1、第二章第二章血栓与止血一般验验血栓与止血一般验验 Test Of Thrombus And Hemostasis1第三节 血凝仪及临床应用n一期止血项目：BT和PLT2血 栓 和 止 血 检 查血 栓 和 止 血 检 查原发性血小板增多症原发性血小板增多症 血小板数量增加血小板数量增加 vWD vWF减少，减少，过敏性紫癜过敏性紫癜 单纯血管通透性和脆性增加单纯血管通透性和脆性增加 所致的血管性紫癜所致的血管性紫癜 特发性血小板特发性血小板 血小板数量减少血小板数量减少 减少性紫癜减少性紫癜 BT PltBT PltBT PltBT Plt疾病疾病试验结果试验结果病因病因3一期止血缺陷n筛选试
2、验的选择和应用 BT和PLT都正常:过敏、单纯性和其他血管性紫癜等。BT，PLT:原发性或继发性血小板减少性紫癜。BT，PLT:原发性或继发性血小板增多症。BT，PLT正常:血小板无力症、贮藏池病以及低（无）纤维蛋白原血症、血管性血友病（vWD）等。4APTT、PT、进一步做以下筛选试验：（二期止血）5血 栓 和 止 血 检 查血 栓 和 止 血 检 查 DIC肝病肝病 血友病（血友病（A、B、FF缺乏缺乏)获得性因子获得性因子缺乏缺乏 APTT PTAPTT PTAPTT PT内凝异常内凝异常外凝异常外凝异常共同途径共同途径异常异常试验结果试验结果疾病疾病61.仅有APTT延长 提示内源性途
3、径因子异常：尤其是 、IX、XI 不能用正常血浆纠正：提示抗、抗IX抗体存在7 2.仅有PT延长 提示外源性因子异常 VII缺乏 Vitk缺乏（II、VII、IX、X为Vitk依赖因子）严重肝病 8 3.全部异常共同凝血途径异常（纤维蛋白原、凝血酶原、V、X因子缺乏）存在血液凝固调节的异常9普通肝素(uFH):首选APTT作为监测试验，使APTT测定值维持在正常对照值的1.52.5倍口服抗凝剂的监测:选用血浆凝血酶原时间即PT监测，使PTR维持在1.82.5为佳。WHO推荐INR作为首选口服抗凝剂的监测试验，维持在2.03.0之间。抗凝治疗实验室监测项目的选择和应用10纤溶系统亢进筛查试验nF
4、DP：原发性纤溶亢进继发性纤溶亢进均阳性nD-二聚体：继发性纤溶亢进阳性11凝血因子筛选试验：凝血因子筛选试验：包括测定：活化部分凝血活酶包括测定：活化部分凝血活酶时间（时间（APTTAPTT），凝血酶原时间），凝血酶原时间（PTPT），凝血酶时间（），凝血酶时间（TTTT）和纤维）和纤维蛋白原（蛋白原（FgFg）定量。）定量。凝血四项称为12第三节血凝仪及临床应用第三节血凝仪及临床应用n掌握血凝仪的检测原理和基本结构掌握血凝仪的检测原理和基本结构n熟悉半自动、全自动血凝仪的特点，血凝熟悉半自动、全自动血凝仪的特点，血凝仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点n
5、了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和进展护和进展 请记住哦请记住哦！13血凝仪血凝仪内容内容概要n血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理二、血凝仪基本结构与评价二、血凝仪基本结构与评价三、血凝仪的维护三、血凝仪的维护四、血凝仪临床应用与进展四、血凝仪临床应用与进展14血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪（血液凝固分析仪（automated coayulation analyzer,ACA）是采用一定分析技术，对血栓）是采用一定分析技术，对血栓与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器与出血有关成分
6、自动检测的临床常规检验仪器在血栓在血栓/出血实验室中最基本的设备就是血出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪（简称血凝仪）液凝固分析仪（简称血凝仪）15血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述发发 展展 史史n1910年，年，Kottman发明了最早的血凝仪发明了最早的血凝仪n1950年，年，Schnitger和和Gross发明了基于电发明了基于电流法的血凝仪流法的血凝仪n20世纪世纪70年代前为血凝仪的初级阶段年代前为血凝仪的初级阶段16血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述n20世纪世纪70年代，较精确的各种自动血凝仪年代，较精确的各种自动血凝仪先后问世，其特点是：单通道、终点法的先后问世，
7、其特点是：单通道、终点法的半自动血凝仪，也称第一代产品半自动血凝仪，也称第一代产品n20世纪世纪80年代末，多通道、多种分析方法年代末，多通道、多种分析方法与原理的半自动血凝仪相继诞生，称之为与原理的半自动血凝仪相继诞生，称之为第二代产品第二代产品各代血凝各代血凝仪的特点仪的特点17血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述n20世纪世纪90年代以来，多通道、多方法、年代以来，多通道、多方法、多功能全自动（即第三代）血凝仪不断多功能全自动（即第三代）血凝仪不断涌现涌现18一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（一）血凝仪分型（一）血凝仪分型按自动化程度按自动化程度半自动血凝仪半自动血凝仪全
8、自动血凝仪全自动血凝仪全自动血凝工作站全自动血凝工作站三者有何三者有何区别区别？19一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（二）血凝仪检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：凝固法、生物化主要检测方法：凝固法、生物化学法、免疫学法等。学法、免疫学法等。彼此有何彼此有何不同？不同？20一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物学法生物学法流法流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导
9、电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊21一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理1凝固法原理凝固法原理 是通过检测血浆在凝血激活剂作用下是通过检测血浆在凝血激活剂作用下发生一系列物理量（光、
10、电、超声、机械发生一系列物理量（光、电、超声、机械运动等）的变化，再由计算机分析所得最运动等）的变化，再由计算机分析所得最终结果，称生物学法。按测量原理分为电终结果，称生物学法。按测量原理分为电流法、光学法和磁珠法。流法、光学法和磁珠法。呵！是血浆呵！是血浆凝固的变化凝固的变化22一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理n光学法（比浊法）：光学法（比浊法）：是根据血浆凝固过程是根据血浆凝固过程中浊度的变化，导致光强度变化来测定相中浊度的变化，导致光强度变化来测定相关因子关因子 12111光光 学学 法法 光光 路路 图图有何不同？谁优有何不同？谁优23一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪
11、分型与检测原理光学法血凝仪工作流程光学法血凝仪工作流程24一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理啊？为何在啊？为何在50%50%？25一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理 双磁路磁珠法原理双磁路磁珠法原理：测试杯的两侧各有一：测试杯的两侧各有一组驱动线圈，产生恒定的交替电磁场，使组驱动线圈，产生恒定的交替电磁场，使杯内去磁小钢珠保持等幅振荡运动；凝血杯内去磁小钢珠保持等幅振荡运动；凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的增多，血激活剂加入后，随着纤维蛋白的增多，血浆黏稠度增加，小钢珠运动振幅逐渐减弱，浆黏稠度增加，小钢珠运动振幅逐渐减弱，将运动幅度衰减到将运动幅度衰减到50时确定
12、为凝固终点时确定为凝固终点 26一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法原理双磁路磁珠法原理 与光电磁法有何不同？与光电磁法有何不同？与光电磁法有何不同？与光电磁法有何不同？与光学法原理区别与光学法原理区别27一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法与光学法原理主要区别双磁路磁珠法与光学法原理主要区别n前者是检测血浆凝固过程中磁电信号变化前者是检测血浆凝固过程中磁电信号变化n后者是检测该过程中光信号的变化后者是检测该过程中光信号的变化28一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理2.免疫学法原理免疫学法原理 以纯化的被检物质为抗以纯化的被检物质为抗
13、原，制备相应的抗体，然后利用抗原原，制备相应的抗体，然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量测抗体反应对被检物进行定性或定量测定。血凝仪使用免疫比浊法定。血凝仪使用免疫比浊法29一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理3.生物化学原理：生物化学原理：实质为光电比色原理，是实质为光电比色原理，是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性，也称底物显色法测物质的含量和活性，也称底物显色法 30二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（一）血凝仪基本结构：（一）血凝仪基本结构：1.半自动血凝仪基本结构半自动血凝仪基本结构 主要由样
14、本预温槽和试剂预温槽、加主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成组成 全自动呢全自动呢？3132二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（二）血凝仪评价（二）血凝仪评价 1.一般性评价：产品质量一般性评价：产品质量50%；价格价格25%；厂商评估；厂商评估10%；担；担保保5%；售后服务；售后服务5%；可接受性；可接受性5%。33二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价 2.技术性能评价：技术性能评价：重复性测定、线重复性测定、线性范围、准确性、携性范围、准确性、携带污染率、干扰因素、带污染率、干扰因素、可
15、比性分析等几方面可比性分析等几方面携便式血凝仪携便式血凝仪34二、血凝仪的基本结构二、血凝仪的基本结构与评价与评价（三）血凝仪的特点（三）血凝仪的特点 1.半自动血凝仪：半自动血凝仪：手工加样加试剂；手工加样加试剂；操作简便；应用检测方法少；操作简便；应用检测方法少；价格便宜；速度慢；测量精度好价格便宜；速度慢；测量精度好于手工，但低于全自动于手工，但低于全自动哦？为什么？哦？为什么？35三、血液凝固分析仪的维护三、血液凝固分析仪的维护（一）半自动血凝仪的维护（一）半自动血凝仪的维护 保持测试槽清洁，严禁有异物进入；保持测试槽清洁，严禁有异物进入；避免阳光直晒和远离强热物体；防止避免阳光直晒和
16、远离强热物体；防止受潮和腐蚀；仪器和加珠器都必须远离受潮和腐蚀；仪器和加珠器都必须远离强电磁场干扰源；电源电压为强电磁场干扰源；电源电压为220V10，最好使用稳压器；使用一次性测试，最好使用稳压器；使用一次性测试杯及钢珠杯及钢珠36二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价2.全自动血凝仪基本结构全自动血凝仪基本结构 包括样本传送及处理装置、试剂冷包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出统、计算机、输出 设备及附件等设备及附件等就这么简单？就这么简单？37二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（三）
17、血凝仪的特点（三）血凝仪的特点 2.全自动血凝仪：全自动血凝仪：自动化程度高；检测自动化程度高；检测方法多；通道多，速度快；项目任意方法多；通道多，速度快；项目任意组合，随机性；测量精度好，易于质控组合，随机性；测量精度好，易于质控和标准化；智能化程度高，功能多；和标准化；智能化程度高，功能多；价格昂贵；对操作人员的素质要求高。价格昂贵；对操作人员的素质要求高。38三、血液凝固分析仪的维护三、血液凝固分析仪的维护（二）全自动血凝仪的维护（二）全自动血凝仪的维护 清洗或更换空气过滤器；检查及清清洗或更换空气过滤器；检查及清洁反应槽；清洗洗针池及通针；检查洁反应槽；清洗洗针池及通针；检查冷却剂液面
18、水平；清洁机械运动导杆和冷却剂液面水平；清洁机械运动导杆和转动部分并加润滑油；及时保养定量装转动部分并加润滑油；及时保养定量装置；更换样品及试剂针；数据备份及置；更换样品及试剂针；数据备份及恢复等恢复等 39四、血凝仪的临床应用与进展四、血凝仪的临床应用与进展（一）临床应用（一）临床应用1.凝血系统的检测凝血系统的检测 2.抗凝系统的检测抗凝系统的检测3.纤维蛋白溶解系统检测纤维蛋白溶解系统检测 4.临床用药的监测临床用药的监测 40四、血凝仪的临床应用与进展四、血凝仪的临床应用与进展（二）进展（二）进展 主要体现在：多方法、多功能、主要体现在：多方法、多功能、快速高效；智能化程度高，软件开快速高效；智能化程度高，软件开发进一步完善；全自动血凝分析仪发进一步完善；全自动血凝分析仪工作站；床旁分析；在临床中的工作站；床旁分析；在临床中的应用日趋广泛应用日趋广泛41第四节 血栓与止血检查的质量控制n抗凝剂：109mmol/L枸橼酸钠溶液n抗凝剂与标本比例为1:9n标本勿溶血、凝血n标本采集、运送应在规定时间内完成42
