1、血细胞直方图和散点图血细胞直方图和散点图的临床意义的临床意义一、什么是直方图？一、什么是直方图？直方图是通过血细胞计数仪测量而提供的血细胞体积分布图形，这些图形可以表示出细胞群体分布情况。检测区域红细胞Oscilloscope示波镜示波镜检测区域白细胞示波镜示波镜ABCChannelNo.No.ofCellsAvg Vol(fL)Total Vol(fL)1025.50.02126.526.53227.555.04328.585.55429.5118.06530.5152.57631.5189.08532.5162.59433.5134.010234.569.01113535.5Total33
2、51027.5 TABLE23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38FemtolitersRelative NumberChannel 11Channel 1How we get from pulses to histograms:直方图原理LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴细胞淋巴细胞大单个核细大单个核细 胞群胞群粒细胞粒细胞淋巴淋巴嗜碱嗜碱单核单核嗜酸嗜酸中性粒细胞中性粒细胞高频度分析-直方图直方图-X轴：体积（fL）-Y轴：相对数量通道划分RBC直方图：36-360fL，256个通道PLT直方图：2-20fL
3、，64个通道.WBC直方图：35-450fL，256个通道二、什么是散点图？二、什么是散点图？散点图是白细胞分类的平面图。正常散点图正常散点图什么是VCS技术？VCS技术是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术，即分类时不需传统的染色方法，仅用三个物理量，VOLUME（体积）、CONDUCTIVITY（传导性）、SCATTER（激光）将五种白细胞分开的技术。V Volumeolume电阻法电阻法针对细胞体积的测量针对细胞体积的测量体积体积(V Volume)olume)运用库尔特原理运用库尔特原理检测细胞体积检测细胞体积 揭示揭示VCSVCS技术技术的威力所在的威力所在CConductivi
4、tyonductivity传导性传导性针对细胞内部结构的测量方法针对细胞内部结构的测量方法 7-10(复杂性)传导性传导性(Conductivity)Conductivity)利用高频电磁波对细胞传导性利用高频电磁波对细胞传导性的特点，检测的特点，检测:细胞核大小细胞核大小细胞核密度细胞核密度细胞核结构细胞核结构核浆比核浆比异淋和淋巴异淋和淋巴揭示揭示VCSVCS技术技术的威力所在的威力所在激光散射激光散射(Scatter)Scatter)全角度：全角度：1010-70-70的全角度的全角度激激光散射量光散射量与流式细胞仪相同的激光光源与流式细胞仪相同的激光光源保证结果准确保证结果准确保证成本
5、低廉保证成本低廉它是准确区分它是准确区分嗜酸性细胞嗜酸性细胞和和中性中性粒粒细胞的一个重要参数。细胞的一个重要参数。Laser Laser S Scattercatter激光散射激光散射针对细胞颗粒特性的测量方法针对细胞颗粒特性的测量方法揭示揭示VCSVCS技术技术的威力所在的威力所在体积检测(V)V 是以库尔特原理检测是以库尔特原理检测细胞的体积细胞的体积获得的是完全的细胞体获得的是完全的细胞体积积VCS-DC细胞内部结构检测(C)C 运用高频探针检测运用高频探针检测细胞的内部结构细胞的内部结构获得细胞核复杂程度的获得细胞核复杂程度的信息信息区分分叶核和非分叶核区分分叶核和非分叶核细胞细胞V
6、CS-RFVCS-LaserS 是运用一个宽角度的散射范围（10-70）来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞细胞颗粒特性检测细胞颗粒特性检测(S)VCSVCS检测检测八千多个白细胞逐个、直接八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受、同时地在流式通道内接受VCS三重检测，得到各自的三重检测，得到各自的三维座标值三维座标值V：检测：检测细胞体细胞体积积C：检测：检测细胞内细胞内部核结部核结构构S：检测：检测细胞内细胞内部颗粒部颗粒特征特征VCS技术的强大威力所有检测在相同的试剂环境下进行。美国贝克曼库尔特美国贝克曼库尔特256X256X256=1677
7、256X256X256=1677 万个数据点万个数据点日本希森美康日本希森美康256 X 256=6256 X 256=6万个数据点万个数据点VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值VCS正常散点图正常散点图正常散点图正常散点图正常散点图正常散点图三、散点图的临床意义三、散点图的临床意义急性粒细胞白血病急性粒细胞白血病WBC 4.7Neut%1Blast%72PLT 8FlagsImmGrans/Bands 2Blasts急性粒细胞性白血病结果特征急性粒细胞性白血病结果特征 中性粒细胞区域上方出现大量细胞，可能为原始中性粒细胞区域上方出现大量细胞，可能
8、为原始粒细胞粒细胞 血小板数量低，分布异常，曲线不拟合，出现血小板数量低，分布异常，曲线不拟合，出现R报警报警 手工涂片分类结果为：手工涂片分类结果为：中性粒细胞中性粒细胞 1%淋巴细胞淋巴细胞 27%原始粒细胞原始粒细胞 72%M1 急性粒细胞性白血病急性粒细胞性白血病WBC74.6Neut%6Myelocyte%1Blast%86PLT 105FlagsImmGrans/Bands 2BlastsM3 急性早幼粒细胞性白血病急性早幼粒细胞性白血病WBC2.9Neut%10Band%1Promyelocyte%53PLT 7FlagsImmGrans/Bands 2BlastsM4 粒单细胞
9、性白血病粒单细胞性白血病WBC67.8Neut%42Mono%34Imm Grans%7Blast%4PLT 55FlagsImmGrans/Bands 2BlastsM5 单核细胞性白血病单核细胞性白血病Mono%47ImmGran%8Blast%34PLT50FlagsBlasts慢性粒细胞性白血病慢性粒细胞性白血病WBC54.6ImmGran%1Blast%75PLT 145FlagsImmGrans/Bands 2Blasts慢性粒细胞性白血病慢性粒细胞性白血病结果特征结果特征 白细胞计数增高，分类散点图上细胞基本集中在白细胞计数增高，分类散点图上细胞基本集中在粒细胞区域粒细胞区域 手
10、工涂片分类结果：手工涂片分类结果：中性粒细胞中性粒细胞 16%淋巴细胞淋巴细胞 3%嗜酸细胞嗜酸细胞 1%嗜碱细胞嗜碱细胞 5%中幼莉细胞中幼莉细胞 1%原始粒细胞原始粒细胞 75%慢性粒单细胞性白血病慢性粒单细胞性白血病WBC 6.6Neut%32Mono%30ImmGran%5Blast%3PLT343FlagsBlasts嗜酸性细胞增多症嗜酸性细胞增多症WBC 4.5Eos%14.6PLT 171FlagsNone嗜酸细胞增多症结果特征嗜酸细胞增多症结果特征 白细胞分类散点图上分类良好，各细胞亚白细胞分类散点图上分类良好，各细胞亚群清晰群清晰 嗜酸细胞亚群细胞增多嗜酸细胞亚群细胞增多异形
11、淋巴细胞异形淋巴细胞(DF1)WBC 22.0Lymph%87.3Lymph#19.2FlagsVariant Lymphs传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症WBC29.2Lymph%77.0Lymph#22.518%Atypical LymphsFlagsVariant Lymphs慢性淋巴细胞性白血病慢性淋巴细胞性白血病WBC263.4Lymph%71.8Lymph#189.1FlagsVariant LymphsBlasts 慢性淋巴细胞性白血病慢性淋巴细胞性白血病WBC12.5Lymph%53.7Lymph#6.7FlagsVariant LymphsBlasts慢性淋巴细胞性白
12、血病慢性淋巴细胞性白血病结果特征结果特征 白细胞数量高，超出仪器操作范围，以旗标白细胞数量高，超出仪器操作范围，以旗标+代替代替 白细胞分类散点图上绝大多数细胞为淋巴细胞白细胞分类散点图上绝大多数细胞为淋巴细胞 由于淋巴细胞数量巨大，影响红细胞，导致其参数后出现由于淋巴细胞数量巨大，影响红细胞，导致其参数后出现R 手工涂片分类结果：手工涂片分类结果：中性粒细胞中性粒细胞 5%淋巴细胞淋巴细胞 91%单核细胞单核细胞 2%嗜酸细胞嗜酸细胞 1%嗜碱细胞嗜碱细胞 1%四、红细胞三个平均值的临床四、红细胞三个平均值的临床意义意义（一）平均红细胞体积（一）平均红细胞体积（MCV）1、计算方法：、计算方
13、法：MCV=Hct/RBC1015 fl 2、参考值：参考值：血液分析仪法：血液分析仪法：80100fl 3、意义：全血中每个红细胞的平均体积。、意义：全血中每个红细胞的平均体积。（二）平均红细胞血红蛋白含量（二）平均红细胞血红蛋白含量（MCHMCH）1、计算方法：、计算方法：MCH=Hb（g/L）1012pg/RBC（L）2、参考值：参考值：血液分析仪法：血液分析仪法：2734pg 3、意义：全血中每个红细胞平均血红蛋、意义：全血中每个红细胞平均血红蛋 白白含量。含量。（三）平均红细胞血红蛋白浓度三）平均红细胞血红蛋白浓度（MCHCMCHC）1、计算方法：、计算方法：MCHC=Hb（g/L）
14、/Hct 2、参考值：参考值：320360g/L 3、意义：单位体积红细胞平均血红蛋白意义：单位体积红细胞平均血红蛋白含量。含量。诊断中的应用诊断中的应用1、正细胞性贫血、正细胞性贫血（1）特点：）特点：MCV、MCH、MCHC均正常。均正常。（2）常见疾病：）常见疾病：急性失血性贫血、溶血性贫血、再生急性失血性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、白血病等。障碍性贫血、白血病等。2 2、大细胞性贫血、大细胞性贫血（1）特点：）特点：MCV正常、正常、MCH 正常、正常、MCHC正常。正常。（2）常见疾病：）常见疾病：巨幼细胞贫血。巨幼细胞贫血。3 3、单纯小细胞性贫血、单纯小细胞性贫血（1）特点
15、：）特点：MCV正常、正常、MCH正常、正常、MCHC正常。正常。（2）常见疾病：）常见疾病：亚急性或慢性炎症疾患、尿毒症。亚急性或慢性炎症疾患、尿毒症。4 4、小细胞低色素性贫血、小细胞低色素性贫血（1）特点：）特点：MCV 正常、正常、MCH 正常、正常、MCHC 正常。正常。（2）常见疾病：常见疾病：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铅中毒、慢性失血性贫血等。铅中毒、慢性失血性贫血等。（五）红细胞体积分布宽度（五）红细胞体积分布宽度（RDWRDW）RDW是反映周围血红细胞间体积差是反映周围血红细胞间体积差异的参数，通过变异系数定量地表示红异的参数，通过变
16、异系数定量地表示红细胞体积分布的离散程度。细胞体积分布的离散程度。1、正常参考值：、正常参考值：14-16%。2、临床意义、临床意义（1）小细胞均一性贫血）小细胞均一性贫血 特点：特点：MCV正常、正常、RDW正常。正常。常见疾病：轻型珠蛋白生成障碍性贫血、常见疾病：轻型珠蛋白生成障碍性贫血、慢性疾病。慢性疾病。（2）小细胞不均一性贫血）小细胞不均一性贫血 特点：特点：MCV正常、正常、RDW增高。增高。常见疾病：缺铁性贫血、血红蛋白常见疾病：缺铁性贫血、血红蛋白S病、病、-珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞破碎珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞破碎综合症等。综合症等。（3）正细胞均一性贫血）正细胞均一性
17、贫血 特点：特点：MCV、RDW均正常。均正常。常见疾病：再障、白血病、化疗后、急常见疾病：再障、白血病、化疗后、急性失血性贫血等。性失血性贫血等。（4）正细胞不均一性贫血）正细胞不均一性贫血 特点：特点：MCV正常、正常、RDW增高。增高。常见疾病：缺叶酸或维生素常见疾病：缺叶酸或维生素B12双相性双相性贫血、铁粒幼细胞贫血、骨髓纤维化等。贫血、铁粒幼细胞贫血、骨髓纤维化等。（5）大细胞均一性贫血）大细胞均一性贫血 特点：特点：MCV正常、正常、RDW正常。正常。常见疾病：多数再障、部分肝病性贫血、常见疾病：多数再障、部分肝病性贫血、某些肾性贫血。某些肾性贫血。（6）大细胞不均一性贫血）大细
18、胞不均一性贫血 特点特点：MCV、RDW均增高。均增高。常见疾病：巨幼细胞贫血、免疫性溶血常见疾病：巨幼细胞贫血、免疫性溶血性贫血等。性贫血等。HmX五分类血液五分类血液分析仪旗标和代码分析仪旗标和代码常见的旗标和代码常见的旗标和代码 旗标旗标(数值后数值后):R 结果需复核结果需复核*R 计数受干扰计数受干扰 H 结果高于参考范结果高于参考范 围上限围上限 L 结果低于参考结果低于参考 范围下限范围下限 代码代码(替代数值替代数值):-三次计数比统一三次计数比统一.不完全计算不完全计算+结果超出操作结果超出操作范围范围:流式通道堵塞流式通道堵塞?数据无效数据无效白细胞计数值后出现白细胞计数值
19、后出现*R的临的临床意义床意义 说明白细胞在35fl处的检测受到干扰.在白细胞计数孔有35fl大小的颗粒通过并被当作白细胞计数,且超过一定数量,触发报警 在白细胞直方图上看,曲线在35fl处上抬导致导致*R出现的可能原因出现的可能原因 红细胞未完全溶解红细胞未完全溶解 样本存在有核红细胞样本存在有核红细胞 由于存在大血小板、血小板聚集干扰到白细胞由于存在大血小板、血小板聚集干扰到白细胞结果结果 溶血剂问题溶血剂问题*R出现的出现的处理方法处理方法 1.查看出现的概率，如概率高则先考虑溶血剂的质和量有无问题，是否应更换溶血剂 2.如只是局限的样本出现，考虑样本原因，如需确认结果，可采用手工镜检*
20、R出现的出现的处理方法处理方法 1.查看出现的概率，如概率高则先考虑溶血剂的质和量有无问题，是否应更换溶血剂 2.如只是局限的样本出现，考虑样本原因，如需确认结果，可采用手工镜检PLT结果后出现结果后出现 R旗标的旗标的临床意义临床意义 仪器进行血小板计数时,计数 2fl 20fl的血小板数量,再拟合出一条 0fl 70fl的曲线,目的是为了排除计数干扰.但条件不满足时仪器不能给出拟合曲线,这时候血小板数值后出现 R.血小板曲线不拟合的条件血小板曲线不拟合的条件：血小板计数20,000;血小板曲线不呈正态分布;大多数血小板分布在3fl或15fl区域内;PDW 20%.导致血小板后出现导致血小板
21、后出现 R 的原因的原因 样本血小板异常：出现异常形态的血小板、血小板发生聚集;存在细胞碎片，如红细胞碎片;血小板大小不一(输血后);电磁波或噪音干扰小孔计数.处理方法处理方法请手工镜检+出现的临床意义出现的临床意义+(+(代码代码)：结果超出仪器的操作范围：结果超出仪器的操作范围 对白细胞而言计数值大于对白细胞而言计数值大于 99.9 99.910109 9/L L；对红细胞而言计数值大于对红细胞而言计数值大于7.007.0010101212/L L；对血小板而言计数值大于对血小板而言计数值大于 999 99910109 9/L.L.处理方法处理方法：用用ISOTON IIIISOTON I
22、II液稀释标本至线性范围内再测液稀释标本至线性范围内再测 注注:1.:1.先做一空白循环以防止携带污染先做一空白循环以防止携带污染 2.2.不能报告白细胞分类结果不能报告白细胞分类结果 检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障代码代码-出现的临床意义出现的临床意义-出现代表三次计数不统一 可能导致的原因可能导致的原因：小孔部分堵塞；标本有凝块；出现细胞凝集；出现血小板凝集；标本稀释后未充分混匀.主要表示吸样错误主要表示吸样错误.出现主要表示吸样错误,当发生吸样错误时,所有参数的结果后都会带有.，同时报警PART ASP 导致的可能原因有导致的可能原因有：样本
23、有凝块,堵塞吸样针系统，影响血样探测器；样本量不够;样本的血红蛋白浓度过低(严重贫血),血样探测器检测失败;发生吸样错误的处理方法发生吸样错误的处理方法 1.查看样本有无凝块,如果有重取标本,没有则重新检测,再出现如上问题则涂片镜检有无凝块或细胞聚集;2.检测标本量是否够;3.对于严重贫血病人样本采用手动进样方式.4.检测仪器吸样系统,如发生堵塞则清洗.代码代码:出现的临床意义出现的临床意义 在白细胞五项分类及网织红细胞计数中,当流式通道堵塞产生:代码.在散点分布图上可有三种堵塞报警：-FC,流式通道完全堵塞(无检测);-PC1,流式通道检测时间延长;-PC2,流式通道检测时间缩短.导致导致
24、PC/:的原因的原因-FC：完全堵塞;-PC1：流式通道或标本通道部分堵塞导致分类时间延长;-PC2：红细胞未完全溶解导致分类时间缩短,或鞘液系统问题.临床上高胆固醇和高甘油三酯血症、血红蛋白病、药物治疗后、进行性肝病等都可导致 PC2.HmX怀疑性旗标怀疑性旗标白细胞怀疑性旗标白细胞怀疑性旗标 1.Blasts(原始细胞)2.Imm Grans/Bands(未成熟杆状细胞)3.Variant Lymphs(异型淋巴细胞)4.Review Slide(涂片复检)白细胞限定性旗标(I)1.Leukopenia(白细胞减少)：白细胞计数低于设定的下限 2.Leukocytosis(白细胞增多)：白
25、细胞计数高于设定的上限 3.Neutropenia(中性粒细胞减少)：中性粒细胞的数值或百分比低于设定的下限 4.Neutrophilia(中性粒细胞增多)：中性粒细胞的数值或百分比高于设定的上限 白细胞限定性旗标(II)5.Lymphopenia(淋巴细胞减少)：淋巴细胞的数值或百分比低于设定的下限 6.Lymphocytosis(淋巴细胞增多)：淋巴细胞的数值后百分比高于设定的上限 7.Monocytosis(单核细胞增多)：单核细胞的数值或百分比高于设定的上限 8.Eosinophilia(嗜酸细胞增多)：嗜酸细胞的数值或百分比高于设定的上限 9.Basophilia(嗜碱细胞增多)：嗜
26、碱细胞的数值或百分比高于设定的上限 红细胞怀疑性旗标 1.NRBCs(有核红细胞)2.Dimorphic RBC Pop(红细胞双峰)3.Micro RBCs/RBC Fragments(小红细胞/红细胞碎片)4.RBC Agglutination(红细胞聚集)红细胞限定性旗标(I)1.Anemia(贫血)：红细胞数值或血红蛋白量低于设定的下限 2.1+Anisocytosis(红细胞大小不一)：RDW高于设定的上限 2+Anisocytosis(红细胞大小不一)：程度高于1+3+Anisocytosis(红细胞大小不一)：程度高于2+3.1+Microcytosis(小红细胞症)：MCV低于
27、设定的下限 2+Microcytosis(小红细胞症)：程度高于1+3+Microcytosis(小红细胞症)：程度高于2+红细胞限定性旗标(II)4.1+Macrocytosis(大红细胞症)：MCV高于设定的上限 2+Macrocytosis(大红细胞症)：程度高于1+3+Macrocytosis(大红细胞症)：程度高于2+5.1+Hypochromia(血红蛋白含量降低)：MCH低于设定的下限 2+Hypochromia(血红蛋白含量降低)：程度高于1+3+Hypochromia(血红蛋白含量降低)：程度高于2+红细胞限定性旗标(III)6.1+Poikilocytosis(红细胞畸形)
28、：RDW高于上限而MCH低于下限 2+Poikilocytosis(红细胞畸形)：程度高于1+3+Poikilocytosis(红细胞畸形)：程度高于2+7.Erythrocytosis(红细胞增多症)：红细胞数值高于设定的上限 8.Pancytopenia(全血细胞下降)：白细胞、红细胞和血小板数值都下降血小板怀疑性旗标 1.Platelet Clumps(血小板聚集)2.Giant Platelets(巨大血小板)血小板限定性旗标 1.Thrombocytopenia(血小板减少症)：血小板数值低于下限 2.Thrombocytosis(血小板增多症)：血小板数值高于上限 3.Small Platelets(小血小板)：MPV低于下限 4.Large Platelets(大血小板)：MPV高于上限
