1、讲座讲座 急性白血病 免 疫 学 分 型急性白血病的免疫分型 MICMICMM分型分型:细胞形态学细胞形态学(包括细胞组化包括细胞组化)为基础，为基础，细胞免疫学细胞免疫学(免疫表型免疫表型)为主体，为主体，细胞遗传学为辅助，细胞遗传学为辅助，分子生物学为补充的原则。分子生物学为补充的原则。免疫学分型对免疫学分型对ALLALL更重要。更重要。免疫学与免疫学与FABFAB分型可不一致。分型可不一致。白血病免疫分型原理 白血病细胞表面有大量的抗原白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发现特异的白血病抗原。现
2、特异的白血病抗原。但白血病细胞可能具有但白血病细胞可能具有:1.1.特异性的联合抗原特异性的联合抗原;2.2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上,而而正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群CDCD（cluster designationscluster designations）.白血病免疫分型原理白血病免疫分型的意义：白血病免疫分型的意义：1 1。有助于白血病亚型的诊断，特别对用形态学、。有助于白血病亚型的诊断，特别对用形态学、细胞化学染色不能肯
3、定细胞来源时及杂合性白细胞化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血病；血病；2 2。指导临床治疗；。指导临床治疗；3 3。有助于判断白血病的预后；。有助于判断白血病的预后；4 4。可进行疾病的监测如检测。可进行疾病的监测如检测。细胞系列抗原的表达-B细胞系抗原B B细胞根据发育阶段可分为：细胞根据发育阶段可分为：B B祖细胞祖细胞 TdTTdT、CD34CD34、HLA-HLA-DRDR 前前B B细胞（可再分为前前细胞（可再分为前前B B、前、前B B）TdTTdT、CD34CD34、CD10CD10、CD19CD19、CD24CD24 未成熟未成熟B B细胞细胞 CD19CD19、CD24C
4、D24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 成熟成熟B B细胞细胞 CD19CD19、CD24CD24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 活化活化B B细胞细胞 CD19CD19、CD24CD24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 浆细胞浆细胞 CD38CD38 细胞系列抗原的表达-T细胞系抗原T T细胞发育的路径为：细胞发育的路径为：骨髓（骨髓（骨髓祖细胞骨髓祖细胞前胸腺细胞，亦称前胸腺细胞，亦称T T祖细胞祖细胞）-胸腺（早胸腺（早中中晚）晚）-外周血（成熟）外周血（成熟）骨髓骨髓T T祖细胞祖细胞CD34+CD34+、TdTTdT+、CD10+CD10+、CD
5、7+CD7+CD7 CD7出现最早并贯穿于出现最早并贯穿于T T细胞发育全程细胞发育全程T细胞系抗原 T T 细胞进入胸腺后：细胞进入胸腺后：（早）（早）CD7+CD7+、CD2-CD2-、CD3-CD3-、CD4-CD4-、CD8-CD8-、TCR-TCR-（中）（中）CD7+CD7+、CD2+CD2+、CD3+CD3+、CD4-CD4-、CD8-CD8-、TCR-TCR-（晚）（晚）CD7+CD7+、CD2+CD2+、CD3+CD3+、CD4+CD4+、CD8+CD8+、TCR+TCR+，CD7+CD2+CD3 CD7+CD2+CD3+CD4-+CD4-CD8+TCR+CD7+CD2+CD
6、3+CD4+CD8+TCR+CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-CD8-TCR+TCR+进入血液及淋巴结进入血液及淋巴结 T细胞系抗原-外周血T细胞血液中血液中T T细胞主要有以下亚型：细胞主要有以下亚型：1.1.CD3+CD3+、CD4+CD4+、CD8-CD8-辅助性辅助性T T细胞细胞/诱导性诱导性T T细胞，细胞，TH/TITH/TI 占占T T细胞总数的细胞总数的60-70%60-70%2.2.CD3+CD3+、CD4-CD4-、CD8+CD8+抑制性抑制性T T细胞细胞/细胞毒性细胞毒性T T细胞，细胞，TS/TCTS/TC，占占T T细胞总数的细胞总数的20-30%20-30
7、%3.CD3+3.CD3+、CD4+CD4+、CD8+CD8+占占T T细胞总数的细胞总数的1-3%1-3%4.CD3+4.CD3+、CD4-CD4-、CD8-CD8-占占T T细胞总数的细胞总数的1-10%1-10%T细胞系抗原-CD4+TCD4+T细胞亚群细胞亚群1根据产生淋巴因子的差异分为：根据产生淋巴因子的差异分为：TH1TH1产生产生 IL-2IL-2、IFN-IFN-、TNF-TNF-TH2TH2产生产生 IL-4IL-4、IL-5IL-5、IL-6IL-6、IL-10IL-102 2根据功能分为：根据功能分为：TSITSI（suppressor inducersuppressor
8、 inducer T-cell T-cell）诱导诱导TSTS功能，功能，CD31+CD31+、CD45RA+CD45RA+THITHI（helper inducerhelper inducer T-cell T-cell）辅助辅助B B细胞产生抗体，细胞产生抗体，CD31-CD31-、CD45RO+CD45RO+3 3分为记忆分为记忆T T细胞、天然细胞、天然T T细胞、活化细胞、活化T T细胞细胞 天然天然T T细胞细胞 记忆记忆T T细胞活化细胞活化T T细胞细胞表表型型天天然然T T细细胞胞 记记忆忆T T细细胞胞活活化化T T细细胞胞C CD D4 4C CD D8 8C CD D4
9、 45 5R RA A+-+-+-C CD D4 45 5R RO O-+C CD D2 25 5 C CD D5 54 4 C CD D5 58 8-/+/+髓系抗原根据髓系抗原表达大致分为根据髓系抗原表达大致分为7 7类：类：1 1粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原：粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原：CD13CD13、CDw17CDw17、CD32CD32、CD87CD87、CD88CD88、CD89CD89、CDw92CDw92、CD93CD93、CD156CD156、CD157CD157、CD163CD163。2 2以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原：以粒细胞为主，也存在于单
10、核细胞上的抗原：CD15CD15、CD65CD65。3.3.以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原：以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原：CD14CD14、CD33CD33。髓系抗原 3 3基本只表达在单核细胞上的抗原：基本只表达在单核细胞上的抗原：CD16CD16、CD64CD64、CD68CD68、CD91CD91、CDw136CDw136、CD155CD155。基本只表达在粒细胞上的抗原：基本只表达在粒细胞上的抗原：CD16bCD16b、CD66CD66。4 4造血干、祖细胞抗原：造血干、祖细胞抗原：CD34CD34、CD90CD90。5 5其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上，其
11、他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上，髓系细胞上也有表达：髓系细胞上也有表达：CD4CD4、CD7CD7、CD9CD9、CD10CD10、CD11bCD11b、CD11cCD11c、CD31CD31、CD36CD36、CD38CD38 6 6血小板相关抗原：血小板相关抗原：CD36CD36、CD41CD41、CD42CD42、CD61CD61、CD62CD62。7.7.红细胞抗原：红细胞抗原：CD36CD36、GPAGPA免疫分型u从从7070年代开始试图进行免疫学分型：年代开始试图进行免疫学分型：u19861986年前五分法年前五分法u19861986年后两大类九分法年后两大类九分法u19
12、941994年四型年四型2121类法类法免疫分型五分法：u五分法：五分法：CommonCommon型型 未分化型未分化型 T T细胞型细胞型 前前B B细胞型细胞型 B B细胞型细胞型u表型表型 DR/CD9/CD10+DR/CD9/CD10+复杂复杂 CD2/CD5+CyIg SmIgCD2/CD5+CyIg SmIg+u发生率：国外发生率：国外 60-70%30%15-25%2-3%2-3%60-70%30%15-25%2-3%2-3%国内国内 50%30%20%0.5%1.5%50%30%20%0.5%1.5%u预后：预后：儿童儿童 最好最好 次之次之 再次再次 最次最次 最次最次 成人
13、成人 次之次之 再次再次 最好最好 最次最次 最次最次 免疫分型两类九型法:非非T T亚型亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 HLA-DR CD9 CD10 CD20 链链 SmIg SmIg 发生率发生率%I +-5 I +-5 II +-15 II +-15 III +-30 III +-30 IV +-50 IV +-50 V +/-+/-+-5 V +/-+/-+-5 VI +-+-+2 VI +-+-+2免疫分型两类九型法uT T亚型亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8 CD1a CD1a 发生率发生率uI +
14、-I +-55 55uII +II +25%+90%+90%+25+25%+90%+90%+25uIII +III +#+#-20+#+#-20#:#:二者之一阳性二者之一阳性 ALL免疫分型 -四型21类法u第一型：裸型第一型：裸型-未分化型未分化型,干细胞型干细胞型u第二型：纯型第二型：纯型-Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3,Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3,Pre-B4,B,T1,T2,T3Pre-B4,B,T1,T2,T3u第三型：变异型第三型：变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-4/CD15+,4/CD15+,PRE
15、-B1-4/T+,T1-4/My+,PRE-B1-4/T+,T1-4/My+,T1-4/CD15+,T1-4/B+T1-4/CD15+,T1-4/B+u第四型：多表型第四型：多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M,Pre-B1-4/M+,T1-4/M,Pre-B+T,Pre-B+T+M.Pre-B+T,Pre-B+T+M.ALL免疫分型 -FAB的MIC分型 B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg FABFAB亚型亚型 早期前早期前B +-B +-L1,L2-L1,L2 t(4;11)t(4;11
16、)t(9;22)t(9;22)普通普通-ALL +-ALL +-L1,L2-L1,L2 6q-6q-近单倍体近单倍体 t/del(12p)t/del(12p)t(9;22)t(9;22)前前B-ALL +B-ALL +-L1-L1 t(1;19)t(1;19)t(9;22)t(9;22)B-ALL +-B-ALL +-+/-+/-+L3+/-+/-+L3 t(8;14)t(8;14)t(2;8)t(2;8)t(8;22)t(8;22)6q-6q-ALL免疫分型 -FAB的MIC分型 T-ALL CD7 CD2 TdT T-ALL CD7 CD2 TdT FABFAB亚型亚型 早期前早期前T +
17、-+L1,L2T +-+L1,L2 t/del(9q-)t/del(9q-)T-ALL +L1,L2 T-ALL +L1,L2 t(11;14)t(11;14)6q-6q-白血病系列积分方法 单表型：某个系列积分大于2分，其他系列为0分：纯B-ALL，纯T-ALL，纯AML（M0-5），纯AML-M6，纯AML-M7。表达某一系列抗原为主型：某一个系列积分大于2分，伴另一系列抗原的表达，但小于或等于2：1、My+-B-ALL，My+-T-ALL，My+：CD13+/14+/33+和15，2、CD15+B-ALL，CD15+T-ALL，CD15+：CD15+（CD13/14/33-）3、CD2+
18、B-ALL CD5+B-ALL CD7+B-ALL，4、CD20+T-ALL CD24+T-ALL 5、Ly+AML。3.双表型：至少二个系列积分大于2分:B-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML），T-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML）。4.未分化型，所有系列积分均小于或等于2。急性白血病免疫学 系列分型的积分方案分数B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 2 免疫学分型 与FAB AML分型的相关性M1M1：CD34+CD34+、MPO+MPO+、DR+DR+、TdTTdT+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、CD15-CD15-
19、、CD11b-CD11b-、无无 淋、红、巨核系抗原淋、红、巨核系抗原M2M2：CD34+CD34+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、DR+DR+、CD15+CD15+M3M3：CD33+CD33+、CD13+CD13+、DR-DR-、CD34-CD34-M4M4：CD34+CD34+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、CD14+CD14+、CD15+CD15+M5M5：CD34+CD33+CD34+CD33+、CD13+CD13+、CD14+CD14+、CD15+CD15+M6M6：血型糖蛋白血型糖蛋白+、CD34-CD34-，DR-DR-、CD33-CD33-、CD1
20、3-CD13-、CD15-CD15-M7M7：CD34+CD34+、CD33+CD33+、DR+DR+、CD41+CD41+、CD42+CD42+、CD61+CD61+M0M0：FABFAB：形态学为：形态学为L2L2型，型，MPOMPO、SBBSBB组化阴性，淋系抗原阴性，组化阴性，淋系抗原阴性，CD33CD33、CD11CD11、CD15 CD15 及及antiMPOantiMPO单抗阳性单抗阳性。细胞系列抗原的表达 -B细胞系抗原 HLA-DRHLA-DR意义意义 在白血病分型中，在白血病分型中，HLA-DRHLA-DR特异性较差，特异性较差，除除B B系外，系外，HLA-DRHLA-D
21、R在急非淋、成人在急非淋、成人T T细胞白细胞白血病亦表达，血病亦表达，但如但如DR+DR+，加上，加上CD5-CD5-、CD7-CD7-则则99%99%为为B B系。系。90%B90%B系系ALLALL表达表达CD10CD10。与与ALAL预后有的抗原预后有的抗原1。CD34：强表达者预后差，特别是复发时CD34增强是最有意义的免疫学表型改变，CD34常与一些预后差的因素共存时有相加的作用，与CD34与Pgp或DR共存的患者，比单表达其中一个抗原的患者完全缓解率明显降低。与与ALAL预后有的抗原预后有的抗原 2。Pgp：表达者 1、预后较差，2、常出现耐药现象，3、常与预后不良的因素如CD3
22、4、CD56相伴随。与与AMLAML预后有的抗原预后有的抗原3。髓系抗原表型越不成熟预后越差，CD33/CD15/CDw65低表达的AML一般提示治疗无反应或/和生存期较短。与与ALAL预后有的抗原预后有的抗原4。My+ALL：CR率低占ALL21.6%，My+ALL CR52.6%,My-ALL CR80%.5。CD34+ALL：CR率较低，占ALL53.6%CD34+ALL CR62%,CD34-ALL CR82.6%,CD34+My+ALL：CR率很低，CR33.3%,CD34-My-ALL83.3%,6。Ph+ALL：CR率低，CR41%,Ph-ALL CR83.3%与与AMLAML预
23、后有的抗原预后有的抗原 6。Ly+AML：CR率低 占AML43%，CR46%，合并CD34+38%，PgP+15%，（其中CD2+AML7.7%，CD7+AML22%，CD19+13%），Ly-AML：CR73%7。CD7+AML：CR率低，占AML22%，合并CD34+75%，PgP+55%，（M1：42%，M2：18%，M4：28%，M5：9%，M3：0%）CR35%与与AMLAML预后有的抗原预后有的抗原 8。CD19+AML：CR率较低，占AML13%，合并CD34+67%，PgP+33%，（M2：16%，M5：25%），CR50%。9。CD2+AML：CR率较高，占AML18%，合
24、并CD34+57%，PgP+14%，（M3：36%，M5：13%），CR71%。与与AMLAML预后有的抗原预后有的抗原10。MK+AML：CR率很低，占AML12.8%，CR33%，其中HAL：45%，M5：24%，M2：14%，M3、M6不表达，常伴CD34+、PgP+，WBC明显增高。11。Ph+AML：CR率低，占AML210%，见于M1，M2，M4，CD34高表达，缓解期短。从分子水平看：bcr断裂点位于M-bcr，产物为P210-CML急变而来；bcr断裂点位于m-bcr，产物为P190-原发性AML。杂合性急性白血病杂合性急性白血病（HAL）又称为混合性急性白血病（MAL）指白血
25、病细胞表达一种系以上免疫标记的一组白血病，主要依靠免疫分型确诊。发生率占白血病的1.2%-1.5%，疗效差，预后不良。分型 1。双表型：白血病细胞较均一，每个细胞同时表达淋巴系和髓系细胞的免疫学标志；2。双克隆型：白血病细胞不均一，同时存在两种恶性克隆性细胞，一般一种表达淋巴系标志，一种表达髓系细胞标志；3。双系细胞：与双克隆型相似，但这两部分白血病细胞系来自同一多能干细胞。并限定只有当两种细胞并存，或6个月之内相继发生，才属次型；4。转换型：白血病细胞由一种表型在6个月以后转为另一种表型，现已不将次型称为HAL。HAL目前多联合应用形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等手段来确定诊断。HA
26、L的淋系和髓系标志均大于标准，T、B淋巴细胞混合一般不作为HAL看。系统标志积分达不到诊断标准的称为Ly+AML或My+ALL。诊断标准 多才用积分法。急性白血病免疫学 系列分型的积分方案 分数B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 2 系统标志积分苏医 B系 T系 髓系 2分分 CD22+、CD3+、POX+1分分 CD19+、CD2+、CD13+、CD33+、CD10CD10+CD41+、CD61+0.5分分 CD7+CD14+、CD15+大于或等于大于或等于2分为系列阳性分为系列阳性 系统标志积分CatovskyB系系 T系系 髓系髓系 2分分 CyCD22+CyCD3+MPO+1分分 C
27、D10+CD19+CD2+、CD5+CyCD13+、CD33 0.5分分 TdT+、IgH IgH TdT+、CD7+CD11+、CD14+CD15+,大于或等于大于或等于2分为系列阳性分为系列阳性 系统标志积分 EGI EGI B系系 T系系 髓系髓系 2分分 CD79a+CyCD3+、抗抗MPO+MPO+CyIgM+、mCD3+、CyCD22+抗抗TcR+、1分分 CD19+CD2+、CD13+、CD10+、CD5+、CD33+、CD20+CD8+、CDw65+0.5分分 TdT+、CDCD24+、TdT+、CD7+、CD14+、CD15+、CD64+、CD117 髓系大于或等于髓系大于或
28、等于2分、淋系大于分、淋系大于1分为系列阳性分为系列阳性 系统标志积分 307307医院医院 B系系 T系系 髓系髓系 2分分 CD22+、链链+、CD3+、MPO、CD13+、CD20+TCR+、CD14+、CD33+、CD19+Auer小体、小体、PPO 1分分 CD10+、CD24+CD2+、CD5+、CD11b+、CD11c+、CD15+、NSE、CAE、SBB、t（8：21）t（15：17）0.5分分 TdT+、IgH+CD7+AML形态学形态学u大于或等于大于或等于2 2分为系列阳性分为系列阳性 系统标志积分u山东医大山东医大 B系系 T系系 髓系髓系 2分分 CD22+、链链+、
29、CD3+、MPO、CD13+、CD20+、SmIg CD14+、CD33+、CD19+Auer小体、小体、PPO CD41、CD42、CD61 1分分 CD10+、CD24+CD2+、CD5+、CD11b+、CD11c+、IgLIgL、L3L3形态学形态学 CD15+、NSE、CAE、SBB、t（15：17）或）或PML/RARa t（8：21）或）或AML/ETO 形态学形态学M2b、M3a、M6 0.5分分 TdT+、IgH+TCR+、CD3+其他其他AML形态学形态学u两系或三系积分大于两系或三系积分大于2 2分为分为HALHAL 系统标志积分u河北二院河北二院 B系系 T系系 髓系髓系
30、 2分分 CD22+、链链+、CD3+、MPO、CD13+、CD33+、CD20+CD21+CD28、CD14+、CD41+CD41+、CD42+CD42+、CD19+SmIg SmIg Auer小体、小体、PPO、inv（16）L3形态学形态学 t（15：17）、）、t（8：21）M4Eo、M6、M2b、M3形形 态学、态学、PML/RARa 1分分 CD10+、CD24+CD2+、CD5+、CD11b+、CD11c+、IgLIgL、PASPAS PASPAS、CD56CD56、CD15+、NSE、CD57 CD57 CAE、SBB、0.5分分 TdT+、IgH+TCR+、CD7+其他其他A
31、ML形态学及细胞化学形态学及细胞化学u两系积分大于两系积分大于2 2分为分为HALHAL 其他白血病的系列标志u多毛细胞白血病：多毛细胞白血病：CD11c+、CD19+、CD22+、CD25+、CD38+、CD20+、SmIg+、CD25-，变异型：CD25-u成人成人T T淋白血病：淋白血病：CD2+、CD3+、CD4+、CD25+，CD8-u幼淋细胞白血病：幼淋细胞白血病：CD19+、CD20+、CD22+、CD24+、SmIg+u浆细胞白血病：浆细胞白血病：DR-、CD19-、CD20-、CD38+、胞质Ig+、SmIg-MDS的免疫表型 1.CD34+7%(正常人为2.5%)RA2.8%，RAEB8.5%，RAEBT11.3%CD34+易转为白血病,预后差.2.CD13+20%(正常人11.7%)RA1.8%，RAEB24%，RAEBT253%3.CD33+20.9%(正常人16.5%)RA18%，RAEB21%，RAEBT23%4.CD15+30%(正常人45.5%)5.CD3+27%,19%,11%(正常人35.5%)
