1、肿瘤免疫专题知识讲肿瘤免疫专题知识讲座座什么是肿瘤？为什么会发生肿瘤？肿瘤是正常组织异常增生所形成的赘生物。按其所引起的后果不同可分为恶性和良性两种。第一节 概述 实践表明，内在的遗传因素、免疫状态和外部的诱变因子，是构成肿瘤发生发展的基础和条件。其中，机体的免疫状态，尤其是细胞免疫功能的强弱，已被视为是否发生肿瘤的重要内在因素。肿瘤免疫专题知识讲座2肿瘤免疫专题知识讲座3肿瘤免疫专题知识讲座4临床：病史、体症物理检查：X光、CT、磁共振、B超、红外、核医学术前：穿刺、刮片、拉网术后：组织切片免疫：肿瘤抗原和代谢物测定分子生物：肿瘤相关基因分析肿瘤诊断辅助病理肿瘤免疫专题知识讲座5正常 间变
2、恶性 可见前期 不可见前期物质分析影像诊断肿瘤免疫专题知识讲座6肿瘤的发展及诊断期肿瘤免疫专题知识讲座7肿瘤的免疫逃避机制？1.肿瘤细胞缺乏有效的抗原性表位，难以触发足够的抗肿瘤免疫效应。2.肿瘤细胞的MHC分子表达发生改变，异常表达的MHC分子，有碍机体免疫细胞对肿瘤细胞的识别，影响抗原递呈作用。3.不能正常表达B7等活化免疫细胞的共刺激分子和黏附分子。4.患者血清中存在着封闭因子。5.肿瘤细胞产生的某些细胞因子对T细胞的产生有抑制作用。6.肿瘤细胞表达FasL，和活化CTL的Fas结合，介导CTL凋亡。第一节 概述肿瘤免疫专题知识讲座8体液免疫效应1.激活补体的溶细胞作用2.介导杀伤细胞的
3、细胞毒作用3.调理吞噬作用4.干扰肿瘤细胞的生物学行为5.其他作用第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座9细胞免疫效应1.T细胞2.生物学效应包括T细胞的直接杀伤和对免疫系统其它成分的活化。3.（1）CD4阳性的辅助T细胞4.（2）CD8阳性的细胞毒T细胞第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座10CD4阳性的辅助T细胞在胸腺中分为Th1和Th2，其中和肿瘤免疫关系密切的是Th1细胞。激活：肿瘤细胞抗原+抗原递呈细胞（树突状细胞）+MHC II类分子形成复合物，被CD4阳性的T细胞的TCR识别并使自身活化。效应：通过释放细胞因子（TNF，IFN-）发挥抗肿瘤作用。Th
4、表面的CD154分子和APC表面的CD40分子结合，释放IL-12。促进CTL分化和增殖。Th和APC释放共刺激信号分子，协助CTL的分化和增殖。可增强B细胞活化引起的抗体应答及CD8阳性CTL的细胞毒 其亚群可分泌因子促进体液免疫应答。第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座11CD8阳性的细胞毒T细胞 是肿瘤免疫的主要途径。通过释放毒性物质或促发靶细胞上的死亡受体，而直接溶解靶细胞，或通过分泌IFN-间接杀伤肿瘤细胞，在机体发挥免疫监视的作用。第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座12细胞免疫效应2.NK细胞3.NK细胞是宿主固有免疫或一线防御机制的一部分，非MH
5、C限制性，她们不需要对宿主或其免疫功能进行调整适应。对肿瘤细胞和病毒感染细胞比对大多数正常细胞更具有毒性作用。其作用机制类似于CTL，还可分泌大量的细胞因子以调节机体免疫反应。4.新发现的NKT细胞在胸腺外发育，其发育依赖于TCR与类MHC I类分子CD1的相互作用，经TCR触发，主要介导NK类细胞毒活性。第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座13细胞免疫效应3.巨噬细胞4.活化的巨噬细胞与肿瘤细胞的结合可触发细胞毒活性，细胞毒性介质有细胞溶解蛋白酶、TNF-及其相关的因子、IFN-和IFN-、IL-1，氧化反应的中介物如过氧化氢，氮化反应的中介物如NO、精氨酸酶等也可能属于此列
6、。5.它是参与抗肿瘤、抗感染的主要效应细胞。第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座14细胞免疫效应4.树突状细胞5.是一类专职抗原递呈细胞，辅佐T、B细胞参与特异性杀伤肿瘤的过程。6.可利用制备肿瘤特异性树突状细胞以进行肿瘤的生物疗法。第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制肿瘤免疫专题知识讲座15 肿瘤抗原是细胞癌变过程中所表达的新生物或过量表达产物，它的产生与下列因素有关：1.细胞发生转化而产生新的蛋白2.点突变或基因重组致细胞内癌基因活化，促使表型3.改变3.随机病变而产生新的蛋白4.胚胎抗原的过度表达或分化抗原的异常表达。第三节 肿瘤抗原的分类肿瘤免疫专题知识讲座16 肿瘤特异性
7、抗原 为肿瘤细胞所特有，只表达于肿瘤细胞，而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞。1.化学物质诱发 其抗原的显著特征是高度个体化，即高度的个体特异性。不同肿瘤，甚至同一化学致癌物诱导的肿瘤，所表达的肿瘤抗原可有不同，而不同化学物质引起的肿瘤，其抗原的差异性更大。第三节 肿瘤抗原的分类肿瘤免疫专题知识讲座17 肿瘤特异性抗原 2.病毒诱发 无严格的特异性，通常由同一种病毒诱发的所有肿瘤，都具有相同的TSA。血清学试验和肿瘤特异性CTL的检测，均有助于抗原的检定。其可诱导机体的免疫应答，故又被称为肿瘤特异性移植抗原。其成分多系病毒基因的表达成分。第三节 肿瘤抗原的分类肿瘤免疫专题知识讲座18 肿
8、瘤特异性抗原 3.自发 自发肿瘤系无明显诱因的肿瘤，很难检测到特异性的抗原标志物，其原因可能有：1)早期肿瘤细胞及近亲本子代细胞一定时间内可以表达，但后代细胞因为染色体的随机突变而失去表达。2)可能存在，但单独使用抗原抗体方法难以得到确定答案。第三节 肿瘤抗原的分类肿瘤免疫专题知识讲座19 肿瘤相关抗原 指非肿瘤细胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常细胞，但在肿瘤发生的机体可异常表达，可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。胚胎抗原 分化抗原第三节 肿瘤抗原的分类肿瘤免疫专题知识讲座20第四节 常见肿瘤的免疫诊断及应用原则一、肿瘤标志物的检测及临床意义肿瘤免疫专题知识讲座21肿瘤免疫专题知识讲座2
9、2肿瘤免疫专题知识讲座23已建立的肿瘤标志物肿瘤免疫专题知识讲座24肿瘤免疫专题知识讲座25病种病种100ng/mL200ng/mL急肝83.592.57.5迁肝9099.60.4肝硬化85.997.52.5原发性肝癌2.96.993.1AFP在各类肝病中的阳性率急肝急肝迁肝迁肝慢肝慢肝重症重症硬化硬化阳性率24%33%74%67%67%肿瘤免疫专题知识讲座26 肿瘤直径 五年生存率 2 cm 100%3 cm 82.2%5 cm 31.25%10cm 3.7%肿瘤免疫专题知识讲座27血清血清1515.12020.140不吸烟95.7%4.3%-吸烟64.5%29.0%6.5%一一.正常值正常
10、值(直接法直接法 ng/mL)ng/mL)胸，腹水 25 ng/mL肿瘤免疫专题知识讲座28癌种癌种1520结/直肠69.746.9肺77.656.9胃70.652.2肝80.065.0乳73.333.3胰腺84.661.5二二.病理值病理值(直接法直接法 ng/mL)ng/mL)2.胸腹水阳性率高于血液3.AFP，CEA联合检测鉴别原发/继发肝癌 肿瘤免疫专题知识讲座29肿瘤免疫专题知识讲座30肿瘤免疫专题知识讲座31PSA的两种主要形式游离PSA结合PSA(PSA-ACT)-1-antichymotrypsin抗原结合部位PSAPSAACT肿瘤免疫专题知识讲座32YACTPSAPSAYPS
11、A30 MAbFree PSA 检查检查 PSAACTPSAYYPSA66MAbPSA10 MAbTotal PSA 检查检查PSA的检测的检测PSA66MAbPSA10 MAb肿瘤免疫专题知识讲座3335%30%25%20%15%10%5%0%良性疾病的良性疾病的可能性增加可能性增加前列腺癌的前列腺癌的可能性增加可能性增加FREE PSA%结果解释肿瘤免疫专题知识讲座34前前列列腺腺癌癌的的可可能能性性%0 01010202030304040505060607070%FreePSA10-11%11-15%15-20%20-24%24-26%26%Probability95%CI*70%(60
12、-80%)58%(49-67%)46%(39-53%)34%(28-40%)23%(18-30%)15%11-22%10%6-16%CI*Confidence Interval肿瘤免疫专题知识讲座35是卵巢癌和子宫内膜癌的肿瘤标志物是卵巢癌和子宫内膜癌的肿瘤标志物分子量为分子量为20万的糖蛋白万的糖蛋白可被单克隆抗体可被单克隆抗体OC125所识别所识别在卵巢肿瘤上皮和在卵巢肿瘤上皮和Mullerian副肾管来副肾管来 源的病理和正常组织中表达，其生物源的病理和正常组织中表达，其生物 学功能不明。学功能不明。肿瘤免疫专题知识讲座36肿瘤免疫专题知识讲座37肿瘤免疫专题知识讲座38卵巢卵巢癌癌的的
13、辅助辅助诊断诊断观察病情及预测观察病情及预测预后预后-血清血清CA125CA125升高（或降低）升高（或降低）2 2倍的患者倍的患者 中大于中大于80%80%的病例为病情进展（或消退）的病例为病情进展（或消退）-CA12535U/mlCA12535U/ml的病人中有的病人中有95%95%在在第第二次二次 手术时仍有肿瘤存在手术时仍有肿瘤存在肿瘤免疫专题知识讲座39肿瘤免疫专题知识讲座40nCA125CA125升高：升高：90%90%的卵巢癌的卵巢癌和和期期 50%50%的的期和期和90%90%的的期期nCA125CA125升高水平与肿瘤大小和分期有升高水平与肿瘤大小和分期有关关nCA125CA
14、125可以区别可触及的良性或恶性可以区别可触及的良性或恶性实体瘤实体瘤肿瘤免疫专题知识讲座41肿瘤免疫专题知识讲座42肿瘤免疫专题知识讲座439.812/122子宫肌瘤8.32/24慢性输卵管炎40.419/47急性输卵管炎非卵巢疾病10.431/299所有良性卵巢14.31/7纤维瘤6.85/74畸胎瘤卵巢疾病 患者数 比例（%）CA12535U/mlCA12535U/ml良性疾病良性疾病肿瘤免疫专题知识讲座44 CA19-9是胰腺、胃和肠癌的标记物。是胰腺、胃和肠癌的标记物。正常人群血清正常人群血清CA19-9阳性的临界值为阳性的临界值为 37U/ml肿瘤免疫专题知识讲座45肿瘤免疫专题知
15、识讲座46肿瘤免疫专题知识讲座47肿瘤免疫专题知识讲座48反应参数反应参数CA 19-9 CA 19-9 CA 19-937 U/ml 72 U/ml 170 U/ml敏感性敏感性81%76%66%特异性特异性79%90%95%PV+80%89%93%PV-80%89%93%肿瘤免疫专题知识讲座49同功酶类肿瘤标志物，正常仅存于神同功酶类肿瘤标志物，正常仅存于神 经组织和红细胞中经组织和红细胞中正常人血清值为正常人血清值为 13 g/L小细胞肺癌、神经母细胞瘤和神经内小细胞肺癌、神经母细胞瘤和神经内 分泌肿瘤及脑损伤时升高分泌肿瘤及脑损伤时升高待测标本绝对禁止溶血，溶血可出现待测标本绝对禁止溶
16、血，溶血可出现 NSE血清水平升高血清水平升高肿瘤免疫专题知识讲座50肿瘤免疫专题知识讲座51肿瘤免疫专题知识讲座52肿瘤免疫专题知识讲座5360.966.8PV-(%)10084.2PV+(%)10093.7特异性(%)43.043.0敏感性(%)鉴别小细胞肺癌与良性肿物鉴别小细胞与非小细胞肺癌NSE反应参数反应参数肿瘤免疫专题知识讲座540 010102020303040405050606070708080鳞癌腺癌小细胞癌CyFra21-1CyFra21-1CEACEANSENSE阳性率阳性率Ebert,W.,et al.Ebert,W.,et al.Anticancer Research
17、,1996,16:2161-2168 肿瘤免疫专题知识讲座55 h糖蛋白类激素，由蛋白核心与位于糖蛋白类激素，由蛋白核心与位于 羧基端的以唾液酸为终止的侧链组成羧基端的以唾液酸为终止的侧链组成h两个亚基组成两个亚基组成:&:与与 -LH,TSH 和和 FSH相同相同:与与-LH有交叉有交叉h由合胞体滋养层细胞产生由合胞体滋养层细胞产生 h被证实是一种原始物质被证实是一种原始物质 (可作为一种有用的肿瘤标志物可作为一种有用的肿瘤标志物)肿瘤免疫专题知识讲座56肿瘤免疫专题知识讲座57肿瘤免疫专题知识讲座58hHCG上升：几乎所有绒毛膜上皮细胞上升：几乎所有绒毛膜上皮细胞 癌、癌、70%的非精原细
18、胞性睾丸癌，胃的非精原细胞性睾丸癌，胃 肠道、肺、肠道、肺、乳腺肿瘤时亦可见乳腺肿瘤时亦可见hHCG水平与肿瘤大小、疾病预后有关水平与肿瘤大小、疾病预后有关h脑脊液中脑脊液中HCG上升提示肿瘤有脑转移上升提示肿瘤有脑转移h可用于监测治疗可用于监测治疗肿瘤免疫专题知识讲座59第四节 常见肿瘤的免疫诊断及应用原则二、常见肿瘤标志物检测的免疫方法肿瘤免疫专题知识讲座60标记标记 名称名称 缩写缩写 仪器仪器 放射免疫 RIA-计数器 放射性核素 免疫放射度量分析 IRMA-计数器 免疫发色 ELISA ES-300、SR-1、Cobas 免疫荧光 EIFA IMX、AxSYM、VIDAS 酶 免疫发
19、光 EILA ACCESS、ECi、Immulite、MAGIA 荧光偏振免疫 FPIA TDX、AxSYM 荧光 时间分辨荧光 DELFIA Wallac Arcus 1235 Cyber Fluor 615 发光免疫 LIA ACS-180SE 发光 电化学发光免疫 ECL Elecsys 肿瘤免疫专题知识讲座61 HAPATITISCANCERFERTILITYPROTEINSTDMs/DRUGSTYROID,ANEMIAHBVHCVM1071010-1510-4 g/L AFP FERCEA CA199 PRLHCG LH FSHGH MyoglobinRHF IgGC3 ASO CE
20、RTRF AAGQUI GEN AMI PHYFT3 FT4 Dig T3 T4TSH ProgImmunoassay Analyte Map肿瘤免疫专题知识讲座62 待测物质浓度与检测手段 临床化学分析临床化学分析10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mL g/mLmg/mLg/L免疫分析免疫分析Therapeutic DrugsThyroid HormoneFertility HormoneAllergyCancer MarkersInfectious DiseaseVitaminsSerum Proteins肿瘤免疫专题知识讲座63第四节 常见肿瘤的免疫诊断及应用原则
21、三、肿瘤标志物的应用价值肿瘤免疫专题知识讲座64肿瘤免疫专题知识讲座65发病率 370/10万 10000/10万灵敏度 95%95%特异性 70%70%真阳性数 370*95%=351.5 10000*95%=9500假阴性数 370-351.5=18.5 10000-9500=500真阴性数 99648.5*70%=69753.95 90000*70%=63000假阳性数 99648.5-69753.95=29894.55 90000-63000=27000阳性预示值 0.15%26.03%阴性预示值 99.97%99.22%肿瘤免疫专题知识讲座66肿瘤免疫专题知识讲座67肿瘤免疫专题知识
22、讲座68肿瘤免疫专题知识讲座69肿瘤免疫专题知识讲座70肿瘤免疫专题知识讲座71肿瘤免疫专题知识讲座7202550751001251501752002252500369121518212427术后时间（月）术后时间（月）患者患者D患者患者C患者患者B患者患者A正常水平正常水平手术手术 化疗化疗73肿瘤标志物水平肿瘤标志物水平肿瘤免疫专题知识讲座73跟 踪 复 发68101214 年年总生存期无症状期 肿瘤标志物治疗复发肿瘤病理组织学确诊手术复发出现临床症状预测自检间隔期间隔期肿瘤免疫专题知识讲座74肿瘤免疫专题知识讲座75肿瘤标志物的应用原则1.有关标志物联合检测-提高灵敏度2.阳性标志物动态
23、观察-提高准确性 不应以单项、单次检测下诊断肿瘤免疫专题知识讲座77肿瘤标志物的其它几个问题正常参考范围的界定方法学不同而导致的结果的不统一肿瘤免疫专题知识讲座78肿瘤标志物的正常参考范围 目前通常以正常人群的95%的可信区间为正常参考范围，对于肿瘤标志物，由于双侧通常是无意义的，因此一般取右单侧 95%为正常参考范围。即有5%的正常人在检测时其值会超过正常参考范围，引起临床的假阳性结果。肿瘤免疫专题知识讲座792.597.5肿瘤免疫专题知识讲座80肿瘤标志物的正常参考范围 研究表明，正常参考范围对于肿瘤标志物来讲是毫无意义的，我们希望通过检测值来了解：（1）阳性结果提示该病人罹患肿瘤的概率（
24、2）阴性结果提示该病人不罹患肿瘤的概率 肿瘤免疫专题知识讲座81肿瘤免疫专题知识讲座82肿瘤免疫专题知识讲座83肿瘤免疫专题知识讲座84肿瘤免疫专题知识讲座85第四节 常见肿瘤的免疫诊断及应用原则四、肿瘤标志物的联合检测肺癌：肺癌：NSENSE、CYFRA21-1CYFRA21-1、CEACEA乳腺癌：乳腺癌：CA153CA153、CEACEA肝癌：肝癌：AFPAFP、AFUAFU、CEACEA、AKPAKP同工酶同工酶胰腺癌：胰腺癌：CA242CA242、CA199CA199、CA50CA50卵巢癌：卵巢癌：CA125CA125、CEACEA、CA199CA199、HCGHCG联合应用可大大
25、提高检出的灵敏度联合应用可大大提高检出的灵敏度肿瘤免疫专题知识讲座86第五节 肿瘤的免疫治疗19841984年，美国国立卫生研究院正式把肿瘤生物治年，美国国立卫生研究院正式把肿瘤生物治疗和外科手术、放射疗法和化学疗法一起作为治疗和外科手术、放射疗法和化学疗法一起作为治疗肿瘤主要疗法之一。疗肿瘤主要疗法之一。肿瘤免疫治疗的目的是通过增加肿瘤细胞的免疫肿瘤免疫治疗的目的是通过增加肿瘤细胞的免疫原性或激发、调动宿主的免疫系统抗肿瘤免疫力原性或激发、调动宿主的免疫系统抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞。，从而控制和杀伤肿瘤细胞。临床上先用常规疗法清除大部分肿瘤细胞，再使临床上先用常规疗法清除大部分肿
26、瘤细胞，再使用生物学治疗方式清除、杀伤少量的残留或扩散用生物学治疗方式清除、杀伤少量的残留或扩散的肿瘤细胞，以提高、巩固肿瘤治疗的效果，减的肿瘤细胞，以提高、巩固肿瘤治疗的效果，减少肿瘤的复发。少肿瘤的复发。肿瘤免疫专题知识讲座87第五节 肿瘤的免疫治疗一、主动免疫疗法（肿瘤疫苗）一、主动免疫疗法（肿瘤疫苗）1.1.肿瘤细胞疫苗肿瘤细胞疫苗2.2.肿瘤抗原疫苗肿瘤抗原疫苗3.3.病毒疫苗病毒疫苗4.4.DNADNA疫苗疫苗5.5.抗原递呈细胞疫苗抗原递呈细胞疫苗肿瘤免疫专题知识讲座88第五节 肿瘤的免疫治疗二、免疫导向疗法二、免疫导向疗法三、过继免疫疗法三、过继免疫疗法四、细胞因子疗法四、细胞因子疗法五、基因疗法五、基因疗法肿瘤免疫专题知识讲座89总结免疫与肿瘤的关系肿瘤的抗原性免疫学检验免疫功能状态的评估免疫治疗肿瘤免疫专题知识讲座90谢 谢肿瘤免疫专题知识讲座91
