1、 目 录前言 临床前药理评价的基本要求主要药效学研究安全药理学研究复方药理学研究23145作用机制研究6一、临床前药理学研究的目的和主要内容临床前药理学研究的目的和主要内容判断一个新药是否有预防、治疗和诊断疾病的作判断一个新药是否有预防、治疗和诊断疾病的作用，即是否有效，有效程度如何；用，即是否有效，有效程度如何；和已知现有药物比较有何特长；和已知现有药物比较有何特长；通过药理作用机制的探讨为进一步了解药物作用通过药理作用机制的探讨为进一步了解药物作用或开发新药提供依据。或开发新药提供依据。前言前言临床前药理学研究的临床前药理学研究的目的目的临床前药理评价是临床前药理评价是新药评价新药评价的的
2、核心核心之一，有效与之一，有效与否决定该药能否进入临床评价，其主要内容包括否决定该药能否进入临床评价，其主要内容包括药效学、药效学、一般药理学一般药理学 、药动学和药理作用机制、药动学和药理作用机制研究。研究。主要药效学：主要药效学：与防治作用有关的主要药理作用研究一般药理学一般药理学：对机体其他系统的作用药动学：药动学：药物在体内的含量随时间变化的规律药理作用机制研究药理作用机制研究：探讨药物产生作用的机制第一节 临床前药理评价的基本要求根据新药临床前药理指导原则，提出相关要求根据新药临床前药理指导原则，提出相关要求1.1.研究人员研究人员 课题负责人必须是有课题负责人必须是有扎实的基础理论
3、知识扎实的基础理论知识、有相有相当知识面的当知识面的 、有、有丰富实践经验丰富实践经验的药理毒理学家，的药理毒理学家，并并熟悉新药审批熟悉新药审批办法的有关规定办法的有关规定 ，尤其是临床前，尤其是临床前药理药理 、毒理学的有关规定、毒理学的有关规定 。研究人员应经过专门培训，技术熟练，操作准确，研究人员应经过专门培训，技术熟练，操作准确，观察仔细，作风踏实，这样结果才能可靠。观察仔细，作风踏实，这样结果才能可靠。试验者应在完整整洁实验记录上签字，以供课题试验者应在完整整洁实验记录上签字，以供课题负责人或单位主管领导的检查。必要时还应接受负责人或单位主管领导的检查。必要时还应接受药政部门的抽查
4、。药政部门的抽查。临床前药理评价的基本要求临床前药理评价的基本要求2.2.受试药物受试药物 结构确定结构确定 、制备工艺基本稳定、制备工艺基本稳定，药物或制，药物或制 剂基剂基本稳定，并符合临床研究用药品质量标准的规定，本稳定，并符合临床研究用药品质量标准的规定，最好能提供与临床前其他基础研究质量同一的药最好能提供与临床前其他基础研究质量同一的药品。所用试剂应表明批号、品。所用试剂应表明批号、厂家和规格要求厂家和规格要求 。3.3.实验动物实验动物 应符合国家规定的等级动物要求。一般用正常成应符合国家规定的等级动物要求。一般用正常成年动物，必要时可用特定年动物，必要时可用特定年龄、性别年龄、性
5、别的动物和特的动物和特定的定的模型模型动物。动物。4.4.实验仪器实验仪器 应符合要求，写明厂家、规格要能保持正常工作，应符合要求，写明厂家、规格要能保持正常工作，并有专人定期校验，误差在允许范围之内。并有专人定期校验，误差在允许范围之内。5.5.实验设计实验设计 应遵循科学研究的基本规律应遵循科学研究的基本规律 ，按随机，按随机 、对照和、对照和重复的原则进行设计。重复的原则进行设计。6.6.实验记录实验记录 尽量采用客观的仪器记录，做到表格化。观察指尽量采用客观的仪器记录，做到表格化。观察指标、记录时间、评判标准等均应通过预试事先制标、记录时间、评判标准等均应通过预试事先制订。订。多人参加
6、记录时多人参加记录时，应事先训练，统一掌握标准。，应事先训练，统一掌握标准。实验出现未预见的现象时，应及时记录。实验出现未预见的现象时，应及时记录。实验中的误差应及时发现，发现差错后应立即在实验中的误差应及时发现，发现差错后应立即在记录中说明情况。原始记录至少应保存到药品记录中说明情况。原始记录至少应保存到药品上上市后二年市后二年。7.7.实验结果实验结果 应经统计学处理。结合客观实际恰当下结论。应经统计学处理。结合客观实际恰当下结论。二、主要药效学研究二、主要药效学研究药效评价一方面是发现新药，另一方面是评选新药效评价一方面是发现新药，另一方面是评选新药。药。发现新药发现新药就是用各种方法将
7、原来作用不明的化合就是用各种方法将原来作用不明的化合物的有效药理作用暴露出来；物的有效药理作用暴露出来；评选新药评选新药就是通过系列严密的科学设计将已发现就是通过系列严密的科学设计将已发现有效的药物的优缺点弄清楚，从而决定弃取。有效的药物的优缺点弄清楚，从而决定弃取。发现的重点发现的重点是暴露有效药是暴露有效药 ，评选的重点评选的重点是择优录是择优录用。不使疗效可疑或没有突出优点的药物滥竽充用。不使疗效可疑或没有突出优点的药物滥竽充数，鱼目混珠，数，鱼目混珠，以免造成上市新药泛滥，管理混以免造成上市新药泛滥，管理混乱。乱。主要药效学研究主要药效学研究一、内容一、内容 评选新药主要是评价它的主要
8、药效作用评选新药主要是评价它的主要药效作用 ，即从它，即从它预期用于临床预防、预期用于临床预防、诊断和治疗目的药理作用，诊断和治疗目的药理作用，这就是主要药效学研究的这就是主要药效学研究的任务任务。如吗啡类化合物评价其镇痛作用如吗啡类化合物评价其镇痛作用 ，青霉素评价其，青霉素评价其杀菌作用杀菌作用 ，胰岛素评价其降血糖作用等。，胰岛素评价其降血糖作用等。通过评价，通过评价，明确受试化合物的作用强度和特点明确受试化合物的作用强度和特点，与已知药相比，有何特点与已知药相比，有何特点 ，从而决定是否需要进，从而决定是否需要进一步的评价。一步的评价。在评价药效的同时，如有可能，还应努力在评价药效的同
9、时，如有可能，还应努力阐明药阐明药物的作用靶器官和作用机制物的作用靶器官和作用机制。二、总的要求二、总的要求(一一)方法方法 1.1.新药的主要药效作用应当用体内体外两种以上新药的主要药效作用应当用体内体外两种以上试验方法获得证明，其中一种必须是整体的正常试验方法获得证明，其中一种必须是整体的正常动物或模型动物。动物或模型动物。2.2.实验模型必须能反映药理作用的本质。如果有实验模型必须能反映药理作用的本质。如果有些新药确实无法满足上述动物和模型要求，应予些新药确实无法满足上述动物和模型要求，应予以充分说明理由，以充分说明理由，改用其它模型。改用其它模型。(二二)指标指标 应能反映主要药效作用
10、的药理本质。应客观，能应能反映主要药效作用的药理本质。应客观，能定量或半定量。定量或半定量。(三三)剂量剂量 应做出量效关系，尽量求出应做出量效关系，尽量求出ED50ED50或有效剂量范围。或有效剂量范围。量效关系不明确的药物应说明原因。量效关系不明确的药物应说明原因。(四四)给药方法给药方法 应采用拟推荐临床应用的给药方法。如该法在动物应采用拟推荐临床应用的给药方法。如该法在动物上无法实施时，应予说明，改用他法。上无法实施时，应予说明，改用他法。(五五)对照对照 应有空白对照和已知标准阳性药物或治疗措施对照。应有空白对照和已知标准阳性药物或治疗措施对照。三、有关问题(1)(1)动物选择动物选
11、择(2)(2)模型的建立模型的建立(3)(3)检测指标检测指标(4)(4)测试方法测试方法(5)(5)剂量要求剂量要求(6)(6)实验设计实验设计(7)(7)统计处理统计处理(8)(8)给药途径给药途径(9)(9)客观总结客观总结(10)(10)其他其他(1)动物选择 依据：符合要求，品系清楚 成年健康，雌雄各半 特定模型，特定动物1-1.生理及健康情况健康，符合要求按微生物控制的程度不同把实验动物分为五个等级 普通动物 清洁动物 SPF动物 无菌动物 悉生动物1-2.年龄一般实验常用性成熟后的成年动物长期毒性（或周期长的）试验，或观察药物生长、发育、内分泌等系统的作用时，则以幼年动物为好。有
12、关衰老研究，则选用老年动物或衰老过程较快的专用模型动物。如：老年痴呆，骨质疏松。1-3.性别 不同性别的动物对同一药物的敏感性差异大，对外界刺激的反应也不尽相同。一般实验常用雄性动物或雌雄各半；致畸实验，雌性内分泌，雌性生殖系统作用的药物，则用雌性动物；热板法镇痛试验也是雌性动物较为敏感。1-4.种属差异 1.1.动物与人的差异性动物与人的差异性 2.2.不同种属动物之间的差异性不同种属动物之间的差异性 3.3.同一种属不同品系动物之间的差异性同一种属不同品系动物之间的差异性1-4-1 动物与人的差异性 实验应选择实验应选择结构、功能、代谢结构、功能、代谢等方面与人类等方面与人类相似相似的动物
13、进行。的动物进行。一般来说，实验动物进化层次越高，其结构、功一般来说，实验动物进化层次越高，其结构、功能越复杂，反应越接近人类，但这些动物价格昂能越复杂，反应越接近人类，但这些动物价格昂贵，不易获得，饲养管理较困难。贵，不易获得，饲养管理较困难。许多啮齿类实验动物，由于许多啮齿类实验动物，由于体型小，繁殖周期短，体型小，繁殖周期短，饲养管理容易饲养管理容易，在药效学实验中应用广泛。但我，在药效学实验中应用广泛。但我们必须充分估计这些动物与人之间的差异性。们必须充分估计这些动物与人之间的差异性。为了使动物实验结果尽量与人接近，开始时应为了使动物实验结果尽量与人接近，开始时应多多选几种动物选几种动
14、物。用比较药效学的方法，对动物在不。用比较药效学的方法，对动物在不同种动物中的反应做定性与定量比较。然后选择同种动物中的反应做定性与定量比较。然后选择最合适的动物模型来做实验。最合适的动物模型来做实验。有的反应只出现于动物，而有的反应只出现于人有的反应只出现于动物，而有的反应只出现于人，如甲醇对动物的毒性小，因为动物体内有甲醇转如甲醇对动物的毒性小，因为动物体内有甲醇转变成低毒甲酸盐的特异性酶；二硝基酚对动物毒变成低毒甲酸盐的特异性酶；二硝基酚对动物毒性也很小，但性也很小，但1935-13371935-1337年美国将其作为减肥药在年美国将其作为减肥药在治疗人的肥胖症是能引起人的白内障、骨髓抑
15、制治疗人的肥胖症是能引起人的白内障、骨髓抑制甚至死亡。甚至死亡。有些药物对动物无效或效果差，但对人体却有效有些药物对动物无效或效果差，但对人体却有效，如环丝氨酸对动物感染无效，但对结核患者却有如环丝氨酸对动物感染无效，但对结核患者却有效；白消安对动物白血病疗效差，但对人的慢性效；白消安对动物白血病疗效差，但对人的慢性髓性白血病的疗效却很好；有些磺胺药在某些家髓性白血病的疗效却很好；有些磺胺药在某些家畜身上疗效不好，但在人身体疗效却很好；畜身上疗效不好，但在人身体疗效却很好；相反有些药物动物实验有效，但临床应用却无效相反有些药物动物实验有效，但临床应用却无效，如苄基青霉素对动物感染有效，对人却很
16、差；吗如苄基青霉素对动物感染有效，对人却很差；吗啡在动物身上安全系数比哌替啶大啡在动物身上安全系数比哌替啶大1414倍，但在临倍，但在临床上哌替啶却比吗啡安全。床上哌替啶却比吗啡安全。1-4-2 不同种属动物之间的差异性 不同种属试验动物不同种属试验动物机体存在一些特殊结构机体存在一些特殊结构，使它，使它们对药物的反应出现明显的差异。们对药物的反应出现明显的差异。在药效学评价中这些种属差异要予以重视，这也在药效学评价中这些种属差异要予以重视，这也是药理学实验中使用多种动物做实验的原因之一。是药理学实验中使用多种动物做实验的原因之一。一般来说，一个药物在多种动物机体上的反应都一般来说，一个药物在
17、多种动物机体上的反应都一致，说明该药的共同性大，人体出现相同效应一致，说明该药的共同性大，人体出现相同效应的机会就大。的机会就大。反之，一个药物对几种动物的作用很不一致，说反之，一个药物对几种动物的作用很不一致，说明该药的共同性少，与其对人作用的一致性的机明该药的共同性少，与其对人作用的一致性的机会就小。会就小。此外，由于动物之间的差异很大，常要选用那些此外，由于动物之间的差异很大，常要选用那些实验因素实验因素最敏感最敏感的动物作为实验对象。的动物作为实验对象。如吗啡对大鼠、兔、狗和猴引起抑制，但对小鼠、如吗啡对大鼠、兔、狗和猴引起抑制，但对小鼠、马、老虎和猫却引起兴奋；啮齿类动物（大鼠、马、
18、老虎和猫却引起兴奋；啮齿类动物（大鼠、家兔、豚鼠）不易产生变性血红蛋白，也没有呕家兔、豚鼠）不易产生变性血红蛋白，也没有呕吐反应；组织胺使豚鼠支气管痉挛而死亡，对于吐反应；组织胺使豚鼠支气管痉挛而死亡，对于家兔则是收缩血管和使右心室功能衰竭而死亡等。家兔则是收缩血管和使右心室功能衰竭而死亡等。家兔对体温变化十分灵敏，适宜发热、解热等研家兔对体温变化十分灵敏，适宜发热、解热等研究；大鼠垂体究；大鼠垂体-肾上腺功能发达，适宜作应急反应、肾上腺功能发达，适宜作应急反应、垂体、肾上腺等内分泌实验研究；豚鼠易于致敏。垂体、肾上腺等内分泌实验研究；豚鼠易于致敏。适宜作过敏试验研究；鸭可用于引起白内障的药适
19、宜作过敏试验研究；鸭可用于引起白内障的药物研究；鸽子能用于引起呕吐的药物试验；筛选物研究；鸽子能用于引起呕吐的药物试验；筛选抗癌药物经常用一些特殊的小鼠；作用于皮肤的抗癌药物经常用一些特殊的小鼠；作用于皮肤的药物则最好用小型猪。药物则最好用小型猪。1-4-3 同一种属不同品系动物之间的差异性 品系品系是指按照遗传学控制的标准将实验动物进行分类。是指按照遗传学控制的标准将实验动物进行分类。有有近交系（纯系）、突变系动物、杂种近交系（纯系）、突变系动物、杂种F1F1代或杂交群代或杂交群动物、封闭群（远交系）动物动物、封闭群（远交系）动物等四种不同类型。等四种不同类型。克服动物品系差异的办法是采用同
20、一品系的动物，如克服动物品系差异的办法是采用同一品系的动物，如比较同一化合物的不同批号产品的活性或毒性时往往比较同一化合物的不同批号产品的活性或毒性时往往采取同一品系的动物。一般情况下，近交系动物突变采取同一品系的动物。一般情况下，近交系动物突变系动物、杂种系动物、杂种F1F1代动物的生物反应稳定性和实验重复代动物的生物反应稳定性和实验重复性都较封闭群好。近交系动物具有基因的高度纯合性、性都较封闭群好。近交系动物具有基因的高度纯合性、同源性、因而表现出反应的高度均一性，但不能不问同源性、因而表现出反应的高度均一性，但不能不问实验目的，一味追求近交系动物。实验目的，一味追求近交系动物。只有个性没
21、有共性的结果，往往在人体上意义不大只有个性没有共性的结果，往往在人体上意义不大；共性越充分的结果往往在人体上意义越大共性越充分的结果往往在人体上意义越大。近交系动。近交系动物主要在设计组织细胞或肿瘤移植的实验中不可或缺。物主要在设计组织细胞或肿瘤移植的实验中不可或缺。突变系动物是带有突变基因的动物，在研究人类的一突变系动物是带有突变基因的动物，在研究人类的一些代谢病，分子病和肿瘤等是有其独特的使用价值。些代谢病，分子病和肿瘤等是有其独特的使用价值。1-5.昼夜节律性 此外，还应注意药物效应在动物身上的昼夜变化。此外，还应注意药物效应在动物身上的昼夜变化。时辰药时辰药 理学理学(Chronoph
22、armacology)(Chronopharmacology)就是研究生就是研究生物体的昼夜节律对药物作用或体内过程的影响的物体的昼夜节律对药物作用或体内过程的影响的药理学分支。药理学分支。由于机体有昼夜节律的变化，因此在昼夜节律的由于机体有昼夜节律的变化，因此在昼夜节律的不同时间，常呈现一种周期性改变，因而反映在不同时间，常呈现一种周期性改变，因而反映在药效和毒性上也会有节律性的变化。当然对临床药效和毒性上也会有节律性的变化。当然对临床前和临床药理学评价带来影响。前和临床药理学评价带来影响。许多药物，如许多药物，如麻醉药、镇静药、安眠药、安定药、麻醉药、镇静药、安眠药、安定药、抗惊药、中兴奋
23、药、抗惊药、中兴奋药、解热消炎药、降压药、强心解热消炎药、降压药、强心药、抗肿瘤药、抗菌素和激素药、抗肿瘤药、抗菌素和激素等都在药效反应上等都在药效反应上受到昼夜节律的影响受到昼夜节律的影响 。综上所述，动物选择时应尽可能选用与人在生物综上所述，动物选择时应尽可能选用与人在生物学上接近，在机体解剖、生理反应等功能上相类学上接近，在机体解剖、生理反应等功能上相类似的动物，同时还要注意动物的似的动物，同时还要注意动物的年龄、性别、遗年龄、性别、遗传、品系、营养、环境传、品系、营养、环境等因素，既有重点又能全等因素，既有重点又能全面的进行选择。面的进行选择。(2)模型的建立 1.1.整体动物模型整体
24、动物模型 2.2.离体器官模型离体器官模型 3.3.细胞水平模型细胞水平模型 4.4.分子水平模型分子水平模型2-1整体动物模型 整体动物模型：动物模型应能反映临床疾病的病理、生理过程，如移植性肿瘤动物模型，高血糖、肝损伤、胃溃疡和镇痛模型等都能模拟人类的疾病过程。但有些模型不意建立，如高血压、冠心病、风湿病、癫痫等模型与临床疾病在病原和病理生理过程中还有相当距离，虽然也成功的评选过一些药物，但对这种模型往往要经过更多方面的验证才能肯定。目前对这类疾病的药物评选只能通过尽量贴近人体的发病机制，采用相近的模型和方法进行研究，因而所得到的结论必须经过更多模型，特别是在人体上验证后才能肯定。总之，在
25、进行动物实验时应尽量选择国内外公认的实验模型，以利于客观、公平地评价新药的作用强度、特点和开发价值。2-2离体器官模型 离体器官模型：离体器官或组织特异性好，能反映药理作用的本质就可以作为评选模型。如离体蛙心和兔心常用来评价药物对心脏活动（包括心率、心输出量、收缩力等）的影响；猫、兔、豚鼠和狗乳头肌标本制备用来观测药物对心肌基本生理特性（如收缩性、兴奋性、自律性）的影响；蛙坐骨神经腓肠肌标本，小鸡颈半棘肌，大白鼠膈神经标本常用来评价作用于骨骼肌的药物；离体豚鼠肠肌可用来评价M-及N-胆碱系统药物，近年来还用来评价作用与吗啡受体的激动剂和拮抗剂；这些方法只要用得合适，可以节省不少人力和物力。2-
26、3细胞水平模型 细胞水平模型：药效学评选模型不仅可以用整体动物和离体器官，也可以在细胞水平进行。抗肿瘤药物的体外研究，就是利用细胞培养技术，检测药物抗肿瘤作用。亚甲蓝试管法是根据癌细胞含有氢酶，该酶可使代谢底物脱氢是亚甲蓝还原变为无色这一原理，将肿瘤细胞悬液与受试药物混合，加放亚甲基蓝孵育。如亚甲蓝不褪色，即初步判定该药具有增强激活剂或免疫抑制剂。基于细胞水平的药物药效的评价技术繁多，研究者可根据各种方法的优缺点和检测条件并结合自身实验室的条件进行相应模型选择。2-4分子水平模型 分子水平模型：分子水平药效模型，是在药物作用靶点明确的基础上进行的药效学评价，应用这种方法筛选可以直接得到药物作用
27、机制的信息。根据生物分子的类型，主要分为酶、受体和其他类型的模型。酶分子水平的筛选模型的最大特点是药物作用靶点明确，可直接得到化合物与靶点酶分子的作用信息。检测酶活性的方法很多，酶的反应底物、产物等都可用作检测指标，反应大多在均相的环境下进行。受体在新药研究中具有灵敏度高、特异性强等特点，适合于大规模筛选及药效研究。综上所述，不同的模型对药物药效评选的差别给新药评选工作带来很大的困难，故药理工作者必须在工作开始之前对模型本身进行认真研究，尽量选择与人体反应比较接近的，国内外公认的动物模型。建立模型时应尽量根据人体发病机制来建立，在利用体外模型评选时，更应该反复探讨模型本身的基础。一定要在体内体
28、外，动物和人体的各方面效应之间不断验证，发现矛盾时再深入分析原因，从中找出比较能代表人体反应情况的模型进行工作。所以，新药的药效学评价应尽量选择与疾病病理过程相似的模型，进行体内外多个模型的研究，才能全面，客观反映药物的作用及特点。(3)(3)检测指标检测指标1、特异性、特异性2、客观性、客观性3、灵敏性、灵敏性4、指标制订标准不同、指标制订标准不同5、多指标综合评价、多指标综合评价 特异性：反映药物药效的指标应特异性反映某一特定现象。不与其他现象混淆。客观性：反映动物药效的指标分两种：1、计数指标，是客观、可定量或半定量的。2、计量指标，通过分级打分来评定。前者指标可以计数，属客观指标，可进
29、行统计处理，比较可信；后者属于主观判定不可计数的资料，不能进行统计处理，需要尽量采用分级打分评定的方法转化成计数资料，再进行统计处理。灵敏性：这个灵敏是指适当的灵敏度。测试指标的方法过分灵敏，不该测出的变化也测出了，这就是“假阳性”；如果测试方法不够灵敏，该测出的变化也测不出来，这就是“假阴性”。指标制订标准不同：对不同药物药效学指标的要求不完全一致。如要评选一个抗生素，指标就应订的适当高些，因为现在已有不少抗生素可供使用，对新抗生素的要求至少不应低于现有抗生素水平。如要评选一个抗艾滋病毒药物，指标就应订的适当低些，因为现在还不仅有较少的有效的抗艾滋病毒药物可供使用。多指标综合评价：现在很多药
30、物的评选往往不是单指标所能满足的，而需要多指标综合评价。以抗胆碱药物为例，有的中枢作用强，有的外周作用强，有的两方面作用强，如果用于有机磷酸酯类农药中毒的解救，应该中枢和外周作用都强才行，而如果作为支气管炎的抗分泌药则最好没有中枢作用。(4)(4)测试方法测试方法 主要药效学试验应当采用体内外等多种试验方法，其中至少一种必须是整体的正常动物或动物病理模型。测试方法应灵敏、误差小，专属性较强，可客观计数。(5)(5)剂量要求剂量要求 药效最终是指在人体所能接受的剂量下药物所产生的药效最终是指在人体所能接受的剂量下药物所产生的作用。在新药的药效学评价中，无论是在什么水平、作用。在新药的药效学评价中
31、，无论是在什么水平、什么层次上的观察，都必须能在整体条件下，在接近什么层次上的观察，都必须能在整体条件下，在接近治疗剂量时出现药效才有意义，否则只能得出片面的治疗剂量时出现药效才有意义，否则只能得出片面的结论。结论。药效学研究的剂量选择应能反映药效学研究的剂量选择应能反映量效关系量效关系，即从无效剂量开始，直到最大效应的浓度。根据量效即从无效剂量开始，直到最大效应的浓度。根据量效关系画出量效曲线，这种量效曲线在普通坐标系上呈关系画出量效曲线，这种量效曲线在普通坐标系上呈长尾长尾S S形曲线，如果以对数剂量为横坐标，则得到的形曲线，如果以对数剂量为横坐标，则得到的量效曲线为对称的量效曲线为对称的
32、S S形曲线。引起最大反应一半所需形曲线。引起最大反应一半所需的药物剂量为半数有效量的药物剂量为半数有效量EDED5050，药物的，药物的EDED5050越低，作越低，作用越强。通常体外试验要测出用越强。通常体外试验要测出EDED5050，整体试验至少需，整体试验至少需要要3 3个剂量组，能反映量效关系，量效关系不明确的个剂量组，能反映量效关系，量效关系不明确的药物应说明原因。药物应说明原因。(6 6)实验设计实验设计 随机：即在抽样或分组时，使总体中任何一个个体都有同等机会被抽取进入样本，或者样本中任何一个个体都有同等机会被分配到任何一个组中去。对照：任何实验都离不开对照，新的科学结论都必须
33、在与严格的对照作比较后才能得出。重复：重复是指在相同的实验条件下，进行多次研究或多次观察。均衡：实验组与对照组除了处理因素不同外，其他条件应相同或接近，即均衡性好。(7 7)统计处理统计处理 在新药的药效学评价中，应该学会应用整套统计学知识，而不仅仅是在一两个具体方法。在药效评价中，关系密切的实验设计方法，如:拉丁法、优选法、正交试验、序贯试验等。在整理实验结果数据和资料时同样需要运用各种统计方法，如计数资料应注明各组例数（n）、阳性例数（r)，阳性率（p）；计量资料应提供各组均数（x）、标准差（s）、例数（M）。检验方法常用用到卡方检验、t检验、方差分析、直线回归与相关等，有等级关系则用到R
34、idit分析或等级序值法。(8)给药途径：一般；说来，给药途径应与推荐临床用药途径一致。但有时临床给药途径无法在动物实验中达到，则应说明理由，改用其他给药途径。(9)客观总结：主要药效学试验完成后，在总结受试药的有效性、作用强度、剂量、与阳性药效果的比较、可能的不良反应等资料、要求客观、实事求是(10)其他：设备仪器作为评价药效的工具必不可少。试剂纯度的保证。操作人员的技术要准确、熟练。实验动物的饲养管理也要加强，保证良好的养殖条件，环境保持恒定。主要药效学完成后要对其有效性、作用强度、与推荐临床剂量的关系、毒副作用等作出明确的结论，要科学的实事求是的总结。三、安全药理学研究三、安全药理学研究
35、一、概述一、概述 （1 1）安全药理学研究的概念）安全药理学研究的概念最早最早出现于出现于19971997年年ICHICH的的实施新药临床研究所需非临床安全性试验的时间安排实施新药临床研究所需非临床安全性试验的时间安排（M3M3指导原则）和指导原则）和生物技术药物的临床前安全性评价生物技术药物的临床前安全性评价（S6S6指导原则）。指导原则）。（2 2）在安全药理学这一概念被采用之前，广泛使用）在安全药理学这一概念被采用之前，广泛使用的额是一般药理学的概念。在的额是一般药理学的概念。在20052005指导原则指导原则中指出，中指出，广义的一般药理学是指对主要药效作用以外进行的广泛广义的一般药理
36、学是指对主要药效作用以外进行的广泛药理学研究，包括药理学研究，包括安全药力学和次要药效学研究安全药力学和次要药效学研究；（3 3）安全药理学主要是研究药物在治疗范围内）安全药理学主要是研究药物在治疗范围内或治疗范围以上的剂量时，潜在的不期望出现的对或治疗范围以上的剂量时，潜在的不期望出现的对主要器官和系统生理功能的不良影响即观察药物对主要器官和系统生理功能的不良影响即观察药物对中书省经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。中书省经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。二、目的和意义 （1 1）参考2005指导原则，安全药理学研究的目的目的包括以下几个方面：用来确定药物可能关系到人安全性的非期望药理学作
37、用；评价药物在毒理学和（或）临床研究中所观察到的药物不良反应和（或）病理生理学作用；研究所观察到的和（或）推测的药物不良反应机制。（2 2）通过安全药理学研究可以对药物的全面药）通过安全药理学研究可以对药物的全面药理作用有一个基本的认识，尤其是可以了解理作用有一个基本的认识，尤其是可以了解中枢神中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统经系统、心血管系统和呼吸系统这三大系统的生理这三大系统的生理指标的功能性变化，并可以补充一般毒性观察的不指标的功能性变化，并可以补充一般毒性观察的不足、为全面开展毒理研究做准备，最大限度的保障足、为全面开展毒理研究做准备，最大限度的保障在新药进入临床研究之前发现可能出现
38、的治疗作用在新药进入临床研究之前发现可能出现的治疗作用之外的不良反应。之外的不良反应。（一）有助于了解新药的全面药理作用及作用机制（一）有助于了解新药的全面药理作用及作用机制 药物用于人体，随着血液循环分布到全身组织器官药物用于人体，随着血液循环分布到全身组织器官 因此在应用一个新化合物之前理应对它的全面作因此在应用一个新化合物之前理应对它的全面作用有基本认识。否则对主要药效作用的评价也可能有用有基本认识。否则对主要药效作用的评价也可能有片面性片面性 。如。如 吗啡类镇痛药的评价若仅限于评价其镇吗啡类镇痛药的评价若仅限于评价其镇痛作用，局限于看它的镇痛强度及持续时间，还要观痛作用，局限于看它的
39、镇痛强度及持续时间，还要观察它的呼吸抑制作用及成瘾性等不良反应的强弱，只察它的呼吸抑制作用及成瘾性等不良反应的强弱，只有对药物的全面作用有了基本了解才能对其只要药效有对药物的全面作用有了基本了解才能对其只要药效作用作出正确评价。作用作出正确评价。（二）有助于发现新药的作用机制（二）有助于发现新药的作用机制 新药的作用部位在哪里，作用方式是新药的作用部位在哪里，作用方式是什么，只有做了全面的药理观察才有认识。什么，只有做了全面的药理观察才有认识。如一个降压药，只知道它的降压降压强度如一个降压药，只知道它的降压降压强度和作用时间，在临床上还是不便应用的，和作用时间，在临床上还是不便应用的，只有通过
40、安全药理研究，分清药物作用部只有通过安全药理研究，分清药物作用部位是中枢、还是心脏、神经节、外周血管，位是中枢、还是心脏、神经节、外周血管，才能在临床应用时正确掌握适应症。总之，才能在临床应用时正确掌握适应症。总之，对药物了解的越全面、越深入，我们才能对药物了解的越全面、越深入，我们才能更好地掌握应用它也就越能成为防病治病更好地掌握应用它也就越能成为防病治病的有力工具。的有力工具。（三）有助于发现新用途（三）有助于发现新用途 安全药理学研究有利于发现药物新安全药理学研究有利于发现药物新的药物作用，这样就有可能开发新的临的药物作用，这样就有可能开发新的临床用途，是的一药多用。在第一章中，床用途，
41、是的一药多用。在第一章中，讲到的综合筛选往往是与安全药理研究讲到的综合筛选往往是与安全药理研究结合起来的，是发现新药药理作用的一结合起来的，是发现新药药理作用的一种手段之一。种手段之一。如苯妥英钠是一种抗癫痫药物，通如苯妥英钠是一种抗癫痫药物，通过安全药理研究发现它对心脏有作用，过安全药理研究发现它对心脏有作用，深入研究则发现它可发挥抗心律失常效深入研究则发现它可发挥抗心律失常效应。应。（四）为毒理学研究打下基础，是毒性试验的重要补充（四）为毒理学研究打下基础，是毒性试验的重要补充 新药毒理学研究主要依靠急性毒性、长期毒性、特殊毒性新药毒理学研究主要依靠急性毒性、长期毒性、特殊毒性等各种毒性评
42、价手段，而安全药理学可为长期毒性试验打基础。等各种毒性评价手段，而安全药理学可为长期毒性试验打基础。安全药理学研究可以比较全面地普查药物的主要作用部位、安全药理学研究可以比较全面地普查药物的主要作用部位、作用性质以及作用特点，这对长期毒性试验的实验设计具有重作用性质以及作用特点，这对长期毒性试验的实验设计具有重要的参考价值。而且设计长期毒性试验时，给药剂量、给药途要的参考价值。而且设计长期毒性试验时，给药剂量、给药途径等的选择也可参考安全药理研究所得的结果。径等的选择也可参考安全药理研究所得的结果。长期毒性的剂量是一个难题，要选好剂量，就要靠急性毒长期毒性的剂量是一个难题，要选好剂量，就要靠急
43、性毒性和安全药理研究中所测得的阳性指标的药物有效量来综合判性和安全药理研究中所测得的阳性指标的药物有效量来综合判断。此外，决定给药途径、用药方法等也要参考安全药理研究断。此外，决定给药途径、用药方法等也要参考安全药理研究的结果的结果 。三、原则和要求三、原则和要求 安全药理学研究作为药物临床前安全性评价的重要组成部分，安全药理学研究作为药物临床前安全性评价的重要组成部分，主要是应用实验动物体内和体外的方法，评价和预测新药在人体临主要是应用实验动物体内和体外的方法，评价和预测新药在人体临床实验中可能出现的不良反应。我国已在床实验中可能出现的不良反应。我国已在20052005指导原则指导原则中对药
44、中对药物的安全药理学研究提出了系统的原则要求，吸纳结合物的安全药理学研究提出了系统的原则要求，吸纳结合ICHICH制订的制订的S7AS7A指导原则，将其归纳为以下要点：指导原则，将其归纳为以下要点：（一）基本原则（一）基本原则 1.1.试验管理试验管理：药物的安全性评价研究必须执行药物的安全性评价研究必须执行GLPGLP。对于重要。对于重要系统的安全药理学研究应符合系统的安全药理学研究应符合GLPGLP，追加和补充的安全药理学研究，追加和补充的安全药理学研究应尽可能最大限度遵守应尽可能最大限度遵守GLPGLP。，但对一些难以满足。，但对一些难以满足GLPGLP要求的特殊情要求的特殊情况，也要保
45、证适当的试验管理和数据保存。况，也要保证适当的试验管理和数据保存。2.2.试验设计试验设计：为了有效地排除非处理因素的干扰和影响，是试验设计科学严谨、试验结果准确可靠，试验设计应符合随机、对照、重复原则，并遵循“具体问题具体分析”原则。3.3.试验方法试验方法：应根据药物的特点和临床使用的目的，合理地选择试验方法。试验方法应选用国内外公认的方法。4.4.研究的阶段性研究的阶段性 安全药理学研究贯穿于新药研究的全过程，可分段进行。在药物进入临床试验前，应完成对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统影响的核心组合实验的研究。追加和（或）补充安全药理学研究可在申报生产前完成 5.5.可免做安全药理学研究
46、的药物：可免做安全药理学研究的药物：（1 1）药理作用明确且体内血药浓度低或其他组织器官分布少的局部用药，如皮肤、眼科用药等。（2 2）只用于治疗晚期癌症患者的细胞毒类药物，在首次用于临床前可免做安全药理学研究，但不包括具有新作用机制的此类药物。（3 3）存在其他可能可免做安全药理学研究，如具有类似药效学和药动学的新的盐类药物。（二）基本要求（二）基本要求 1.1.受试物受试物 ：安全药理学研究的受试物应采用制备工艺稳定、符合临床使用质量标准规定的样品。2.2.试验系统试验系统 ：选择试验系统应考虑的因素包括试验系统的药效学反应，受试物的药动学特点，试验动物的种属、品系、性别和年龄，试验系统的
47、敏感性、灵敏度和重现性，以及受试物的背景资料。（1 1）常用的实验动物常用的实验动物：整体动物常用小鼠、家兔等。特内研究尽量用清醒动物。（2 2）常用的离体实验系统常用的离体实验系统：离体试验系统主要包括离体器官及组织、细胞、细胞器、受体、离子通道和酶。3.3.样品量和对照：样品量和对照：为了科学合理地届时所获得的实验结果并符合统计学要求，实验组的组数以及每组动物数或离体样本数的设定应十分充分。小动物一般不小于10只，大动物不少于6只，雌雄各半，设计应采用合适的阴性和阳性对照。4.4.给药途径：给药途径：设计整体动物试验时，首先应考虑受试物的给药途径与临床拟用途径一致，如采用不同的给药途径时，
48、应说明理由。5.5.剂量或浓度剂量或浓度 ：（1 1）在体研究在体研究：安全药理学研究应确定不良反应的量效关系，如果可能也应对时效关系进行研究。安全药理学的脊梁应包括或超过主要药效学的有效剂量或治疗范围。（2 2）离体研究离体研究：体外研究应确定受试物的浓度-效应关系。无明显作用时，应对选择的浓度范围进行说明。6.6.给药次数和观察时间给药次数和观察时间：一般采用单次给药。如果受试物再给要一段时间后才能起效，或者重复给药的非临床研究和（或）临床研究结果出现安全性问题时，应根据具体情况合理设计给药次数。应结合受试物的药效学和药动学特性、受试动物、临床研究方案等因素选择观察时间点和观察时间。7.7
49、.数据处理和结果评价数据处理和结果评价：应根据详细的试验记录，选用适当的统计方法，对试验数据进行定性和定量分析。结合药效学、毒理学、药动学及其他研究资料对统计结果进行综合评价，分析这些药理作用所提示的临床意义，为临床研究设计提出建议。四、主要研究内容 安全药理研究的内容包括：对重要系统的安全药理学研究、追安全药理研究的内容包括：对重要系统的安全药理学研究、追加的安全药理学研究、补充的安全药理学研究。其中，加的安全药理学研究、补充的安全药理学研究。其中，心血管系心血管系统、呼吸系统和中枢神经系统时维持生命的重要系统统、呼吸系统和中枢神经系统时维持生命的重要系统。（一）核心组合实验（一）核心组合实
50、验 安全药理学核心组合实验的目的安全药理学核心组合实验的目的是研究受试物对重要生命功能是研究受试物对重要生命功能的影响。通常作为重要的器官系统的中枢神经系统、心血管系统、的影响。通常作为重要的器官系统的中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统就是核心组合实验要研究的内容。在某些情况下，基于科呼吸系统就是核心组合实验要研究的内容。在某些情况下，基于科学理论，可增加或减少部分实验内容，但应说明理由。学理论，可增加或减少部分实验内容，但应说明理由。1.1.中枢伸进系统：定性或定量评价受试物对中枢神经系统的作中枢伸进系统：定性或定量评价受试物对中枢神经系统的作用，观察指标包括动物的运动功能、行为改变、协调功
