1、中枢神经系统药物的作用筛选中枢神经系统药物的作用筛选及及ED50的测定的测定实验原理 本次实验测定药液的本次实验测定药液的EDED5050，有助于了解，有助于了解药物作用的性质，也可为临床用药提供参药物作用的性质，也可为临床用药提供参考资料。通常用治疗指数考资料。通常用治疗指数TITI来估计药物的来估计药物的安全性，安全性，TITI的大小是半数致死量的大小是半数致死量LDLD5050和半数和半数有效量有效量EDED5050的比值。的比值。TI=LDTI=LD5050/ED/ED5050 半数有效剂量（半数有效剂量（ED50ED50）：能引起）：能引起50%50%阳性反应（质反应）或阳性反应（质
2、反应）或50%50%最大效应最大效应（量反应）的剂量。在（量反应）的剂量。在50%50%效应处斜率效应处斜率最大，这就是半数有效量（最大，这就是半数有效量（ED50ED50）。）。药理效应的强弱与药物剂量大小药理效应的强弱与药物剂量大小或浓度高低呈一定的关系，即剂量或浓度高低呈一定的关系，即剂量-效效应关系。如以药物的效应为纵坐标，药应关系。如以药物的效应为纵坐标，药物的剂量或浓度为横坐标作图，则得到物的剂量或浓度为横坐标作图，则得到直方双曲线；如将药物浓度或剂量改用直方双曲线；如将药物浓度或剂量改用对数值作图，则呈典型的对数值作图，则呈典型的S S形曲线，这形曲线，这就是通常所说的量效曲线就
3、是通常所说的量效曲线(图图-1)-1)。定量。定量阐明药物的剂量阐明药物的剂量(浓度浓度)与效应之间的关与效应之间的关系，有助于了解药物作用的性质，为临系，有助于了解药物作用的性质，为临床用药提供参考。药理效应是连续增减床用药提供参考。药理效应是连续增减的量变，可用具体数量或最大反应的百的量变，可用具体数量或最大反应的百分数表示的，称为量反应分数表示的，称为量反应 一一.预实验预实验 1 1 目的目的 初步筛选出具有中枢抑制作用的药物，并探索出初步筛选出具有中枢抑制作用的药物，并探索出0 0和和100100动物有效的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。动物有效的剂量范围，以便正式实验时确定各
4、组剂量。2 2 动物动物 小鼠小鼠1515只，体重只，体重12-16g12-16g，雌雄不限。实验前禁食，雌雄不限。实验前禁食12h12h，不，不禁水。禁水。3 3 器材和药品器材和药品 器材：小鼠体重称、注射器、针头、烧杯、鼠笼、吸量管、器材：小鼠体重称、注射器、针头、烧杯、鼠笼、吸量管、洗耳球洗耳球 药品：药品：3 3种未知名药品种未知名药品1.确定抑制药物确定抑制药物1.1 分别称取分别称取3只小鼠，记录其各自体重。只小鼠，记录其各自体重。1.2 将将3种给出的药物分别对种给出的药物分别对3只小鼠进行腹腔注射，其注射量按照只小鼠进行腹腔注射，其注射量按照0.2ml/10g比例。比例。预试
5、结果预试结果 组数组数稀释倍数稀释倍数剂量（剂量（mg/kg）只数只数小鼠阳性反应小鼠阳性反应1 11/21/2100100（1%）3 3 3 3只小鼠无翻正反射只小鼠无翻正反射2 21/3 1/3 7575（0.75%）3 3 2 2只小鼠无翻正，只小鼠无翻正，1只小鼠有翻正反射只小鼠有翻正反射3 31/41/45050（0.5%）3 33 3只小鼠有翻正反射只小鼠有翻正反射4 41/81/82525（0.25%）3 33 3只小鼠有翻正反射只小鼠有翻正反射5 51/161/1612.512.5（0.125%）3 33 3只小鼠有翻正反射只小鼠有翻正反射由表可知：由表可知：ED0 0=50m
6、g/kg=50mg/kg，EDED100100=100mg/kg=100mg/kg所以猜测所以猜测ED5050在在75mg/kg附近附近 2.2.从实验结果表明从实验结果表明:第一组的第一组的3 3只小鼠都无翻正反射；只小鼠都无翻正反射；第三组开始，第三组开始，3 3只小鼠翻正反射都有翻正反射；只小鼠翻正反射都有翻正反射；可以确定第一组注射液的浓度为有效全效量，第三组注射可以确定第一组注射液的浓度为有效全效量，第三组注射液的浓度为无效全效量。液的浓度为无效全效量。因此，因此，ED0=1/4C,ED100=1/2C.ED0=1/4C,ED100=1/2C.二二.正式实验正式实验 1 1 目的目的
7、 测定所选中枢抑制药的测定所选中枢抑制药的ED50ED50。2 2 动物动物 健康小鼠健康小鼠7070只，体重只，体重10-17g10-17g，雌雄不限，雌雄不限 3 3 器材与药品器材与药品 器材：小鼠体重称、注射器、针头、烧杯器材：小鼠体重称、注射器、针头、烧杯 、鼠笼鼠笼 、吸量管、洗耳球、吸量管、洗耳球 药品：预实验中的中枢抑制药药品：预实验中的中枢抑制药,药品浓度药品浓度2%2%3.3.确定确定ED50ED50的值的值3.1 3.1 分别称取分别称取7070只小鼠，将其分为只小鼠，将其分为7 7个小组，每个小组个小组，每个小组1010只，记录其各自体重。只，记录其各自体重。3.2 3
8、.2 选取浓度为选取浓度为2%2%即即200mg/kg200mg/kg的抑制药，按照规律把其的抑制药，按照规律把其稀释为稀释为7 7组不同的浓度，组不同的浓度，根据预实验的结果：根据预实验的结果：ED0=1/4，ED100=1/2 及公式及公式求得求得:剂量公比剂量公比 r=0.84 1maxminnDDr根据剂量公式算得，根据剂量公式算得，r=0.84 第一组第一组 c=100mg/kg 第二组第二组 c=100*0.84=84mg/kg 第三组第三组 c=100*0.842=71mg/kg 第四组第四组 c=100*0.843=59mg/kg 第五组第五组 c=100*0.844=50mg
9、/kg 第六组第六组 c=100*0.845=38mg/kg 第七组第七组 c=100*0.846-=33.3mg/kg剂量与没翻正鼠数的关系曲线图 3.3 3.3 根据实验结果的表格显示，将数据代根据实验结果的表格显示，将数据代入软件求入软件求ED50ED50中枢抑制药的中枢抑制药的ED50实验结果实验结果 实验是从7、8和9号药液中筛选出具有中枢抑制性的药物，初步确定其阳性反应率100%和阳性反应率0%，然后再测定药物的ED50，我们组通过观察小鼠的指标为翻正反应。实验结果显示，7号为中枢神经抑制性药液，测得其ED50为31.2893mg/kg。在该剂量范围内，小鼠抑制性的反应为翻转小白鼠
10、3min不转正。实验讨论：中枢神经系统是神经组织最集中的部位。反射活动表现在中枢神经系统，把不同空间和时间的传入冲动进行整合，神经元之间在机能上发生突触联系，使中枢神经系统的活动表现为兴奋的扩散，抑制和反馈。中枢抑制药是一类能抑制中枢神经系统功能活动的药物。临床上用其对中枢的抑制作用。根据作用部位不同，表现有不同。实验中小鼠因不同的给药量而有不同的反应，属于正常现象。误差分析误差分析 本实验是探索性综合实验，是小组设计实验，把不确定因素控制的尽量使之均衡，预实验的目的是筛选初具有某种特定作用的药物，并探索其ED0和ED100的剂量，为真实验测定ED50做铺垫。实验分析实验分析 预实验：由于对小鼠的给药剂量不明确，所以用稀释浓度的办法来确定给药剂量。分别稀释浓度1/2，1/3,1/4，1/8，1/16，这是对药物的初次探索，由于现象明显，所以预实验结果较好。设计性实验：前五组小鼠全部无翻正反射，从实验现象可推测预实验与设计性实验的浓度可能不一致，设计性实验所配制的药物浓度偏高。实验结论实验结论 所用中枢抑制药的半数有效量所用中枢抑制药的半数有效量ED50=31.2893mg/kg组员：谢XX、严XX、陈XX、谢XX、岑XX、黎XX
