1、XXX年度本科生毕业论文（设计）干旱胁迫对大黄种子萌发的影响院 系：生命科学与技术学院 专 业：生物科学 年 级：XX 学生姓名：XX 学 号：XXXX 导师及职称：XXXXX 20XX年XX月2018 Annual Graduation Thesis (Project) of the College Undergraduate Effect of Drought Stress on Rheum palmatum L. Seed GerminationDepartment: College of Life Science and TechnologyMajor: BioscienceGrade
2、: 2014Students Name: Zhou ting-qingStudent No.: 201401130142Tutor: Lecturer Shen Yun-meiApril, 2018毕业论文（设计）原创性声明本人所呈交的毕业论文（设计）是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文（设计）不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本论文（设计）的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意。 作者签名： 日期： 毕业论文（设计）授权使用说明本论文（设计）作者完全了解XX学院有关保留、使用毕业论文（设计）的规定，
3、学校有权保留论文（设计）并向相关部门送交论文（设计）的电子版和纸质版。有权将论文（设计）用于非赢利目的的少量复制并允许论文（设计）进入学校图书馆被查阅。学校可以公布论文（设计）的全部或部分内容。保密的论文（设计）在解密后适用本规定。 作者签名： 指导教师签名：日期： 日期： XXXX 毕业论文（设计）答辩委员会(答辩小组)成员名单姓名职称单位备注教授组长讲师高级实验师讲师 XX学院本科毕业论文 (设计)摘 要本文探究大黄种子萌发对不同浓度PEG干旱胁迫的响应规律，以大黄种子为实验材料，设置5个不同的PEG浓度0、5、10、20、25，对大黄种子进行处理试验，测定大黄种子的发芽指标及抗氧化酶的活
4、性。结果表明，在不同浓度PEG作用下，随着浓度的增大，不同浓度的PEG溶液对大黄种子的萌发呈“低促高抑”的规律；幼苗根长呈先上升后下降的趋势，苗高呈下降趋势；CAT酶活性呈上升的趋势，SOD酶和POD酶活性则呈先上升后下降的趋势。结论:干旱胁迫对大黄种子萌发的影响规律是“低促高抑”，低浓度促进大黄种子萌发和幼苗根的生长，高浓度抑制大黄种子萌发和幼苗根的生长。关键词：聚乙二醇；干旱胁迫；大黄种子；发芽指标；抗氧化酶ABSTRACTThis article explores Rheum palmatum L. seeds germination of different concentration
5、s of PEG drougut stress response. It sets up five different concentrations of PEG were :0、5、10、20、25,to deal with Rheum palmatum L. seeds. Then we measured the germination indexs,and the activity of antioxidant enzymes. The results showed that ,Under the action of different concentration PEG, with t
6、he increase of concentration, the burdock seeds germination inhibition. Rheum palmatum L.germination of was low and high.;CAT enzyme shows ascendant trend, SOD and POD enzyme is a trend of decline after rising first. Conclusion: lDrought stress on the influence law of Rheum palmatum L seed germinati
7、on is promote high suppression low, low concentration promotes Rheum palmatum L seed germination and seedling root growth, high concentration of inhibition of Rheum palmatum L seed germination and seedling root growth.Key words: Polyethylene glycol(PEG)；Drought stress；Rheum palmatum L；Indicators of
8、germination；Antioxidant enzymes 目录1.前言11.1国内外研究现状11.2研究目的及意义12.材料与方法32.1实验材料32.2实验仪器与试剂32.3实验方法33.实验结果与分析73.1干旱胁迫对大黄种子萌发影响73.2干旱胁迫对大黄幼苗体内抗氧化酶活性的影响74.讨论114.1干旱胁迫对大黄种子萌发的影响呈“低促高抑”的规律114.2不同浓度PEG处理对大黄幼苗CAT活性的影响114.3不同浓度PEG处理对大黄幼苗POD活性的影响114.4不同浓度PEG处理对大黄幼苗SOD活性的影响124.5大黄与其它物种的抗逆境响应规律是否一致124.6干旱胁迫下大黄种子发
9、芽特征135.结论14参考文献15致谢18IIIXX学院本科毕业论文 (设计)1.前言1.1 国内外研究现状大黄（Rheum palmatum L.）为被子植物门双子叶植物纲蓼科（Polygonaceae） 大黄属（Rheum）多年生草本植物。是我国重要的传统大宗中药材、道地药材，也是多功效、多道地产区中药材的典型代表，用药部分主要是根状茎及根13。大黄含有蒽醌类化合物、蒽酮类化合物、二苯乙烯类化合物、鞣质类化合物、苯丁酮类化合物、色酮类化合物、挥发性化合物等化学成分，具有泻下攻积、活血化瘀、清热解毒、消炎镇痛、抗感染、抗衰老抗氧化、能够调节免疫系统、抗炎、解热、抗病原微生物、降血脂、止血等药
10、理作用34。干旱胁迫对植物的影响体现在对细胞活性、器官和组织功能的影响上，植物受到干旱胁迫后，植物个体或群体生长受抑制，形态发生变化，生物量或产量受到影响。为了在干旱胁迫条件下保证生存或保持生物量，植物会相应的做出一系列响应。如通过自身的细胞对干旱信号的感知和转导、调节基因表达、产生新蛋白质从而引起大量的生理和代谢上的变化；光合速率会降低，代谢途径会发生改变，可溶性物质累积，合成脯氨酸及甜菜碱；一些原来存在体内的蛋白质消失、分解，同时产生参与各种代谢调节相关的酶，组成抗氧化防御系统抵抗干旱，从而减轻干旱所造成的伤害。聚乙二醇（polyethylene glycol PEG）是一种渗透调节剂，是
11、亲水性很强的大分子有机物，常被用来模拟干旱胁迫进行植物的抗旱试验，用PEG溶液渗透方法模拟干旱条件具有周期短、简单方便、重复性好等优点，所以近年以来干旱胁迫被广泛的应用于植物种子萌发期的耐旱性研究。1.2 研究目的及意义国内大黄蕴藏量并不丰富，属于稀少品种，主要分布在甘肃、青海、四川、云南等地，生长于降水多、海拔高、日照时间长、湿度不大的地区，甘肃境内的道地产区以栽培为主，其他地区以野生资源为主。目前野生资源已近濒危，栽培的由于栽培技术不规范，气候等问题，药材产量不太理想。据统计，中国约有1/3的土地处于干旱区，水资源缺乏是制约这些地区经济、社会发展和生态环境建设的主要因素之一11。水是植物赖
12、以生存的物质基础，充足的水分保障是植物正常生长发育的前提条件。干旱严重影响植物的生长发育、光合作用、呼吸作用以及氮的代谢，造成农作物减产，制约着农业的发展。土地干旱现象的不断加重，人们对各种作物耐旱性的研究越来越重视，其中对蔬菜、牧草耐旱性研究报道较多，就抗旱性的研究目前主要有以下几种作物：青稞13、胡枝子14、景天属植物23、栓皮栎24、鸭茅26、羊毛属植物29、决明32等。但是目前对药材，尤其是针对野生资源已近濒危、引种种植受气候影响的大黄来说，对环境的响应规律研究报道相对较少，因此揭示干旱胁迫对大黄幼苗生长的影响，对于引种种植大黄，争取全苗、壮苗、提高产量都具有重要意义。本实验以大黄种子
13、为材料，对其进行培养、处理、采样分析，进而探讨不同浓度PEG对大黄种子萌发、幼苗生长及抗氧化酶活性的影响，从而反应大黄对干旱逆境的响应规律，为大黄的系统研究奠定理论基础。55XX学院本科毕业论文 (设计)2.材料与方法2.1实验材料大黄种子网购于“安国中药材推广站”店铺，2017年产自甘肃陇西。2.2实验仪器与试剂2.2.1实验仪器数显恒温水浴锅（国华电器有限公司，HH-4）、冰箱（合肥美菱股份有限公司，BCD-256VBY）、低速离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司，SC-3610）、紫外可见分光光度计（T6新世纪）、电子天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司，BSA223S）、移液枪（DX47
14、538）2.2.2实验耗材研钵、玻璃棒、15mL离心管、1/2/5mL移液管、50/100/500/1000mL烧杯、25mL容量瓶、50mL锥形瓶、试剂瓶2.2.2 实验试剂聚乙二醇(PEG)、无水乙醇（分析纯）、核黄素（生化试剂）次氯酸钠（分析纯）、过氧化氢、愈创木酚（生化试剂）、磷酸氢二钠（分析纯）、磷酸二氢钠（分析纯）、甲硫氨酸（Met）、氯化硝基四氮唑蓝（NBT）、乙二胺四乙酸钠（EDTA-Na）、蒸馏水2.3实验方法2.3.1 大黄种子的处理及萌发采用PEG溶液进行干旱处理，浓度设置为5、10、20、25，以蒸馏水为对照（CK）。挑选饱满大小均匀一致的大黄种子，无菌蒸馏水冲洗多次，
15、经无菌蒸馏水中浸泡24小时后，在直径为9cm的培养皿中垫入双层无菌滤纸并加入不同浓度的PEG溶液至滤纸完全湿润，每个培养皿里的溶液总体积为7mL，然后将浸种的种子点入培养皿中，加盖封口，放入温度242的培养室中萌发。以胚轴长于2mm为发芽标准，每天统计种子发芽数。由统计数据分析可以得到，萌发13天后不再有种子萌发，所以第13天结束萌发实验，测定根长和苗高，并取萌发的整株幼苗测定POD、SOD以及CAT的活性。2.3.2 种子活力的测定发芽标准是以种子胚根生长到1mm时为准，每天记录种子发芽数,记录至不再萌发为止。在测定生理指标之前，测量其根长和苗高。发芽势（%）5d内供试种子的发芽数供试种子数
16、100%发芽率（%）10d内供试种子的发芽数供试种子数100% 发芽指数（Gt /Dt）Gt 为供试种子在t日的发芽数Dt为发芽日数。2.3.3 叶片过氧化氢酶活性测定2.3.3.1 酶液制备精确称取大黄幼苗0.1g置研钵中，加入2mL在4冰箱下预冷的pH=7.0磷酸缓冲液，在冰浴中研磨成匀浆，转入25mL容量瓶中，用pH=7.0的缓冲液冲洗研钵数次，合并冲洗液，并定容到25mL。混合均匀后将容量瓶置于4冰箱中静置10min，取上清液10mL放入离心管中，在4000r/min下离心15min，取出，该上清液即为过氧化氢酶粗提液。放入4下的冰箱中保存备用。2.3.3.2 CAT活性测定CAT活性
17、测定用紫外吸收法18。取4支试管，加入1mL0.3%H2O2溶液和1.95mLH2O，最后加0.05mL酶液（样品管），启动反应（每加完一管立即计时），测定240nm处OD降低速度，每隔1min读数1次，共测3min。将每分钟OD减少0.01定义为1个活力单位。3个重复。待3支管全部测定完后，计算CAT的活性。 2.3.3.3 酶活性计算CAT总活性(U /g /min)=（A240 /min V）/0.01VtW 以每克鲜重酶单位表示 CAT总活性240/min为每分钟增加的OD值V为样液总体积(mL)Vt为测定时样品用量(mL)W为样品鲜重(g)0.01A240为每下降0.01为一个酶活单
18、位2.3.4 叶片过氧化物酶活性测定2.3.4.1 酶液制备 精确称取大黄幼苗0.25g置研钵中，加入2mL在4冰箱下预冷的pH=7.0磷酸缓冲液,在冰浴中研磨成匀浆，转入25mL容量瓶中，用pH=7.0的缓冲溶液冲洗研钵数次，合并冲洗液，并定容到25mL。混合均匀后将容量瓶置4冰箱中静置10min，取上清液10mL放入离心管中，在4000r/min下离心15min，取出，该上清液即为过氧化氢酶粗提液。放入4下的冰箱保存备用。2.3.4.2 POD活性测定 POD活性测定用愈创木酚氧化法18。取4支试管，加入1mL0.3%H2O2溶液和0.95mL0.2%愈创木酚溶液及1mL0.05mol/L
19、pH=7.0PBS，最后加入0.05mL粗酶液启动反应（3个重复）（对照用0.05mol/L PBS代替酶液），记录470nm处OD增加速度。将每分钟OD增加0.01定义为1个活力单位。比色时加酶液，混合后即刻计时。2.3.4.3 POD的活性计算POD活性(U/g/min)=（A470/minV）/0.01VtW以每克鲜重酶单位表示POD总活性470/min为每分钟增加的OD值V为样液总体积(mL)Vt为测定时样品用量(mL)W为样品鲜重(g)0.01A470为每下降0.01为一个酶活单位2.3.5 叶片超氧化物歧化酶活性测定超氧化物歧化酶（SOD）活性测定用氮蓝四唑（NBT）法1819。
20、2.3.5.1 酶液提取精确称取大黄幼苗0.2g，加入2.5mLpH7.8磷酸盐缓冲液（PBS），研磨成匀浆，再加入2.5mLPBS混匀，410000r/min离心15min，上清液即为粗酶液。2.3.5.2 SOD活性测定表1：SOD反应体系试 剂 用 量(mL)终浓度（比色时）0.05mol/L PBS1.5130mmol/L Met0.30.313mmol/L750mol/L NBT0.30.375mmol/L30mol/L 核黄素0.310mol/L100mol/L EDTANa0.310mol/L蒸馏水0.2酶液0.1对照组PBS缓冲液代替酶液总体积3.0取10mL玻璃试管7支，3支
21、测定样品，4支作对照(即3个重复)，按表2添加试剂组成3mL反应体系：上述试剂混匀后，1支用铝箔包被避光，其余对照管和样品管一起置于4000x日光灯下反应20min(要求各管受光一致)。在560nm测定反应液的吸光度。以不光照的对照管作参比，分别测各管的吸光度。以抑制NBT光化还原的50%为一个酶活性单位表示SOD活性单位。2.3.5.3 SOD活性计算SOD总活性(U/g)=(ACKAE)V/(ACK0.5WVt)SOD总活性以U/gFW表示ACK为对照管的吸光度AE为样品管的吸光度V为样液总体积(mL)Vt为测定时样品用量（本研究为0.05mL）W为样品鲜重（g）2.4 数据统计与分析实验
22、数据采用SPSS21.0软件进行方差分析及S-N-K多重比较，并作图。3.实验结果与分析3.1干旱胁迫对大黄种子萌发影响 对大黄种子萌发整体过程的观察可以看出，在不同浓度的PEG溶液处理下，大黄种子萌发存在显著差异（P0.05），5%和10%的萌发效果较好，为对照组的1.05和1.22倍，且两组之间差异显著（P0.05），20%、25%则与对照组差异显著（P0.05）。 由表2可知，浓度为10%的PEG溶液促进了大黄种子萌发，其发芽势和发芽率及发芽指数分别为对照组的1.19、1.22和1.22倍，差异显著（P0.05），高浓度20%、25%的PEG溶液对大黄种子的萌发具有抑制作用，在PEG浓度
23、为25%时其发芽势和发芽率及发芽指数为对照组的2.02、1.62和1.62倍，差异显著（P0.05）。浓度为5%、10%和20%的PEG溶液促进了大黄幼苗根的生长，其中10%的促进效果最明显，是对照组的1.33倍，差异显著（P0.05）。随着PEG处理浓度的升高，大黄幼苗的苗高逐渐下降，且差异显著（P0.05）。表2.不同浓度PEG对大黄种子发芽指数的影响处理浓度根长（cm）苗高（cm）发芽势发芽率发芽指标0%4.610.101c3.890.038a47.33%0.034ab66.00%0.019bc1.520.044bc5%5.680.124b3.510.037b50.00%0.034ab6
24、9.33%0.020b1.600.046b10%6.110.104a3.220.054c56.33%0.031a80.33%0.020a1.850.047a20%5.410.156b2.250.078d41.51%0.029b60.91%0.029c1.410.044c25%3.740.178d1.450.074e23.40%0.021c40.80%0.017d0.940.039d注：同一列的a、b、c、d、e表示5差异显著性水平。3.2 干旱胁迫对大黄幼苗体内抗氧化酶活性的影响3.2.1 CAT活性的变化 由图1可知，不同浓度的PEG处理后大黄幼苗的CAT酶活性发生了变化。在不同浓度的PEG
25、溶液处理下，随着PEG浓度的增大，大黄幼苗的CAT酶活性逐渐增大，呈上升趋势。其中25%的PEG溶液处理后大黄幼苗的CAT酶活性最高，是对照组的1.84倍，差异显著（P0.05），10%和20%的PEG溶液处理后，大黄幼苗的CAT酶活性无显著差异（P0.05），10%、20%、25%的PEG溶液处理后的大黄幼苗CAT酶活性与对照组和5%处理结果差异显著（P0.05），其中25%的PEG溶液处理后的结果与对照组和5%处理结果差异极显著（P0.01）。 图1.干旱胁迫下大黄幼苗的CAT活性注：a、b表示5差异显著性水平。3.2.2 POD的活性变化 由图2可知，在不同浓度的PEG溶液处理下，大黄幼
26、苗体内的POD酶活性发生了变化。在不同浓度的PEG溶液处理下，随着PEG浓度的增大，大黄幼苗的POD酶活性呈先上升后下降趋势。其中，20%的PEG浓度处理的大黄幼苗体内的POD酶活性最高，为2836.37U/g/min，是对照组的2.49倍，差异显著（P0.05）；10%、20%、25%的浓度处理组间无明显差异（P0.05），但与对照组间存在差异显著（P0.05）。图2.干旱胁迫下大黄幼苗的POD活性注：a、b表示5差异显著性水平3.2.3 SOD的活性变化由图3可知在不同的PEG溶液处理下大黄幼苗体内的SOD酶活性发生了明显变化。在不同浓度的PEG溶液处理下，随着PEG浓度的增大，大黄幼苗体
27、内的SOD酶活性呈先上升后下降趋势。其中，在PEG浓度为5、10、20时，大黄幼苗体内的SOD酶活性均升高，并且在20时达到最高，为826.37U/g，为对照组的2.18倍，差异显著（P0.05）；但当PEG浓度达到25时大黄幼苗体内的SOD酶活性又降低，与对照组相比差异显著（P0.05）；当PEG浓度为10、15、20、25%时，SOD酶活性均比对照组高，且差异显著（P0.05）。图3.干旱胁迫下大黄幼苗的SOD活性注：a、b、c表示5差异显著性水平13134.讨论4.1干旱胁迫对大黄种子萌发的影响呈“低促高抑”的规律本实验探究干旱胁迫对大黄种子萌发的影响，PEG处理浓度为0、5、10、20
28、、25。实验结果表明低浓度5、10%的PEG溶液对大黄种子的萌发有一定的促进作用，随着PEG浓度的增大，当浓度达到20时，对大黄种子的萌发起抑制作用，而在浓度达到25时抑制更加明显。在20的PEG溶液处理时，其发芽势发芽率和发芽指数均降低，在25的PEG溶液处理时对大黄种子萌发的抑制更加明显，致使大黄种子有一半以上不会萌发。说明低浓度的干旱胁迫对大黄种子萌发起到了促进的作用，表现为发芽率、发芽势及发芽指数提高，而高浓度则有明显抑制作用。4.2 不同浓度PEG处理对大黄幼苗CAT活性的影响CAT是植物体内重要的保护酶之一，主要作用就是催化H2O2分解为H2O与O2，使得H2O2不致于与O2在铁螯
29、合物作用下反应，生成非常有害的-OH，从而避免膜伤害，达到保护细胞的目的。实验结果显示，随着干旱胁迫的不断加剧，CAT酶活性也逐渐增加，当干旱胁迫浓度达到25%时CAT活性达到最大值。表明了CAT酶活性的变化过程，在干旱胁迫低浓度范围内，大黄幼苗可以调动CAT酶，清除大黄幼苗中的自由基，从而反映了，大黄幼苗通过CAT酶活性的增强来适应干旱逆境。4.3 不同浓度PEG处理对大黄幼苗POD活性的影响POD酶广泛存在于植物体中，是活性较高的一种酶。它与呼吸作用，光合作用及生长素的氧化等都有关系。在植物生长发育的过程中它的活性不断发生变化。一般老化组织中活性较高，幼嫩组织中活性较弱。这是因为过氧化物酶
30、能使组织中所含的某些碳水化合物转化成木质素，增加木质化程度。并且它与CAT酶作用相同，把H2O2转化成H2O。实验结果显示，随着干旱胁迫的不断加剧，POD酶活性也逐渐增加，胁迫浓度达到一定值时，POD酶活性逐渐下降。大黄幼苗中POD酶活性在对照组中最低，而随着PEG浓度的增加，POD酶活性也随之增加，当浓度为20%时最高。说明随着PEG浓度的增加，干旱胁迫对大黄幼苗的伤害增大，使幼苗加速老化。在最高浓度时，大黄幼苗承受不住胁迫，POD酶活性达不到调节的正常水平，幼苗老化，POD酶活性也达到最高。4.4 不同浓度PEG处理对大黄幼苗SOD活性的影响超氧化物歧化酶（SOD）是植物体内清除自由基的最
31、关键的保护酶之一，它能催化生物体内氧活化的第一个中间产物O2发生歧化反应，生成O2和H2O2，从而起到清除活性氧、维护氧代谢平衡的重要作用，SOD酶活性越高，植物抗逆性也就越强。SOD酶对干旱胁迫反应敏感，胁迫浓度较低时SOD酶活性增加很小，随着胁迫浓度增加SOD酶活性迅速增加，并达到最大值，达到最大值后酶活性又下降。这可能是在低浓度范围内，大黄幼苗表现出了良好的抗逆性，所以随着PEG浓度的增加，SOD的酶活性是增加的，以维持大黄幼苗氧代谢的平衡，从而适应干旱逆境。而浓度达到20%时，已经超出了大黄幼苗对干旱的耐受范围，SOD酶活性就下降。4.5 大黄与其它物种的抗逆境响应规律是否一致本实验探
32、究表明，随着浓度的增大，不同浓度的PEG溶液对大黄种子的萌发呈“低促高抑”的规律；幼苗根长、发芽势、发芽率、发芽指数呈先上升后下降的趋势，苗高呈下降趋势；CAT酶活性呈上升的趋势，SOD酶和POD酶活性则呈先上升后下降的趋势，即干旱胁迫对大黄种子萌发和幼苗的生长生理特性的影响呈“低促高抑”的规律，这表明了不同浓度的PEG胁迫对大黄种子的萌发具有一定的延缓作用。有研究显示，在干旱胁迫条件下，随着PEG浓度的增加，青稞13、木蓝23、栓皮栎25种子的发芽率、幼苗根长、苗高呈先上升后下降的趋势，并在10%的处理浓度下达到最高，其中栓皮栎25幼苗中的SOD酶呈先下降后上升再下降的趋势，POD酶活性呈上
33、升趋势，CAT酶活性呈先上升后下降再上升的趋势，即不同浓度的PEG对其种子的萌发和幼苗的生长生理特性的影响也呈“低促高抑”的规律；胡枝子14体内的CAT、POD、SOD酶活性呈先上升后下降的趋势；黑麦草15、红砂21、洛绒藜21、碱蓬21、梭梭21、豆科植物29、羊毛属的牧草30、决明子32的发芽率、发芽指数、种子活力明显下降，其中决明子幼苗32体内的SOD、CAT酶活性呈先上升后下降的趋势、POD酶活性在中期下降，后期又进一步升高，即不同浓度的PEG对其种子的萌发和幼苗的生长生理特性具有抑制作用。4.6 干旱胁迫下大黄种子发芽特征发芽过程的基本特征，随着PEG浓度的不断增加，大黄种子的发芽时
34、间有一定的迟缓，发芽率也在逐渐的降低，在对照组和低浓度PEG处理下，种子发芽的准备期为两到三天，具有较明显得发芽高峰期，但随着PEG浓度的不断增大，发芽准备期和高峰期逐渐的延长，并随着PEG浓度的增加而逐渐增加。 反映种子品质的重要指标之一是发芽势，发芽势越高表明种子播种后发芽越整齐。据结果显示，随着PEG浓度的不断增加，大黄种子发芽势呈现先上升后下降的趋势，PEG处理浓度为10%时，发芽势最大，为56.33%，发芽情况较其它组越整齐。5.结论本实验通过不同浓度PEG模拟干旱胁迫对大黄种子萌发和生理生化特性的影响，包括萌发过程中的观察与统计，过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、超氧化物
35、歧化酶（SOD）活性测定，发现适当浓度的干旱胁迫能促进大黄种子的萌发，而高浓度胁迫将使大黄种子萌发受阻。实验结果表明，在不同浓度PEG处理下，大黄幼苗的POD活性和SOD活性的变化趋势是一致的，呈先上升后下降的趋势，而CAT活性变化趋势则与POD和SOD的不同，一直呈上升趋势。综上所述，植物在遭受干旱胁迫时其体内抗氧化保护酶系统启动，抗氧化保护酶系统中包含了SOD、CAT和POD等各种保护酶类，这些保护酶主要是在阻止或减少羟基自由基的形成以及清除过氧化物、超氧自由基和过氧化氢等方面起重要作用。其中SOD的主要功能是清除O2-，是一种重要的防护氧自由基对细胞膜伤害的保护酶。CAT的主要功能是将S
36、OD等产生的H2O2转化成H2O然后与SOD协同反应，让活性氧维持在较低水平上。通过该实验，适宜浓度的PEG处理可以提高大黄的氧化酶活性，从而适应干旱胁迫来增强抗逆性。因此，在种植过程中可考虑用低浓度的PEG对大黄幼苗进行处理，但其适宜浓度还需进一步的探索研究。参考文献1 国家药典委员会.中华人民共和国药典 2010 年版S.一部.北京:中国医药科技出版社,2010: 222 南海江,许旭东,陈士林,等.大黄属植物研究进展J.天然产物研究与开发，2009，21( 4) : 690 -7013 李莉.不同道地产区大黄资源现状与药材质量特征及其形成机制研究D.长春：长春中医药大学.20144 王阳
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40、21 杨景宁,王彦荣.PEG模拟干旱胁迫对四种荒漠种子萌发的影响J.草业学报,2012,21(6):23-29.22 李玲,李娘辉,等.植物生理学模块实验指导M.北京:科学出版社,2009:48-50.23 孙霞，高信芬.聚乙二醇（PEG）模拟干旱胁迫对干旱河谷5种木蓝种子萌发影响J.应用与环境生物学报,2010,16(3):317-322.24 周伟伟,王雁,杜静.干旱胁迫对景天属植物生理生化特性的影响J.林业科学研究,2009,22(6):829-834.25 李志萍,张文辉,崔豫川.PEG模拟干旱胁迫对栓皮栎种子萌发及生长生理的影响J.西北植物学报,2013,33(10):2043-20
41、49.26 曲涛,南志标.作物和牧草对干旱胁迫的响应及机理研究进展J.草业学报,2008,17(2):126-135.27 高杨,张新全,谢文刚.干旱胁迫下鸭茅新品系抗旱性研究J.湖北农业科学,2007,46( 6):981-984 .28 张勇,薛林贵,高天鹏,等.荒漠植物种子萌发研究进展J.中国沙漠,2005,25(1):106-112. 29 秦文静,梁宗锁.四种豆科牧草萌发期对干旱胁迫的响应及抗旱性评价J.草业学报,2010,19(4):61-7030 梁国玲,周青平,颜红.聚乙二醇对羊茅属4种植物种子萌发特性的影响研究J.草业科学,2007,24(6):50-54. 31 王海宁,张
42、建利,冯林,等.温度和干旱胁迫对3种牧草种子萌发的影响J.草业科学,2009;26(8):87-92.32 喻泽莉,何平,张春平,等.干旱胁迫对决明种子萌发及幼苗生理特性的影响J.西南大学学报（自然科学版),2012,34(2):39-44.致谢在此，诚挚的感谢我的导师沈云玫老师，以及感谢公维昌在实验中给予的帮助和指导。沈老师工作繁忙，但在百忙之中仍抽时间来指导以及参与到我的毕业论文设计中，从题目的选定、查阅参考资料到实验方案的确定等，自始至终得到了导师的精心指导和热情帮助，其中无不凝结着导师的心血和汗水。导师严谨求实和一丝不苟的学风、扎实勤勉和孜孜不倦的工作态度时刻激励着我努力学习，并将鞭策我在未来的工作中锐意进取、奋发努力。导师的指导将使我终生受益。在此我向她表示我诚挚的谢意。其次，我要感谢我的组友张晶同学以及学院为我们提供的良好的实验环境。在实验过程当中我们互相帮助、共同解决困难，才能使实验顺利的进行和完成。谢谢你们！ 2018年4月1717
