1、2023-1-31XX版药典与2020版微生物对比XX版药典与版药典与2020版微生版微生物对比物对比XX版药典与2020版微生物对比 起草的指导思想起草的指导思想一、以科学发展观为统领，服务于资源节约型社会、一、以科学发展观为统领，服务于资源节约型社会、环境友好型社会的要求；落实科学监管理念，环境友好型社会的要求；落实科学监管理念，着着力解决发展中的问题。力解决发展中的问题。二、与时俱进，广泛吸纳先进技术与成果；坚持自二、与时俱进，广泛吸纳先进技术与成果；坚持自主与创新；积极推进药品标准化战略，主与创新；积极推进药品标准化战略，提高我国提高我国药品标准总体水平，着力提升药品标准总体水平，着力
2、提升中国药典中国药典在国在国际社会中的地位和作用，提高综合竞争力，际社会中的地位和作用，提高综合竞争力，促进促进医药产业的健康发展，为构建社会主义和谐社会医药产业的健康发展，为构建社会主义和谐社会作出贡献。作出贡献。XX版药典与2020版微生物对比 2010年版无菌检查年版无菌检查法法增修订内容增修订内容XX版药典与2020版微生物对比 一、进一步确定了无菌检查法的定义一、进一步确定了无菌检查法的定义：无菌检查法系用于检查要求无菌的药品、医疗器具、无菌检查法系用于检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。一种方法。二、进一步明确了无
3、菌检查保障二、进一步明确了无菌检查保障 1、检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，但采用的措施不得影响微生物的生长。但采用的措施不得影响微生物的生长。2、无菌检查要进行环境检测无菌检查要进行环境检测增加了增加了日常检验还需进日常检验还需进行环境检测。行环境检测。2、无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过、无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。无菌技术的培训。XX版药典与2020版微生物对比 三、培养基增修订内容删去删去硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的使用范围的使用范围(用于培养好氧
4、菌、厌氧菌及用于用于培养好氧菌、厌氧菌及用于培养真菌培养真菌)删去删去选择性培养基使用的表面活性剂种类选择性培养基使用的表面活性剂种类对氨对氨基苯甲酸、聚山梨酯基苯甲酸、聚山梨酯-80等等。理由理由 经验证试验选择适宜的中和剂、灭活剂经验证试验选择适宜的中和剂、灭活剂和表面活性剂和表面活性剂XX版药典与2020版微生物对比 培养基适用性检查增修订内容培养基适用性检查增修订内容3、培养基灵敏度试验、培养基灵敏度试验 删除删除 菌悬液制备中黑曲霉菌悬液的制菌悬液制备中黑曲霉菌悬液的制备备“（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管）过滤菌丝的无菌毛细吸管
5、）”修改为修改为“用用适宜的方法吸出孢子悬液适宜的方法吸出孢子悬液”。增加增加在稀释液在稀释液0.9%无菌氯化钠溶液中无菌氯化钠溶液中加加入入0.05v/v）聚山梨酯）聚山梨酯80。XX版药典与2020版微生物对比 四、试验稀释液、冲洗液增修订为四、试验稀释液、冲洗液增修订为 增加增加根据供试品的特性，可选用其他根据供试品的特性，可选用其他经经验证过验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。试验中使用的中和剂、灭活剂和表面活试验中使用的中和剂、灭活剂和表面活性剂除证明其有效性外还应证明对污染的性剂除证明其有效性外还应证明对污染的微生物微生物无影响无影响修改修改为无毒
6、性。为无毒性。XX版药典与2020版微生物对比五、方法验证试验增修订内容五、方法验证试验增修订内容试验菌株试验菌株 删除删除铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌增加增加大肠大肠埃希菌及大肠埃希菌菌液的制备埃希菌及大肠埃希菌菌液的制备(同金黄同金黄色葡萄球菌色葡萄球菌)。薄膜过滤法薄膜过滤法 供试品用量供试品用量 将规定量将规定量供供试品试品 按薄膜过滤法过滤按薄膜过滤法过滤 修改为修改为取每种培取每种培养基规定接种的供试品总量。养基规定接种的供试品总量。XX版药典与2020版微生物对比 六六、供试品的无菌检查增修订内容供试品的无菌检查增修订内容检验量检验量 直接接种法直接接种法除另有规定外，每份培养基接种
7、除另有规定外，每份培养基接种的供试品量按表的供试品量按表2、表、表3规定规定删除删除采用直接接采用直接接种法时的规定。种法时的规定。阴性对照阴性对照 无菌试验中若使用表面活性剂等应证明其有无菌试验中若使用表面活性剂等应证明其有效性且对微生物生长无影响效性且对微生物生长无影响修改为修改为无毒性。无毒性。XX版药典与2020版微生物对比 薄膜过滤法薄膜过滤法 增加了增加了抗生素供试品滤膜选择的指导抗生素供试品滤膜选择的指导应选应选择择低吸附的滤器及滤膜。低吸附的滤器及滤膜。若需要冲洗滤膜若需要冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量一般为每张滤膜每次冲洗量一般为100ml，且冲洗量不宜过大且冲洗量不宜过大修改
8、为修改为总冲洗量不总冲洗量不得超过得超过1000ml。水溶液供试品水溶液供试品 含抑菌成分需用适量的冲洗液冲洗膜含抑菌成分需用适量的冲洗液冲洗膜修改为修改为所用所用的冲洗量的冲洗量、冲洗方法同方法验证试验冲洗方法同方法验证试验.XX版药典与2020版微生物对比 装有药物的注射器供试品装有药物的注射器供试品 取规定量，取规定量，删去删去装上无菌针头装上无菌针头.修改为修改为排出排出注射器中的内容物至无菌容器中，若需要可注射器中的内容物至无菌容器中，若需要可吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，或非水吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，或非水溶性制剂供试品项下方法操作。溶性制剂供试品项下方法操作。无菌气雾剂
9、供试品无菌气雾剂供试品 供试液的制备将供试品置冰室供试液的制备将供试品置冰室修改为修改为置至少置至少 -20的冷冻室约的冷冻室约1小时。小时。XX版药典与2020版微生物对比直接接种法直接接种法删除删除内酰胺类或磺内酰胺类或磺氨类供试品。氨类供试品。XX版药典与2020版微生物对比表1、表2、表3增修订表表1（第3列）接种每种培养基改为接种每种培养基改为所需所需的最少检验数量的最少检验数量 表表2（表题）上市抽验样品（液体制剂）的最少检验数量（表题）上市抽验样品（液体制剂）的最少检验数量修改为修改为液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量数量第二
10、列每支样品接入每管培养基的最少样品量第二列每支样品接入每管培养基的最少样品量修改为修改为每每支供试品接入每管培养基的最少样品量支供试品接入每管培养基的最少样品量第三列最少检验数量（瓶或支）第三列最少检验数量（瓶或支）1 全量 0 修改修改为为供试品最少检验数量（瓶或支）供试品最少检验数量（瓶或支）0 注注 每种培养基各接种支供试品每种培养基各接种支供试品修改为修改为若供试品每个若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍验数量加倍。XX版药典与2020版微生物对比表表3（表题）将上市抽验样品（固体制剂）的最少检验（表题）
11、将上市抽验样品（固体制剂）的最少检验量量修改为修改为固体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验固体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量数量”第三列最少检验数量、第三列最少检验数量、1 全量 0 修改为修改为供试品最少检验数量（瓶或支）供试品最少检验数量（瓶或支）0 注注 每种培养基接种支培养基每种培养基接种支培养基修改为修改为若供试品每若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。少检验数量加倍。XX版药典与2020版微生物对比 微生物限度检查增修定内容微生物限度检查增修定内容XX版药典与2020版微生物对比 修改内
12、容修改内容 1、培养条件、培养条件 控制菌培养温度控制菌培养温度3537修修改为改为3035(细菌、控制菌培养温度相细菌、控制菌培养温度相同同)。修改理由修改理由 此温度适于所有中温菌生长，一些高此温度适于所有中温菌生长，一些高温菌在该温度下也可以生长温菌在该温度下也可以生长。XX版药典与2020版微生物对比 增修订内容增修订内容 2、结果报告、结果报告 特殊品种可以最小包装单位报告特殊品种可以最小包装单位报告 特殊品种包括特殊品种包括 药典规定药典规定微量包装微量包装药品的检验量可以酌减。药品的检验量可以酌减。还有一些还有一些贵重贵重药品也应考虑检验量。药品也应考虑检验量。XX版药典与202
13、0版微生物对比3、检验量增修订内容、检验量增修订内容 中药膜剂检验量中药膜剂检验量50 cm2 修改为修改为100cm2。沙门菌检验量沙门菌检验量修改为修改为检验量为检验量为20 g或或20ml并并注明（其中注明（其中10 g用于阳性对照）。用于阳性对照）。XX版药典与2020版微生物对比 4、供试液的制备增修订内容、供试液的制备增修订内容 供试品检查时使用表面活性剂应证明其对供试品检查时使用表面活性剂应证明其对 微生物微生物生长和存活无影响生长和存活无影响修改为修改为无毒性无毒性。供试液的制备若需加温时，可采用其他经供试液的制备若需加温时，可采用其他经 验证的方法，但应均匀加热，且温度不应超
14、验证的方法，但应均匀加热，且温度不应超 过过45。XX版药典与2020版微生物对比 新增贴剂供试液制备新增贴剂供试液制备 供试液的制备供试液的制备 经验证方法制备成供试液在无菌环境进行。经验证方法制备成供试液在无菌环境进行。避免粘贴面粘合在一起。避免粘贴面粘合在一起。置于含有表面活性剂（如聚山梨酯置于含有表面活性剂（如聚山梨酯80或卵磷或卵磷脂）的稀释剂中，制成供试液。脂）的稀释剂中，制成供试液。充分振摇。充分振摇。也可采用以其他适宜的方法制备成供试液。也可采用以其他适宜的方法制备成供试液。XX版药典与2020版微生物对比具抑菌活性的供试品增修订内容具抑菌活性的供试品增修订内容 删除删除应应消
15、除供试液的抑菌活性消除供试液的抑菌活性修改为修改为当供试品具当供试品具有抑菌活性时，应尽量选择操作简便、快速的方有抑菌活性时，应尽量选择操作简便、快速的方法，应避免损伤供试品中污染的微生物。在供试法，应避免损伤供试品中污染的微生物。在供试品溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过滤品溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过滤法。法。XX版药典与2020版微生物对比 离心沉淀集菌法离心沉淀集菌法 两次离心修改为一次离心；500转/分离心，不超过3分钟，取全部上清液用于检查。影响因素 供试品 污染菌特性 适用范围 仅使用于微生物限度检查供试液的制备。尽量避免使用，不可使用快速离心。XX版药典与2020
16、版微生物对比细菌、霉菌及酵母菌计数增修订内容细菌、霉菌及酵母菌计数增修订内容 新增新增计数培养基的适用性检查计数培养基的适用性检查菌种菌种 大肠埃希菌（大肠埃希菌（Escherichia coli）CMCC（B）44102 金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CMCC（B）26 003 枯草芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CMCC（B）63 501 白色念珠菌（白色念珠菌（Candida albicans）CMCC（F）98 001 黑曲霉黑曲霉（Aspergillus niger）CMCC（F）98 003 XX版药典与20
17、20版微生物对比 增加了增加了菌悬液的制备及保存条件。菌悬液的制备及保存条件。菌悬液制备后在室温下放置应在菌悬液制备后在室温下放置应在2小小时内使用，若保存在时内使用，若保存在28可以在可以在24小小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 28，在验证过的贮存期内使用，每株试，在验证过的贮存期内使用，每株试验菌平行制备验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，按个平皿，混匀，凝固，按规定条件培养计数，同时用相应的对照培规定条件培养计数，同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。养基替代被检培养基进行上述试验。增加了增加了对照培养。对照培养。XX版药典与2020版微生物
18、对比 2.新增新增常见干扰物的中和剂和灭活方法常见干扰物的中和剂和灭活方法 参见参见 表表1常见干扰物的中和剂或灭活方法常见干扰物的中和剂或灭活方法XX版药典与2020版微生物对比 6、供试品检查增修订内容、供试品检查增修订内容 XX版药典与2020版微生物对比 平皿法平皿法 删去删去采用平皿法进行菌数测定采用平皿法进行菌数测定时，连续时，连续23个稀释级的供试液。个稀释级的供试液。修改为修改为按计数方法的验证试验确认的程序按计数方法的验证试验确认的程序进行供试液制备。进行供试液制备。XX版药典与2020版微生物对比 培养时间修改内容培养时间修改内容 除另有规定外，细菌培养除另有规定外，细菌培
19、养48小时小时改为改为3天天，霉菌、酵母菌培养，霉菌、酵母菌培养72小时小时改为改为 5天天，必要时，可适当延长培养必要时，可适当延长培养时间至时间至7天进行菌落计数并报告。天进行菌落计数并报告。XX版药典与2020版微生物对比菌数报告规则增修订内容菌数报告规则增修订内容 若同稀释级两个平板的菌落平均数不若同稀释级两个平板的菌落平均数不小于小于15，则两个平板的菌落数不能相差，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。倍或以上。细菌、酵母菌和霉菌平均菌落数在细菌、酵母菌和霉菌平均菌落数在30300、30100之间的稀释级之间的稀释级修改修改为为选取菌落数小于选取菌落数小于300cfu和和100cf
20、u的稀的稀释级作为菌数报告的依据。释级作为菌数报告的依据。XX版药典与2020版微生物对比薄膜过滤法增修订内容薄膜过滤法增修订内容 新增内容新增内容 采用其它直径的滤膜，冲洗量采用其它直径的滤膜，冲洗量应相应的进行调整（如使用膜直径增大冲应相应的进行调整（如使用膜直径增大冲洗液量也应相应增加，可保证冲洗液覆盖洗液量也应相应增加，可保证冲洗液覆盖整个滤膜）。整个滤膜）。删去删去每片滤膜的总过滤量不宜过大，每片滤膜的总过滤量不宜过大，修改修改为为总冲洗量不得超过总冲洗量不得超过1000ml。XX版药典与2020版微生物对比 7、控制菌检查增修订、控制菌检查增修订增加控制菌检查用培养基的适用性检查；
21、增加控制菌检查用培养基的适用性检查；检查项目包括检查项目包括促生长、抑制及指示能力促生长、抑制及指示能力检查检查参照表参照表2XX版药典与2020版微生物对比 新增培养基适用性检查方法新增培养基适用性检查方法液体培养基促生长能力检查。液体培养基促生长能力检查。固体培养基促生长能力检查。固体培养基促生长能力检查。培养基抑制能力检查培养基抑制能力检查。液体培养基指示能力检查。液体培养基指示能力检查。固体培养基指示能力检查。固体培养基指示能力检查。试验结果与对照培养基比较试验结果与对照培养基比较XX版药典与2020版微生物对比控制菌检查用培养基的适用性检查控制菌检查用培养基的适用性检查控制菌检查用培
22、养基的促生长、抑制及指示能力检查控制菌检查用培养基的促生长、抑制及指示能力检查控制菌检查控制菌检查 培养基培养基 特性特性 试验菌株试验菌株大肠埃希菌大肠埃希菌 胆盐乳糖胆盐乳糖 促生长能力促生长能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 MUG 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 曙红亚甲蓝曙红亚甲蓝 或麦康凯或麦康凯 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌大肠菌群大肠菌群 乳糖胆盐乳糖胆盐 促生长能力促生长能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 乳糖发酵乳糖发酵 促生长能力促
23、生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 曙红亚甲蓝曙红亚甲蓝 或麦康凯或麦康凯 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠大肠埃希菌埃希菌 XX版药典与2020版微生物对比沙门菌沙门菌 营养肉汤营养肉汤 促生长能力促生长能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 四硫磺酸钠亮绿四硫磺酸钠亮绿 促生长能力促生长能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 胆盐硫乳琼脂或沙门、胆盐硫乳琼脂或沙门、志贺氏属琼脂培养基志贺氏属琼脂培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 曙红亚甲蓝琼脂曙红亚甲蓝琼脂 或麦康凯琼脂
24、或麦康凯琼脂 培养基培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 三糖铁琼脂三糖铁琼脂 培养基培养基 指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌铜绿假单铜绿假单 胆盐乳糖胆盐乳糖 促生长能力促生长能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌胞菌胞菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 溴化十六烷基三溴化十六烷基三 促生长能力促生长能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 甲铵琼脂甲铵琼脂 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 绿脓菌素测定绿脓菌素测定 用培养基用培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌金黄色葡金黄色葡 亚碲酸盐肉
25、汤亚碲酸盐肉汤 促生长能力促生长能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 萄球菌萄球菌 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 卵黄氯化钠琼脂促生长能力卵黄氯化钠琼脂促生长能力+指示能力指示能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 或甘露醇盐琼脂或甘露醇盐琼脂 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌梭菌梭菌 梭菌增菌培养基梭菌增菌培养基 促生长能力促生长能力 生孢梭菌生孢梭菌 哥伦比亚琼脂哥伦比亚琼脂 促生长能力促生长能力 生孢梭菌生孢梭菌 白色念白色念 沙氏葡萄糖肉汤沙氏葡萄糖肉汤 促生长能力促生长能力 白色念珠菌白色念珠菌珠菌珠菌 沙氏葡萄糖琼脂沙氏葡萄糖琼脂 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力
26、白色念珠菌白色念珠菌 念珠菌显色培养基念珠菌显色培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 白色念珠菌白色念珠菌 吐温吐温80玉米琼脂玉米琼脂 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 白色念珠菌白色念珠菌XX版药典与2020版微生物对比控制菌检查法增修订内容控制菌检查法增修订内容疑似致病菌的确证疑似致病菌的确证微生物控制菌检查中没有规定进一步确证疑微生物控制菌检查中没有规定进一步确证疑似致病菌的方法。选择已被认可的菌种鉴定方似致病菌的方法。选择已被认可的菌种鉴定方法。如法。如伯杰氏细菌鉴定手伯杰氏细菌鉴定手。控制菌检查方法验证控制菌检查方法验证 删去删去阴性菌对照组。阴性菌对照组。XX版药
27、典与2020版微生物对比 大肠菌群大肠菌群检查用胆盐乳糖培养基检查用胆盐乳糖培养基改为改为乳糖胆盐。乳糖胆盐。改梭菌检查用改梭菌检查用庖肉培养基为梭菌增庖肉培养基为梭菌增菌培养基。菌培养基。改梭菌改梭菌培养时间培养时间7296小时为小时为48小时小时。XX版药典与2020版微生物对比 增加了白色念珠菌检验方法增加了白色念珠菌检验方法 增菌培养增菌培养 沙氏葡萄糖肉汤培养基。沙氏葡萄糖肉汤培养基。分离培养分离培养 划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上。基平板上。XX版药典与2020版微生物对比鉴定试验鉴定试验 典型菌落典型菌落 沙氏葡萄糖琼脂培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基
28、 菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓 酵母气味，时间稍久则菌落增大，颜色变酵母气味，时间稍久则菌落增大，颜色变 深、质地变硬或有皱摺。深、质地变硬或有皱摺。念珠菌显色培养基念珠菌显色培养基 菌落呈绿色或翠绿色菌落生长。菌落呈绿色或翠绿色菌落生长。XX版药典与2020版微生物对比 确认试验确认试验取取1%吐温吐温80-玉米琼脂玉米琼脂 培养基培养基培养物进行染色，镜检及芽管培养物进行染色，镜检及芽管 试验。试验。结果判断结果判断非革兰阳性菌，显微镜下未见厚膜孢子、假菌非革兰阳性菌，显微镜下未见厚膜孢子、假菌丝、芽管判未检出白色念珠菌。丝、芽管判未检出白色念珠
29、菌。XX版药典与2020版微生物对比 新增微生物限度检查法指导原则新增微生物限度检查法指导原则一、抑菌剂效力检查法指导原则一、抑菌剂效力检查法指导原则二、药品微生物检验替代方法验证指二、药品微生物检验替代方法验证指 导原则导原则三、微生物限度检查法应用指导原则三、微生物限度检查法应用指导原则四、药品微生物实验室规范指导原则四、药品微生物实验室规范指导原则XX版药典与2020版微生物对比 一、抑菌剂效力检查法指导原则抑菌剂效力检查法指导原则 指导原则的目的指导原则的目的 是为测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评是为测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评价价最终产品的抑菌效力最终产品的抑菌效
30、力及生产企业在制剂研及生产企业在制剂研发阶段抑发阶段抑菌剂的确定菌剂的确定提供指导。提供指导。为防止药品由于微生物污染而引起变质，对服用者为防止药品由于微生物污染而引起变质，对服用者造成不良反应，在药品生产过程中加入一定剂量的抑造成不良反应，在药品生产过程中加入一定剂量的抑菌剂。菌剂。抑菌剂不能用于替代药品生产的抑菌剂不能用于替代药品生产的GMP管理，不能作管理，不能作为非灭菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为非灭菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。XX版药典与2020版微生物对比使用范围及原则使
31、用范围及原则 使用范围使用范围 如果药物本身不具有充分如果药物本身不具有充分的抗菌活性，应根据制剂特性添加适宜的抗菌活性，应根据制剂特性添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏和使的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏和使用过程中可能发生的微生物污染和繁殖，用过程中可能发生的微生物污染和繁殖，对患者造成伤害。对患者造成伤害。XX版药典与2020版微生物对比 使用原则使用原则 所有抑菌剂都所有抑菌剂都具有一定的毒性具有一定的毒性，添加抑，添加抑菌剂时应注意以下原则菌剂时应注意以下原则:抑菌剂的用量应为抑菌剂的用量应为最低有效量最低有效量。具有抗菌活性的制剂应具有抗菌活性的制剂应确认其抗菌效力。确认其抗菌效
32、力。XX版药典与2020版微生物对比 应验证最终容器中的抑菌剂效力在效应验证最终容器中的抑菌剂效力在效期内不因贮藏条件而降低。期内不因贮藏条件而降低。本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准用于包装未启开的成品制剂。准用于包装未启开的成品制剂。XX版药典与2020版微生物对比 抑菌剂抑菌效力的测定抑菌剂抑菌效力的测定 供试品的分类供试品的分类 分为四类，但对于一些抗酸性制剂和分为四类，但对于一些抗酸性制剂和含活生物制剂应考虑会降低有益菌的含活生物制剂应考虑会降低有益菌的生物活性。见表生物活性。见表1XX版药典与2020版微生物对比 表表1 产品分类产品分类 类别类别
33、药品药品 1 类类 注射剂、注射剂、其他非肠道制剂，其他非肠道制剂，包括包括 乳剂、耳用制剂、无菌鼻用制剂及眼乳剂、耳用制剂、无菌鼻用制剂及眼 用制剂用制剂 2 类类 局部给药制剂、非灭菌鼻用制剂及用于局部给药制剂、非灭菌鼻用制剂及用于 黏膜的乳剂黏膜的乳剂 3 类类 口服非固体制剂（非抗酸制剂）口服非固体制剂（非抗酸制剂）4 类类 非固体抗酸制剂非固体抗酸制剂XX版药典与2020版微生物对比 培养基培养基 培养基的制备培养基的制备 胰酪胨大豆肉汤琼脂培养基胰酪胨大豆肉汤琼脂培养基 胰酪胨大豆肉汤培养基胰酪胨大豆肉汤培养基 沙氏葡萄糖肉汤培养基沙氏葡萄糖肉汤培养基 培养基的适用性检查培养基的适
34、用性检查 同控制菌同控制菌培养基培养基 的适用性检查的适用性检查XX版药典与2020版微生物对比抑菌剂效力测定方法抑菌剂效力测定方法 菌种菌种 菌液制备菌液制备 菌种菌种 同培养基适用性检查，制剂中常见的污同培养基适用性检查，制剂中常见的污 染微生物也可作为试验菌。染微生物也可作为试验菌。菌液制备菌液制备 制成每制成每1ml含菌数约为含菌数约为108cfu的菌悬的菌悬液。液。供试品接种影响因素给予指导供试品接种影响因素给予指导 容器的材质、形状、体积、封口方式及容器的容器的材质、形状、体积、封口方式及容器的PH等分别给予了指导。等分别给予了指导。XX版药典与2020版微生物对比 接种菌量接种菌
35、量 接种菌液的体积不得超过供试接种菌液的体积不得超过供试品体积的品体积的0.5%1%。放置放置 2025，避光贮存，贮存温度，避光贮存，贮存温度的变化应尽可能控制在最小范围，并防止的变化应尽可能控制在最小范围，并防止被污染。被污染。XX版药典与2020版微生物对比 存活菌数测定存活菌数测定 采用经验证的方法进行试验，计算采用经验证的方法进行试验，计算1ml(g)供试品各试验菌所得的菌数及供试品各试验菌所得的菌数及各间隔时间的菌数，并换算成各间隔时间的菌数，并换算成lg值。值。XX版药典与2020版微生物对比 结果判断结果判断 结果符合表结果符合表3要求，可判断要求，可判断该产品抑菌效力符合规定
36、。该产品抑菌效力符合规定。XX版药典与2020版微生物对比 表表3 抑菌剂抑菌效力判断标准抑菌剂抑菌效力判断标准 1 类类 供供 试试 品品 细菌细菌 7天菌数下降不少于天菌数下降不少于1.0 lg，14天菌数下降不少于天菌数下降不少于 3.0lg,14天到天到28天菌数不增加。天菌数不增加。真菌真菌 与初始值比，与初始值比，7、14、28天菌数均不增加。天菌数均不增加。2 类类 供供 试试 品品 细菌细菌 14天菌数下降不少于天菌数下降不少于2.0 lg，14天到天到28天菌数不增加。天菌数不增加。真菌与初始值比，真菌与初始值比，14、28天菌数均不增加。天菌数均不增加。3 类类 供供 试试
37、 品品 细菌细菌 14天菌数下降不少于天菌数下降不少于1.0 lg，14天到天到28天菌数不增加。天菌数不增加。真菌真菌 与初始值比，与初始值比，14、28天菌数均不增加。天菌数均不增加。4 类类 供供 试试 品品 细菌，真菌细菌，真菌 与初始值比，与初始值比，14、28天菌数均不增加。天菌数均不增加。注：注：1、表中、表中“不增加不增加”是指对前一个测定时间，试验菌增加的数量是指对前一个测定时间，试验菌增加的数量 不超过不超过0.5 lg。2、0时菌数时菌数(初试值初试值)供试品加入试验菌，摇匀，立即取样检供试品加入试验菌，摇匀，立即取样检 查，培养，计数，为查，培养，计数，为0时菌数。时菌
38、数。XX版药典与2020版微生物对比 二、药品微生物检验替代方法验证指导原则二、药品微生物检验替代方法验证指导原则 目的目的 是为所采用的试验方法能否替代药典规定的是为所采用的试验方法能否替代药典规定的 方法用于药品微生物的检验提供指导。方法用于药品微生物的检验提供指导。在控制药品微生物质量中，需要采用替代方在控制药品微生物质量中，需要采用替代方 法法 时，应进行方法的验证，确认其时，应进行方法的验证，确认其应用效果应用效果 优于或等同于药典的方法。优于或等同于药典的方法。XX版药典与2020版微生物对比 微生物检验的类型及验证参数微生物检验的类型及验证参数 药品微生物检验方法主要分两种类型药
39、品微生物检验方法主要分两种类型 定性试验定性试验 定量试验定量试验 生物试验的特殊性生物试验的特殊性 抽样误差抽样误差 操作误差操作误差 稀释误差稀释误差 培养误差培养误差 计量误差计量误差 计数误差计数误差 药品质量标准分析方法验证指导原则不完全药品质量标准分析方法验证指导原则不完全 宜于微生物替代方法的验证。宜于微生物替代方法的验证。XX版药典与2020版微生物对比 表表1、不同微生物检验类型验证参数表不同微生物检验类型验证参数表 参数参数 定性检验定性检验 定量检验定量检验 准确度准确度 精密度精密度 专属性专属性 检测限检测限 定量限定量限 线性线性 范围范围 耐用性耐用性 重现性重现
40、性 注：注：表示需要验证的参数表示需要验证的参数 表示不需要验证的参数表示不需要验证的参数 逐项按替代方法验证的要求进行验证和评价以便操作者了逐项按替代方法验证的要求进行验证和评价以便操作者了解方法的关键操作点解方法的关键操作点XX版药典与2020版微生物对比替代方法验证的一般要求替代方法验证的一般要求 适用性验证前，对替代方法有一个全面的了解；适用性验证前，对替代方法有一个全面的了解；由替代方法的研发者提供，或由方法使用者完成。由替代方法的研发者提供，或由方法使用者完成。验证应至少使用验证应至少使用2 个批号的样品，每批样品应个批号的样品，每批样品应平行进行至少平行进行至少3 次独立实验。次
41、独立实验。在开展各参数验证时，除规定的菌株外，还应在开展各参数验证时，除规定的菌株外，还应根据替代方法及样品的特点增加相应的菌株。根据替代方法及样品的特点增加相应的菌株。XX版药典与2020版微生物对比 三、药品微生物限度检查法应用指导原则三、药品微生物限度检查法应用指导原则 目的目的 为更好的应用微生物限度检查法及限度标为更好的应用微生物限度检查法及限度标准的合理执行提供指导。准的合理执行提供指导。用途用途 用于判断非规定灭菌制剂及原料、辅料是用于判断非规定灭菌制剂及原料、辅料是否符合药典的规定，也可用于指导制剂、原料、否符合药典的规定，也可用于指导制剂、原料、辅料的微生物质量标准的制定，及
42、指导生产过辅料的微生物质量标准的制定，及指导生产过程中间产品微生物质量的监控。程中间产品微生物质量的监控。本指导原则将对标准和方法中的特定内容及标本指导原则将对标准和方法中的特定内容及标准的应用做进一步的说明。准的应用做进一步的说明。XX版药典与2020版微生物对比 1.微生物限度检查过程中，如需要使用微生物限度检查过程中，如需要使用表面活性剂、灭活剂及中和剂，表面活性剂、灭活剂及中和剂，应对其应对其用量、有效性、无毒性进行确认，无毒用量、有效性、无毒性进行确认，无毒性确认，试验的菌株应包括产品中可能性确认，试验的菌株应包括产品中可能污染的微生物。污染的微生物。XX版药典与2020版微生物对比
43、 2.检验方法的选择检验方法的选择 供试液制备应尽量选择微生物限度检查供试液制备应尽量选择微生物限度检查法中法中操作简便、快速的方法操作简便、快速的方法，且应避免损伤，且应避免损伤供试品中污染的微生物。供试品中污染的微生物。对于抑菌作用较强的供试品，在供试品对于抑菌作用较强的供试品，在供试品溶液性状允许的情况下，溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过应尽量选用薄膜过滤法进行试验。滤法进行试验。XX版药典与2020版微生物对比3.供试液制备供试液制备 本指导原则对离心沉淀法使用范围、方法及对本指导原则对离心沉淀法使用范围、方法及对检验结果影响的因素进行了分析和指导检验结果影响的因素进行了分析和指
44、导 4.验证试验存在的问题及处理方法验证试验存在的问题及处理方法 自药典收载方法验证以来在实施过程中存在一些自药典收载方法验证以来在实施过程中存在一些具体问题，对这些存在问题进行了指导；具体问题，对这些存在问题进行了指导；进行验证试验时，进行验证试验时，因没有适宜的方法消除供试因没有适宜的方法消除供试品中的抑菌作用而导致微生物回收的失败。品中的抑菌作用而导致微生物回收的失败。XX版药典与2020版微生物对比 处理方法处理方法 应采用能使微生物生长的更高稀释级应采用能使微生物生长的更高稀释级供试液进行方法验证试验供试液进行方法验证试验。若采用允许的最高稀释级供试液进行若采用允许的最高稀释级供试液
45、进行验证试验还存在一株或多株试验菌的回验证试验还存在一株或多株试验菌的回收率达不到要求。收率达不到要求。处理方法处理方法 应选择回收情况最接近要求应选择回收情况最接近要求的方法进行供试品的检测。的方法进行供试品的检测。XX版药典与2020版微生物对比在以上情况下，生产单位或研制单位在以上情况下，生产单位或研制单位应进行全面的风险评估以保证检验方法应进行全面的风险评估以保证检验方法的可靠性，从而保证产品质量。的可靠性，从而保证产品质量。XX版药典与2020版微生物对比.控制菌的确证控制菌的确证 没有规定进一步确证疑似致病菌的方没有规定进一步确证疑似致病菌的方法。仅规定若供试品检出疑似致病菌，法。
46、仅规定若供试品检出疑似致病菌，确证的方法应选择已被认可的菌种鉴确证的方法应选择已被认可的菌种鉴定方法。定方法。XX版药典与2020版微生物对比微生物限度标准微生物限度标准 该指导原则对标准执行中存在的问题进行了分该指导原则对标准执行中存在的问题进行了分析和指导；析和指导；明确了微生物限度标准使用范围明确了微生物限度标准使用范围 标准执行标准执行 必检项目必检项目原则性要求原则性要求 （丸剂、口服片剂、（丸剂、口服片剂、胶囊剂、颗粒剂），应对其被微生物污染的风胶囊剂、颗粒剂），应对其被微生物污染的风险进行评估。险进行评估。XX版药典与2020版微生物对比 用于手术、烧伤及严重创伤的局部给用于手术
47、、烧伤及严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法要求。药制剂应符合无菌检查法要求。用于创伤程度难以判断的局部给药制用于创伤程度难以判断的局部给药制剂，若没有证据证明药品不存在安全性剂，若没有证据证明药品不存在安全性风险则应符合无菌检查法要求。风险则应符合无菌检查法要求。眼用制剂应符合无菌检查法要求。眼用制剂应符合无菌检查法要求。XX版药典与2020版微生物对比 含动物类原药材粉的口服中药制剂要求不含动物类原药材粉的口服中药制剂要求不得检出沙门菌。其中的动物类原药材粉是指得检出沙门菌。其中的动物类原药材粉是指除蜂蜜、王浆、动物角、阿胶外的所有动物除蜂蜜、王浆、动物角、阿胶外的所有动物类原药材粉，如
48、牡蛎、珍珠等贝类，海蜇、类原药材粉，如牡蛎、珍珠等贝类，海蜇、冬虫夏草、人工牛黄等。冬虫夏草、人工牛黄等。制定合理、安全和严格的微生物限度标准制定合理、安全和严格的微生物限度标准 XX版药典与2020版微生物对比 四、药品微生物实验室规范指导原则四、药品微生物实验室规范指导原则 XX版药典与2020版微生物对比 目的目的 该指导原则用于指导药品微生物检验实验该指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。室的质量控制。药品微生物的检验的对象具特殊性药品微生物的检验的对象具特殊性；活的生物、活的生物、分布不均匀、重现性差分布不均匀、重现性差 必须使用经验证的检测方法并严格按照药品必须使用经验证
49、的检测方法并严格按照药品微生物实验室规范要求进行试验。微生物实验室规范要求进行试验。XX版药典与2020版微生物对比药品微生物实验室规范包括以下几个方面药品微生物实验室规范包括以下几个方面人员、培养基、菌种、实验室的布局和运行、人员、培养基、菌种、实验室的布局和运行、设备、文件、实验记录、结果的判断等。设备、文件、实验记录、结果的判断等。人员人员从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景学或相近专业知识的教育背景 XX版药典与2020版微生物对比 检验人员和管理人员培训检验人员和管理人员培训 进行岗前培训进行岗前培训 检验人员检验
50、人员技能培训技能培训熟悉相关检测熟悉相关检测 方法、程序、检测目的方法、程序、检测目的和结果评价。和结果评价。XX版药典与2020版微生物对比 管理人员管理人员 其专业技能和经验水平应与他们的职责范其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符。不断接受系统的教育与职责范围相围相符。不断接受系统的教育与职责范围相关的培训。关的培训。客观评估检验人员的能力，必要时对其进客观评估检验人员的能力，必要时对其进行再培训并重新评估。行再培训并重新评估。XX版药典与2020版微生物对比 培养基培养基是微生物试验的基础，直接影培养基是微生物试验的基础，直接影 响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、响微生物试验
