1、-叶酸受体介导叶酸受体介导（FRD)的的肿瘤检测肿瘤检测新技术新技术 -FRD上皮组织特殊染色液上皮组织特殊染色液 检测宫颈异常病变（检测宫颈异常病变（CIN2+）主讲人：魏丽惠主讲人：魏丽惠时时 间间：2015.12.05-主要内容主要内容 现有宫颈癌筛查技术现有宫颈癌筛查技术 FRD FRD上皮组织特殊染色液作用原理上皮组织特殊染色液作用原理 FRD FRD特殊染色操作规范及注意事项特殊染色操作规范及注意事项 临床研究结论临床研究结论-背景背景宫颈癌流行病学宫颈癌流行病学 宫颈癌是宫颈癌是危及妇女生命健康的第二大杀手，仅次于乳腺癌危及妇女生命健康的第二大杀手，仅次于乳腺癌；全世界每年新增病
2、例数全世界每年新增病例数超过超过5050万，万，2525万人因其死亡。发展万人因其死亡。发展 中国家每年有中国家每年有2020万人因此死亡，占全球死亡人数的万人因此死亡，占全球死亡人数的8080；我国每年新增病例数超过我国每年新增病例数超过1313万人万人，超过全球总数的超过全球总数的1/41/4，死亡人数约为死亡人数约为3 3万人。万人。-背景背景-宫颈癌筛查的必要性宫颈癌筛查的必要性死亡的主要原因：很少筛查或从不筛查；死亡的主要原因：很少筛查或从不筛查；美国美国 50宫颈癌发生于从不筛查宫颈癌发生于从不筛查 10宫颈癌发生于近宫颈癌发生于近5年未接受筛查年未接受筛查有明确的癌前病变阶段，发
3、展缓慢，有足有明确的癌前病变阶段，发展缓慢，有足够的时机来重复进行筛查；够的时机来重复进行筛查；癌前病变的治疗效果较好。癌前病变的治疗效果较好。-宫颈细胞学检查宫颈细胞学检查 HPV-DNA检测检测 醋白试验醋白试验/碘试验碘试验 FRD上皮组织特殊染色上皮组织特殊染色 技术技术目前用于宫颈癌检查的技术目前用于宫颈癌检查的技术-细胞学检查细胞学检查液基细胞学巴氏涂片样本采集及制片：样本采集及制片：细胞采集细胞采集（是否完整）（是否完整）脱落细胞脱落细胞（是否脱落）（是否脱落）腺体病变（是否敏感）腺体病变（是否敏感）阅片：阅片：观察细胞形态的改变（是否特异）观察细胞形态的改变（是否特异）专业阅片
4、医生（是否足够）专业阅片医生（是否足够）-HPV-DNA检测检测临床指导意义：临床指导意义：可进行性消退；可进行性消退；单次单次HPV感染有多大风险；感染有多大风险；持续高危型感染导致风险增加；持续高危型感染导致风险增加；高标准实验室、专业人员高标准实验室、专业人员检查费用检查费用-肉眼检查肉眼检查(VIA/VILI)阳性预测值低阳性预测值低;绝经后及宫颈萎缩妇女能否绝经后及宫颈萎缩妇女能否 使用；使用；-及时诊断，科学分流；及时诊断，科学分流；诊断颈管病变；诊断颈管病变；降低漏诊率，提高诊断符合率；降低漏诊率，提高诊断符合率；宫颈的肿瘤属性的客观信息。宫颈的肿瘤属性的客观信息。临床需要什么？
5、临床需要什么？-叶酸受体介导的肿瘤细胞叶酸受体介导的肿瘤细胞靶向检测技术靶向检测技术一种新技术一种新技术 -一个新产品一个新产品FRD上皮组织特殊染色液上皮组织特殊染色液成分：叶酸衍生物、亚甲蓝等。成分：叶酸衍生物、亚甲蓝等。陕西高源医疗器械服务有限公司出品陕西高源医疗器械服务有限公司出品-临床应用临床应用用于妇科内诊常规检查用于妇科内诊常规检查 提供宫颈提供宫颈异常病变异常病变的客观信息，的客观信息，及时检测及时检测,科学科学分流分流病病人，提高病人的依从性，降低假阴性，提高诊断符合率。人，提高病人的依从性，降低假阴性，提高诊断符合率。（1 1）FRDFRD染色染色阴性，阴性，提示宫颈无异常
6、病变提示宫颈无异常病变，建议患者定期建议患者定期检查或细胞学、检查或细胞学、HPVHPV检查；检查；（2 2）FRDFRD染色染色阳性，阳性，提示宫颈异常病变，提示宫颈异常病变，建议阴道镜检查建议阴道镜检查。-使用操作流程使用操作流程 宫颈：用蘸取宫颈：用蘸取FRDFRD上皮组织特殊染色液上皮组织特殊染色液的的妇科大棉签，妇科大棉签，在在宫宫颈表面颈表面用力涂抹用力涂抹5 5圈圈，再在，再在宫颈外口宫颈外口用力按压用力按压1010秒秒，取出观察，取出观察颜色颜色。宫颈管：用蘸取宫颈管：用蘸取FRDFRD上皮组织特殊染色液的小棉签上皮组织特殊染色液的小棉签插入宫颈插入宫颈管管（1.5 cm-1.
7、5 cm-3 3.0 cm.0 cm），沿颈管内壁），沿颈管内壁旋转旋转5 5圈圈逐步下拉棉签逐步下拉棉签 ，进行颈管内特殊染色。进行颈管内特殊染色。-阴性：棉签阴性：棉签棕黄色棕黄色，提示上皮组织无病变；，提示上皮组织无病变；阴性：棉签阴性：棉签绿色绿色，提示上皮组织无异常病变；，提示上皮组织无异常病变；阳性：棉签阳性：棉签蓝色蓝色、蓝黑色蓝黑色、黑色，提示上皮组、黑色，提示上皮组织异常病变（织异常病变（CIN2+CIN2+）。）。-FRD作用机理作用机理FRD上皮组织特殊染色液中的上皮组织特殊染色液中的叶叶酸衍生物（叶酸二氢呋喃）酸衍生物（叶酸二氢呋喃）与肿与肿瘤细胞表面的瘤细胞表面的叶酸
8、受体叶酸受体结合，内结合，内吞胞浆后，将共价连接的吞胞浆后，将共价连接的还原态还原态亚甲蓝亚甲蓝带入细胞，亚甲蓝在肿瘤带入细胞，亚甲蓝在肿瘤细胞内细胞内Fe2+的催化下，快速与细的催化下，快速与细胞内胞内活性氧活性氧发生氧化反应，使黄发生氧化反应，使黄色的底物变色，从而判断是否具色的底物变色，从而判断是否具有肿瘤组织。有肿瘤组织。-FRD的主要特点的主要特点特点一特点一:灵敏灵敏 已有的研究显示已有的研究显示FRD检测检测CIN2+的敏感性大的敏感性大于于75%。-陕西省两癌筛查项目（陕西省两癌筛查项目（9949例）例）人群：人群：2012年年10月至月至2013年年12月在西安市高陵县的子宫
9、月在西安市高陵县的子宫颈癌筛查门诊和陕西省人民医院妇科门诊就诊的颈癌筛查门诊和陕西省人民医院妇科门诊就诊的9949名已名已婚女性患者。进入研究的对象均符合以下条件：年龄婚女性患者。进入研究的对象均符合以下条件：年龄21岁岁以上，此前以上，此前6个月未接受过宫颈手术。未在经期和孕期。个月未接受过宫颈手术。未在经期和孕期。所有所有9949名受检者年龄区间名受检者年龄区间22-78岁。平均岁。平均49.51岁，岁，30-65岁占岁占98.5%。方案：方案：FRD染色检查染色检查TCT取样取样阴道镜检查阴道镜检查活检活检。-检查方法检查方法敏感性敏感性特异性特异性阳性阳性预测值预测值阴性阴性预测值预测
10、值FRD特殊染色阳性特殊染色阳性75.0%81.6%48.6%93.3%细胞学（细胞学（ASC-H）56.0%87.9%52.8%89.2%FRD+细胞学（任一为阳细胞学（任一为阳性，检查即为阳性）性，检查即为阳性）78.0%70.7%39.0%93.0%FRD+细胞学（同时阳性，细胞学（同时阳性，检查即为阳性）检查即为阳性）50.0%98.6%89.3%89.1%结论结论-北京多中心研究北京多中心研究项目基本情况：项目基本情况：牵头单位牵头单位-北京大学人民医院北京大学人民医院 联合参研单位联合参研单位-天坛医院、天坛医院、301医院、北京安贞医院、医院、北京安贞医院、北京朝阳医院、北京大学
11、第三医院、北京妇产医院、北京朝阳医院、北京大学第三医院、北京妇产医院、北京复兴医院、北京世纪坛医院、北京同仁医院、北北京复兴医院、北京世纪坛医院、北京同仁医院、北 京宣武医院、北京医院、协和医院。京宣武医院、北京医院、协和医院。研究方案：研究方案：TCT和和/或或HPV异常；有临床指症需要做阴道镜异常；有临床指症需要做阴道镜 检查检查FRD染色染色阴道镜检查阴道镜检查活检活检共收集到有活检结果的病例共收集到有活检结果的病例1926例。例。-人群背景信息人群背景信息年龄：平均年龄40.98(10.33)项目项目 例数例数20-29 256(13.39%)30-39 685(35.83%)40-4
12、9 524(27.41%)50-65 447(23.38%)合计合计missing 191214研究人群的年龄分段情况研究人群的年龄分段情况-研究人群的孕次情况研究人群的孕次情况孕次孕次病例数病例数0 229(13.15%)1 331(19.00%)2 466(26.75%)3 377(21.64%)4 198(11.37%)5 84(4.82%)6 41(2.35%)7 7(0.40%)8 7(0.40%)9 2(0.11%)合计合计Missing 1742184-研究人群的产次情况研究人群的产次情况产次产次例数例数0 455(26.12%)1 944(54.19%)2 263(15.10%
13、)3 57(3.27%)4 16(0.92%)5 7(0.40%)合计合计 1742Missing 184-总数据情况总数据情况病理诊断结果病理诊断结果已完成病例数已完成病例数计划完成病例数计划完成病例数炎症炎症750(38.94%)500CIN1521(27.05%)600CIN2289(15.01%)600CIN3295(15.32%)宫颈癌宫颈癌71(3.69%)300合计合计19262000总研究入组人群情况总研究入组人群情况-病理结果病理结果HPVHPV结果结果合计合计MissingMissing阴性阴性阳性阳性CIN2+28(4.49%)595(95.51%)62332CIN1与炎
14、症与炎症 178(14.52%)1048(85.48%)122645合计合计 206(11.14%)1643(88.86%)184977HPV检测情况检测情况-（未区分检测方法）（未区分检测方法）-HPV检测能力评估检测能力评估指标指标值值（95%CI CI）符合率符合率41.81%（39.56-44.05）KAPPA7.15%（5.25-9.04）灵敏度灵敏度95.51%（93.88-97.13）特异度特异度14.52%（12.55-16.49）阳性预测值阳性预测值36.21%（33.89-38.54）阴性预测值阴性预测值86.41%（81.73-91.09）阳性似然比阳性似然比1.12（1
15、.09-1.15）阴性似然比阴性似然比0.31（0.21-0.46）-病理结果病理结果细胞学结果细胞学结果合计合计MissingMissing阴性阴性（%）阳性阳性(ASCUS)(ASCUS)（%）CIN2+132(20.66)507(79.34)63916CIN1与炎症与炎症 429(34.24)824(65.76)125318合计合计 561(29.65)1331(70.35)189234病理结果病理结果细胞学结果细胞学结果合计合计MissingMissing阴性阴性（%）阳性阳性(ASC-H)(ASC-H)（%）CIN2+271(42.41)368(57.59)63916CIN1与炎症与
16、炎症 833(66.48)420(33.52)125318合计合计 1104(58.35)788(41.65)189234细胞学检测能力评估细胞学检测能力评估-指标指标值（值（%）95%CI符合率符合率49.4747.22-51.72KAPPA10.737.44-14.02灵敏度灵敏度79.3476.20-82.48特异度特异度34.2431.61-36.87阳性预测值阳性预测值38.0935.48-40.70阴性预测值阴性预测值76.4772.96-79.98阳性似然比阳性似然比1.211.14-1.28阴性似然比阴性似然比0.600.51-0.72指标指标值（值（%）95%CI符合率符合率
17、63.4861.31-65.65KAPPA22.7718.36-27.18灵敏度灵敏度57.5953.76-61.42特异度特异度66.4863.87-69.09阳性预测值阳性预测值46.7043.22-50.18阴性预测值阴性预测值75.4572.91-77.99阳性似然比阳性似然比1.721.55-1.90阴性似然比阴性似然比0.640.58-0.70细胞学分类细胞学分类1（ASCUS）细胞学分类细胞学分类2（ASC-H）细胞学检测能力评估细胞学检测能力评估-病理结果病理结果FRDFRD染色结果染色结果合计合计阴性阴性阳性阳性CIN2+145（22.14%）510（77.86%）655CI
18、N1与炎症与炎症749（58.93）522（41.07%）1271合计合计894(46.42%)1032(53.58%)1926FRD检测能力的评估检测能力的评估-指标指标值值(%)95%CI符合率符合率65.3763.24-67.49KAPPA32.2928.43-36.15灵敏度灵敏度77.8674.68-81.04特异度特异度58.9356.23-61.63阳性预测值阳性预测值49.4246.37-52.47阴性预测值阴性预测值83.7881.36-86.20阳性似然比阳性似然比1.901.75-2.05阴性似然比阴性似然比0.380.32-0.44FRD检测能力的评估检测能力的评估-指
19、标指标FRD（95%CI）TCT(ASCUS)（95%CI）HPV（95%CI）符合率符合率65.37%(63.24-67.49)49.47%(47.22-51.72)41.81%(39.56-44.05)KAPPA32.29%(28.43-36.15)10.73%(7.44-14.02)7.15%(5.25-9.04)灵敏度灵敏度77.86%(74.68-81.04)79.34%(76.20-82.48)95.51%(93.88-97.13)特异度特异度58.93%(56.23-61.63)34.24%(31.61-36.87)14.52%(12.55-16.49)阳性预测值阳性预测值49.
20、42%(46.37-52.47)38.09%(35.48-40.70)36.21%(33.89-38.54)阴性预测值阴性预测值83.78%(81.36-86.20)76.47%(72.96-79.98)86.41%(81.73-91.09)阳性似然比阳性似然比1.90(1.75-2.05)1.21(1.14-1.28)1.12(1.09-1.15)阴性似然比阴性似然比0.38(0.32-0.44)0.60(0.51-0.720.31(0.21-0.46)FRD、细胞学和、细胞学和HPV检测能力评估汇总检测能力评估汇总有统计学差异有统计学差异-特点二特点二：及时：及时 FRD检查可在检查可在1
21、 min内得到检查结果，内得到检查结果，在妇科内诊阶段即可对宫颈异常病变进行在妇科内诊阶段即可对宫颈异常病变进行检测，以便及时分流病人，减少病人的复检测，以便及时分流病人，减少病人的复诊和流失。诊和流失。-特点三特点三：全面：全面 使用大小两个棉签，可完整覆盖宫颈外使用大小两个棉签，可完整覆盖宫颈外口和宫颈管进行有效检查，提高宫颈管内口和宫颈管进行有效检查，提高宫颈管内病变的检出率。病变的检出率。-特点四特点四：直观直观-小结小结 FRD叶酸受体介导靶向肿瘤检测技术叶酸受体介导靶向肿瘤检测技术；妇科内诊检查宫颈异常病变妇科内诊检查宫颈异常病变CIN2+，提供宫颈的肿，提供宫颈的肿 瘤属性的客观信息瘤属性的客观信息；高敏感性、高特异性高敏感性、高特异性 1分钟完成检查，分钟完成检查，科学科学分流病人分流病人；完整覆盖宫颈，降低漏诊率，尤其对宫颈腺上皮完整覆盖宫颈，降低漏诊率，尤其对宫颈腺上皮 病变。病变。-吴冠中三美图-Thanks for your Thanks for your timetime！
