1、大豆抗原蛋白及仔猪过敏性腹泻大豆抗原蛋白及仔猪过敏性腹泻 仔猪腹泻与产生原因仔猪腹泻与产生原因1.日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白2.大豆抗原蛋白的消除大豆抗原蛋白的消除3.大豆抗原蛋白的分析检测大豆抗原蛋白的分析检测4.1.1.传染性病因传染性病因 1.1 病毒性腹泻传染性胃肠炎、轮状病毒感染1.2 细菌性腹泻仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢2.免疫系统因素免疫系统因素 1234周龄6756842免疫力主动免疫被动免疫(母乳)被动免疫(母乳)3.应激因素应激因素3.1 温度骤变温度骤变 u皮下脂肪薄,被毛稀少:保温能力差;糖原水平低,产热能力不足,因此仔猪对冷
2、相当敏感1234周龄6756842免疫力主动免疫被动免疫(母乳)被动免疫(母乳)断奶3.2 断奶应激断奶应激 4.饲料(营养)因素饲料(营养)因素4.1 营养消化不良营养消化不良 日粮抗原蛋白过敏日粮抗原蛋白过敏导致仔猪腹泻的一个重要因素导致仔猪腹泻的一个重要因素 4.饲料(营养)因素饲料(营养)因素4.2 日粮抗原过敏日粮抗原过敏 植物性饲料植物性饲料大大 豆豆大豆制品大豆制品 蛋白酶抑制因子脲酶 凝集素植酸寡糖(热敏性)(热敏性)(热稳定性)(热稳定性)抗维生素因子 其 他单 宁 大豆抗原蛋白是由大豆抗原蛋白是由 Duke等(等(1934)首次发现)首次发现 婴儿过敏婴儿过敏 Castim
3、apoolas和和Ekenstam(1969)从大豆中分离出从大豆中分离出4种抗原种抗原 蛋白蛋白:大豆球蛋白(大豆球蛋白(glycinin)-伴大豆球蛋白(伴大豆球蛋白(-conglycinin)-伴大豆球蛋白(伴大豆球蛋白(-conglycinin)-伴大豆球蛋白(伴大豆球蛋白(-conglycinin)Glycinin 由由6个酸性多肽和个酸性多肽和6个碱性多肽组成的个碱性多肽组成的 大分子蛋白(大分子蛋白(360 kDa)酸性多肽酸性多肽碱性多肽碱性多肽GlycininGlycinin晶体结构晶体结构占大豆总球蛋白的40%(李德发,2003)-Conglycinin是大豆中的一种主要贮
4、藏蛋白是大豆中的一种主要贮藏蛋白孙鹏等,孙鹏等,2008Glycinin水平水平0%2%4%8%SEMP-值值十二指肠十二指肠空空 肠肠回回 肠肠10.5321.0920.1517.172.600.0510.9320.1017.7617.082.010.0410.2519.9714.5410.891.930.01 日粮中添加日粮中添加 2%或或 4%的的glycinin可显著增加仔猪空肠、可显著增加仔猪空肠、回肠内组胺回肠内组胺的释放量。的释放量。孙鹏等,孙鹏等,2008饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况(Miller,1994)大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P3%);
5、具有发酵香味,提高适口性和采食量;大豆基因工程改良据报道,三亚基的抗原活性:据报道,三亚基的抗原活性:-conglycinin-亚基亚基对大鼠对大鼠肠道超微结构肠道超微结构的影响的影响正常组:上皮细胞微绒毛正常组:上皮细胞微绒毛结构清晰结构清晰试验组:上皮细胞微绒毛试验组:上皮细胞微绒毛结构模糊结构模糊郭鹏飞(郭鹏飞(2007)结果表明,结果表明,-conglycinin的的-亚基同样有较强的致过敏活性。亚基同样有较强的致过敏活性。RNA Gel Blot Shows Conglycinin CosuppressionTransgenic Soybean Seeds Kinney等,等,200
6、1但研究表明,大豆但研究表明,大豆-conglycinin含量的减少,将伴随着含量的减少,将伴随着glycinin含量的增加含量的增加。而而glycinin同样是一种同样是一种抗原蛋白抗原蛋白品名优势劣势微生物发酵法(勃乐)1、零抗原、零不良寡糖;2、含有发酵产生的约7乳酸(HPLC法);3、浓郁发酵香味,多吃10%;4、消化率高(体外消化率96);5、代谢产物丰富,改善肠道微环境;1、相对SPC粗蛋白含量略低(CP50%)有机溶剂萃取法(SPC)1.零不良寡糖;2.蛋白含量高,配方空间大;1.抗原的去除不稳定,仍有部分抗原;2.适口性差;3.性价比不好;膨化大豆1.脂肪利用率高;2.适口性好
7、;1.抗原蛋白未完全去除;2.不良寡糖未去除;酶解(HP3000)1.抗原大部分降解;2.零不良寡糖;1.性价比不好;不同加工工艺大豆蛋白比较是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法发酵豆粕的质量差异及大豆抗原蛋白的含量检测 SDS-PAGE(定性)(定性)抗血清测定(特异性问题)抗血清测定(特异性问题)高效液相色谱分析(设备、前处理问题)高效液相色谱分析(设备、前处理问题)以以抗大豆抗大豆-conglycinin单克隆抗体单克隆抗体为介质的为介质的 免疫学检测方法免疫学检测方法Marker豆豆粕粕对对照照发发酵酵豆豆粕粕1发发酵酵豆豆粕粕2发发酵酵豆豆粕粕3发发酵酵豆豆粕粕4发发酵酵豆豆粕粕5发发酵酵豆豆粕粕6以单抗为介质的以单抗为介质的ELISA(定量)(定量)热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法,但对于热稳定性高,热加工不足以有效地灭活的抗营养因子,热处理是应用较为广泛的日粮抗原消除方法,但对于热稳定性高,热加工不足以有效地灭活的抗营养因子,人们必须要不断地研究新的方法加以消除。人们必须要不断地研究新的方法加以消除。微生物发酵是目前改善大豆及其制品营养价值和饲喂价值,减少仔猪致敏性腹泻的有效途径!微生物发酵是目前改善大豆及其制品营养价值和饲喂价值,减少仔猪致敏性腹泻的有效途径!