1、2020/4/27 缺氧 1 机能学实验机能学实验 机能学实验机能学实验 生理学与病理生理学系生理学与病理生理学系 余靖余靖 缺缺 氧氧 2020/4/27 缺氧 2 【目的和原理目的和原理】 为掌握各型缺氧的特点并观察其对机体的影响，本实验通为掌握各型缺氧的特点并观察其对机体的影响，本实验通 过制造乏氧环境，制造过制造乏氧环境，制造CO中毒环境，腹腔注射氰化钾的方法中毒环境，腹腔注射氰化钾的方法 复制复制低张性低张性，血液性血液性和和组织中毒性缺氧组织中毒性缺氧动物模型。动物模型。 观察不同类型缺氧中呼吸的反应和皮肤、粘膜及内脏的颜观察不同类型缺氧中呼吸的反应和皮肤、粘膜及内脏的颜 色变化，
2、从而掌握缺氧的分类和特点，同时了解不同类型缺氧色变化，从而掌握缺氧的分类和特点，同时了解不同类型缺氧 的解救方法。的解救方法。 2020/4/27 缺氧 3 【实验对象实验对象】 昆明种成年小鼠昆明种成年小鼠1313只，体重只，体重20202222克，雌雄不拘；克，雌雄不拘； 2020/4/27 缺氧 4 【实验步骤与观察项目实验步骤与观察项目】 1低张性缺氧低张性缺氧 取小鼠取小鼠3只，分别置于盛有钠石灰的只，分别置于盛有钠石灰的3个广口瓶内个广口瓶内 2020/4/27 缺氧 5 【实验步骤与观察项目实验步骤与观察项目】 钠石灰的作用机制钠石灰的作用机制 钠石灰（钠石灰（NaOH CaO）
3、是一种粉红色颗粒，具有吸收）是一种粉红色颗粒，具有吸收CO2的功能：的功能： NaOH CaO+ CO2 Na2CO3+CaCO3+H2O 钠石灰用于吸收瓶中钠石灰用于吸收瓶中CO2以排除以排除CO2的干扰。的干扰。 2020/4/27 缺氧 6 【实验步骤与观察项目实验步骤与观察项目】 1低张性缺氧低张性缺氧 取小鼠取小鼠3只，分别置于盛有钠石灰的只，分别置于盛有钠石灰的3个广口瓶内，先不加橡皮塞，个广口瓶内，先不加橡皮塞， 观察并记录其正常指标。观察并记录其正常指标。 将其中将其中2个广口瓶用橡皮塞塞紧，另一个不加橡皮塞作为正常对照，个广口瓶用橡皮塞塞紧，另一个不加橡皮塞作为正常对照， 每
4、隔每隔2min重复观察并记录各指标变化。重复观察并记录各指标变化。 当密闭在瓶内的当密闭在瓶内的2只小鼠只小鼠 R 10次次/10s以下或痉挛抽搐时，立即抢救。以下或痉挛抽搐时，立即抢救。 另一只不予救治，直至死亡。另一只不予救治，直至死亡。 行颈椎脱臼处死小鼠，解剖。观察内脏颜色变化。行颈椎脱臼处死小鼠，解剖。观察内脏颜色变化。 HbCO定性试验。定性试验。 2020/4/27 缺氧 7 【实验步骤与观察项目实验步骤与观察项目】 2. 组织性缺氧组织性缺氧 取小鼠取小鼠2只，只，称重称重后观察并记录其正常指标。后观察并记录其正常指标。 抽取亚硝酸钠、硫代硫酸钠各抽取亚硝酸钠、硫代硫酸钠各0.
5、1ml/10g备用。备用。 2只小鼠腹腔注射氰化钾只小鼠腹腔注射氰化钾0.1ml/10g，每隔，每隔20s重复观察并记录上述指标，重复观察并记录上述指标， 并与正常对照组小鼠进行比较。并与正常对照组小鼠进行比较。 其中一只腹腔先后快速注入亚硝酸钠和硫代硫酸钠进行抢救，若无明显其中一只腹腔先后快速注入亚硝酸钠和硫代硫酸钠进行抢救，若无明显 好转可再注射一次硫代硫酸钠。另一只不予救治，直至死亡。好转可再注射一次硫代硫酸钠。另一只不予救治，直至死亡。 处死解剖，观察内脏颜色变化。处死解剖，观察内脏颜色变化。 HbCO定性试验。定性试验。 2020/4/27 缺氧 8 【实验步骤与观察项目实验步骤与观
6、察项目】 3. 血液性缺氧血液性缺氧 取小鼠取小鼠2只，分别置于只，分别置于2个广口瓶内，观察并记录其记录其正常指标。个广口瓶内，观察并记录其记录其正常指标。 将将2个广口瓶用带有个广口瓶用带有2个通气管的橡皮塞塞紧，从个通气管的橡皮塞塞紧，从CO球囊抽取球囊抽取CO气体气体3ml 注入瓶内，每隔注入瓶内，每隔2min重复观察并记录上述指标，并与正常对照组小鼠进重复观察并记录上述指标，并与正常对照组小鼠进 行比较。行比较。 当密闭在瓶内的当密闭在瓶内的2只小鼠只小鼠R减至减至10次次/10s以下或痉挛抽搐时，取出其中一只以下或痉挛抽搐时，取出其中一只 抢救。另一只则不予救治，直至死亡。抢救。另
7、一只则不予救治，直至死亡。 处死解剖，观察内脏颜色变化。处死解剖，观察内脏颜色变化。 HbCO定性试验。定性试验。 2020/4/27 缺氧 9 【实验步骤与观察项目实验步骤与观察项目】 碳氧血红蛋白（碳氧血红蛋白（HbCO）定性试验）定性试验 原理原理 HbCO呈樱桃红色，对碱的抵抗力较正常血红蛋白强，在呈樱桃红色，对碱的抵抗力较正常血红蛋白强，在5%NaOH 溶液中不易褪色。溶液中不易褪色。 方法方法 在白瓷反应板上的小凹槽内滴上在白瓷反应板上的小凹槽内滴上5%NaOH 1-2滴，剪开小鼠心脏，滴，剪开小鼠心脏， 用滴管取血加入小凹槽内的用滴管取血加入小凹槽内的NaOH溶液中，轻轻混匀，如
8、血液中有溶液中，轻轻混匀，如血液中有HbCO， 则血液仍呈樱桃红色，若血液中无则血液仍呈樱桃红色，若血液中无HbCO，则血液褪色为棕黄色。，则血液褪色为棕黄色。 樱桃红樱桃红 棕黄色棕黄色 2020/4/27 缺氧 10 【实验结果分析实验结果分析】 2020/4/27 缺氧 11 【实验结果分析实验结果分析】 1. 低张性缺氧低张性缺氧 肺通气量增加是急性低张性缺氧的最重要代偿反应。肺通气量增加是急性低张性缺氧的最重要代偿反应。 PaO2 60-100mmHg时，肺通气量无变化。时，肺通气量无变化。 PaO2 60mmHg 刺激劲动脉体和主动脉体的外周化学感受器，冲动经窦神刺激劲动脉体和主动
9、脉体的外周化学感受器，冲动经窦神 经和迷走神经传入延髓，反射性地引起呼吸加深加快。经和迷走神经传入延髓，反射性地引起呼吸加深加快。 PaO2 30mmHg，直接抑制呼吸中枢，呼吸变浅变慢。，直接抑制呼吸中枢，呼吸变浅变慢。 随着缺氧的时间增加，小鼠即出现呼吸逐渐减弱直至停止死亡。随着缺氧的时间增加，小鼠即出现呼吸逐渐减弱直至停止死亡。 2020/4/27 缺氧 12 【实验结果分析实验结果分析】 1. 低张性缺氧低张性缺氧 通常毛细血管中脱氧通常毛细血管中脱氧Hb的平均浓度为的平均浓度为2.6g/dl。 低张性缺氧时，动脉血与静脉血的低张性缺氧时，动脉血与静脉血的HbO2浓度降低，毛细血管中浓
10、度降低，毛细血管中HbO2 必然减少，脱氧必然减少，脱氧Hb浓度增加。浓度增加。 毛细血管中脱氧毛细血管中脱氧Hb平均浓度增加到平均浓度增加到5g/dl以上，可使皮肤与粘膜呈青紫以上，可使皮肤与粘膜呈青紫 色，称为色，称为发绀发绀。 2020/4/27 缺氧 13 【实验结果分析实验结果分析】 2. 血液性缺氧血液性缺氧 CO与与Hb 的亲和力比的亲和力比O2 与与Hb 的亲和力高的亲和力高210 倍倍 ，HbCO 不能与不能与O2 结结 合，同时还可抑制红细胞的糖酵解，使合，同时还可抑制红细胞的糖酵解，使2,3-DPG生成减少，氧离曲线左生成减少，氧离曲线左 移，移，HbO2中的中的O2 不
11、易释放，从而加重组织缺氧。不易释放，从而加重组织缺氧。 动脉血含过多的动脉血含过多的HbCO，其皮肤、黏膜呈，其皮肤、黏膜呈樱桃红色樱桃红色。 CO中毒性缺氧属中毒性缺氧属等张性缺氧等张性缺氧，呼吸系统的代偿不明显，小鼠的呼吸逐，呼吸系统的代偿不明显，小鼠的呼吸逐 渐减弱直至停止死亡。渐减弱直至停止死亡。 2020/4/27 缺氧 14 【实验结果分析实验结果分析】 3. 组织中毒性缺氧组织中毒性缺氧 KCN为剧毒，由于氰化物中的氰基与氧化型细胞色素氧化酶中的为剧毒，由于氰化物中的氰基与氧化型细胞色素氧化酶中的Fe3+结合，结合， 形成氰化高铁细胞色素氧化酶（形成氰化高铁细胞色素氧化酶（cyt
12、aa3Fe3+-CN），阻碍其还原为还原型细），阻碍其还原为还原型细 胞色素氧化酶（胞色素氧化酶（cytaa3Fe2+），从而使整个呼吸链的电子传递无法进行，组），从而使整个呼吸链的电子传递无法进行，组 织利用氧障碍，毛细血管中氧合血红蛋白高于正常，故皮肤、粘膜、肝脏织利用氧障碍，毛细血管中氧合血红蛋白高于正常，故皮肤、粘膜、肝脏 呈玫瑰红色。呈玫瑰红色。 KCN 2020/4/27 缺氧 15 【实验结果分析实验结果分析】 3. 组织中毒性缺氧组织中毒性缺氧 KCN cytaa3Fe3+ -CN e cytaa3Fe2+ cytaa3Fe3+ Hb Fe2+ Hb Fe3+ NaNO2 2020/4/27 缺氧 16 【实验结果分析实验结果分析】 3. 组织中毒性缺氧组织中毒性缺氧 cytaa3Fe3+ Hb Fe2+ Hb Fe3+ NaNO2 Hb Fe3+ -CN NaSCN（硫氰酸钠）硫氰酸钠） Na2S2O3 e cytaa3Fe2+ cytaa3Fe3+
