1、在兔肝纤维化模型中在兔肝纤维化模型中的初步实验研究的初步实验研究研究生：杨研究生：杨 超超 导导 师：赵建农师：赵建农 教授教授研究背景研究背景近年来，磁共振各种功能成像技术发展迅猛近年来，磁共振各种功能成像技术发展迅猛本课题组已对肝纤维化的常规成像及、功能成像本课题组已对肝纤维化的常规成像及、功能成像进行了研究进行了研究血氧水平依赖（）成像逐渐应用于腹部领域的研血氧水平依赖（）成像逐渐应用于腹部领域的研究究血氧水平依赖（）成像原理血氧水平依赖（）成像原理将将 成像应用于家兔肝纤维化、肝硬化模型中的研成像应用于家兔肝纤维化、肝硬化模型中的研究，探讨究，探讨 成像对肝纤维化的临床应用价值成像对肝
2、纤维化的临床应用价值研究目的研究目的第二部分第二部分 成像在兔肝纤维化模型中的应成像在兔肝纤维化模型中的应用价值探讨用价值探讨 研究内容研究内容第一部分第一部分 兔肝纤维化模型的建立兔肝纤维化模型的建立兔肝纤维化模型的建立兔肝纤维化模型的建立材料与方法材料与方法 实验动物 健康纯系雄性新西兰大白兔只 月龄 体质量 造模方法造模方法实验组：只，纯腹腔注射次周，剂量实验组：只，纯腹腔注射次周，剂量 ，辅，辅以乙醇作为饮水以乙醇作为饮水对照组：只，生理盐水腹腔注射次周，剂对照组：只，生理盐水腹腔注射次周，剂量量 ，饮用清水，饮用清水 检查检查 造模后第、周，分别按编号取实造模后第、周，分别按编号取实
3、验只组和对照组只行扫描。验只组和对照组只行扫描。病理学检查病理学检查影像检查结束后经耳缘静脉注入空气处死影像检查结束后经耳缘静脉注入空气处死动物动物将兔肝取出，进行取材将兔肝取出，进行取材取材部位尽量保持与影像学测量区一致取材部位尽量保持与影像学测量区一致取材大小约取材大小约 用甲醛液固定小时后，送病理检查用甲醛液固定小时后，送病理检查结结 果果动物一般情况动物一般情况对照组：一切正常，体重增加值平均对照组：一切正常，体重增加值平均 实验组：随实验进程各方面机能下降，实验实验组：随实验进程各方面机能下降，实验末体重增加值平均末体重增加值平均 组别组别只数只数存活存活只数只数死亡死亡只数只数死亡
4、死亡率率肝纤维化分期肝纤维化分期 对照组对照组 实验组实验组 实验成模情况统计实验成模情况统计肝脏组织病理学改变肝脏组织病理学改变 对照组兔肝鲜红色，表面光滑，对照组兔肝鲜红色，表面光滑，质地柔软质地柔软实验组兔肝体积略增大，被膜肿实验组兔肝体积略增大，被膜肿胀胀 肝脏小叶结构清晰，肝细胞排列呈条索状，以中央静脉为中心放射状肝脏小叶结构清晰，肝细胞排列呈条索状，以中央静脉为中心放射状排列。为染色、为染色。排列。为染色、为染色。期期 肝脏汇管区稍扩大，局限窦周纤维化。为染色、为染色肝脏汇管区稍扩大，局限窦周纤维化。为染色、为染色期期肝脏汇管区扩大，汇管区周围薄层纤维间隔形成，向小叶内伸入。肝脏汇
5、管区扩大，汇管区周围薄层纤维间隔形成，向小叶内伸入。为染色、为染色为染色、为染色期期 肝纤维化肝脏，大量纤维增生向小叶内延伸形成不完全的纤维间隔，肝纤维化肝脏，大量纤维增生向小叶内延伸形成不完全的纤维间隔，伴小叶结构紊乱伴小叶结构紊乱(白箭白箭)，无肝硬化，无肝硬化.为染色、为染色为染色、为染色期期 肝脏小叶结构紊乱，大量纤维组织增生形成完整纤维间隔伴假小肝脏小叶结构紊乱，大量纤维组织增生形成完整纤维间隔伴假小叶形成。叶形成。为染色、为染色。为染色、为染色。期期造模动物物的选择造模动物物的选择 讨论讨论造模药物的选择造模药物的选择 诱导诱导 的肝的肝纤维化模纤维化模型法：型法：优点：优点：缺点
6、：缺点：简便、易行、价廉、重复性简便、易行、价廉、重复性较好、有相似较好、有相似 性性肝毒性作用剧烈而迅速，肝毒性作用剧烈而迅速，死亡率很高死亡率很高用复合因素造模，可以缩短造模时间，提高成功率。用复合因素造模，可以缩短造模时间，提高成功率。诱导肝纤维化原理诱导肝纤维化原理肝纤维化肝纤维化进入进入过氧化过氧化内质网中微内质网中微粒体粒体细胞内细胞内大分子大分子细胞膜不细胞膜不饱和脂质饱和脂质正常正常肝细胞肝细胞肝细胞损肝细胞损伤、坏死伤、坏死攻击攻击修复修复小小 结结使用建立兔肝纤维化模型是可行的，其病理改变、使用建立兔肝纤维化模型是可行的，其病理改变、转归及分期与临床人体肝纤维化相似，并且造
7、模成转归及分期与临床人体肝纤维化相似，并且造模成功率较高，成模时间较短，是一种较理想的肝纤维功率较高，成模时间较短，是一种较理想的肝纤维化动物模型化动物模型兔肝纤维化模型行兔肝纤维化模型行 成像扫描成像扫描材料与方法材料与方法 动物模型的制作 同第一部分 动物麻醉 禁食，正常饮水。扫描前经耳缘静脉注射戊巴比妥钠（）行全麻，麻醉深度以角膜反射迟钝和肢体抵抗力消失为标准。扫描固定扫描固定将家兔俯卧固定在自制弧形装置上，再将家兔俯卧固定在自制弧形装置上，再一起固定于线圈上，腹部加压包扎，将其一起固定于线圈上，腹部加压包扎，将其肝脏位置置于线圈中央。肝脏位置置于线圈中央。设备及扫描方式设备及扫描方式
8、超导型磁共振扫描仪超导型磁共振扫描仪单通道表面线圈（）单通道表面线圈（）常规常规 、横断扫描横断扫描,扫描扫描扫描参数扫描参数 序列：常规（序列：常规（)脉冲序列脉冲序列;:（个），个），：，：，：，层厚：层厚：，间距：，间距：，矩阵：，：。矩阵：，：。图像后处理及分析图像后处理及分析 肝脏形态大小肝脏形态大小信号变化信号变化是否腹腔积液是否腹腔积液图像图像图像图像常规扫描成像常规扫描成像 成像成像原始图像原始图像 工作站工作站*图图肝纤维化肝纤维化*图图 病理学检查病理学检查 病理结果病理结果分期分组分期分组组（无肝纤维化组，）组（无肝纤维化组，）组（重度肝纤维化肝硬化组）组（重度肝纤维化肝
9、硬化组）组（轻中度肝纤维化组组（轻中度肝纤维化组)统计学分析统计学分析*值用均数标准差表示值用均数标准差表示组间样本均数的比较采用单因素方差分析，组间样本均数的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用最小显著差法，组间两两比较采用最小显著差法，数据处理应用数据处理应用 统计软件统计软件常规表现常规表现 信号信号体积体积各叶比例各叶比例表面表面腹腔积液腹腔积液实验组实验组不均匀不均匀逐渐增大逐渐增大后期失调后期失调欠光滑欠光滑后期出现后期出现对照组对照组均匀均匀正常正常正常正常光滑光滑无无结结 果果观察指标观察指标*图及图及*值值期肝纤维化期肝纤维化*图图 期肝纤维化期肝纤维化*图图 期肝纤维化
10、期肝纤维化*图图 期肝纤维化期肝纤维化*图图 三组三组*平均值比较平均值比较只数只数*平均值平均值组组组组组组三组三组*平均值图平均值图值值统计学分析统计学分析组与组组与组组与组组与组组与组组与组三组三组*平均值组间比较平均值组间比较讨讨 论论肝脏肝脏 成像国内外研究现状成像国内外研究现状 肝脏肝脏 成像作为磁共振功能成像的一种，目前成像作为磁共振功能成像的一种，目前研究尚处起步阶段。研究尚处起步阶段。肝脏肝脏 成像运用于肝纤维化、肝硬化成像运用于肝纤维化、肝硬化 的的理论基础理论基础 肝脏纤维化时肝脏微循环已经发生障碍肝脏纤维化时肝脏微循环已经发生障碍 肝脏血流的自身调节机制以及肝动脉的缓冲
11、肝脏血流的自身调节机制以及肝动脉的缓冲功能功能 纤维化初期，门脉灌注量与肝实质氧分压变纤维化初期，门脉灌注量与肝实质氧分压变化不大随着纤维化程度加重，缓冲功能不足以化不大随着纤维化程度加重，缓冲功能不足以调节门脉灌注量的降低，导致肝实质血氧分压调节门脉灌注量的降低，导致肝实质血氧分压降低降低小小 结结 成像虽不能作为诊断早期肝纤维化的敏感指标，成像虽不能作为诊断早期肝纤维化的敏感指标，也不能准确地对肝纤维化进行分级分期，但它在一也不能准确地对肝纤维化进行分级分期，但它在一定程度上能反映肝纤维化的严重程度以及肝脏氧含定程度上能反映肝纤维化的严重程度以及肝脏氧含量的变化，从而指导临床量的变化，从而
12、指导临床全文结论全文结论 本实验应用复合因素建立兔肝纤维化模型本实验应用复合因素建立兔肝纤维化模型成功率达到了，并且成模时间较短，取得成功率达到了，并且成模时间较短，取得了较好的效果动物模型了较好的效果动物模型 成像在一定程度上能反映肝纤维化的严重成像在一定程度上能反映肝纤维化的严重程度以及肝脏氧含量的变化，从而指导临程度以及肝脏氧含量的变化，从而指导临床床致致 谢谢 衷心感谢导师赵建农教授三年来在学习、科研及生活上给予的悉心指导和亲切关怀。导师渊博的学识，严谨的治学态度，精益求精的工作作风，永不放弃的人生态度，诲人不倦的高尚师德，严以律己、宽以待人的崇高风范，豁达开朗、笑对人生的乐观性格对我
13、影响深远。我要铭记导师的谆谆教诲，在今后的工作中不断进取、努力工作，不辜负导师的期望。在此，谨向导师致以崇高的敬意和衷心的感谢！在此也要对曾燕教授致以诚挚的感谢,在整个研究及学位论文的撰写上都给了我无私的指导和帮助。衷心感谢重庆医科大学附属第二医院放射科的全体老师和同学，感谢郭大静老师、余聪老师、李杰老师、谢微波老师、淦伟老师及罗小平老师，对我学习和研究给予的大力支持和帮助。感谢何晓静师姐、舒健师兄、罗银灯师兄，吴伟师兄、陈维娟师姐，你们对科研的执着追求鼓舞着我前进，也感谢你们在科研方面对我的提示和帮助。感谢技术组的老师、护士组老师在学习及生活各个方面对我无微不至的关心。感谢我的父母，感谢他们多年来对我学习、生活的的关心和支持，特别是在我课题研究期间、论文撰写过程中，对我的默默无闻的支持和帮助。向那些本文中尚未提及，给予我指导、帮助和关心的老师、同学和亲人们表示最诚挚的感谢！
