1、人体寄生虫学实验人体寄生虫学实验 不迟到、早退；有事需到年级办公室写请假条；不迟到、早退；有事需到年级办公室写请假条；携带工作服、学生证、实验指导、理论教材、红蓝笔或铅笔、实验报告纸；携带工作服、学生证、实验指导、理论教材、红蓝笔或铅笔、实验报告纸；除最后一次课无需使用显微镜之外，其余的课程均需用学生证借用显微镜；除最后一次课无需使用显微镜之外，其余的课程均需用学生证借用显微镜；显微镜的规范使用，爱护实验标本损坏需赔偿；显微镜的规范使用，爱护实验标本损坏需赔偿；课程安排：观察标本的介绍、学生实习及绘图（小测试）、实验录像，实验课程安排：观察标本的介绍、学生实习及绘图（小测试）、实验录像，实验课
2、结束时间在课结束时间在11：10或或17:10。绘图要求：生物制图，客观反映显微镜下的观察，注意相对大小比例，标注绘图要求：生物制图，客观反映显微镜下的观察，注意相对大小比例，标注（标本的名称、放大倍数、染料、重要结构）。录像结束后上交。（标本的名称、放大倍数、染料、重要结构）。录像结束后上交。实验课结束后，班长安排值日。实验课结束后，班长安排值日。寄生虫课的考核方式：理论成绩寄生虫课的考核方式：理论成绩70+实验标本考试实验标本考试20+网络成绩网络成绩10寄生虫学实验课的基本要求寄生虫学实验课的基本要求医医学学寄寄生生虫虫学学医学蠕虫学医学蠕虫学Medical Helminthology医
3、学原虫学医学原虫学Medical Protozoology医学节肢动物学医学节肢动物学Medical Arthropodology吸虫纲吸虫纲绦虫纲绦虫纲线虫纲线虫纲棘头虫纲棘头虫纲叶足虫纲叶足虫纲鞭毛虫纲鞭毛虫纲孢子虫纲孢子虫纲纤毛虫纲纤毛虫纲昆虫纲昆虫纲蛛形纲蛛形纲甲壳纲甲壳纲唇足纲唇足纲医学寄生虫学的范围医学寄生虫学的范围溶组织内阿米巴溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)结肠内阿米巴结肠内阿米巴(Entamoeba coli)叶足虫纲叶足虫纲(Class Lobosea)实验要求实验要求 了解了解Eh与与Ec的生活史的生活史 了解了解Eh与与 Ec的滋养体形态特点
4、的滋养体形态特点 掌握掌握Eh与与Ec包囊的形态特点包囊的形态特点并绘图并绘图 掌握包囊碘液涂片法及其中包囊的形态掌握包囊碘液涂片法及其中包囊的形态1 1个个四核包囊四核包囊口口小肠小肠脱囊成脱囊成4 4核囊后滋养体核囊后滋养体8 8个个滋养体滋养体（二（二分裂繁殖）分裂繁殖）定居于结肠粘膜皱定居于结肠粘膜皱褶或肠腺窝处褶或肠腺窝处滋养体侵入肠壁滋养体侵入肠壁或转变成或转变成包囊包囊排出体外排出体外滋养体去向：滋养体去向：侵入肠粘膜侵入肠粘膜肠溃疡肠溃疡 血行播散血行播散肝、肺、脑寄生肝、肺、脑寄生排出体外排出体外脓血或稀便脓血或稀便 形成包囊（仅肠腔内）形成包囊（仅肠腔内）生活史生活史 好发
5、部位：常见盲肠、升结肠，次为乙状结肠和直肠好发部位：常见盲肠、升结肠，次为乙状结肠和直肠;也可也可 寄生于肝、肺与脑等寄生于肝、肺与脑等 感染期：感染期：四核包囊四核包囊（成熟包囊）（成熟包囊）致病阶段：致病阶段：滋养体滋养体 结肠内结肠内：阿米巴痢疾（脓血、奇臭、里急后重）：阿米巴痢疾（脓血、奇臭、里急后重）结肠外结肠外：阿米巴肝脓肿等（巧克力酱样）：阿米巴肝脓肿等（巧克力酱样）诊断阶段：诊断阶段：滋养体与包囊滋养体与包囊简图简图吞入的红细胞吞入的红细胞泡状核泡状核伪足伪足内质内质外质外质溶组织内阿米巴滋养体溶组织内阿米巴滋养体铁苏木素染色铁苏木素染色n核核n红细胞红细胞碘染碘染溶组织内阿米
6、巴滋养体溶组织内阿米巴滋养体4 4个圆形核，核周染粒个圆形核，核周染粒分布均匀分布均匀包囊呈圆形，壁厚包囊呈圆形，壁厚溶组织内阿米巴溶组织内阿米巴成熟包囊成熟包囊（简图）（简图）溶组织内阿米巴溶组织内阿米巴未成熟包囊未成熟包囊（简图）（简图）糖原泡糖原泡糖原泡糖原泡核核拟染色体拟染色体溶组织内阿米巴包囊溶组织内阿米巴包囊铁苏木素染色铁苏木素染色 核核 拟染色体拟染色体 糖原泡糖原泡溶组织内阿米巴包囊溶组织内阿米巴包囊碘液染色碘液染色Images on the top are the same cell,at different focal planes.溶组织内阿米巴包囊（溶组织内阿米巴包囊（
7、HE染色）染色）共栖于人体的结肠共栖于人体的结肠不侵入组织，亦无临床症状不侵入组织，亦无临床症状结肠内阿米巴结肠内阿米巴（Entamoeba coli）形态形态结肠内阿米巴（简图）结肠内阿米巴（简图）结肠内阿米巴滋养体（铁苏木素染色）结肠内阿米巴滋养体（铁苏木素染色）形态形态大小：大小：15-50 m，较，较Eh滋养体稍大滋养体稍大外形：长圆形或圆形外形：长圆形或圆形内外质：界限不清，内质中内外质：界限不清，内质中无吞噬无吞噬的红细胞的红细胞核的特征：核周染粒粗细不匀、排核的特征：核周染粒粗细不匀、排列不整齐；核仁稍大、常列不整齐；核仁稍大、常偏位偏位结肠内阿米巴包囊结肠内阿米巴包囊圆球形，比
8、圆球形，比E.hE.h大，壁厚，不大，壁厚，不着色，核着色，核1 18 8个。核仁大，个。核仁大，核膜薄，未成熟包囊有较大核膜薄，未成熟包囊有较大糖原泡。拟染色体草束状，糖原泡。拟染色体草束状，两端尖细不整齐。两端尖细不整齐。外形：圆球或卵圆形外形：圆球或卵圆形大小：大小：10-35 m，比，比Eh包囊大包囊大核的特征：核的特征：18个核，个核，成熟成熟8个个；核周染粒粗核周染粒粗细不匀、排列细不匀、排列不整齐不整齐，核仁稍大、常，核仁稍大、常偏位偏位拟染色体：拟染色体：草束状草束状，两端尖细不整齐，两端尖细不整齐碘液染色碘液染色铁苏木素染色铁苏木素染色HE染色染色两种阿米巴的鉴别两种阿米巴的
9、鉴别 溶组织内阿米巴溶组织内阿米巴 结肠内阿米巴结肠内阿米巴外形外形 圆球形圆球形 圆球形圆球形大小大小 小小 大大核数核数 14个个 18个个核仁核仁 小而居中小而居中 大而偏位大而偏位核周染粒核周染粒 排列整齐排列整齐 排列不齐排列不齐拟染色体拟染色体 棍棒状，两端钝圆棍棒状，两端钝圆 草束状或碎片状草束状或碎片状外形外形 圆形或椭圆形圆形或椭圆形 长圆形或圆形长圆形或圆形大小大小 12-60 m 15-50 m内外质内外质 界限清界限清 界限不清界限不清 有吞噬的红细胞有吞噬的红细胞 无吞噬的红细胞无吞噬的红细胞核仁核仁 小而居中小而居中 大而偏位大而偏位核周染粒核周染粒 排列整齐排列整
10、齐 排列不齐排列不齐包囊包囊滋养体滋养体疟原虫疟原虫 Plasmodium孢子虫纲孢子虫纲(Class Sporozoa)疟原虫疟原虫 Malaria parasites 1、间日疟原虫间日疟原虫 Plasmodium vivax(P.v)引起间日疟，全国性分布引起间日疟，全国性分布2、恶性疟原虫恶性疟原虫 P.falciparum(P.f)引起恶性疟，主要分布在二广、海南引起恶性疟，主要分布在二广、海南3、三日疟原虫三日疟原虫 P.malariae(P.m)引起三日疟，散在分布，较少见引起三日疟，散在分布，较少见4、卵形疟原虫卵形疟原虫 P.ovale(P.o)引起卵形疟，仅在云南等地发现少
11、数病例引起卵形疟，仅在云南等地发现少数病例知识要点回顾知识要点回顾1.1.感染阶段：感染阶段：子孢子子孢子2.2.感染途径与方式：蚊虫叮咬、输血或经胎盘感染途径与方式：蚊虫叮咬、输血或经胎盘3.3.致病阶段：致病阶段：红内期疟原虫红内期疟原虫4.4.人体寄生部位：肝细胞、红细胞人体寄生部位：肝细胞、红细胞5.5.宿主：人宿主：人(中间宿主中间宿主)&雌性按蚊雌性按蚊(终宿主终宿主)6.6.诊断阶段：诊断阶段：红内期原虫红内期原虫蚊吸血注入子孢子蚊吸血注入子孢子红外期红外期红内期红内期蚊吸血吸入子配子体休眠子休眠子生活史生活史卵囊合子疟原虫的形态疟原虫的形态 三期六种三期六种形态形态1.滋养体期
12、滋养体期：小、大滋养体：小、大滋养体2.裂殖体期裂殖体期：未成熟、成熟裂殖体：未成熟、成熟裂殖体3.配子体期配子体期：雌、雄配子体：雌、雄配子体形态形态在在RBC内发现疟原虫是确诊疟疾和鉴别虫内发现疟原虫是确诊疟疾和鉴别虫种的重要依据种的重要依据疟原虫基本构造相同疟原虫基本构造相同 细胞膜、质、核细胞膜、质、核瑞氏瑞氏Wright或姬氏或姬氏Giemsa染色染色：核染成紫核染成紫红色，胞质呈蓝色，疟原虫消化血红蛋白红色，胞质呈蓝色，疟原虫消化血红蛋白产物产物 疟色素呈棕黄色疟色素呈棕黄色间日疟间日疟原虫在原虫在RBC内的形态内的形态间日疟间日疟原虫原虫滋养体滋养体(trophozoite,T)
13、期期 1:normal red cell 2-6:ring stage parasites(young trophozoites)间日疟间日疟原虫原虫早期滋养体早期滋养体环状体环状体 胞质淡蓝色，呈环状，直径约为红细胞直径胞质淡蓝色，呈环状，直径约为红细胞直径的的1/3，中间为大空泡，中间为大空泡 红细胞内一般只含红细胞内一般只含1个原虫个原虫 核核1个，虫体一侧，似戒指的红宝石个，虫体一侧，似戒指的红宝石 早期滋养体又称为早期滋养体又称为环状体（环状体（ring form）Thin blood film Giemsa stained间日疟间日疟原虫原虫晚期滋养体晚期滋养体大滋养体大滋养体 经
14、经810小时，胞质增多，虫体变大，形状不规则，伸出伪足小时，胞质增多，虫体变大，形状不规则，伸出伪足 出现棕黄色颗粒出现棕黄色颗粒 疟色素（疟色素（malarial pigment）红细胞胀大，色淡，红细胞膜上出现能染成淡红色的小点，红细胞胀大，色淡，红细胞膜上出现能染成淡红色的小点，薛氏小点（薛氏小点（Schffners dots)间日疟间日疟原虫原虫大滋养体大滋养体阿米巴样体阿米巴样体 伪足活动增加，虫体有空泡伪足活动增加，虫体有空泡间日疟间日疟原虫裂殖体期（原虫裂殖体期（Schizonts）Increasingly mature schizonts间日疟间日疟原虫原虫未成熟裂殖体未成熟裂
15、殖体 约经约经40小时，虫体胞小时，虫体胞质变圆，核开始质变圆，核开始分裂分裂 2-12 细胞核细胞核 薛氏小点薛氏小点 受染受染RBC 变大、颜色变大、颜色苍白、形态不规则苍白、形态不规则间日疟间日疟原虫原虫成熟裂殖体成熟裂殖体 裂殖子裂殖子1224个，平均个，平均16个，排列不规则个，排列不规则 虫体占满胀大了的红细胞虫体占满胀大了的红细胞 疟色素集中成堆疟色素集中成堆间日疟间日疟原虫原虫成熟裂殖体成熟裂殖体 从红细胞释出裂殖子的全过程约需从红细胞释出裂殖子的全过程约需1 1分钟分钟 释放出的裂殖子，一部分被吞噬细胞吞噬，一释放出的裂殖子，一部分被吞噬细胞吞噬，一部分侵入健康的红细胞，重复
16、裂体增殖过程部分侵入健康的红细胞，重复裂体增殖过程间日疟原虫间日疟原虫雌配子体雌配子体 虫体较大，占满胀大的红细胞虫体较大，占满胀大的红细胞 胞质致密，色深蓝胞质致密，色深蓝 核小致密，深红色，核小致密，深红色，多位于多位于虫体一侧虫体一侧 疟色素分散疟色素分散 配子体期配子体期间日疟原虫间日疟原虫雄配子体雄配子体 虫体圆形或椭圆形，虫体圆形或椭圆形，较小，胞质浅蓝略带较小，胞质浅蓝略带红色红色 核一个，核一个，大而疏松，大而疏松，淡红色，淡红色，多位于虫体多位于虫体的的中央中央 疟色素分散疟色素分散配子体期配子体期恶性疟原虫恶性疟原虫 早期滋养体（环状体）早期滋养体（环状体）寄生的红细胞较小
17、寄生的红细胞较小 红细胞常含红细胞常含2个或个或2个以上疟原虫个以上疟原虫，核，核1-2个个 环纤细，约为环纤细，约为RBC直径的直径的1/5-1/6 无薛氏小点无薛氏小点恶性疟原虫恶性疟原虫 晚期滋养体晚期滋养体(大滋养体大滋养体)一般不出现在外周血一般不出现在外周血此时开始集中在内脏此时开始集中在内脏毛细血管毛细血管 体小，圆形体小，圆形 胞质深蓝色胞质深蓝色 疟色素集中，黑褐色疟色素集中，黑褐色恶性疟原虫恶性疟原虫 成熟裂殖体成熟裂殖体 裂殖子裂殖子8 83636个，排列个，排列不规则不规则 疟色素集中成团疟色素集中成团 虫体占红细胞体积的虫体占红细胞体积的2/32/3至至3/43/4
18、外周血中不易见到外周血中不易见到 恶性疟原虫恶性疟原虫 雄配子体雄配子体 腊肠形腊肠形，两端钝圆，两端钝圆 胞质色蓝而略带红胞质色蓝而略带红 核疏松，淡红色，位于中央核疏松，淡红色，位于中央 疟色素黄褐色，小杆状，分布核周疟色素黄褐色，小杆状，分布核周 恶性疟原虫恶性疟原虫 雌配子体雌配子体 新月形，两端较尖新月形，两端较尖 核致密，深红色，常核致密，深红色，常位于中央位于中央 疟色素黑褐色，分布疟色素黑褐色，分布于核周于核周诊断诊断1.病原学检查病原学检查厚、薄血膜染色镜检厚、薄血膜染色镜检：最常用、最可靠：最常用、最可靠采血部位：采血部位：外周血（无名指或耳垂末梢血液；小孩在足后根）外周血
19、（无名指或耳垂末梢血液；小孩在足后根）采血时间：采血时间：恶性疟恶性疟：发作开始时发作开始时查查环状体和配子体环状体和配子体，发作数小时后因晚，发作数小时后因晚期滋养体寄生虫的红细胞滞留于期滋养体寄生虫的红细胞滞留于皮下脂肪及内脏微血管皮下脂肪及内脏微血管中，中，不易查见。不易查见。间日疟和三日疟间日疟和三日疟：发作后：发作后10小时内小时内，能提高检出率（太久后，能提高检出率（太久后原虫数量要下降）原虫数量要下降）主要诊断主要诊断外周血涂片检查外周血涂片检查 厚血膜涂片：厚血膜涂片：原虫变形，且原虫变形，且红细胞已溶，鉴别有困难，红细胞已溶，鉴别有困难，但原虫集中，易发现。但原虫集中，易发现
20、。薄血膜涂片：薄血膜涂片：原虫形态结构原虫形态结构完整，清晰，可辩认原虫的完整，清晰，可辩认原虫的种类和各发育阶段的形态特种类和各发育阶段的形态特征，适用于临床诊断，但虫征，适用于临床诊断，但虫数较少易漏检。数较少易漏检。2.免疫诊断免疫诊断(1)查抗原查抗原可诊断可诊断现症病人现症病人和和带虫者带虫者。血中有疟原虫时。血中有疟原虫时才能查出其抗原。一旦治愈，抗原在短期内才能查出其抗原。一旦治愈，抗原在短期内即行消失。即行消失。(2)查抗体查抗体适用于多次寒热发作又未查明原因者。原虫适用于多次寒热发作又未查明原因者。原虫血症后血症后1周可查出抗体，故早期无诊断价值。周可查出抗体，故早期无诊断价
21、值。诊断诊断 显示有荧光的裂殖体显示有荧光的裂殖体 诊断诊断间接荧光抗体试验间接荧光抗体试验（IFA）3.查查DNA PCR诊断诊断Lane S:molecular base pair standard(50bp ladder).Black arrows show the size of standard bands.Lane 1:P.vivax(size:120bp)Lane 2:the red arrow shows the P.malariae(size:144bp)Lane 3:P.falciparum(size:205bp)Lane 4:P.ovale(size:800bp)诊断诊断
22、吸虫概论吸虫概论TREMATODA吸虫纲主要特点吸虫纲主要特点1.形态2.消化系统3.雌雄同体4.间接发育型 5.虫卵入水才能发育；发育过程相似：卵多种幼虫（毛蚴胞蚴雷蚴尾蚴囊蚴）成虫6.囊蚴/尾蚴为感染期，经口/皮感染；7.血吸虫例外。毛蚴胞蚴尾蚴成虫吸虫纲主要特点吸虫纲主要特点血吸虫生活史（血吸虫生活史（Life Cycle）华支睾吸虫华支睾吸虫布氏姜片吸虫布氏姜片吸虫成成 虫虫卫氏并殖吸虫卫氏并殖吸虫日本血吸虫日本血吸虫虫虫 卵卵五方面：大小、形状、颜色、卵壳、卵内含物五方面：大小、形状、颜色、卵壳、卵内含物肝吸虫肝吸虫姜片虫姜片虫肺吸虫肺吸虫日本血吸虫日本血吸虫肝吸虫肝吸虫第一中间宿主
23、第一中间宿主第二中间宿主第二中间宿主肺吸虫肺吸虫中间宿主中间宿主中间宿主：扁卷螺中间宿主：扁卷螺 水生植物为第二媒介水生植物为第二媒介菱角菱角荸荠茭白茭白姜片虫姜片虫日本血吸虫的中间宿主日本血吸虫的中间宿主钉螺钉螺肝吸虫肝吸虫姜片虫姜片虫传播途径传播途径肺吸虫肺吸虫日本血吸虫日本血吸虫诊诊 断（血吸虫）断（血吸虫）粪检查虫卵：粪检查虫卵：首选首选水洗沉淀法水洗沉淀法+毛蚴孵化法毛蚴孵化法。KATO-KATZ法（改良加藤厚涂片法）；直接涂法（改良加藤厚涂片法）；直接涂片法适于急性期。片法适于急性期。直肠黏膜活检：直肠黏膜活检：免疫诊断：免疫诊断：实验报告实验报告（绘图）（绘图）溶组织内阿米巴包囊溶组织内阿米巴包囊结肠内阿米巴包囊结肠内阿米巴包囊间日疟原虫环状体、裂殖体、配子体间日疟原虫环状体、裂殖体、配子体恶性疟原虫环状体、配子体恶性疟原虫环状体、配子体血吸虫虫卵血吸虫虫卵
