1、病毒学基础知识病毒学基础知识n病毒（Viruses）是一类结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA）、对抗生素不敏感、营严格寄生生活、非细胞形态的最微小生物。第一节病毒的形态与结构第一节病毒的形态与结构一、病毒的大小与形态一、病毒的大小与形态砖形（痘病毒）砖形（痘病毒）n弹状（狂犬病病毒）水泡性口炎病毒）弹状（狂犬病病毒）水泡性口炎病毒）n球形（绝大多数病毒）球形（绝大多数病毒）二、包含体二、包含体病毒在宿主细胞内增殖后，于细胞中形成病毒在宿主细胞内增殖后，于细胞中形成的一种用光学显微镜即可看到的特殊的一种用光学显微镜即可看到的特殊“斑块斑块” 三、病毒的结构与功能三、病毒的结构与功能 1、核酸
2、（芯髓）：、核酸（芯髓）：为单股或双股为单股或双股RNARNA（或（或DNADNA），），导入活细胞后可形成新的完整病毒，并致细胞病导入活细胞后可形成新的完整病毒，并致细胞病变。变。2 2、衣壳：、衣壳：包围芯髓的蛋白质称衣壳，为二十面体或包围芯髓的蛋白质称衣壳，为二十面体或螺旋对称。具有抗原性、保护作用、吸附作用。螺旋对称。具有抗原性、保护作用、吸附作用。 核酸和衣壳统称为核衣壳。核酸和衣壳统称为核衣壳。3 3、襄膜：、襄膜：由脂质、蛋白质和糖类组成，故对乙醚敏由脂质、蛋白质和糖类组成，故对乙醚敏感。有的病毒在襄膜外还有剌突。感。有的病毒在襄膜外还有剌突。4 4、触须：、触须：某些无襄膜的病
3、毒所具有。某些无襄膜的病毒所具有。第二节 病毒的增殖n病毒缺乏生物细胞所具有细胞器、新陈代谢必须病毒缺乏生物细胞所具有细胞器、新陈代谢必须的酶系统和能量。其增殖，只能靠宿主细胞提供的酶系统和能量。其增殖，只能靠宿主细胞提供原料、能量、生物合成场所（细胞器），在病毒原料、能量、生物合成场所（细胞器），在病毒核酸指控下，合成病毒的核酸与蛋白质等成分，核酸指控下，合成病毒的核酸与蛋白质等成分，然后在宿主细胞内装配为成熟的具有感染性的病然后在宿主细胞内装配为成熟的具有感染性的病毒体，再以特定的方式释放到细胞外，感染其它毒体，再以特定的方式释放到细胞外，感染其它易感细胞，病毒的这种增殖方式称为复制。所需
4、易感细胞，病毒的这种增殖方式称为复制。所需时间称为复制周期。时间称为复制周期。病毒复制的过程n一、吸附一、吸附n首先是病毒与宿主细胞之间通过静电引力发生首先是病毒与宿主细胞之间通过静电引力发生的非特异性吸附。其次是病毒与宿主细胞之间的非特异性吸附。其次是病毒与宿主细胞之间有选择性和有特殊亲和力的有选择性和有特殊亲和力的特异性吸附特异性吸附。它是。它是病毒感染具有明显选择性的理论基础。病毒感染具有明显选择性的理论基础。二、穿入二、穿入通过胞饮作用进入细胞，通过胞饮作用进入细胞， 如牛痘病毒如牛痘病毒通过病毒与细胞膜融合后进入细胞，如疱通过病毒与细胞膜融合后进入细胞，如疱疹病毒疹病毒病毒与细胞膜上
5、受体作用进入细胞，如脊病毒与细胞膜上受体作用进入细胞，如脊髓灰质炎病毒髓灰质炎病毒病毒直接完整进入细胞内，如呼肠孤病毒病毒直接完整进入细胞内，如呼肠孤病毒三、脱壳三、脱壳n病毒脱壳包括脱去襄膜和衣壳两个过程病毒脱壳包括脱去襄膜和衣壳两个过程脱襄膜，有的在与细胞膜融合时发生并向胞浆脱襄膜，有的在与细胞膜融合时发生并向胞浆内释放核衣壳如疱疹病毒；有的在吞饮泡内发内释放核衣壳如疱疹病毒；有的在吞饮泡内发生如痘病毒。生如痘病毒。脱衣壳，发生在吞饮泡内或细胞浆内。脱衣壳，发生在吞饮泡内或细胞浆内。n四、生物合成四、生物合成n包括核酸和蛋白质合成。一般为：包括核酸和蛋白质合成。一般为：nDNA病毒（除痘病
6、毒和虹病毒外）在细病毒（除痘病毒和虹病毒外）在细胞核中复制。胞核中复制。nRNA病毒（含痘病毒和虹病毒）在细胞病毒（含痘病毒和虹病毒）在细胞质中复制。质中复制。n病毒脱壳后释放核酸，这时在细胞内查病毒脱壳后释放核酸，这时在细胞内查不到具有感染性的完整病毒子，此期称不到具有感染性的完整病毒子，此期称隐蔽期或黑暗期。隐蔽期或黑暗期。 n五、装配及释放五、装配及释放无襄膜的无襄膜的DNADNA病毒如腺病毒，核酸病毒如腺病毒，核酸与衣壳在细胞核内装配，细胞溶解与衣壳在细胞核内装配，细胞溶解后一次释放。后一次释放。无襄膜的无襄膜的RNARNA病毒如脊髓灰质炎病病毒如脊髓灰质炎病毒，核酸与衣壳在细胞浆内装
7、配，毒，核酸与衣壳在细胞浆内装配，细胞溶解后一次释放。细胞溶解后一次释放。 有襄膜的有襄膜的DNADNA病毒如单纯疱疹病毒，在核内病毒如单纯疱疹病毒，在核内装配为核衣壳。释放方式有三种：装配为核衣壳。释放方式有三种：一是一是移至核移至核膜以芽生方式进入胞浆，获得核膜成分作为襄膜以芽生方式进入胞浆，获得核膜成分作为襄膜。并由此渐渐释放到细胞外；膜。并由此渐渐释放到细胞外；二是二是通过核膜通过核膜裂隙进入胞浆，从胞浆膜上获得襄膜，沿核周裂隙进入胞浆，从胞浆膜上获得襄膜，沿核周围与内质网相通的部位从细内逐渐释放。围与内质网相通的部位从细内逐渐释放。三是三是复合病毒如牛痘病毒的复合病毒如牛痘病毒的DN
8、ADNA与蛋白质均在胞与蛋白质均在胞浆中合成，形成浆中合成，形成“未成熟颗粒未成熟颗粒”经再分化成为经再分化成为成熟颗粒，其中一部分通过细胞表面释放，大成熟颗粒，其中一部分通过细胞表面释放，大部分则通过细胞与细胞之间接触而扩散释。部分则通过细胞与细胞之间接触而扩散释。有襄膜的有襄膜的RNARNA病毒病毒如副流感病毒，核酸与蛋如副流感病毒，核酸与蛋白质在胞浆中装配螺旋状核衣壳，并在感白质在胞浆中装配螺旋状核衣壳，并在感染过程中使病毒特异性染过程中使病毒特异性AgAg成分（如血凝素、成分（如血凝素、神经氨酸）整合于细胞膜上。当病毒以芽神经氨酸）整合于细胞膜上。当病毒以芽生方式通过细胞膜时，获得襄膜
9、，并产生生方式通过细胞膜时，获得襄膜，并产生剌突。剌突。第三节 干扰现象与干扰素o 一、干扰现象 一种病毒（活病毒或灭活病毒）作用于宿主一种病毒（活病毒或灭活病毒）作用于宿主细胞后，可导致另一种在免疫学上有关或无细胞后，可导致另一种在免疫学上有关或无关的病毒株不能在其中正常增殖的现象，关的病毒株不能在其中正常增殖的现象，称称病毒的干扰现象。病毒的干扰现象。二、干扰素n概念：概念： 干扰素（干扰素（IFNIFN）是病毒或其它因素如干扰素诱生）是病毒或其它因素如干扰素诱生剂，剌激脊椎动物组织细胞（体外或体内）产生剂，剌激脊椎动物组织细胞（体外或体内）产生的一种能干扰病毒增殖的特殊蛋白质。的一种能干
10、扰病毒增殖的特殊蛋白质。n产生机理：产生机理： 病毒与细胞病毒与细胞DNADNA中干扰素基因的中干扰素基因的“抑制物抑制物”结结合，从而消除抑制作用，导致产生特异性合，从而消除抑制作用，导致产生特异性mRNAmRNA合成干扰素。合成干扰素。 干扰素被释放以后进入另一个细胞，与细胞干扰素被释放以后进入另一个细胞，与细胞“作用因子约束物作用因子约束物”结合导致产生干扰素。结合导致产生干扰素。n作用机制：作用机制： 干扰素的作用机制不象抗病毒那样直接灭活干扰素的作用机制不象抗病毒那样直接灭活病毒。干扰素对病毒体身没有作用，既不能直病毒。干扰素对病毒体身没有作用，既不能直接阻止其吸附或穿入，也不能阻断
11、释放，而是接阻止其吸附或穿入，也不能阻断释放，而是作用于宿主细胞，使其产生抗病毒蛋白质，这作用于宿主细胞，使其产生抗病毒蛋白质，这种蛋白质附着于细胞的核蛋白体上，选择性地种蛋白质附着于细胞的核蛋白体上，选择性地抑制病毒抑制病毒mRNAmRNA译制为病毒蛋白质，从而影响病译制为病毒蛋白质，从而影响病毒结构蛋白和酶类的合成，使复制受到阻抑而毒结构蛋白和酶类的合成，使复制受到阻抑而呈现抗病毒的作用。即最初感染的细胞由于病呈现抗病毒的作用。即最初感染的细胞由于病毒核酸的剌激被诱导产生干扰素，它透过细胞毒核酸的剌激被诱导产生干扰素，它透过细胞膜向外扩散并进入血液循环进入其它细胞。膜向外扩散并进入血液循环
12、进入其它细胞。n干扰素具有广谱抗病毒作用，又具有干扰素具有广谱抗病毒作用，又具有细胞种属特征。即某一种动物产生的细胞种属特征。即某一种动物产生的干扰素只能保护同种属或近缘种属动干扰素只能保护同种属或近缘种属动物细胞。物细胞。n干扰素是一种活性很强的生物制剂，干扰素是一种活性很强的生物制剂，但对没有但对没有Ag性（或性（或Ag很弱），故治很弱），故治疗病毒性疾病。亦具有抗肿瘤和调节疗病毒性疾病。亦具有抗肿瘤和调节免疫机能的作用。免疫机能的作用。第四节第四节 病毒的抵抗力与分类病毒的抵抗力与分类一、病毒对理化因素的抵抗力一、病毒对理化因素的抵抗力l病毒对理化因素的抵抗力与细菌繁殖体相似病毒对理化因
13、素的抵抗力与细菌繁殖体相似l用理化因素使病毒丧失感染性的过程称灭活用理化因素使病毒丧失感染性的过程称灭活l灭活后的病毒仍然保留其它生物学活性灭活后的病毒仍然保留其它生物学活性1、温度：病毒耐寒不耐热。大多数病毒可在病毒耐寒不耐热。大多数病毒可在4以下以下良好生存，尤其在干冰温度（良好生存，尤其在干冰温度（70）和液）和液氮（氮（196）下更能长期保持其感染性。）下更能长期保持其感染性。而大多数病毒于而大多数病毒于55-601030min灭活，灭活，100迅速灭活。有的在室温下只能存活数迅速灭活。有的在室温下只能存活数小时（流感、麻疹病毒），有的在自然界中小时（流感、麻疹病毒），有的在自然界中可
14、存活数日或数月（肠道病毒群、肝炎病可存活数日或数月（肠道病毒群、肝炎病毒）。但猪瘟毒）。但猪瘟Vi可耐受可耐受502h，701h，1000.51h。2、PH：n大多数病毒在大多数病毒在PH68的范围内保持稳定。的范围内保持稳定。在在PH9.0的环境中迅速灭活。的环境中迅速灭活。n病毒种类不同对病毒种类不同对PH的稳定性亦不同。例的稳定性亦不同。例如呼肠孤病毒能抗如呼肠孤病毒能抗PH3.0；口蹄疫病毒；口蹄疫病毒在在PH6.06.5及及8.09.0迅速灭活，猪迅速灭活，猪水泡病毒在水泡病毒在PH2.2，24h仍具有感染性。仍具有感染性。 多数病毒对氧化剂敏感，常用多数病毒对氧化剂敏感，常用H H
15、2 2O O2 2、K K2 2MOMO4 4、漂白粉、碘化物等灭活病毒。、漂白粉、碘化物等灭活病毒。酚可用于几种病毒的消毒，但不宜于酚可用于几种病毒的消毒，但不宜于脊髓灰质炎病毒。脊髓灰质炎病毒。4 4、甘油和抗生素：、甘油和抗生素：常用常用50%50%甘油生理盐水并加甘油生理盐水并加“双抗双抗”保保存病毒病料。存病毒病料。二、病毒的分类二、病毒的分类1、按病毒的性质综合来分类：、按病毒的性质综合来分类：双股或单股、有无包膜、立体或螺旋体对称、双股或单股、有无包膜、立体或螺旋体对称、子粒多少、颗粒大小、对乙醚敏感性等方面对子粒多少、颗粒大小、对乙醚敏感性等方面对病毒分类。病毒分类。2、依传染途径不同分类：、依传染途径不同分类：呼吸道病毒、肠病毒、虫媒病毒等。呼吸道病毒、肠病毒、虫媒病毒等。3、根据寄生宿主不同分类：、根据寄生宿主不同分类：细菌病毒、植物病毒、动物病毒。细菌病毒、植物病毒、动物病毒。第五节第五节 病毒的分离培养病毒的分离培养l一、病料的采集与送检一、病料的采集与送检l尽早采取病料尽早采取病料l部位适宜部位适宜 l冷藏速送冷藏速送 l二、病毒的分离二、病毒的分离 细胞致病作用细胞致病作用(CPE) 红细胞吸附现象红细胞吸附现象 干扰现象干扰现象
