间充质干细胞的临床应用心得课件.ppt

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资源描述

1、间充质干细胞的临床应用心得生物学特性q来源广泛q自我更新、多向分化潜能q易扩增传代能力MSCsIL-6,IL-7,IL-10,IL-11,SCF,SDF-1GM-CSF,M-CSF.adipocyteosteocytechondrocytemyoblastcardiocyteNerve cellhepatocytev可来源于骨髓、胰腺、皮肤、肺脏等多处器官组织 v体外能够传40代,并保持稳定的表型和多向分化的潜能(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)q免疫调节作用q产生多种细胞因子 q表达多种细胞表面分子)等q无MHC限制q狼疮骨髓MSCs(BMSCs)SLE骨髓(P0)M

2、SCs第25d 倒置显微镜观察 100 v人正常人与SLE患者BMSCs形态大小上无差异,均以长梭形为主孙凌云等,中华风湿病学杂志,2005形态观察SLE 组正常对照组原代培养时间267.76 d17 5.46 dP=0.029形态学无区别张华勇,孙凌云,中华风湿病学杂志,2006扩增效率 P5代后降低 P10代后降低 q表 达 CD29、CD44 和CD105 q不 表 达 CD14、CD34、CD45、HLA-DR 正常组与狼疮组表型表达并无差异(P0.05)张华勇,孙凌云,中华风湿病学杂志,2006表面标记测定02000400060008000100001200012 345 678 9

3、 10 11 12 13 天数细胞数SLENormaldCell populationq生长曲线呈S形qSLE患者BMSCs总体生长较正常人缓慢 张华勇,孙凌云,中华风湿病学杂志,2006对照SLESLEBeta-actinIL-7vSLE中IL-6、IL-7 表达降低()v而IL-11,M-CSF表达无区别张华勇,孙凌云,中华风湿病学杂志,2006张华勇,孙凌云,中华风湿病学杂志,2006 BALB/c NZBWF1/J (P0)100 q形态上无显著差异 q但狼疮MSCs增殖速度更快、传代时间更短 不同于人?Sun LY,et al.Scand J Rheumatol,2006qMSCsM

4、SCs与与T T细胞细胞q与正常(BALB/c)及狼疮鼠(NZBWF1/J)BMSCs共培养均导致活化的T细胞凋亡下降(P0.(不需细胞间直接接触)Transplantation,2003,76:1208-1213SLE中IL-6、IL-7 表达降低()MSCs与HSCs共移植的临床研究Spaggiari GM,et al.狼疮鼠BMSCs对T细胞免疫调节功能存在缺陷表 达 CD29、CD44 和CD105慢性GVHD发生率为 12%(对照组 67%,P=0.与正常鼠BMSCs共培养:T-bet,GATA-3 TH1Sethe S,et al.Conded splenocytes+MSC ML

5、RConded splenocytes+MSC MLR Disease No.Source of MSCs/SCT Outcome Ref.Study Patients SettingHematologic 15 Autologous IV No adverse events of 1,Lazarus et al.malignancies infusion 10,and 50 106 cellsBreast cancer 28 Autologous in IV infusion was safe;Ko et al.autologous SCT autologous SCT recovery w

6、as rapidInborn errors of 11 HLA-identical No immune response against koc et al.Metabolism from SCT donor donor;improved nerve conductio velocity in metachromatic leukodystrophyOsteogenesis 5 HLA-identical from Gene-marked MSCs engrafted;Horwitz et al.Imperfecta SCT donor new dense bone formation;few

7、 fracturesAcute myeloid 1 HLA-haploidentical SCT engraftment with no GVHD Lee et al.Leukemia from SCT donorLeukemia 31 HLA-identical from Rapid platelet engraftment;low rassoni et al.SCT donor incidence of acute GVHDSevere aplastic 1 Allogeneic MSC Engraftment;improved stroma Fouillard et al.anemia

8、Severe acute 1 Haploidentical MSC;Clearance of grade IV acute Le Blanc et al.GVHD unrelated donor SCT GVHD,twice qMSCs与HSCs共移植的临床研究Le Blanc C,et al.Biology of Blood and Marrow Transplantation.2005;11:321-3341.1.血液疾病血液疾病v女,20岁,急性白血病 全身照射+传统化疗5.7 106 CD34+cells/kg+1.5106 MSCs/kg(来自患者父亲)无急性GVHD 或慢性GVHD

9、发生移植后31月血象正常,无病情复发Lee ST,et al.Br J Haematol.2002;118:1128-1131.2.2.肿瘤肿瘤接受高剂量化疗 自体干细胞移植静脉输注12106/kg MSCs 无输注后毒性反应发生治疗后血小板 0.5109/L 的平均时间 9 d(4-19 d)中性粒细胞 0.5109/L 的平均时间8 d(6-11 d)Koc ON,et al.Clin Oncol,2000;18:307-316MSCs 可促进HSCs移植(移植物抗宿主病)q为为HSCTHSCT常见并发症(常见并发症(20206060)q预防方法预防方法 传统传统vMSCs输注31名患者接

10、受HLA相匹配的同胞HSCsMSCs移植qMSCs 剂量15106/kgq无MSCs 输注相关毒性反应q急性IIIV GVHD发生率为 15%(对照组 40%,P=0.01)q慢性GVHD发生率为 12%(对照组 67%,P=0.002)q6月存活率88%(对照组 67%)ASCT同时输入MSCs可促进移植,降低 GVHD,提高生存率Frassoni F,et al.Bone Marrow Transplant 2002;29(suppl 2)男,男,9 9岁,急性淋巴细胞白血病岁,急性淋巴细胞白血病HSCTHSCT后发生后发生型急性型急性GVHDGVHDq症状:腹泻,高胆红素血症,反复细菌、

11、真菌、病毒感染q常规抗GVHD治疗无效q移植后73d予静脉输注2106/kg MSCs(来自患者母亲),第170d予1106/kg MSCsq治疗效果:症状好转至消失,血胆红素正常,急淋缓解q该中心1000例接受异基因HSCT患者中,25例发生急性型GVHD,除此例外,另24例均死亡(移植后月,平均2月)如下图患者移植临床过程Le Blanc K,et al.Lancet.2004;363:143941结论:利用MSCs的免疫抑制作用可治疗急性GVHD治疗组 例数/次数急性GVHD 8慢性GVHD 1MSCs治疗1次 6MSCs治疗2次 3移植后急性GVHD消失 6移植后死亡 3巨细胞病毒胃肠

12、炎 1存活(2月3年)5生存率明显高于同期未接受MSCs输注的GVHD患者(P)Ringden O,et al.Biology Blood Marrow Transplant,2006qMSCs用于自身免疫病治疗的潜能4.自身免疫病qKushida T等用照射胫骨内注射全骨髓(IBMBMT)治疗狼疮(MRL/lpr),1年以上生存率达100 结论qMSCs的输注可延长狼疮鼠生存期限q输注途径影响q2000年,Kushida T等用全身照射门静脉内注射(PV)尾静脉注射(IV)治疗狼疮(MRL/lpr),1年生存率达100,高于(照射PV)及(照射IV)组SLE在延长生存率上,PVIVPVIVIBMBMT可减少照射剂量,并无需追加IVMRL/lpr鼠肾小球病理改变Kushida T,et al.Blood.2001;97:3292-3299NanjingUniversityBONE MARROW MSCs

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