1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查 Test for purity Contents 概概 述述1一般杂质检查法一般杂质检查法2特殊杂质检查法特殊杂质检查法来源（一）生产过程中引入的杂质（一）生产过程中引入的杂质（二）贮藏过程中引入的杂质（二）贮藏过程中引入的杂质种种 类类来源来源一般杂质一般杂质特殊杂质特殊杂质 结构结构无机杂质无机杂质有机杂质有机杂质性质性质信号杂信号杂质质有害杂有害杂质质理化性质理化性质有机杂质有机杂质无机杂质无机杂质残留溶剂残留溶剂 杂质限量检查杂质限量检查灵敏度法灵敏度法对照法对照法 比较法比较法对照法对照法对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 氯化物氯化物 取本品取本品
2、2.0g2.0g，加水，加水100ml,100ml,加热溶解后，加热溶解后，冷却，滤过，取滤液冷却，滤过，取滤液25ml25ml，依法检，依法检 查（附查（附录录 A A），与标准氯化钠溶液），与标准氯化钠溶液5.0ml 5.0ml 制成制成的对照液比较，不得更浓的对照液比较，不得更浓(0.01(0.01)。硫酸盐硫酸盐 取氯化物项下剩余的滤液取氯化物项下剩余的滤液25ml25ml，依法，依法检查（附录检查（附录 B B），与标准硫酸钾溶），与标准硫酸钾溶 液液1.0ml 1.0ml 制成的对照液比较，不得更浓制成的对照液比较，不得更浓(0.02(0.02)。对照法对照法葡萄糖注射液葡萄糖注射
3、液 重金属重金属 取本品适量（约相当于葡萄糖取本品适量（约相当于葡萄糖3g3g），），必要时，蒸发至约必要时，蒸发至约20ml20ml，放冷，加醋酸盐，放冷，加醋酸盐缓冲液缓冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml与水适量使成与水适量使成25ml25ml，依，依法检查（附录法检查（附录 H H第一法），按葡萄糖含第一法），按葡萄糖含 量计算，含重金属不得过百万分之五。量计算，含重金属不得过百万分之五。灵敏度法灵敏度法硫鸟嘌呤硫鸟嘌呤 游离硫游离硫 取本品取本品50mg50mg，加氢氧化钠试液，加氢氧化钠试液5ml 5ml，振摇溶解，振摇溶解后，溶液应澄清。后，溶液应澄清。比较法比较法 盐酸
4、去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 酮体酮体 取本品，加水制成每取本品，加水制成每1ml 1ml 中含中含2.0mg 2.0mg 的溶液，照的溶液，照分光光度法（附录分光光度法（附录 A A），），在在310nm 310nm 的波长处的波长处测定吸收度，不得大于测定吸收度，不得大于0.200.20。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法一、氯化物一、氯化物 布洛芬布洛芬 【检查检查】氯化物氯化物 取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水50ml50ml，振摇，振摇5 5 分钟，滤过，取续滤液分钟，滤过，取续滤液25ml25ml，依，依 法检查（附录法检查（附录 A A），与标准氯化钠溶
5、液），与标准氯化钠溶液5.0ml 5.0ml 制成的对照制成的对照液比较，不得更浓液比较，不得更浓(0.010(0.010)。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法 卡托普利卡托普利【检查检查】硫酸盐硫酸盐 取本品取本品1.0g1.0g，依法检查，依法检查（附录（附录 B B），与标准硫酸钾溶液），与标准硫酸钾溶液5.0ml5.0ml制成的对照液制成的对照液 比较，不得更浓比较，不得更浓(0.05(0.05)。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法三、铁盐检查法三、铁盐检查法 泛影酸泛影酸 【检查检查】铁盐铁盐 取炽灼残渣项下遗留的残
6、渣，加取炽灼残渣项下遗留的残渣，加盐酸盐酸1ml,1ml,置水浴上蒸干，再加稀盐酸置水浴上蒸干，再加稀盐酸1ml 1ml 与与 水水适量，置水浴上加热，滤过，坩埚用水洗涤，适量，置水浴上加热，滤过，坩埚用水洗涤，合并滤液与洗液使成合并滤液与洗液使成25ml25ml，依法检查（，依法检查（附录附录 G G），与标准铁溶液），与标准铁溶液1.0ml 1.0ml 用同一方法制成的对用同一方法制成的对照液比较，不得更深照液比较，不得更深(0.001%)(0.001%)。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法四、重金属检查法四、重金属检查法 环拉酸钠环拉酸钠 重金属重金属 取本品取本品1.
7、0g1.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，加醋酸溶解后，加醋酸盐缓冲液盐缓冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml，依法检查（，依法检查（附录附录 H H第一法），含重金属不得过百万分之第一法），含重金属不得过百万分之十。十。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法四、重金属检查法四、重金属检查法 供试品置瓷坩锅中供试品置瓷坩锅中用浓硫酸破坏用浓硫酸破坏炽灼，炽灼，HNOHNO3 3破坏破坏蒸干除尽蒸干除尽NONO2 2残渣加盐酸，残渣加盐酸，生成水溶性氯化物生成水溶性氯化物氨试液调节至中性氨试液调节至中性醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液pH=3.5pH=3.5依法试验依法试验
8、第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法五、砷盐检查法五、砷盐检查法 苯丙氨酸苯丙氨酸砷盐砷盐 取本品取本品2.0g2.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，加盐酸溶解后，加盐酸5ml5ml，依法检查依法检查(附录附录 J J 第一法第一法)，应符合规，应符合规定定 (0.0001(0.0001)。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法（1 1）目视比色法）目视比色法 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪溶液的澄清度与颜色溶液的澄清度与颜色 取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水10ml10ml溶解后，溶液应澄清无溶解后，溶液应澄清无色；色；如显
9、浑如显浑 浊，与浊，与1 1 号浊度标准液（附录号浊度标准液（附录 B B）比较，不得更浓；如显色，与黄色）比较，不得更浓；如显色，与黄色2 2 号标准号标准比色液比色液 （附录（附录 A A第一法）比较，不得更深。第一法）比较，不得更深。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法（）分光光度法（）分光光度法 华法林钠华法林钠 溶液的澄清度溶液的澄清度 取本品取本品0.50g 0.50g，加水，加水10ml10ml溶解后，溶液应澄清；如显溶解后，溶液应澄清；如显浑浊，与浑浊，与1 1号浊号浊 度标准液（附录度标准液（附录 B B）比较，不得更浓。）
10、比较，不得更浓。丙酮溶液的澄清度与颜色丙酮溶液的澄清度与颜色 取本品取本品 0.20g0.20g，加丙酮，加丙酮10ml10ml溶解后，溶液应澄清无色；溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与如显浑浊，与1 1 号浊度标号浊度标准液（附录准液（附录 B B）比较，不得更浓；如显色，置）比较，不得更浓；如显色，置4cm 4cm 吸吸收池中，收池中，依法检查（附录依法检查（附录 A A 第二法第二法），在），在460nm 460nm 的的波长处测定吸收度，不得过波长处测定吸收度，不得过0.120.12。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法（）色差计
11、法（）色差计法 用色差计直接测定药物溶液的三刺激值用色差计直接测定药物溶液的三刺激值（在给定的三色系统中与待测色达到色匹（在给定的三色系统中与待测色达到色匹配所需要的三个原刺激量），对其颜色进配所需要的三个原刺激量），对其颜色进行定量表述和分析。行定量表述和分析。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法七、易炭化物检查法七、易炭化物检查法 阿司匹林阿司匹林 易炭化物易炭化物 取本品取本品0.5g0.5g，依法检查（附录，依法检查（附录 K K），），与对照液（取比色用氯化钴液与对照液（取比色用氯化钴液 0.25ml0.25ml、比色用重铬酸钾液比色用重铬酸钾液0.25ml0.25m
12、l、比色用硫酸铜、比色用硫酸铜液液0.40ml0.40ml，加水使成，加水使成5ml 5ml）比较，不）比较，不 得得更深。更深。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法八、溶液的澄清度检查八、溶液的澄清度检查 塞替派塞替派【检查检查】溶液的澄清度溶液的澄清度 取本品取本品0.20g 0.20g，加水加水10ml10ml溶解后，溶液应澄清；如显浑溶解后，溶液应澄清；如显浑 浊，与浊，与1 1号浊度标准液（附录号浊度标准液（附录 B B）比较，）比较，不得更浓。不得更浓。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法九、炽灼残渣检查法九、炽灼残渣检查法 供试品置瓷坩锅中用浓硫酸
13、炭化低温除尽硫酸低温除尽硫酸700-800700-800炽灼炽灼灰化灰化,放冷放冷700-800700-800炽灼炽灼恒重恒重 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法九、炽灼检查法九、炽灼检查法阿苯达唑阿苯达唑 炽灼残渣炽灼残渣 取本品取本品1.0g1.0g，依法检查（附录，依法检查（附录 N N），遗留残渣不得过），遗留残渣不得过0.2 0.2。第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法1.1.常压恒温常压恒温干燥法干燥法4.4.热分析法热分析法2.2.恒温恒温 减压减压干燥法干燥法3.3.干燥剂干燥剂干燥法干燥法十、十、干燥失重测定法干燥失重测定法 第二节第二节 一般杂
14、质的检查方法一般杂质的检查方法十、干燥失重测定法十、干燥失重测定法奥沙西泮奥沙西泮 干燥失重干燥失重 取本品，在取本品，在105 105 干燥至恒重，减失重量不得干燥至恒重，减失重量不得过过1.01.0（附录（附录 L L）。）。第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法热重分析热重分析差热分析差热分析差热扫描量热法 第二节第二节 一般杂质的检查方一般杂质的检查方法法十一、水份测定法十一、水份测定法Karl FisherKarl Fisher法测定药物中的水份法测定药物中的水份()标定标定 用水分测定仪直接标定。或取干燥的具塞玻用水分测定仪直接标定。或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水
15、约瓶，精密称入重蒸馏水约30 mg30 mg，除另有规定外加无水，除另有规定外加无水甲醇甲醇2 25ml5ml，用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永或用永 停滴定法（附录停滴定法（附录 A A）指示终点；另作空白试）指示终点；另作空白试验，按下式计算。验，按下式计算。F FA AB B 式中式中 F F为每为每1ml1ml费休费休氏试液相当于水的重量，氏试液相当于水的重量，mgmg；W W为称取重蒸馏水的重量，为称取重蒸馏水的重量，mgmg；A A为滴定所消耗费休氏试液的容积，为滴定所消耗费休氏试液的容积，mlml；B B为空白为空白所消耗费休氏试液的
16、容积，所消耗费休氏试液的容积，mlml。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法测定法测定法 精密称取供试品适量精密称取供试品适量(约消耗费休氏试液约消耗费休氏试液1 15ml),5ml),除另有除另有规定外规定外,溶剂为甲溶剂为甲 醇，用水分测定仪直接测定。或将供醇，用水分测定仪直接测定。或将供试品置干燥的具塞玻瓶中，加溶剂试品置干燥的具塞玻瓶中，加溶剂2 25ml5ml，在不断，在不断 振振摇摇(或搅拌或搅拌)下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色棕色,或用永停滴定法或用永停滴定法(附录附录 A)A)指示终点；另作空白指示终点；另作空白
17、试验，按下式计算。试验，按下式计算。供试品中水分含量供试品中水分含量()(A(AB)F B)F W W 100100式中式中 A A为供试品所消耗费休氏试液的容积为供试品所消耗费休氏试液的容积,ml,ml；B B为空白所消耗费休氏试液的容积为空白所消耗费休氏试液的容积,ml,ml；F F为每为每1ml1ml费休氏试液相当于水的重量费休氏试液相当于水的重量,mg,mg；W W为供试品的重量为供试品的重量,mg,mg。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法十一、水份测定法十一、水份测定法Karl FisherKarl Fisher法测定药物中的水份法测定药物中的水份阿莫西林阿莫西林
18、水分水分 取本品，照水分测定法（附录取本品，照水分测定法（附录 M M第一法第一法A A）测定，）测定，含水分应为含水分应为12.012.015.015.0。 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法十二、残留溶剂测定法十二、残留溶剂测定法1毒性大，致癌，毒性大，致癌，有害于环境，避有害于环境，避免使用免使用苯，四氯化碳，苯，四氯化碳，二氯甲烷，三氯二氯甲烷，三氯甲烷甲烷2对人有一定毒性对人有一定毒性，限制使用，限制使用乙腈，氯苯，甲乙腈，氯苯，甲醇，吡啶醇，吡啶3对人无毒性，推对人无毒性，推荐使用荐使用乙酸，丙酮，正乙酸，丙酮，正丁醇丁醇 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的
19、检查方法白田道夫法作为锑干扰时的补充方法。白田道夫法作为锑干扰时的补充方法。原理：氯化亚锡在盐酸酸性中将砷盐还原成棕褐原理：氯化亚锡在盐酸酸性中将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液同法处理后色的胶态砷，与一定量标准砷溶液同法处理后的颜色比较，可判断供试品中的含砷量。的颜色比较，可判断供试品中的含砷量。灵敏度：以灵敏度：以ASAS2 2O O3 3计为计为20ug20ug。加入少量二氯化汞可。加入少量二氯化汞可提高灵敏度：提高灵敏度：2ug2ug 。一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法氯化物与硫酸盐氯化物与硫酸盐水份与残留溶剂水份与残留溶剂铁盐与重金属铁盐与重金属砷盐与溶液的颜色砷盐与
20、溶液的颜色炽灼残渣与干燥失重炽灼残渣与干燥失重澄清度与易炭化物澄清度与易炭化物检查内容检查内容 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法一、物理分析法一、物理分析法（）特殊气味（）特殊气味乙醇中杂醇油检查乙醇中杂醇油检查取本品取本品10ml10ml，加水，加水5ml 5ml 与甘油与甘油1ml 1ml，摇匀，摇匀后，分次滴加在无臭的滤纸上，后，分次滴加在无臭的滤纸上，使乙醇使乙醇自然挥散，始终不得发生异臭。自然挥散，始终不得发生异臭。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）特殊颜色（）特殊颜色盐酸胺碘酮盐酸胺碘酮 游离碘游离碘 取本品取本品0.5g0.5g，加水，加水
21、10ml10ml，振摇，振摇3030秒秒钟，放置钟，放置5 5 分钟，滤过，滤液加稀硫酸分钟，滤过，滤液加稀硫酸 1ml 1ml 与氯仿与氯仿2ml 2ml，振摇，氯仿层不得显色。，振摇，氯仿层不得显色。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）特殊颜色（）特殊颜色盐酸胺碘酮盐酸胺碘酮 游离碘游离碘 取本品取本品0.5g0.5g，加水，加水10ml10ml，振摇，振摇3030秒秒钟，放置钟，放置5 5 分钟，滤过，滤液加稀硫酸分钟，滤过，滤液加稀硫酸 1ml 1ml 与氯仿与氯仿2ml 2ml，振摇，氯仿层不得显色。，振摇，氯仿层不得显色。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂
22、质的检查方法（）溶解度差异（）溶解度差异高三尖杉酯碱高三尖杉酯碱 溶液的澄清度溶液的澄清度 取本品取本品10mg10mg，加，加0.1 0.1 酒石酒石酸溶液酸溶液10ml10ml溶解后，溶液应溶解后，溶液应 澄清。澄清。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）比旋度的测定（）比旋度的测定硫酸阿托品硫酸阿托品 莨菪碱莨菪碱 取本品，按干燥品计算，加水制成取本品，按干燥品计算，加水制成每每1ml 1ml 中含中含50mg50mg的溶液的溶液,依法测定（附录依法测定（附录 E E），旋光度不得过），旋光度不得过0.400.40。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法二
23、、化学分析法二、化学分析法（）酸碱性差异（）酸碱性差异乙琥胺乙琥胺 酸度酸度 取本品取本品0.10g 0.10g，加水，加水10ml10ml使溶解，依使溶解，依法测定（附录法测定（附录 H H），），pH pH 值应为值应为3.0 3.0 4.5 4.5。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）氧化还原性差异（）氧化还原性差异盐酸可卡因盐酸可卡因 肉桂酰可卡因与其他易氧化物肉桂酰可卡因与其他易氧化物 取本品取本品0.10g 0.10g，加水，加水5ml 5ml 溶解后，加溶解后，加5 5 硫酸溶液硫酸溶液 0.3ml 0.3ml 与高锰酸钾滴定液与高锰酸钾滴定液(0.02mol
24、/L)0.10ml(0.02mol/L)0.10ml，密塞，在，密塞，在15152020的暗处放置的暗处放置3030分钟，分钟，紫色不得完全消失紫色不得完全消失。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）沉淀反应（）沉淀反应间苯二酚间苯二酚 邻苯二酚邻苯二酚 取本品取本品0.5g0.5g，加水，加水10ml10ml溶解后，溶解后，加稀醋酸加稀醋酸2 2 滴与醋酸铅试液滴与醋酸铅试液0.5ml 0.5ml，不，不 得发生浑浊。得发生浑浊。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）显色反应（）显色反应盐酸乙基吗啡盐酸乙基吗啡 吗啡吗啡 取本品取本品0.10g 0.10g
25、，加盐酸溶液，加盐酸溶液(91000)5ml(91000)5ml使溶解，再加亚硝酸钠试液使溶解，再加亚硝酸钠试液2ml 2ml，摇匀，放置摇匀，放置1515分钟，加氨试液分钟，加氨试液3ml 3ml，摇匀；如显黄棕色，摇匀；如显黄棕色，与吗啡溶液与吗啡溶液取无水吗啡取无水吗啡2.0 mg2.0 mg，加盐酸溶液，加盐酸溶液(91000)(91000)使溶解成使溶解成100ml 100ml 5.0ml 5.0ml 用同一方用同一方法制成的对照液比较，不法制成的对照液比较，不 得更深得更深(0.1(0.1)。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法（）产生气体反应（）产生气体反应氧化镁
26、氧化镁 碳酸盐碳酸盐 取本品取本品0.10g 0.10g，加水，加水5ml 5ml，煮沸，煮沸，放冷，加醋酸放冷，加醋酸5ml 5ml，不得泡沸。，不得泡沸。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法三、光谱分析法三、光谱分析法1 1、紫外光谱法、紫外光谱法（）杂质有最大吸收（）杂质有最大吸收华法林钠华法林钠 酚酮酚酮 取本品，加取本品，加5 5 氢氧化钠溶液制成氢氧化钠溶液制成每每1ml 1ml 中含中含0.125g0.125g的溶液，照分光光度法的溶液，照分光光度法 （附录（附录 A A），于），于1515分钟内在分钟内在385nm 385nm 的波的波长处测定吸收度，不得过长处
27、测定吸收度，不得过0.300.30。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法2 2、红外光谱法、红外光谱法甲苯咪唑甲苯咪唑 【检查检查】晶型晶型 取本品与含晶型为取本品与含晶型为1010的甲苯咪唑对照的甲苯咪唑对照品各约品各约25mg25mg，分别加，分别加 液状石蜡液状石蜡0.3ml 0.3ml，研磨均匀，制成厚，研磨均匀，制成厚度约度约0.15mm0.15mm的石蜡糊片，同时制作厚度相同的空白的石蜡糊片，同时制作厚度相同的空白 液状石液状石蜡糊片作参比，照红外分光光度法（附录蜡糊片作参比，照红外分光光度法（附录 C C）测定并调节）测定并调节供试品与对照品在供试品与对照品在 8
28、03cm803cm-1-1 波数处的透光率为波数处的透光率为90909595，分，分别记录别记录620 620 803cm803cm-1-1 波数处的红外光吸收图波数处的红外光吸收图 谱。在约谱。在约620cm620cm-1-1 和和803cm803cm-1-1波数处的最小吸收峰间联接一基线，再在波数处的最小吸收峰间联接一基线，再在约约640cm640cm-1-1和和 662cm662cm-1-1波数处的最大吸收峰之顶处作垂线使基波数处的最大吸收峰之顶处作垂线使基线相交，从而得到这些最大吸收峰处的校线相交，从而得到这些最大吸收峰处的校 正吸收值，供试正吸收值，供试品在约品在约640cm640c
29、m-1-1 与与662cm662cm-1-1波数处的校正吸收值之比，不得大波数处的校正吸收值之比，不得大于含晶型于含晶型 为为1010的甲苯咪唑对照品在该波数处的校正吸的甲苯咪唑对照品在该波数处的校正吸收值之比。收值之比。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法3 3、原子吸收分光光度法、原子吸收分光光度法维生素维生素 铁铁 取本品取本品5.0g5.0g两份，分别置两份，分别置25ml25ml量瓶中，一份中加量瓶中，一份中加0.1mol/L0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至硝酸溶液溶解并稀释至 刻度，摇匀，作为供刻度，摇匀，作为供试品溶液试品溶液(B)(B)；另一份中加标准铁溶液
30、（精密称取硫酸；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵铁铵863mg863mg，置，置 1000ml1000ml量瓶中，加量瓶中，加1mol/L1mol/L硫酸溶液硫酸溶液25ml25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml10ml，置，置100ml 100ml 量瓶量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml1.0ml，加，加0.1mol/L0.1mol/L硝酸硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液作为对照溶液(A)(A)。照。照原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法（附录（附录 D D 杂质检查法），在
31、杂质检查法），在248.3nm248.3nm的波长处的波长处 分别测定，应符合规定。分别测定，应符合规定。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法四、色谱分析法四、色谱分析法1 1、薄层相色谱法、薄层相色谱法 设备简单，操作简便，分离速度快，灵敏度和设备简单，操作简便，分离速度快，灵敏度和分辩率较高分辩率较高）杂质对照品法）杂质对照品法）自身对照法）自身对照法）杂质对照品法与自身对照法联用）杂质对照品法与自身对照法联用）对照药物法）对照药物法 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法1 1、薄层相色谱法、薄层相色谱法）杂质对照品法）杂质对照品法枸橼酸乙胺嗪枸橼酸乙胺嗪 【
32、检查检查】甲基哌嗪甲基哌嗪 取本品，加甲醇制成每取本品，加甲醇制成每1ml 1ml 中含中含50mg50mg的溶液，作为供试的溶液，作为供试 品溶液，另取甲基哌嗪对品溶液，另取甲基哌嗪对照品，加甲醇制成每照品，加甲醇制成每1ml 1ml 中含中含50g 50g 的溶液，作为对照的溶液，作为对照品品 溶液。照薄层色谱法（附录溶液。照薄层色谱法（附录 B B）试验，吸取上述）试验，吸取上述两种溶液各两种溶液各10l 10l，分别点于同一硅，分别点于同一硅 胶薄层板上，胶薄层板上，以氯仿甲醇氨溶液以氯仿甲醇氨溶液(13:5:1)(13:5:1)为展开剂，展开后，晾为展开剂，展开后，晾干，置碘蒸气中显
33、干，置碘蒸气中显 色。供试品溶液如显与对照品相应色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不 得更深得更深(0.1(0.1)。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法）自身对照法）自身对照法吡罗昔康吡罗昔康 【检查检查】有关物质有关物质 取本品，加氯仿制成每取本品，加氯仿制成每1ml 1ml 中含中含20mg20mg的的溶液，作为供试品溶溶液，作为供试品溶 液；精密量取适量，加氯仿稀释成每液；精密量取适量，加氯仿稀释成每1ml 1ml 中含中含0.2mg 0.2mg 的溶液，作为对照溶液。照薄层色的溶液，
34、作为对照溶液。照薄层色 谱法谱法（附录（附录 B B）试验，吸取上述两种溶液各）试验，吸取上述两种溶液各10l10l，分别点于，分别点于同一硅胶同一硅胶254 254 薄层板薄层板 （0.5 0.5 羧甲基纤维素钠与羧甲基纤维素钠与1mol/L1mol/L氢氧化钠溶液等容混合液为黏合剂）上，以氯仿氢氧化钠溶液等容混合液为黏合剂）上，以氯仿丙丙 酮甲醇酮甲醇(25:25:5)(25:25:5)为展开剂，展开后，晾干，置紫外为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯光灯(254nm)(254nm)下检视。供试品溶下检视。供试品溶 液如显杂质斑点，与对照液如显杂质斑点，与对照溶液所显的主斑点比较，不得更深。
35、溶液所显的主斑点比较，不得更深。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法）杂质对照品法与自身对照法联用）杂质对照品法与自身对照法联用 硫酸奈替米星硫酸奈替米星 有关物质有关物质 取本品，加水制成每取本品，加水制成每1ml1ml中含中含150mg150mg的溶液，作的溶液，作为供试品溶液；另取奈替米星标准品，分别加水制成每为供试品溶液；另取奈替米星标准品，分别加水制成每1ml1ml中含中含1.5mg1.5mg和和3mg3mg的溶液，作为标准品溶液的溶液，作为标准品溶液(1)(1)、(2)(2)；取西梭米星标准品，加水制成每取西梭米星标准品，加水制成每1ml1ml中含中含1.44mg1
36、.44mg的溶液，的溶液，作为标准品溶液作为标准品溶液(3)(3)。照薄层色谱法。照薄层色谱法(附录附录 B)B)试验，试验，吸取上述四种溶液各吸取上述四种溶液各2l2l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G G薄层板薄层板上，以二氯甲烷上，以二氯甲烷-甲醇甲醇-浓氨溶液浓氨溶液(4:4:2)(4:4:2)为展开剂，展为展开剂，展开后，晾干，喷以开后，晾干，喷以0.20.2茚三酮的水饱和正丁醇溶液，茚三酮的水饱和正丁醇溶液，在在110110加热加热2020分钟。供试品溶液如显杂质斑点，其颜分钟。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与标准品溶液色与标准品溶液(3)(3)所显主斑点相比较，不得更深所显主
37、斑点相比较，不得更深(1(1)，其他杂质与标准品溶液其他杂质与标准品溶液(1)(1)所显主斑点相比较，均不得所显主斑点相比较，均不得更深更深(1(1)，如有一点超过，应不深于标准品溶液，如有一点超过，应不深于标准品溶液(2)(2)的的主斑点主斑点(2(2)。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法）药物对照法）药物对照法马来酸麦角新碱马来酸麦角新碱 【检查检查】有关物质有关物质 取本品，加乙醇浓氨溶液取本品，加乙醇浓氨溶液(9:1)(9:1)制制成每成每1ml1ml中含中含5mg 5mg 的溶液的溶液 (1)(1)与每与每1ml1ml中含中含0.2mg 0.2mg 的溶的溶液液(2
38、)(2)，同时取，同时取马来酸麦角新碱对照品马来酸麦角新碱对照品制成每制成每1ml1ml中含中含5mg 5mg 的的 溶液溶液(3)(3)，照薄层色谱法（附录，照薄层色谱法（附录 B B）试验，）试验，吸取上述三种溶液各吸取上述三种溶液各10l,10l,分别点于硅胶分别点于硅胶 薄层板上，薄层板上，以氯仿甲醇水以氯仿甲醇水(25:8:1)(25:8:1)为展开剂，展开后，晾干，为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯置紫外光灯(365nm)(365nm)下检视，溶液下检视，溶液(1)(1)主斑点的颜色主斑点的颜色及位置应与溶液及位置应与溶液(3)(3)的主斑点相一致，所显杂质斑点的主斑点相一致，所显
39、杂质斑点 的颜色不得深于溶液的颜色不得深于溶液(3)(3)对应的杂质斑点，并不得有溶对应的杂质斑点，并不得有溶液液(3)(3)以外的杂质斑点；溶液以外的杂质斑点；溶液(2)(2)除主斑点外，不得显除主斑点外，不得显任何杂质斑点。任何杂质斑点。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法2 2、高效液相色谱法、高效液相色谱法 分离效能高，专属性强和检测灵敏度高，可准分离效能高，专属性强和检测灵敏度高，可准确测量各组分的峰面积确测量各组分的峰面积）峰面积归一化法）峰面积归一化法）不加校正因子的主成分自身对照法）不加校正因子的主成分自身对照法）加校正因子的主成分自身对照法）加校正因子的主成分
40、自身对照法）内标法加校正因子测定供试品中杂质）内标法加校正因子测定供试品中杂质）外标法）外标法 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法 2 2）不加校正因子的主成分自身对照法）不加校正因子的主成分自身对照法 尼群地平尼群地平 有关物质有关物质 避光操作。取本品，加甲醇分别制成每避光操作。取本品，加甲醇分别制成每1ml 1ml 中含中含1.0mg 1.0mg 的供试品溶液和的供试品溶液和 每每1ml 1ml 中含中含10g 10g 的预试溶液。照的预试溶液。照高效液相色谱法（附录高效液相色谱法（附录 D D）测定，以十八烷基硅烷）测定，以十八烷基硅烷 键合键合硅胶为填充剂；甲醇水硅胶
41、为填充剂；甲醇水(7:3)(7:3)为流动相；检测波长为为流动相；检测波长为237nm 237nm。理论板数按尼群地。理论板数按尼群地 平峰计算应不低于平峰计算应不低于20002000。取预。取预试溶液试溶液10l 10l 注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度，注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的1010；再取供；再取供试品溶液试品溶液10l 10l 注入液相色谱注入液相色谱 仪，记录色谱图至主成分峰仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的保留时间的2.5 2.5 倍。供试品溶液的色谱图中如显示杂质峰，倍。供试品溶液的
42、色谱图中如显示杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于总面积的量取各杂质峰面积的和，不得大于总面积的7.0 7.0。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法四、色谱分析法四、色谱分析法（二）高效液相色谱法（二）高效液相色谱法）外标法）外标法卡托普利卡托普利 【检查检查】卡托普利二硫化物卡托普利二硫化物 避光操作。取本品，加甲醇制成每避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml1ml中含中含2mg2mg的溶液的溶液 ，作为供试品，作为供试品溶液（立即使用）溶液（立即使用）;另取卡托普利二硫化物对照品适量，加甲醇制另取卡托普利二硫化物对照品适量，加甲醇制成每成每1ml1ml中中 含含30g30g
43、的溶液，作为对照品溶液（的溶液，作为对照品溶液（1 1）；再另取卡托）；再另取卡托普利对照品与托普利二硫化物对照品普利对照品与托普利二硫化物对照品 适量，加甲醇制成每适量，加甲醇制成每1ml1ml中中各含各含10g10g的混合溶液，作为对照品溶液（的混合溶液，作为对照品溶液（2 2）。照高效液相色谱）。照高效液相色谱法法 （附录（附录 D D）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；9 9四氢呋喃的甲醇溶液四氢呋喃的甲醇溶液0.050.05 磷酸溶液（磷酸溶液（33:6733:67）为流动相；检）为流动相；检测波长为测波长为220nm220nm，用外标法进
44、行测定。取对照品溶液（，用外标法进行测定。取对照品溶液（2 2）20l20l注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度，使卡托普利色谱峰注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度，使卡托普利色谱峰的峰高约为满量程的的峰高约为满量程的 5050；相对保留时间卡托普利约为；相对保留时间卡托普利约为1.01.0，卡，卡托普利二硫化物为托普利二硫化物为3.23.2。精密量取供试品溶液和对。精密量取供试品溶液和对 照品溶液（照品溶液（1 1）各各20l20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液如显与，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液如显与对照品溶液对照品溶液 （1 1）相应的卡托普利二硫化物色
45、谱峰，其含量不得）相应的卡托普利二硫化物色谱峰，其含量不得过过1.5%1.5%。 第三节第三节 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法 1 1）峰面积归一化法）峰面积归一化法 ）加校正因子的主成分自身对照法）加校正因子的主成分自身对照法红霉素红霉素 ）内标法加校正因子测定供试品中杂质）内标法加校正因子测定供试品中杂质1.1.药物的质量可以从哪三个方面考查药物的质量可以从哪三个方面考查?它们它们在质量标准中又是通过哪些项目来衡量的在质量标准中又是通过哪些项目来衡量的?2.2.药物中的杂质可分为哪几类？简述杂质药物中的杂质可分为哪几类？简述杂质的来源有哪些？的来源有哪些？一般杂质检查和特殊杂质检查分别指一般杂质检查和特殊杂质检查分别指哪些项目？它们各自的检查方法和原理？哪些项目？它们各自的检查方法和原理？思考题思考题L O G OL O G O
