1、n 自Davis(1910)首先利用羊膜作为生物敷料替代皮肤帮助烧伤创面修复以来，羊膜作为一种来源方便、取材容易和价格便宜等诸多优点的生物膜在临床上应用越来越广，如覆盖烧伤的创面；修补阴道缺损；四肢溃疡；脾破裂的修补和肾、胰移植时的包裹材料等等。n Rotth(1940)首次应用新鲜羊膜移植到睑球粘连的患者，开创了羊膜在眼科临床应用的先例，其后有少量的文献报道。n 直到Kim和Tseng(1995)改良了羊膜的保存方法，移植到眼表后，用于治疗结膜肿瘤；复发性翼状胬肉切除；睑球粘连青光眼滤过性手术等等，可起到一个良好的生物胶原支架作用。因此，羊膜移植已再次成为眼表重建的一大热点。羊膜的羊膜的组织
2、组织结构结构羊膜是人体胎盘组织的一部分羊膜是人体胎盘组织的一部分羊膜光滑、无血管、神经及淋羊膜光滑、无血管、神经及淋巴，具有一定弹性。正常羊膜巴，具有一定弹性。正常羊膜厚约厚约0.02-0.5mm0.02-0.5mm，是人体中最，是人体中最厚的基底膜。厚的基底膜。羊膜的羊膜的组织组织结构结构上皮细胞层：由单层无纤毛立方上皮细胞组成基底层：位于上皮细胞下的网状组织致密层纤维母细胞层海绵层一般仅将羊膜分为上皮面和基底膜面，上皮面包饶羊水，基质面与绒毛膜之间有一潜在间隙，容易钝性分离。1.上皮层：羊膜上皮可为单层立方形、在胎儿面上皮为柱状，有时上皮呈假复层，其上皮层内可见退化细胞。上皮细胞内常含有脂
3、肪滴。该层是新鲜的羊膜组织抗原性所在的部位。2.基底膜层：由狭窄的无细胞网状纤维构成，厚度不一。在胎盘处羊膜的基底膜最厚，该层组织PAS染色呈阳性反应。羊膜的羊膜的组织组织结构结构3.致密层：薄而致密，是羊膜张力所在。此层与基底膜紧密相连，而与下面的纤维母细胞层连接较松。该层由网织纤维组成，HE染色呈淡伊红色均质带。致密层极少因炎症等原因引起水肿、增厚。在羊膜眼表移植后此层的结构能阻止炎症细胞穿透羊膜向病灶区浸润。4.纤维母细胞层：该层构成羊膜的主要厚度。HE染色为有梭形的淡伊红带。纤维母细胞层染色淡是因为黏液含量高。本层由疏松纤维母细胞和网状纤维构成，纤维母细胞具有吞噬作用。5.海绵层：由波
4、浪状网织纤维束构成，象其它弹力纤维一样具有伸展性。本层厚度变化大，主要依此层黏液和液体的多少而定。正常厚度为0.020.5mm，水肿时可增厚数百倍。羊膜的羊膜的组织组织结构结构羊膜的作用机制羊膜的作用机制5 5个方面的临床效果个方面的临床效果n 加速上皮化加速上皮化n 维持正常上皮表型维持正常上皮表型n 减轻炎症反应减轻炎症反应n 减轻血管化减轻血管化n 减少瘢痕形成等减少瘢痕形成等羊膜的特性羊膜的特性羊膜手术适应症羊膜手术适应症睑球粘连、结膜囊缺失、翼状胬肉、角膜溃疡、化学灼伤和睑球粘连、结膜囊缺失、翼状胬肉、角膜溃疡、化学灼伤和热烧伤、烫伤、近视眼手术并发症、干眼症、眼表肿瘤、眼热烧伤、烫
5、伤、近视眼手术并发症、干眼症、眼表肿瘤、眼表多重手术损害、眼内疤、先天性无虹膜、眼角炎、角膜白表多重手术损害、眼内疤、先天性无虹膜、眼角炎、角膜白斑、青光眼手术、角膜新生血管、角膜病等。斑、青光眼手术、角膜新生血管、角膜病等。眼表重建时完好的基底膜是非常重要的，而化学伤、热烧伤的患者，其干细胞破坏的同时，多伴有基底膜的破坏，所以在羊膜移植重建的角膜基底膜的基础上行角膜缘干细胞移植，会取得更好的眼表重建效果。刺激上皮增殖和分化：羊膜中含有各种蛋白成分，如层粘蛋白、纤维连接蛋白、型胶原纤维等，能刺激上皮的分化、增生，增强上皮细胞的黏附性，在上皮创伤愈合中起到重要作用清除炎症：羊膜中含有各种蛋白酶，
6、通过抑制相应的蛋白酶而发挥其清除炎症的作用；同时羊膜中抑制细胞因子表达和调节细胞凋亡的成分，可以避免炎细胞和细胞因子诱发的角膜基质和胶原纤维的过度增生因此，在眼表重建时可以抑制局部炎症，促进表面愈合而不留瘢痕。但对于复发性胬肉或缺乏相对正常自体干细胞的患者，许多学者试用羊膜移植治疗翼状胬肉，其术后复发率明显低于单纯切除组。这可能与羊膜本身没有抗原性，不会诱发免疫反应；同时羊膜能抑制炎性反应，阻止新生血管长入；羊膜有接触抑制，本身可以阻止变性结膜组织生长，防止胬肉复发。解决屈光手术引起的角膜混浊(Haze)。多数人认为角膜混浊的产生与激光手术产生的局部炎症反应及新生上皮产生的多种生长因子引起前基
7、质细胞和胶原的异常增生有关，因此羊膜移植可以减轻手术区域的炎症反应及局部刺激因素，有望减轻角膜混浊。作为体外细胞培养的载体：随着角膜缘干细胞理论与实验培养技术的发展羊膜作为没有抗原性、有较好的生物相容性等，使其成为载体的最佳选择，但有关这种上皮羊膜上培养后抗原性改变，移植上皮眼表的分化及功能的维持都需要鸡长时间的探讨。目前羊膜存在的问题目前羊膜存在的问题n 无标准化产品n 无权威性的安全质量标准n 潜在危险：HIV、HBV、HCV、梅毒螺旋体等n 法律保障-医患纠纷n 羊膜保存时间短，运输不方便，不能随时满足临床要求低温冷冻干燥技术钴60辐照灭菌技术羊膜细胞处于“休眠状态”延长其保存期 实现生
8、物羊膜的产业化、标准化，解决生物羊膜制备的安全性和常温保存、运输的难题满足临床需要保护液处理后预冻保护液处理后预冻抽真空抽真空水分升华水分升华冻干羊膜冻干羊膜对温度的控制对温度的控制 压力的控制压力的控制温度的控制温度的控制时间的控制时间的控制生产环境生产环境对妊娠第三个月的妇女进行检测，了解其家族史情况，对符合要求的健康者跟踪服务。取取 羊羊 膜膜 第第 一一 步（初检）步（初检）已跟踪孕妇在产前再次检测，在其知情的情况下，剖腹产后取羊膜取取 羊羊 膜膜 第第 二二 步（复检步（复检）确认被采集的产妇在第三个月及产前各检测结果均是阴性后，再将羊膜进行加工制备。取取 羊羊 膜膜 第第 三三 步
9、（核实）步（核实）被采集产妇的详细资料，每片羊膜有安全的来源。取取 羊羊 膜膜 第第 四四 步（备案）步（备案）辐照灭菌技术辐照灭菌技术国家药监局对辐照灭菌中针对国家药监局对辐照灭菌中针对HIVHIV、HBVHBV、HCVHCV、梅毒等病毒杀灭的有效性进行了反复放射学与梅毒等病毒杀灭的有效性进行了反复放射学与病毒学专家论证，确认了钴辐照生物羊膜病毒学专家论证，确认了钴辐照生物羊膜可以达到高水平的病毒安全性。可以达到高水平的病毒安全性。新鲜羊膜新鲜羊膜冷冻干燥羊膜冷冻干燥羊膜新鲜羊膜新鲜羊膜冷冻干燥羊膜冷冻干燥羊膜 上皮细胞上皮细胞 新鲜羊膜新鲜羊膜冷冻干燥羊膜冷冻干燥羊膜胶原层胶原层上皮细胞上
10、皮细胞 质量保障质量保障无统一标准制作、无保障无统一标准制作、无保障 按国家标准生产、有保障按国家标准生产、有保障 致病原污染致病原污染存在存在 不存在不存在 保存方式保存方式低温保存，储存不方便低温保存，储存不方便 常常 温温 保保 存存 保存时间保存时间几几 天天 一一 年年 使用方式使用方式临时剥制，取材不便临时剥制，取材不便 随时可使用随时可使用 研制单位：研制单位：江西省科学院住友生物工程技术有限公司江西省科学院住友生物工程技术有限公司协作单位：协作单位：中山大学中山眼科中心中山大学中山眼科中心广东省人民医院眼科广东省人民医院眼科河南省眼科研究所河南省眼科研究所江西医学院第三附属医院眼科江西医学院第三附属医院眼科专家组成员：专家组成员：陈家祺、王丽娅、郭海科、杨斌、石浔等。陈家祺、王丽娅、郭海科、杨斌、石浔等。
