1、尿有形成分尿有形成分标标 准准 化化现状、问题、对策现状、问题、对策曾真尿液检验标准化目的v标准程序控制v结果准确v最少最少人为干预人为干预、人人为误差为误差尿液有形成分检验的标准问题尿液有形成分检验的标准问题 金标准金标准是什么？形态学镜检 问题问题：如何标准化 如何控制人为误差和错误尿常规的内容尿常规的内容尿液检验常规现状尿液检验常规现状理 学 检 验化 学 检 验有形成分镜检有形成分有形成分定量检验定量检验特检常规常规中尿液有形成分中尿液有形成分定性定性与与定量定量v临床需要v定量和定性有无差异化v人为误差干化学干化学应应 用用8 中华医学会检验分会1995年制定的尿液干化学镜检筛选指南
2、建议“尿液干化学检查结果为白细胞、白细胞、红细胞、亚硝酸盐、蛋白红细胞、亚硝酸盐、蛋白四项指标同时皆为阴性时，可视为尿内有形成分大致在正常范围内，可免除镜检，直接报告尿液内有形成大致在正常范围内”干化学干化学 能否取代镜检干化学不能替代镜检的原因v为化学成分检测v影响因素众多v许多有形成分不能检测 干化学筛选简单易行，但有一定数量假阴性，造成漏诊，假阳性颇多，不但造成复检率增加，在短时间要出大量报告困难，也给临床诊断思给临床诊断思路造成混乱路造成混乱。干化学替代镜检的结果干化学替代镜检的结果干化学替代镜检问题干化学替代镜检问题v弊大于利；v影响因素众多；v不能替代镜检；尿液有形成分分析标准化尿
3、液有形成分分析标准化现状、问题现状、问题离心镜检尿液检验标准化委员会文件尿液检验标准化委员会文件vECCLS：欧洲临床检验标准委员会vNCCLS：美国临床检验标准委员会JCCLS：日本国家临床检验标准委员会vCCCLS：中国临床检验标准委员会操作规程影响定量准确的主要问题影响定量准确的主要问题v离心沉淀不完全离心沉淀不完全v离心对有形成分破坏作用离心对有形成分破坏作用v操作误差大操作误差大v费时费力费时费力定量不准确离心和非离心尿液比较丛玉隆等 尿液细胞成份定量分析方法学研究中华医学检验杂志 2006年3期人工离心镜检方法的评价人工离心镜检方法的评价v定量定量 不准确不准确 结果显著偏低v定性
4、定性 理理 想想问题问题1、推广意义？2、是否所有尿液有形成分 都应定量？不离心尿液有形成分不离心尿液有形成分检验参考方法检验参考方法2003年实验血液学学会（年实验血液学学会（ISLH）提出了尿中颗粒计数参考方法。提出了尿中颗粒计数参考方法。（不离心尿液方法）（不离心尿液方法）主要内容如下主要内容如下:计数池计数池Fuchs-Rosenthal 计数盘：计数盘：2个计数池，个计数池，16大格；大格；每大格：每大格：1*1*0.2mm=0.2ul;总体积总体积：2*16*0.2=6.4ul；不离心尿液不离心尿液：不离心新鲜尿液标本充不离心新鲜尿液标本充池后静置沉淀；池后静置沉淀；低倍镜低倍镜（
5、10倍）：观察计数大型有形成倍）：观察计数大型有形成分（上皮细胞、管型）；分（上皮细胞、管型）；高倍镜高倍镜（40倍）：观察计数小型有形成倍）：观察计数小型有形成分（细胞、真菌、结晶等）；分（细胞、真菌、结晶等）；结结 果：果：以以“个个/ul”报告。报告。统计学精度统计学精度低倍低倍：（管型和上皮）至少计数50个，计数CV14%；高倍：高倍：（红、白细胞等）至少计数200个，计数CV7%；不离心尿液不离心尿液检测检测有形成分的标准化问题有形成分的标准化问题参考方法人工完成检验的可能性v6ul体积：人工计数不可能完成v即便可以完成，质量水分很大。仪器不离心尿液检测方法仪器不离心尿液检测方法非形
6、态学方法：非形态学方法：流式技术为代表形态学方法形态学方法 机器视觉技术为代表流式技术流式技术尿流式仪器尿流式仪器v传统流式技术：传统流式技术：日本：日本：UF-1000i流式技术优点流式技术优点v自动化检测仪器：1、节约人力成本 2、检测速度 60-70 test/小时v国外品牌优势；尿流式检测尿流式检测标准化问题标准化问题非特异性非特异性问题问题层流式技术层流式技术物镜不能拍摄到清晰图片仿形态学技术提供的红细胞仿形态学技术提供的红细胞（RBC）潘扬、衣鲁江苏州大学附二院检验科临床检验杂志2008年5期IQ200尿沉渣分析仪尿沉渣分析仪检测尿红细胞性能评价检测尿红细胞性能评价结论：对红细胞的
7、检测仍仅可作为对红细胞的检测仍仅可作为筛查，不能取代镜检筛查，不能取代镜检尿流式操作程序中补救措施流式检测阴性阴性阳性阳性镜检镜检报告报告干化学干化学镜检镜检 尿尿 流流 式式不同复核方式需要不同复核方式需要商榷商榷 问问 题题 流式+干化学=复核v流式的假阳性用干化学无法验证流式的假阳性用干化学无法验证v流式检测和干化学检测之间没有互补性流式检测和干化学检测之间没有互补性v两种检测方法均为非形态学方法两种检测方法均为非形态学方法化学流式过筛报 告理学 如何做到镜检复核不打折扣？流式结果流式结果+镜检复核镜检复核镜检自动化仪器镜检自动化仪器现状和标准化问题现状和标准化问题形态学镜检仪器形态学镜
8、检仪器镜检自动化仪器的优点镜检自动化仪器的优点v形态学方法：形态学方法：真实、可靠，符合方法学溯源v自动化：自动化：效率高、速度快60-180 tests/hv图像保持图像保持 可以共享、追溯、控制v减少人为操作误差，有利于标准化减少人为操作误差，有利于标准化镜检自动化仪器存在的问题镜检自动化仪器存在的问题 智能识别技术不同智能识别技术不同识别能力差异大识别能力差异大图像识别技术的形式图像识别技术的形式v第一代图像分析技术第一代图像分析技术图像对比技术 收集各类图像存贮，将未定图像与图像库内的图像对比来确定图像分类的技术 v第二代图像分析技术第二代图像分析技术光电检测技术 依据有形物质表面特征
9、在给定光照射后，由于表面差异，造成反射光不同，进而进行判断确定的技术 数字图像识别v第三代图像分析技术第三代图像分析技术机器视觉技术机器视觉技术 即采用机器代替人眼来做测量和判断 优 点：大大提高了对于图像分析的准确度。核心点：特征参数的设定。图像分析的准确度与特征参数直接相关。图像识别技术的形式图像识别技术的形式衣服颜色头发长短眉毛、胡须、喉结、肩宽、三围、曲线、骨骼、肌肉、器官 识别技术简单、识别准确性低、识别水平无提升空间 售价低廉 综合机器人智能化识别技术、识别准确性最高识别准确性最高 机器视觉识别机器视觉识别，形态学检验新趋向形态学检验新趋向 健康报健康报 2010.10 机器视觉识
10、别技术机器视觉识别技术是一种新兴的很有前途是一种新兴的很有前途的技术。的技术。丛玉隆丛玉隆机器视觉仪器程序优势机器视觉仪器程序优势样品仪器检测阴性阳性识别确认报告复核1、机器视觉：、机器视觉：智能智能识别准确性最高识别准确性最高，但仍不可能达到完全识别。2、人工审核是必须的。荧屏上纠错，无需重新镜检；机器视觉识别代替人的问题机器视觉识别代替人的问题质质 量量 控控 制制质量控制的必要性质量控制的必要性v计数准确性计数准确性：细胞、颗粒v灵敏度质控：灵敏度质控：不离心尿液更必须v识别正确性：识别正确性：专家图谱专家图谱漏检是不离心方法的致命问题漏检是不离心方法的致命问题v离心目的是浓缩；v不离心
11、极易漏检；仪器检测的灵敏度是关键仪器检测的灵敏度是关键为什么仪器灵敏度会有差异技术不同1、流式：电阻抗2、数字图像识别：轨迹搜索3、机器视觉：目标定位、跟踪低倍镜低倍镜确保不漏检的技术确保不漏检的技术AVE目标定位和跟踪目标定位和跟踪目标定位、目标跟踪目标定位、目标跟踪高倍镜高倍镜定位、跟踪定位、跟踪轨轨 迹迹 搜搜 索索漏检漏检不漏检的原则和意义不漏检的原则和意义实现早期诊断漏检常常对病人是致命灵敏度：在 5-10细胞/ul时必须检出保证不漏检的方法保证不漏检的方法v仪器必须有灵敏度质控品仪器必须有灵敏度质控品（注册）（注册）v检验科自己制作控制品检验科自己制作控制品 2-32-3个细胞个细
12、胞/LP/LP检测检测1010次，大于次，大于8 8次检测出次检测出 灵敏度差异差异造成正常参考值不同：仪器必须经临床联合检测正常参考值并公示。正常参考值正常参考值检验目的是为临床诊断服务检验目的是为临床诊断服务 红细胞：临床除了需要定量，评价疗效，更需要明确红细胞来源30507090110130150170红细胞大小红细胞（%）80130180230红细胞色度红细胞（%）80100120140160180200220240050100150200红细胞大小红细胞色度大小大小均一性均一性红细胞色度红细胞色度图片图片正常皱缩红细胞红细胞色度红细胞色度 安徽省临床检验中心文件安徽省临床检验中心文件
13、 皖检中（2010）2号 关于我省尿液有形成分定量检验指南的通知关于我省尿液有形成分定量检验指南的通知各医疗机构检验科：随着科学技术进步和新技术新方法的应用，特别是自动化技术发展为尿液检验的规范化起到十分重要的作用。尿液检验中有形成分镜检对临床诊断和治疗有重要意义，但是，不少医疗单位仍然存在不重视镜检以及操作不规范的现象。为了规范尿液常规检验，确保尿液检验的质量，卫生部医政司发布的全国临床检验操作规程（第三版）要求在尿常规检验中对尿液有形成分进行镜检。鉴于在尿液常规检验操作中实际存在的问题，省临床检验中心组织省内外相关专家进行了专题讨论，制定了我省临床尿液有形成分定量检验指南，特发通知。一、尿
14、液有形成分检验质量控制应引起足够重视，各临床实验室应根据相关规定建立尿液有形成分镜检的标准操作规程，开展尿液有形成分镜检工作。二、离心方法检测尿有形成分因存在有形成分不完全沉淀、细胞破坏现象，定量计数与真实结果明显偏低，结果不准确，因此定量检测不建议采用。但离心方法可以提高低浓度有形成分的检出率，可作定性检测，报告方式：XX个/HP（LP）或加号/HP（LP）。三、不离心尿液人工做有形成分定量检测，为避免造成有形成分漏检，要求对每个标本镜检体积不得少于5 l（计数大于5个计数板）。由于人工镜检计数体积太大，劳动强度大，检测时间太长，临床实际操作性不强，建议使用自动化检测仪器（如机器视觉识别系统
15、等）。四、对红细胞、白细胞、结晶等可以定量的有形成分应该做定量检测。对管型、粘液丝等不易定量的有形成分可以用半定量的方式报告：个/HP（LP）或加号/HP（LP）。五、干化学检测是对尿液的化学成分检验，不是形态学分析，而且影响干化学结果的干扰和影响因素众多，因此不能用干化学检测代替镜检。六、尿液有形成分分析仪器品牌多，方法原理各异，需有各自的参考值范围和专门的质控品，保证尿液有形成分定量检验结果准确可靠，防止临界标本漏检情况发生。七、尿有形成分报告中应有取尿时间和报告时间，以显示尿液是否是在2小时内检测。八、今后在对各级医院进行临床检验质量督查或医院等级评审时，将把尿液有形成分定量检验是否按本
16、指南操作列为临床检验的重点考察内容之一。希望各医疗机构检验科重视尿液镜检项目，规范尿液有形成分检验的方法，提高检工作质量，更好地为临床和患者服务。安徽省临床检验中心 二O一O年六月二日五、干化学检测是对尿液的化学成分检验，不是形态学分析，而且影响干化学结果的干扰和影响因素众多，因此不能用干化学检测代替镜检不能用干化学检测代替镜检。六、尿液有形成分分析仪器品牌多，方法原理各异，需有各自的参考值范围需有各自的参考值范围和专门的质控品和专门的质控品，保证尿液有形成分定量检验结果准确可靠，防止临界标防止临界标本漏检情况发生本漏检情况发生。第一届华北地区临床检验质量控制与标准化高峰论坛尿液分析专题会议简
17、报各临床实验室应对尿液常规检测的质量控制和操作标准化引起足够重视，并根据相关规定建立尿液常规检测的标准操作规程。尿液常规检测包括干化学和形态学检测，实验室只进行单一干化学检测是不完整的，而且影响干化学结果的干扰和影响因素众多，因此必须进行尿有形成分的形态学检测（镜检）。在尿液检测时，各临床实验室可根据自身具体情况选择适合的工作流程，如（1）干化学检测后人工镜检；（2）干化学检测后，流式仪器过筛，阳性标本人工镜检或形态学仪器镜检；（3）干化学检测后，全自动形态学仪器镜检。必须强调和要求的是检测方法必须符合方法学溯源要求，即镜检形态学。尿液流式技术仪器因无法进行形态学方法验证，实际使用中存在较多的
18、假阳性和假阴性的原因，其检测只是过筛性质，不能作为定量检测结果，阳性标本必须重新进行人工或形态学仪器镜检确认后方可向临床发出检测报告。随着技术水平的不断发展，对尿液有形成分中红细胞、白细胞、结晶等可以定量的有形成分应做定量检测。对管型、粘液丝等不易定量的有形成分可以用半定量或定性的方式报告。不离心尿液直接检测尿液有形成分，特别是自动化仪器的使用对尿液质量控制提出更高的要求，讨论中认为应该从以下三个方面进行质量控制：（1）对仪器定量检测计数准确性进行质控；（2）对仪器细胞最低检出浓度进行质控，确保有形成分在有临床价值的临界浓度时不会因为仪器灵敏度达不到要求造成漏检。（3）对识别和判断尿液有形成分正确性进行质控。这方面可以采用细胞定值质控液进行仪器检测质评，也可以用已知有形成分图片对操作人员进行培训等。由于目前没有尿液有形成分镜检方法的正常参考值，在实际工作中各医院使用的仪器品种多、灵敏度差异很大，建议协作组区域内开展正常人群参考值的调研统计工作，制定符合本地域应用标准。协作组内各省市陆续开展尿液有形成分室内和室间质量控制，并相互交流经验内容。要要 点点v不论什么方法检测，最终必须用形态学镜检方法；v红白细胞可以定量的应该定量检测v粘液丝、管型等不易定量的可以定性或半定量v质控：定量质控、灵敏度质控、识别正确性质控v必须有正常值
