1、呼吸道病毒和检验呼吸道病毒和检验RNA病毒 正粘病毒科：流感病毒 副粘病毒科：副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒；其他病毒如：风疹病毒、冠状病毒、鼻病毒等DNA病毒腺病毒主要种类呼吸道病毒和检验2 是指对人或某些动物红细胞表面的粘蛋白有亲和性的病毒。正、副粘病毒的分别以其核酸是否分节段为标准，分节段者为正粘病毒，不分节段者为副粘病毒。粘病毒（Orthomyxovirus）呼吸道病毒和检验3第一节 流行性感冒病毒呼吸道病毒和检验419181918年年西班牙流感西班牙流感呼吸道病毒和检验56级级甲型甲型H1N1流感流感2009.45月全球发病人数：月全球发病人数：2万人万人截止截止2
2、009.12，死亡人数，死亡人数9000呼吸道病毒和检验6截至截至2010年年2月月28日，全国日，全国31个省个省份累计报告甲型份累计报告甲型H1N1流感确诊病例流感确诊病例12.7万例，死亡病例万例，死亡病例793例例 呼吸道病毒和检验7（influenza virus）流感病毒是一种什么样的病毒？为什么容易流感病毒是一种什么样的病毒？为什么容易引起流行引起流行?流感如何传播、有何症状？流感如何传播、有何症状？如何进行微生物学检查？如何进行微生物学检查？怎样防治这种疾病？怎样防治这种疾病？呼吸道病毒和检验8 （一）形态与结构（一）形态与结构 球形（球形（8080120nm120nm）丝状、
3、杆状，长短不一丝状、杆状，长短不一一、生物学性状形态形态呼吸道病毒和检验9分三部分核心核蛋白（NP）衣壳包膜结构：呼吸道病毒和检验101 1、核心：、核心：含含RNARNA及及RNARNA多聚酶多聚酶 所以所以 易发生易发生基因重组基因重组，导致基因编码的蛋白抗原发，导致基因编码的蛋白抗原发生变异而出现新亚型。生变异而出现新亚型。RNA分节段，分节段，78段段特点特点呼吸道病毒和检验11 呈螺旋对称呈螺旋对称 其抗原性稳定，具有型特异性其抗原性稳定，具有型特异性。2 2、衣壳：核蛋白（、衣壳：核蛋白（NPNP）核蛋白核蛋白呼吸道病毒和检验12 内层内层：基质蛋白（：基质蛋白（MPMP），分型依
4、据。），分型依据。据据NPNP和和MPMP分型：分型：A A型型甲型流感病毒甲型流感病毒 B B型型乙型流感病毒乙型流感病毒 C C型型丙型流感病毒丙型流感病毒3 3、包膜、包膜 外层外层：脂质双层，：脂质双层，来源于宿主细胞膜来源于宿主细胞膜呼吸道病毒和检验13（1 1）血凝素血凝素(Hemagglutinin HA(Hemagglutinin HA)：（：（柱形）凝集红细胞凝集红细胞血凝现象，用于鉴定病毒血凝现象，用于鉴定病毒 吸附宿主细胞吸附宿主细胞与受体结合（侵入细胞的关键）与受体结合（侵入细胞的关键）抗原性抗原性相应抗体，有中和作用相应抗体，有中和作用 易变异（分亚型）易变异（分亚型
5、）（2 2）神经氨酸酶（）神经氨酸酶（Neuraminidase NANeuraminidase NA）：（：（蘑菇形）参与病毒释放，促进病毒扩散参与病毒释放，促进病毒扩散 抗原性抗原性非中和抗体非中和抗体 易变异（分亚型）易变异（分亚型）呼吸道病毒和检验14 亚型（甲型流感病毒）目前已发现HA有15种（H1-H15），NA有9种（N1-N9），所有亚型均可从禽、鸟类中分离到，但带有病毒的禽鸟未必会发病。人类流行的亚型：人类流行的亚型：主要是由主要是由H1H1、H2H2、H3H3和和N1N1、N2N2几种抗原构成。几种抗原构成。流感病毒的传播路流感病毒的传播路线线呼吸道病毒和检验15 易变异
6、乙型和丙型流感病毒抗原性比较稳定（二）为什么流感病毒易引起流行？（二）为什么流感病毒易引起流行？原因原因呼吸道病毒和检验16（1 1）甲型流感病毒甲型流感病毒抗原变异的幅度小，属于量抗原变异的幅度小，属于量变，可引起小规模流感的流行变，可引起小规模流感的流行，称称抗原漂移抗原漂移（Antigenic driftAntigenic drift）（2 2）若抗原变异幅度大，系质变若抗原变异幅度大，系质变，形成新的亚形成新的亚型，可以引起大规模甚至世界性的流感流行型，可以引起大规模甚至世界性的流感流行，称称抗抗原转变原转变(Antigenic shift)(Antigenic shift)。为什么抗
7、原变异与流行密切相关？呼吸道病毒和检验17甲型流感病毒在不同年代的抗原变化甲型流感病毒在不同年代的抗原变化流行年代流行年代 亚亚 型型 代表毒株代表毒株*表面抗原表面抗原HA NA 1918 甲甲0 (原甲型原甲型)H0 N1 A/puerto Rico/8/34 1947 甲甲1(亚甲型亚甲型)H1 N1 A/FM/1/47 1957 甲甲2(亚洲甲型亚洲甲型)H2 N2 A/Singpore/1/57 1968 甲甲3(香港甲型香港甲型)H3 N2 A/Hong Kong/1/68 1977 甲甲1 H1 N1 A/USSR/90/77 甲甲3 H3 N2 2009 甲型甲型 H1 N1*
8、：型：型/分离地点分离地点/编号编号/分离年份分离年份呼吸道病毒和检验18二、流感病毒的致病性主要是病人、隐性感染者、病禽主要是病人、隐性感染者、病禽传染传染源源传播途传播途径径飞沫（主要）、接触感染飞沫（主要）、接触感染流行季节流行季节多为冬春季多为冬春季呼吸道病毒和检验19 发热、畏寒发热、畏寒 咳嗽、咽痛咳嗽、咽痛 全身酸痛、疲乏无力全身酸痛、疲乏无力 头痛头痛 腹泻、呕吐腹泻、呕吐（部分病人）（部分病人）流感症状流感症状重者继发肺炎、呼吸衰竭、甚至死亡重者继发肺炎、呼吸衰竭、甚至死亡呼吸道病毒和检验20 包括：体液免疫和细胞免疫包括：体液免疫和细胞免疫 中和抗体中和抗体(抗抗HA)HA
9、)：SlgASlgA、IgGIgG、IgMIgM 血清中的抗体可维持血清中的抗体可维持1010年，但仅年，但仅对同型对同型病毒有免疫力。病毒有免疫力。免疫性免疫性呼吸道病毒和检验21三、微生物学检验（一）分离培养与鉴定（一）分离培养与鉴定 1 1、标本采集和处理、标本采集和处理 鼻腔洗液、鼻咽拭子、咽漱液、支气管分泌物（接种前加入青霉素和链霉素）。时间：发病后3天内（鼻咽分泌物病毒量达104-107/ml）；尽快送检；低温保存。呼吸道病毒和检验222、检验程序标本911日龄鸡胚日龄鸡胚3335，3d收获羊水和尿液收获羊水和尿液阳性阳性 阴性阴性血凝抑制试验血凝抑制试验补体结合试验补体结合试验盲
10、传盲传3次次MDCK细胞细胞3335，710d观察观察CPE红细胞吸附红细胞吸附阳性阳性 阴性阴性盲传盲传血凝抑制试验血凝抑制试验补体结合试验补体结合试验呼吸道病毒和检验23（1）鸡胚培养 初次分离：接种于鸡胚羊膜腔内传代：接种尿囊腔24日后：取羊水、尿囊液做血凝试验，检查有无病毒增殖。若试验为阴性，需在鸡胚中盲目传代三次后再试验。若血凝试验为阳性，可用已知流感病毒各型特异性抗体与新分离病毒进行血凝抑制试验，鉴定型别。3、检验方法 呼吸道病毒和检验24（2 2）细胞培养细胞培养 原代人胚肾细胞、猴肾细胞、MDCK细胞，观察CPE。做血凝试验或红细胞吸附试验鉴定。（3 3）动物分离培养动物分离培
11、养 雪貂呼吸道病毒和检验25 取病人急性期（发病3日内）和恢复期（发病24周）双份血清，同样与已知各亚型流感病毒进行血凝抑制试验血凝抑制试验或其他试验。恢复期血清的抗体效价是急性期的4倍或4倍以上，具有协助诊断意义。其他试验：其他试验：补体结合试验、中和试验、酶免疫试验、固相放免等。（二）血清学试验呼吸道病毒和检验26（1）免疫荧光、免疫酶等方法检测感染细胞或培养细胞中的病毒抗原病毒抗原。敏感、快速。（2）分子杂交测病毒病毒RNARNA：甲型（3）PCR法测病毒病毒RNARNA（4）其他：免疫电镜（三）快速诊断呼吸道病毒和检验27四、怎样防治流感？呼吸道病毒和检验28双手要勤洗；打嚏掩口鼻双手
12、要勤洗；打嚏掩口鼻居室常通风；无事少聚集居室常通风；无事少聚集脏手勿触口；吐痰包纸里脏手勿触口；吐痰包纸里感冒戴口罩；染疫要隔离感冒戴口罩；染疫要隔离呼吸道病毒和检验29 制备的疫苗必须与流行型别相同制备的疫苗必须与流行型别相同、接种流感疫苗、接种流感疫苗：（最有效的预防方法）要求要求禁忌症禁忌症鸡蛋过敏史鸡蛋过敏史免疫缺陷免疫缺陷患病期间患病期间呼吸道病毒和检验30（2）合并细菌感染：抗生素3 3、治疗：、治疗：早期隔离治疗呼吸道病毒和检验31小小 结结1、流感病毒的形态结构、变异与流行（掌握）2、流感的传染源、传播途径（掌握）3、流感病毒的微生物学检验（掌握）4、流感的防治原则（熟悉）思考
13、题：请你对流感病毒的各种微生物学检验方法在临床的应用价值分别做一评价。课后：注意查阅流感病毒的相关研究进展及流行情况呼吸道病毒和检验32流感病毒粘附细胞流感病毒粘附细胞呼吸道病毒和检验331997：禽流感：禽流感然而然而呼吸道病毒和检验34抗抗-HA-HA的中和作用：阻止流感病毒感染细胞的中和作用：阻止流感病毒感染细胞呼吸道病毒和检验35一、麻疹病毒二、腮腺炎病毒三、副流感病毒四、呼吸道合胞病毒第二节 副粘病毒呼吸道病毒和检验36麻疹病毒（Measles virus）是引起麻疹的病原体。麻疹是儿童最常见一种急性呼吸道传染病。临床上以发热、上呼吸道炎症、结膜炎、口腔粘膜斑及全身丘疹为特征。麻 疹
14、 病 毒呼吸道病毒和检验37形态大致与流感病毒相似，为球形、丝状等多种形态，直径为140180nm，长者可达270nm；结构由内向外为核衣壳和外面的脂蛋白包膜两部分，其核衣壳内的核酸为单股负链核酸为单股负链RNARNA，不分节段，不易发生重组；不分节段，不易发生重组；包膜结构与流感病毒相似，膜上也有两种糖蛋白剌突：一种称为H蛋白，能凝集猴、狒狒等动物的红细胞；另一种称为F蛋白。一、生物学性状呼吸道病毒和检验38 麻疹病毒无神经氨酸酶，该病毒只有一个血清型。在人胚肾、人羊膜细胞及Hela、Vero 等多种传代细胞中可增殖，出现细胞病变，形成多核巨细胞，胞核胞浆中可形成嗜酸性包涵体。呼吸道病毒和检
15、验39麻疹是一种典型的全身出疹的急性传染病。其传染性强、易感接触后90%以上都发生麻疹，儿童初次感染几乎都发病，传染源是麻疹患儿。病毒病毒呼吸道上呼吸道上皮细胞内皮细胞内血流血流全身淋巴组织全身淋巴组织单核吞噬细胞单核吞噬细胞第一次病毒血症第一次病毒血症 发热、咳嗽、发热、咳嗽、眼结膜充血、口腔粘膜斑等眼结膜充血、口腔粘膜斑等第二次病毒血症第二次病毒血症 损伤血管内损伤血管内皮，使全身相继出现红疹皮，使全身相继出现红疹中枢中枢N.S（亚急性硬化性全脑炎亚急性硬化性全脑炎）极少数极少数912天天35天天二、致病性与免疫性呼吸道病毒和检验40 麻疹病毒感染的免疫力持久，一般不会出现二次感染。免疫性
16、呼吸道病毒和检验41麻疹因临床症状典型，一般无需作微生物学检查。六个月以内的婴儿有被动免疫力，但随年龄增长逐渐消失，易感性增加，给6个月1岁的儿童普遍接种麻疹减毒活疫苗麻疹减毒活疫苗是预防麻疹的最好方法。给有接触麻疹患儿病史的体弱易感儿注射丙种球蛋白或健康成人全血，有预防发病或减轻症状的作用。三、微生物学诊断和预防呼吸道病毒和检验42病毒病毒形态结构形态结构 致致 病病特异预防特异预防免疫免疫力力麻疹麻疹病毒病毒球形；有球形；有包膜，包膜，RNA麻疹麻疹：柯氏斑柯氏斑；全身丘疹，高热、咳嗽等亚急性硬化性全脑炎亚急性硬化性全脑炎减毒活疫苗减毒活疫苗丙种球蛋白丙种球蛋白牢固牢固腮腺腮腺炎炎V球形；
17、有球形；有包膜，包膜，RNA腮腺炎腮腺炎并发：睾丸炎、卵巢炎并发：睾丸炎、卵巢炎减毒活疫减毒活疫苗苗牢固牢固风疹风疹病毒病毒球形；有球形；有包膜，包膜，RNA风疹风疹：先有上呼吸道症状；先有上呼吸道症状；随之出现斑丘疹随之出现斑丘疹先天性风疹综合征先天性风疹综合征风疹疫苗风疹疫苗牢固牢固其他呼吸道病毒呼吸道病毒和检验43经典的冠状病毒与SARS病毒的比较 冠状病毒：1965年，Tyrrell首次用人胚器官培养成功。1968年正式命名，1975年建立冠状病毒科。形态结构：为单股正链RNA病毒 致病：猪、牛、狗等动物感染后可引起腹泻，人和禽类主要通过呼吸道感染，只侵犯上呼吸道，引起普通感冒，尔偶引
18、起腹泻。SARS病毒呼吸道病毒和检验44香港衛生署香港衛生署 嚴重呼吸道症候群嚴重呼吸道症候群(SARS)病徵出現率病徵出現率呼吸道病毒和检验45 参考资料：医学微生物学 周正任 主编 医学微生物学 陆德源 主编 Nature 网站： www.lib.uiowa.edu/hardin/md/ej.html www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez 呼吸道病毒和检验46禽流感病毒禽流感病毒 近年来发现禽流感病毒也可传染人，由禽类传近年来发现禽流感病毒也可传染人，由禽类传染人的禽流感病毒有三种：甲型染人的禽流感病毒有三种：甲型H5N1H5N1、甲型、甲型H7N7H7N7及
19、甲型及甲型H9N2H9N2，其中，其中H5N1H5N1型为高致病性禽流型为高致病性禽流感病毒。感病毒。甲型流感病毒除了感染人外，还可引起禽、猪甲型流感病毒除了感染人外，还可引起禽、猪等多种动物感染，禽流感病毒即属此类病毒。等多种动物感染，禽流感病毒即属此类病毒。呼吸道病毒和检验47 禽流感病毒为单负链禽流感病毒为单负链RNARNA病毒，有包病毒，有包膜，表面有刺突。形态呈球形、杆状或膜，表面有刺突。形态呈球形、杆状或丝状。丝状。1、形态结构与变异性、形态结构与变异性 呼吸道病毒和检验48禽流感病毒在电镜下的形态，左图中染成黄色的即为禽流感病毒呼吸道病毒和检验49 假如已导致亚洲65人死亡的H5
20、N1型禽流感病毒与人类流感病毒发生基因重组，从而变异为能在人际间传播的病毒，后果将会怎样？WHO负责公共医疗的专家预测，届时全球将有500万至1.5亿人被禽流感夺去性命。呼吸道病毒和检验50 中国在人感染高致病性禽流感实验室诊断中主要采取3种办法，分别是病毒分离、核酸检测和检测抗体。2 2、禽流感病毒的检测、禽流感病毒的检测呼吸道病毒和检验51 流感病毒流感病毒(Influenza virus)呼吸道病毒和检验52核心核心M蛋白蛋白包膜包膜血凝素血凝素神经氨神经氨酸酶酸酶呼吸道病毒和检验53鸡胚尿囊腔接种鸡胚羊膜腔接种呼吸道病毒和检验55麻疹病毒麻疹病毒 Measles virus Measl
21、es virus呼吸道病毒和检验56呼吸道病毒和检验57呼吸道病毒和检验58呼吸道病毒和检验59麻疹引致的口腔表徵麻疹引致的口腔表徵柯氏白斑柯氏白斑 麻疹引致的口腔柯氏白斑 呼吸道病毒和检验60呼吸道病毒和检验61 腺 病 毒(adenovirus)呼吸道病毒和检验62呼吸道病毒和检验63 风疹病毒模式图风疹病毒模式图呼吸道病毒和检验64风疹致盲风疹浅红色斑丘疹呼吸道病毒和检验65呼吸道病毒和检验66 可致猪狗牛等动物腹泻可致猪狗牛等动物腹泻呼吸道病毒和检验67 冠状病毒冠状病毒 coronavirus呼吸道病毒和检验68呼吸道病毒和检验69SARS virus呼吸道病毒和检验70腮腺炎呼吸道病毒和检验71
