1、Contents目录项目背景及意义实验流程及质控血片采集、递送与保存耳聋遗传咨询临床案例2目 录项目背景及意义part 1Contents3 我国残疾人群：8502万 听力残疾人群：2054万数据来自：关于使用2010年末全国残疾人总数及各类、不同残疾等级人数的通知，2012.3.52010年末各类残疾人比例听力残疾比例高听力残疾,24%视力残疾,15%言语残疾,2%肢体残疾,29%智力残疾,7%精神残疾,7%多重残疾,16%41.中国出生缺陷防治报告（2012）2.中国听力论坛（2013）80%的聋儿出生在听力正常的家庭每年新增3.5万先天性聋儿【1】每年新增3-4万迟发性聋儿【2】我国耳聋
2、出生缺陷现状5耳耳 聋聋Journal of Audiology and Speech Pathology.2011,19(1):73-77遗传是耳聋最大病因6流调单位：301医院聋病分子诊断中心流调范围：全国 28 个省市样品规模：10880 例正常人群中携带耳聋基因突变比例约为基因病征正常人携带比例聋人中携带比例GJB2先天聋3%21%SLC26A4迟发聋2%14.5%12S rRNA药物聋0.3%4.4%GJB3高频聋我国本土上克隆的第一个遗传疾病基因四大致聋基因7GJB2基因：先天性重度以上感音神经性耳聋；当GJB2基因发生纯合突变时，患者出生即表现出耳聋症状；进行人工耳蜗移植效果良好
3、SLC26A4基因（PDS基因）：大前庭水管综合征（EVAS），当患者患感冒、头部受打击时，听力急剧下降；避免颅压增大，使用改善微循环药物和神经营养药治疗线粒体基因突变：氨基糖甙类药物敏感性耳聋；患者使用氨基糖甙类药物会导致重度耳聋的发生；母系家族成员应杜绝使用氨基糖甙类抗生素药物GJB3基因：后天高频感音神经性耳聋；表现为后天突发性耳聋；进行人工耳蜗移植效果良好基因型与致病关系8及早确诊先天性耳聋，避免由聋致哑及早发现迟发性耳聋，通过生活指导，避免或延缓耳聋发生及早发现药物性耳聋，终身禁用耳毒性药物，并预防家族成员发生药物性耳聋遗传咨询9先天性聋儿及早安装助听器或人工耳蜗植入避免孩子由聋致哑
4、迟发性聋儿通过生活指导避免或延缓耳聋发生终身禁用耳毒性药物并预防家族成员发生药物性耳聋药物性聋儿10高危新生儿的干预措施10目前，新筛项目已经在北京、成都、长治、南通、固始、郑州等地方开展开展地区2014.1南通新筛项目培训2014.8河南固始新筛项目培训2013.6长治新筛项目2012.4北京新筛项目2012.10成都新筛项目2014.10郑州新筛项目全国新筛项目开展情况11全国受益新生儿达到100万例！全国新筛项目开展情况12目 录实验流程及质控part 2Contents13四个基因的9个突变位点：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和299 del AT
5、；SLC26A4 IVS7-2 AG、2168 AG；线粒体12s rRNA 1555 AG、1494 CT，GJB3 538 CT针对中国人设计，指标覆盖了国人中98%GJB2,50%PDS,90%药物性耳聋患者。快 速：8小时灵 敏：2-20 ng/L 高通量：同时检9个位点准 确：与测序验证相符率100%芯片杂交仪芯片洗干仪芯片扫描仪141415血片接收及血斑提取2.5 h核酸扩增3.5 h芯片杂交及清洗 2h芯片扫描及结果判读5 min15IVS7-2MIVS7-2MIVS7-2M4321QC：表面化学质控探针 BC：空白对照探针PC：杂交阳性对照探针 MC：磁珠质控探针IC：基因扩增
6、内对照探针 NC：阴性对照探针野生型探针突变型探针1617 质控品为血片，全程质控 每批次样本均含一套质控品 质控品包含所有位点室内质控 质控中心监督控制 所有9个位点 每年一次室间质评通过芯片内质控与室内、室间质量控制，完全能够满足临床对准确性、一致性的需求！1718先天性聋235 纯合1555均质299 杂合携带者药物聋敏感2168/IVS7-2复合杂合先天性聋1819结果上传短信发送上网查结果医院就诊报告打印医院就诊电话回访北京郑州19目 录血片采集、递送与保存Part 3Contents2021物品准备采血针滤纸片知情同意书血片架打印纸自封袋同代谢病筛查采集血片要求！2122分娩机构信
7、息登记采血晾干标本血片递送市妇幼保健院签署知情同意书2223（一）签署知情同意书 采血前将本次筛查的项目、条件、方式、费用等情况如实告知新生儿的监护人、遵循知情选择的原则。2324（二）信息登记 同代谢性疾病筛查：认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登记完整。并注意在填写过程中不要污染滤纸片。卡片内容包括：公/自费、采血单位、母亲姓名、住院号、新生儿性别、出生日期、采血日期、居住地址、联系电话和采血人等信息。2425（三）规范采血 采血时间：与代谢性疾病同时 采血方式：同代谢性疾病 合格要求：不少于2个血斑 直径大于8mm 血斑自然渗透，滤纸正反面血斑一致血斑无污染2526酒精污染的血斑，出现渗血
8、环组织液污染样本过少，渗透不良样本过多2627（四）血片递送与保存1、采血单位 采血完成后制成干血片，完成初级质控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉变，放入专用运输包，与代谢性疾病筛查血片同时送区县妇幼，并做好交接登记。2、市妇幼保健院 完成血片二级质控后，干燥密封保存，放入专用运输包，递送到筛查单位，并做好交接登记。3、筛查单位 完成交接，对血片进行三级质控后，进行检测并长期保存血片（2-8）。因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应当及时预约或追踪采集血片。27目 录耳聋遗传咨询part 4Contents2829减轻患者身体和精神上的痛苦；减轻患者及其亲属的心理压力；帮助他
9、们正确对待遗传性耳聋、了解发病概率；采取正确的预防、治疗措施，从而最终降低人群遗传性耳聋的发病率；意义：29301.已生育聋儿的正常夫妇询问再发风险者；2.有耳聋家族史的正常夫妇，担心后代会遗传此病者；3.未婚或已婚的男女双方均为聋哑人或其中一人为聋哑人，需要给予婚前婚配指导或婚后生育指导者；4.新生儿耳聋患者，指导用药及生活指导；此外，由于耳聋基因在正常人群中也有一定的携带率，因此有婚配或生育要求但无耳聋家族遗传史的正常人也在耳聋遗传咨询服务对象范围内。30u 第一步：样本芯片检测结果报告发送 邮寄或者短信发送u 第二步：整理需要电话追访的名单 新生儿耳聋基因实验室检测及报告发送完成后，整理
10、并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突变携带者列表清单u 第三步：电话追访并记录追访结果 确认新生儿家长收到报告并告知查看筛查结果 对于需要和希望进行门诊复诊的新生儿及家长，追访中告知其来诊的预约方式及就诊时间、流程等 初次追访失败的，记录追访时间及失败原因，需进行随后的第二次电话追访，若第三次追访失败，送约定部门31u 第四步：电话遗传咨询工作 身份确认：筛查编号、母亲姓名、出生医院 听力检测是否通过？是否有耳聋家族史？听力未通过者来门诊复诊听力通过者定期（每3月-半年）测查听力至3岁或到门诊进行听力复诊和遗传咨询 绘制药物相关耳聋基因携带者母系家族谱，记录家族中已
11、有听障者的发病年龄、原因、听力状况，并通知其领取致聋药物卡片等32u 第五步：门诊复诊新生儿遗传咨询工作 登记复诊新生儿耳聋基因筛查结果、编号、听力筛查是否通过，询问有无听力障碍家族史 有家族史者绘制家系图；绘制药物相关耳聋基因携带者母系家系图，记录家族中已有听障者的发病年龄、原因、听力状况，并通知其领取致聋药物卡片等 OAE听力测试 听力检测结果及基因筛查结果联合分析 定期复查听力、诊断性听力学检查或分子诊断 分子诊断程序：GJB2、SLC26A4全基因测序检测33u 门诊复诊新生儿遗传咨询工作结合听筛结果提供听力及遗传综合资讯听筛通过听筛未通过基筛通过基筛未通过基筛通过基筛未通过随诊程序分
12、子诊断程序听力/分子诊断程序听力/分子诊断程序提供听力及遗传服务及康复指导，并长期随访观察34目 录临床案例part 5Contents35野生型（正常）235delC纯合（耳聋）235delC纯合（耳聋）235delC杂合（正常）235delC杂合（耳聋）爷爷奶奶母亲父亲姑姑未知（过世）在郑州大学第三附属医院听力筛查中心，孩子进行听力筛查但未通过，抽血检查耳聋基因，结果孩子是235纯合突变，父亲是235纯合突变，母亲是235杂合突变，爷爷和姑姑分别是235杂合突变和野生型，奶奶不在了，因父母均是聋哑人，对母亲进行GJB2基因测序，查出是257CG杂合突变。结果展示GJB2 235 杂合GJB2 235 纯合36IVS7-2纯合（耳聋）IVS7-2纯合（耳聋）IVS7-2杂合（正常）爸爸妈妈女儿儿子IVS7-2杂合（正常）山东聊城岳姓家庭，大女儿5岁半，先天性聋，小儿子2岁半，出生时听筛已过，由于一次意外跌倒，听力丧失；两个孩子已做耳部CT检查，显示大前庭和内耳畸形。经耳聋芯片检测，两个孩子均为IVS7-2纯合突变，父母均为IVS7-2杂合突变。37博奥生物集团有限公司生 物 芯 片 北 京 国 家 工 程 研 究 中 心北 京 博 奥 晶 典 生 物 技 术 有 限 公 司
