1、对基层医务人员的培训对基层医务人员的培训 提高对人禽流感的发现报告能力提高对人禽流感的发现报告能力标本采集、保存与送检 自治区疾控中心 李新兰 2019.4.流感病毒分离成功与否很大程度上取决于临床标本的质量，及其保存运输等环节。现场标本采集准备工作标本采集和现场检测用品1)人感染高致病性禽流感病例或密切接触者采样登记表;2)采血用品:1Oml外螺旋带密封垫圈螺口塑料管、医用5ml或lOml一次性注射器针管或5ml真空针管、2ml血清管、带有冰排的冰壶或冰包、止血带、棉拭子、酒精、腆酒;3)采集鼻咽拭子用物品:鼻咽拭子保存管、15ml螺口管、3-5ml样本运送液（常用普通肉汤培养基、MEM、等
2、渗盐溶液或磷酸盐缓冲）、15ml螺口管,棉拭子;4）粪便、痰液、尸检组织保存管:5Oml螺旋带密封垫圈螺口塑料管;5)其他:油性记号笔;一次性纸杯、一次性纸漏斗、冰壶;污物袋;样品编号标签纸或条码纸。采集物品包v装好VTM的样品采集管v聚酯纤维拭子v无菌生理盐水(0.85%NaCl)v痰或粘液吸取管v压舌板v采样杯或平皿v吸管v其它样品管v冰袋v采血的物品vPPEv防水的Marker笔,用于标本的标记现场标本采集准备工作 现场个人防护用品:手套、防护眼镜、符合N95标准的防护口罩、全面型呼吸防护器、鞋套、白大衣、隔离衣、洗手液、75%酒精等消毒液等。采样对象v单个不明原因肺炎病例当县级卫生行政
3、部门组织的专家组会诊后，仍不能排除SARS或人禽流感时v聚集性不明原因肺炎病例发现后立即采样送检标本种类和采集时间（1）v临床标本呼吸道标本v上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液v下呼吸道标本：呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺组织活检标本v尽早采集上述标本，发病一至两周也可采集血清标本v第一份血清应尽早（最好在发病后7天内）采集v第二份血清应在发病后第34周采集v在病愈出院或死亡前采集血标本1份粪便标本v发病后尽可能早的采集粪便标本标本种类和采集时间（2）v尸检标本病人死亡后应尽早进行解剖，在严格按照生物安全防护的条件下，进行尸检主要采集肺、气管、肝、肾、脾、心脏、脑、胃、
4、肠、淋巴结等可疑组织标本同时采集血标本、分泌物或渗出物没有条件进行尸体解剖的，可采集呼吸道灌洗液或经皮穿刺采集肺组织标本 v其他标本可采集胸水、肺活检标本，还可采集枸橼酸盐抗凝血标本采集方法-1v鼻拭子：将1根带有聚丙烯纤维头的拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以另一拭子拭另侧鼻孔。将拭子头浸入采样液中，尾部弃去，旋紧盖管。v咽拭子：用2根带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，同样将拭子头浸入采样液中，尾部弃去，旋紧盖管。注：注：亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中，以便提高分离率，减少工作量。v鼻咽抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物
5、。先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液3-5ml涮洗收集器3次。标本采集方法-2v漱口液：用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理盐水在咽部转动。然后，用平皿或烧杯收集洗液v鼻洗液：患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔。标本采集方法-3v深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于50ml含3ml采样液的螺口塑料管中。v呼吸道灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管约30cm深处，注
6、入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液5ml涮洗收集器（亦可用小孩道尿管接在50ml注射器上代替收集）。v胸水：在B超定位下进行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，至于无菌的塑料螺口管中。标本采集方法-4v肺组织活检标本：在超声或X线定位下，经皮穿刺取肺组织活检标本，置于含3ml采样液的塑料螺口管中。v尸检标本：每一个采集部位分别使用不同消毒器械，以防交叉污染；每种组织应多部位取材，各部位应取20-50g，淋巴节取2个。v粪便标本：采集5-10g粪便置于含5-10ml采样液的无菌螺口管中，严格密封。v血清标本：用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置换30分
7、钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于2ml无菌螺口塑料管中。咽拭子v容易操作v在可疑的病例中发现禽流感病毒的可能性较高v请病人尽量把嘴张开 v当拭子触及咽后时病人不要往后躲，应该抵住咽拭子例子correctwrong2.鼻咽拭子1.插入干的拭子到鼻孔伸入鼻咽部2.停留片刻3.缓慢旋转退出鼻咽拭子4.另一个鼻孔使用另一个棉签5.将棉签的尾部折断后放入含有VTM的采样管中。3.鼻咽吸取液的收集1.将吸液管与真空泵相连2.将软管与上腭平行插入鼻孔3.使用真空泵4.缓慢的移出同时轻轻旋转5.使用同一个管子采集另一鼻孔的液体6.收集的液体用3 ml VTM 冲洗出，放入采样管中采集血液样本Serum separator tubes(SST)标本保存v医院内检测的标本可按本院规章对样品进行留样及消毒处理。v用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快送样进行检测24小时内能检测的标本可置于4保存24小时内无法检测的标本则应置于-70或以下保存v如无70保存条件，则于20冰箱暂存v血清可在4存放3天、-20以下长期保存。标本运送期间应避免反复冻融。标本送检程序v医院内临床检验标本由专人进行送检，和检验科室办理交接手续 v病原学检测标本由疾控中心专业人员按时到医院取样或由医院专业人员送样至疾控中心，并办理交接手续谢谢！
