血管及蝶形针具、建议采用真空采血管及蝶形针具3、血清样品采集：注射器抽出静脉血、血清样品采集：注射器抽出静脉血5ml，室温下自然放置，室温下自然放置40分钟，待血液凝固和血块收缩后分钟，待血液凝固和血块收缩后,常规离心，吸血清备用常规离
16、心，吸血清备用4、抗凝血样品采集：用、抗凝血样品采集：用EDTA抗凝剂真空采血管抽取静脉血抗凝剂真空采血管抽取静脉血510ml，反复颠倒，测定，反复颠倒，测定CD4淋巴细胞；分离血浆进行病淋巴细胞；分离血浆进行病毒载量测定，毒载量测定，48小时内分离血浆小时内分离血浆 2009年5月27日西安二、二、样品的保存样品的保存1 1、用于抗体检测的血清或血浆样品应存放于、用于抗体检测的血清或血浆样品应存放于-20-20以以下，下， 一周内进行检测的样品可存放于一周内进行检测的样品可存放于2-82-8。2 2、用于用于CD4+/ CD8+T淋巴细胞检测的样本不能长期淋巴细胞检测的样本不能长期保存，保存
17、，4848小时内置室温保存小时内置室温保存。3、进行病毒载量检测的样本如、进行病毒载量检测的样本如4天内检测可在天内检测可在4暂暂时保存，时保存，3个月以内应存于个月以内应存于-20以下，冻融次数不以下，冻融次数不能超过三次。能超过三次。2009年5月27日西安高致病性病原微生物运输条例 1、 HIV毒株标本要求毒株标本要求A类包装运输，国际航类包装运输，国际航空编号为空编号为UN2814； 2、 血清学标本要求血清学标本要求B类包装运输，国际航类包装运输，国际航空编号为空编号为UN3373。2009年5月27日西安四、样品的接收四、样品的接收 1 1、含有感染性样品的包裹必须在污染区由经过培
18、、含有感染性样品的包裹必须在污染区由经过培训的工作人员打开，用后的包裹进行消毒。训的工作人员打开，用后的包裹进行消毒。2 2、核对标本与送检单，检查样品管有无破损和、核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时上报有关人员对样品管和盛器消毒，同时上报有关人员3 3、检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生、检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。物污染、血脂过多以及黄疸等情况。2009年5月27日西安第二章第二章 HIV抗体检测抗体检测.31 范围范围.32 规范性
19、引用文件规范性引用文件.33 HIV抗体检测实验室抗体检测实验室.34 HIV抗体检测的目的和要点抗体检测的目的和要点.34.1 HIV抗体检测的目的抗体检测的目的.34.2 HIV抗体检测的要点抗体检测的要点.35 常规常规HIV抗体检测的方法和程序抗体检测的方法和程序.45.1 HIV抗体检测筛查试验抗体检测筛查试验.45.2 HIV抗体确认试验抗体确认试验.66 HIV抗体检测的替代策略抗体检测的替代策略 .87 HIV抗体检测情况季报的时间和程序抗体检测情况季报的时间和程序12 HIV抗体检测程序与方法抗体检测程序与方法2009年5月27日西安 HIV抗体检测抗体检测 （一）检测试剂（
20、一）检测试剂 1 1、筛查试剂必须是筛查试剂必须是HIV-1/2HIV-1/2混合型混合型 2 2、经国家药品监督管理局注册批准、经国家药品监督管理局注册批准 3 3、批批检合格、批批检合格 4 4、临床评估质量优良、临床评估质量优良 5 5、在有效期内的试剂。在有效期内的试剂。2009年5月27日西安常用的筛查试剂常用的筛查试剂 酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISAELISA） 第三代试剂：双抗原夹心法第三代试剂：双抗原夹心法 第四代试剂：抗体、第四代试剂：抗体、P24P24抗原联合检测抗原联合检测 快速诊断试剂快速诊断试剂(ST/FT)(ST/FT)。 硒标法（斑点免疫）：硒标法
21、（斑点免疫）： 金标法（免疫层析）：金标法（免疫层析）：2009年5月27日西安（二）检测要点（二）检测要点 1 1、严格按照试剂说明书操作、严格按照试剂说明书操作 2 2、注意防止交叉污染、注意防止交叉污染 3 3、严格遵守实验室操作规程、严格遵守实验室操作规程2009年5月27日西安HIV抗体筛查试验流程图抗体筛查试验流程图 2009年5月27日西安HIVHIV抗体检测结果报告抗体检测结果报告筛查（筛查（- -）：出具）：出具“HIVHIV抗体阴性抗体阴性”报告报告 筛查（筛查（+ +）：出具）：出具“HIVHIV抗体待复查抗体待复查”报告报告 不能出阳性报告不能出阳性报告 确认（确认（-
22、 -）：出具）：出具“HIVHIV抗体阴性抗体阴性”报告报告” 确认（确认（+ +）：出具）：出具“HIVHIV抗体阳性抗体阳性”报告报告 确认结果不确定：出具不确定报告，继续随访确认结果不确定：出具不确定报告，继续随访2009年5月27日西安筛查阳性结果的处理-1（1 1）填写）填写HIVHIV抗体复查送检单（附表抗体复查送检单（附表4 4），），经一名检测操作人员和一名具有中级以上经一名检测操作人员和一名具有中级以上技术职称的人员审核签字。技术职称的人员审核签字。（2 2）尽可能重新采集受检者的血样。）尽可能重新采集受检者的血样。（3 3）将二份血样（或仅原血样）连同）将二份血样（或仅原血
23、样）连同HIVHIV抗抗体复查送检单送当地艾滋病筛查中心实验体复查送检单送当地艾滋病筛查中心实验室，或直接送确认实验室。室，或直接送确认实验室。2009年5月27日西安筛查阳性结果的处理-2（4 4）筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复测，）筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复测，如结果均阳性或一阴一阳，应将标本和如结果均阳性或一阴一阳，应将标本和HIVHIV抗体抗体复查送检单送艾滋病确认实验室确认。如复检结复查送检单送艾滋病确认实验室确认。如复检结果均为阴性，在送检单上盖上果均为阴性，在送检单上盖上“HIVHIV抗体阴性抗体阴性（一）（一）”字样图章，并及时将结果反馈送检单位，字样图章，并及
24、时将结果反馈送检单位，不必再送确认实验室。不必再送确认实验室。（5 5）做好检测后咨询。）做好检测后咨询。2009年5月27日西安 随访复检：随访复检：HIV抗体不确定的处理抗体不确定的处理 (1) (1) 每每3 3个月随访复检个月随访复检1 1次，连续次，连续2 2次，次，6 6个月。个月。如果检测时暴露时间已超过如果检测时暴露时间已超过3 3个月，则在个月，则在3 3个月个月后随访后随访1 1次即可。将前后次即可。将前后2 2份样品同时检测，仍份样品同时检测，仍呈不确定或阴性则报告呈不确定或阴性则报告HIVHIV抗体阴性，如果在抗体阴性，如果在随访期间发生带型进展，符合随访期间发生带型进
25、展，符合HIVHIV抗体阳性判抗体阳性判定标准则报告定标准则报告HIV-1HIV-1或或HIV-2HIV-2抗体阳性。抗体阳性。 (2) (2) 必要时可做必要时可做HIV-1 P24HIV-1 P24抗原或抗原或HIVHIV核酸测定核酸测定 2009年5月27日西安艾滋病筛查实验室管理规范化艾滋病筛查实验室管理规范化 环境要求环境要求 人员要求人员要求 设备要求设备要求 技术要求技术要求 制度管理制度管理 安全管理安全管理 经费保障经费保障 工作计划工作计划2009年5月27日西安HIVHIV检测实验室管理检测实验室管理一、文件和文件管理要求一、文件和文件管理要求 （1 1）建立标准操作程序
26、文件（）建立标准操作程序文件（SOPSOP） （2 2）建立实验室原始记录表）建立实验室原始记录表 （3 3）建立）建立HIVHIV抗体检测程序抗体检测程序 （4 4）检测结果表）检测结果表 （5 5）标本的登记记录）标本的登记记录2009年5月27日西安HIV检测实验室文件和文件管理要求（6 6）HIVHIV阳性标本的保存记录阳性标本的保存记录（7 7）实验室安全措施）实验室安全措施（8 8）文件存档）文件存档 包括实验原始记录表、打印数据、标本登记包括实验原始记录表、打印数据、标本登记表、标本保存记录以及仪器设备维修和校准记表、标本保存记录以及仪器设备维修和校准记录等重要记录，保存录等重要
27、记录，保存1010年以上。同时推荐使用年以上。同时推荐使用计算机保存各种文件和记录。计算机保存各种文件和记录。 2009年5月27日西安文件和文件管理原则-1（一）操作规程和操作手册一）操作规程和操作手册 每个实验都应有标准操作规程或操作手册，每个实验都应有标准操作规程或操作手册，要准确、规范，妥善保管，每个检验人员要准确、规范，妥善保管，每个检验人员都能随时、方便查阅。都能随时、方便查阅。2009年5月27日西安文件和文件管理原则-2 1 1、标准操作程序、标准操作程序 (Standard Operation Procedure (Standard Operation Procedure S
28、OP)SOP)要求要求 （ 1 1）建立覆盖主要工作内容的）建立覆盖主要工作内容的SOPSOP文件文件 （2 2）由具体工作人员起草，实验室主任审定，）由具体工作人员起草，实验室主任审定， （3 3）并定期修订，每年至少一次。）并定期修订，每年至少一次。 （4 4）所有工作人员要在所从事工作的）所有工作人员要在所从事工作的SOPSOP文件上文件上签名表示已经阅读并掌握了有关内容。签名表示已经阅读并掌握了有关内容。2009年5月27日西安标准操作程序（标准操作程序（SOP）Standard of ProcedureStandard of Procedure 写下你所做的一切写下你所做的一切 Wr
29、ite what you have done 做你所写的程序做你所写的程序 Do what you have written 2009年5月27日西安SOP通常包括以下内容通常包括以下内容（1）标题和编号）标题和编号（2）编写和修改日期）编写和修改日期（3）编写和修订人员姓名）编写和修订人员姓名（4）方法、目的和原理）方法、目的和原理（5）相应的职业规范）相应的职业规范（6）检测设备和试剂）检测设备和试剂（7）实验相关步骤）实验相关步骤（8）健康和安全操作指南）健康和安全操作指南（9）结果的解释和报告以及出现问题时所采取的措施）结果的解释和报告以及出现问题时所采取的措施（10）附录，包括相关的
30、附加文件如试验表格、设备和试剂）附录，包括相关的附加文件如试验表格、设备和试剂盒说明书等。盒说明书等。2009年5月27日西安SOP范围范围 （1 1）样本的接收、登记和处理）样本的接收、登记和处理 （2 2）检测方法和步骤）检测方法和步骤 （3 3）质控品的应用方法）质控品的应用方法 （4 4）仪器的使用与维护）仪器的使用与维护 （5 5）结果解释与报告）结果解释与报告 （7 7）保密程序）保密程序 （8 8）检测数据的记录）检测数据的记录 （9 9）追踪和处理）追踪和处理 （1010）实验室的清理和消毒）实验室的清理和消毒 （11 11）安全）安全职业暴露防护职业暴露防护有传染性的体液包括
31、 血液血液 精液精液 阴道分泌物阴道分泌物 脑脊液脑脊液 羊水羊水 胸水胸水, , 腹水腹水 心包液心包液 滑膜液滑膜液 一切有可见的血液污染的体液一切有可见的血液污染的体液职业性HIV感染率经皮暴露:0.3% (95%可信限0.2%-0.5%)粘膜暴露:0.09% (95%可信限0.006%-0.5%) 随着临床就诊艾滋病病毒感染者和艾滋病随着临床就诊艾滋病病毒感染者和艾滋病病人的增多，医护人员发生职业暴露的机会增病人的增多，医护人员发生职业暴露的机会增加。我省各级医院去年共发生医护人员职业暴加。我省各级医院去年共发生医护人员职业暴露多起，涉及急诊科、手术室、内科、骨科、露多起，涉及急诊科、手术室、内科、骨科、外科等多个科室、相关医护人员外科等多个科室、相关医护人员30余人。余人。职业暴露职业暴露（二）检测、报告、登记与保密（二）检测、报告、登记与保密2009年5月27日西安Thank you!
