1、水果硬糖中还原糖的测定n1、学习、学习直接滴定法直接滴定法测定还原糖的原理，测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术。并掌握其测定的操作技术。2、通过对实验结果的分析，了解影响测、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素。定准确性的因素。一、目的要求一、目的要求二、实验原理二、实验原理 将等量的碱性酒石酸铜甲液，乙液混合时，立即将等量的碱性酒石酸铜甲液，乙液混合时，立即生成天蓝色的生成天蓝色的氢氧化铜氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络酒石酸钾钠铜络合物合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还
2、原。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的糖还原为一价的氧化亚铜氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈呈淡黄色淡黄色而指示滴定终点。根据还原糖标准溶液标而指示滴定终点。根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。n将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合
3、时，硫酸铜与氢氧化钠反应硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：n2NaOH+CuSO4 =Cu(OH)2 +Na2SO4n所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜：COOKCOHHCOHCOONaHCOOKCOHCOCOONaHCu(OH)2+=Cu +2 H2 O n 在加热条件下，检测样品中还原糖与酒石酸还原糖与酒石酸钾钠铜反应钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应如下：n反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应氰化钾（黄血盐）
4、反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。COHHCOHHCOOKCOHHCOHCOONaHCu O +=Cu +(CHOH)+6H O2CHOCH OH4+(CHOH)COOHCOOH+H CO23COOKCOONa66232n滴定时以亚甲基蓝为氧化还原指示剂。因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。根据样液量可计算出还原糖含量。三、主要仪器n1、定糖滴定装置：150mL三角瓶，滴定管架，25mL滴定管n2、电炉：500W。四、四、仪器与试剂n1、碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜甲甲液液n2、碱性酒石酸铜
5、碱性酒石酸铜乙乙液液n3、葡萄糖标准溶液葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g至962干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。五、实验步骤（一）样品处理 n 称取硬糖约称取硬糖约1g左右（左右（精确至精确至0.1mg），），加水溶解并定容至加水溶解并定容至250mL，摇匀后备用。，摇匀后备用。（二）标定碱性酒石酸铜溶液n做三次平行试验,取其平均值，按下式计算。5.0mL碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜甲甲液液5.0mL碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜乙乙液液150mL三角锥形瓶中三角锥形瓶中加水加水10mL加入玻璃珠加入玻璃珠3粒粒从滴定管滴加
6、从滴定管滴加约约9mL葡萄糖标准溶液葡萄糖标准溶液，摇匀，摇匀电炉上加热至沸电炉上加热至沸 （在（在2min内沸腾）内沸腾）沸腾后以每沸腾后以每2S 1滴的速度滴的速度滴加滴加葡萄糖标准溶液葡萄糖标准溶液溶液溶液蓝色刚好褪去蓝色刚好褪去显示显示淡黄色淡黄色即为终点即为终点记录消耗葡萄糖记录消耗葡萄糖Vn标定后的计算：n每10ml费林试剂相当于葡萄糖的质量（mg）A=VcA-每10ML费林试剂相当于葡萄糖的质量（mg）V-标定消耗的葡萄糖标准溶液的体积mlC-葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml（三）样品溶液预备滴定（预测）吸取吸取5.0mL碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜甲甲液及液及5.0mL乙乙液，液，
7、置于置于150mL三角锥瓶，加水三角锥瓶，加水10mL，加入玻璃，加入玻璃珠珠3粒，摇匀，在电炉上加热至沸，粒，摇匀，在电炉上加热至沸，趁热以先趁热以先快后慢的速度快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，从滴定管中滴加试样溶液，并并保持溶液沸腾状态保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时待溶液颜色变浅时，以以每两秒每两秒1滴滴的迅速滴定，直至溶液的迅速滴定，直至溶液蓝色刚好蓝色刚好褪去褪去为终点，记录样品溶液消耗体积为终点，记录样品溶液消耗体积V预预。（四）样品溶液正式滴定n 吸取吸取5.0mL碱性酒石酸甲液及碱性酒石酸甲液及5.0mL乙液，乙液，置于置于150mL三角锥瓶，加水三角锥瓶，加水10mL
8、，加入玻，加入玻璃珠璃珠3粒，从滴定管加入比预备测定体积粒，从滴定管加入比预备测定体积V预预少少1mL(即即V预预-1)的样品溶液至三角锥瓶，摇的样品溶液至三角锥瓶，摇匀，使其匀，使其2min内沸腾，以内沸腾，以2S每滴的速度滴每滴的速度滴定，到蓝色刚好褪去为终点。同法定，到蓝色刚好褪去为终点。同法平行操平行操作三份作三份。n平行试验的样液消耗量相差不应超过0.1ml六、结果计算n式中式中 X试样中还原糖的含量（以某种还原糖计），试样中还原糖的含量（以某种还原糖计），单位为克每百克（单位为克每百克（g/100g）；）；nA碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5mL）相当于某
9、种）相当于某种还原糖的质量（还原糖的质量（mg）；）；nm样品的质量（样品的质量（g）；）；nV测定时平均消耗样品溶液的体积（测定时平均消耗样品溶液的体积（mL）。）。n计算结果表示到小数点后一位计算结果表示到小数点后一位。1001000250VmAX七、注意事项n滴定必须是在滴定必须是在沸腾条件下进行沸腾条件下进行，其原因一是加快还原糖与，其原因一是加快还原糖与Cu2的反的反应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化
10、亚铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。n滴定时滴定时不能随便摇动锥形瓶不能随便摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从电炉上取下来滴定，更不能把锥形瓶从电炉上取下来滴定，以防止空气进入到反应液中。以防止空气进入到反应液中。n加热温度应使溶液在加热温度应使溶液在2min内沸腾，若煮沸的时间过长会导致耗糖量内沸腾，若煮沸的时间过长会导致耗糖量增加。增加。滴定速度应尽量控制在滴定速度应尽量控制在2s加加l滴滴，滴定速度快，耗糖增多；滴，滴定速度快，耗糖
11、增多；滴速慢，耗糖减少。速慢，耗糖减少。滴定时间应在滴定时间应在1min内内，滴定时间延长，耗糖量减，滴定时间延长，耗糖量减少。少。n样品溶液样品溶液应预测应预测，其目的，其目的是是通过预测可以知道样液大概消耗量，以便通过预测可以知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少在正式测定时，预先加入比实际用量少1ml左右的样液，只留下左右的样液，只留下1ml左右样液在继续滴定时加入，以保证在左右样液在继续滴定时加入，以保证在1分钟之内完成继续滴定工作，分钟之内完成继续滴定工作，提高测定的准确度。提高测定的准确度。八、思考题n1、为什么要进行预备滴定？、为什么要进行预备滴定？n2、为什么滴定过程要保持沸腾？、为什么滴定过程要保持沸腾？选择选择=结果结果汇报结束汇报结束 谢谢观看谢谢观看！欢迎提出您的宝贵意见！欢迎提出您的宝贵意见！
