1、第一章第一章 绪论绪论n本章内容概要:本章内容概要:*生物化学检验的概念生物化学检验的概念*生物化学检验的发展史生物化学检验的发展史*生物化学检验的研究内容生物化学检验的研究内容一、一、生物化学检验的概念生物化学检验的概念以研究人在健康和疾病时体内的生物化学过程为目的,以研究人在健康和疾病时体内的生物化学过程为目的,为疾病的诊断、治疗和预防提供信息的一门学科。为疾病的诊断、治疗和预防提供信息的一门学科。第一章第一章 绪论绪论应用一定的分析方法,测定体液或组织的各种化学成分,应用一定的分析方法,测定体液或组织的各种化学成分,*2020世纪世纪5050年代,自动化分析仪的问世,使分析的速度和数量年
2、代,自动化分析仪的问世,使分析的速度和数量大大地提高大大地提高二、二、发展史发展史*1919世纪,用费林反应测定尿糖来对糖尿病进行诊断世纪,用费林反应测定尿糖来对糖尿病进行诊断*2020世纪初,主要利用比色法和光度法对肌酐等血液和尿液世纪初,主要利用比色法和光度法对肌酐等血液和尿液成分进行分析。成分进行分析。*2020世纪中期,一些新的技术应用于生化检验,如离心、层析、世纪中期,一些新的技术应用于生化检验,如离心、层析、电泳、免疫分析技术等等。电泳、免疫分析技术等等。离心机离心机电泳仪电泳仪层析仪层析仪光电比色计光电比色计全自动生化分析仪全自动生化分析仪*现代生物化学检验的特点现代生物化学检验
3、的特点1 1、检测分析自动化、检测分析自动化2 2、试剂标准化和商品化、试剂标准化和商品化3 3、质量管理体系标准化、质量管理体系标准化4 4、ISO 15189ISO 15189认可认可(医学检验实验室质量和能力认可准则)医学检验实验室质量和能力认可准则)5 5、参与临床诊断和治疗、参与临床诊断和治疗*发展趋势发展趋势快速、微量、准确快速、微量、准确分子生物学技术的应用分子生物学技术的应用床边检测床边检测三、三、研究内容研究内容1 1、光谱分析技术、光谱分析技术2 2、电泳技术、电泳技术3 3、层析技术、层析技术4 4、离心技术、离心技术5 5、酶学分析技术、酶学分析技术6 6、仪器分析技术
4、、仪器分析技术第二章第二章 临床生化检验基本知识临床生化检验基本知识n本章内容概要:本章内容概要:*申请方式与报告申请方式与报告 *质量管理要素质量管理要素 *实验室信息管理系统实验室信息管理系统第一节第一节 生化检验的申请方式与报告生化检验的申请方式与报告一、单项检验与组合检验一、单项检验与组合检验1、单项检验、单项检验血糖测定、血清淀粉酶测定血糖测定、血清淀粉酶测定2、组合检验、组合检验随机组合随机组合血糖测定血糖测定+胆固醇测定胆固醇测定+甘油甘油固定组合固定组合肝功能系列、肾功能系列、血脂肝功能系列、肾功能系列、血脂系列、心肌酶谱系列等等系列、心肌酶谱系列等等三酯测定三酯测定二、报告单
5、发放形式二、报告单发放形式1、急诊检验、急诊检验小于小于2小时小时2、常规检验、常规检验34小时小时2天天3、特殊检验、特殊检验一周或更长时间一周或更长时间4、危急值报告、危急值报告危急值概念:危急值概念:是指某些检测结果出现了可能会危及患者生命的极限值是指某些检测结果出现了可能会危及患者生命的极限值报告形式:打电话立即报告报告形式:打电话立即报告部分临床生化危急值部分临床生化危急值1、血钾:、血钾:5.5mmol/L2、血糖:、血糖:15.0mmol/L3、血肌酐:、血肌酐:450umol/L第二节第二节 生化检验质量管理要素生化检验质量管理要素一、生化检验流程一、生化检验流程医生申请医生申
6、请患者准备患者准备标本采集标本采集标本标志标本标志标本运输标本运输标本处理标本处理标本检测标本检测报告单发放报告单发放标本存储与复检标本存储与复检质量信息反馈质量信息反馈一、生化检验流程一、生化检验流程医生申请医生申请患者准备患者准备标本采集标本采集标本标志标本标志标本运输标本运输 收检收检检验前阶段(差错占检验前阶段(差错占60%)针对性针对性敏感性和特异性敏感性和特异性报告时间报告时间经济负担经济负担一、生化检验流程一、生化检验流程医生申请医生申请患者准备患者准备标本采集标本采集标本标志标本标志标本运输标本运输 收检收检检验前阶段检验前阶段采血体位(一般原则坐位、特殊可卧位)采血体位(一般
7、原则坐位、特殊可卧位)饮食的影响(一般原则空腹)饮食的影响(一般原则空腹)药物的影响(一般原则停药、说明用药情况)药物的影响(一般原则停药、说明用药情况)避免剧烈运动(避免剧烈运动(G、Alb、K+、ALT增加)增加)采血时间(一般原则为上午、个别激素例外)采血时间(一般原则为上午、个别激素例外)一、生化检验流程一、生化检验流程医生申请医生申请患者准备患者准备标本采集标本采集标本标志标本标志标本运输标本运输 收检收检检验前阶段检验前阶段防止溶血防止溶血抗凝标本避免凝血抗凝标本避免凝血安静、坐位(卧位)安静、坐位(卧位)避免污染避免污染输液时血液采集输液时血液采集防腐保存防腐保存血液标本的采集血
8、液标本的采集 血液标本血液标本毛细血管血:手指或耳垂,用于需血量少的检验,也主毛细血管血:手指或耳垂,用于需血量少的检验,也主 要用于儿童。要用于儿童。静脉血:是最常用的标本,静脉穿刺是最常用的采血方法静脉血:是最常用的标本,静脉穿刺是最常用的采血方法 动脉血:血气分析多使用(动脉血:血气分析多使用(,p p)真空采血法真空采血法 优点优点:1:1、在完全封闭状态下采血、在完全封闭状态下采血,避免血液外溢避免血液外溢,有利运输与保存。有利运输与保存。2 2、标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血、标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血 管内添加剂种类和试验用途。可根据需
9、要选择相应的盛血管内添加剂种类和试验用途。可根据需要选择相应的盛血 试管。试管。、注意事项、注意事项(1 1)防止溶血)防止溶血(2 2)避免充血和血液浓缩)避免充血和血液浓缩(3 3)输液时的血液采集)输液时的血液采集(4 4)采血的体位)采血的体位(5 5)采血时避免注入空气)采血时避免注入空气 (6 6)其他影响因素)其他影响因素(二)动脉采血法(二)动脉采血法、部位:、部位:肱动脉、股动脉、桡动脉都可以作为采血点,但多选择肱动脉、股动脉、桡动脉都可以作为采血点,但多选择肱动脉和桡动脉肱动脉和桡动脉、步骤:、步骤:触摸消毒固定针头成触摸消毒固定针头成90角穿刺血液注入容器角穿刺血液注入容
10、器生化检验常用抗凝剂:生化检验常用抗凝剂:1、肝素:、肝素:含有硫酸基团的粘多糖常用于含有硫酸基团的粘多糖常用于血气分析血气分析和部分生化项目的测和部分生化项目的测定,使用定,使用1.0g gL L的肝素溶液的肝素溶液0.5ml0.5ml可抗凝可抗凝5ml5ml血液血液2、氟化钠、氟化钠+草酸钾:草酸钾:常用于常用于血糖血糖测定,草酸钾可与血中钙离子生成草测定,草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钾溶解度大,抗凝作用强草酸钾溶解度大,抗凝作用强。氟离氟离子能结合钙而抗凝,但抗凝效果较弱。氟离子可子能结合钙而抗凝,但抗凝效果较弱。氟离子可抑制糖酵
11、解中的烯醇抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解。化酶,防止糖酵解。防腐剂防腐剂1 1、浓盐酸、浓盐酸激素及代谢产物测定激素及代谢产物测定2 2、甲苯、甲苯生化项目测定生化项目测定3 3、冰醋酸、冰醋酸激素测定激素测定4 4、麝香草酚、麝香草酚电解质等生化项目测定电解质等生化项目测定l尿液标本尿液标本随机新鲜尿随机新鲜尿定时尿定时尿2424小时尿小时尿晨尿晨尿餐后餐后2 2小时尿小时尿一、生化检验流程一、生化检验流程医生申请医生申请患者准备患者准备标本采集标本采集标本标志标本标志标本运输标本运输 收检收检 检验前阶段检验前阶段唯一性唯一性 室温、室温、冷藏、冷藏、冷冻。冷冻。不合格标本拒收不合格标
12、本拒收不合格标本的标准不合格标本的标准1、患者信息不全、患者信息不全3、抗凝不当,标本凝固、抗凝不当,标本凝固2、标签不清或无标识、标签不清或无标识6、标本量过少、标本量过少5、容器破损、容器破损4、标本溶血、标本溶血7、标本容器使用错误、标本容器使用错误一、生化检验流程一、生化检验流程收检收检标本处理标本处理标本检测标本检测检验中阶段检验中阶段不能及时分离的血液标本:室温或不能及时分离的血液标本:室温或3737水浴水浴分离后来不及检测标本:分离后来不及检测标本:4 4 冰箱(冰箱(LDHLDH例外)例外)一、生化检验流程一、生化检验流程报告单发放报告单发放标本存储与复检标本存储与复检质量信息
13、反馈质量信息反馈检验后阶段检验后阶段一般原则在一般原则在28保存一周保存一周第三节第三节 实验室信息管理系统实验室信息管理系统一、实验室信息管理系统(一、实验室信息管理系统(LIS)概述)概述二、实验室信息管理系统的完善与维护二、实验室信息管理系统的完善与维护第四节第四节 实验用纯水实验用纯水一、一、纯水的制备方法纯水的制备方法1 1、蒸馏法蒸馏法2 2、离子交换法离子交换法3 3、电渗透法电渗透法4 4、炭吸附法炭吸附法5 5、超滤膜法超滤膜法按蒸馏次数可分为一次、二次和多次蒸馏法。按蒸馏次数可分为一次、二次和多次蒸馏法。6 6、混合纯化系统混合纯化系统二、二、水的纯度检查水的纯度检查1 1
14、、电阻率电阻率2 2、可溶性硅检验可溶性硅检验3 3、细菌菌落计数细菌菌落计数三、三、实验用纯水标准及用途实验用纯水标准及用途中国实验室用水国家标准中国实验室用水国家标准GB6682-2000GB6682-2000CAPCAP标准(美国临床病理学会)标准(美国临床病理学会)NCCLSNCCLS标准(美国临床实验室标准化委员会)标准(美国临床实验室标准化委员会)名名 称称 一一 级级 二二 级级 三三 级级 PH值范围(值范围(25)-5.0-7.5 电导率(电导率(25),mS/m 0.01 0.10 0.50 比电阻(比电阻(M.cm.25)10 1 0.2 可氧化物质可氧化物质以(以(0)
15、计)计,mg/L-0.08 0.40 吸光度(吸光度(254nm,1cm 光程)光程)0.001 0.01-蒸发残渣(蒸发残渣(1052),),mg/L-1.0 2.0 可溶性硅可溶性硅以(以(sio2)计)计,mg/L 0.01 0.02 -中国实验室用水国家标准中国实验室用水国家标准GB6682-2000GB6682-2000实验用纯水的应用实验用纯水的应用级:用于有严格要求的分析实验,如酶活性测级:用于有严格要求的分析实验,如酶活性测 定、电解质测定、液相色谱分析用水。定、电解质测定、液相色谱分析用水。级:用于一般实验室定量分析、玻璃器皿洗涤。级:用于一般实验室定量分析、玻璃器皿洗涤。级
16、:用于一般实验室定性分析、玻璃器皿洗涤。级:用于一般实验室定性分析、玻璃器皿洗涤。第五节第五节 实验室常用玻璃仪器的使用实验室常用玻璃仪器的使用一、一、常用玻璃仪器的使用常用玻璃仪器的使用1 1、吸量管吸量管规格规格分类(完全流出式、不完全流出式)分类(完全流出式、不完全流出式)选择原则选择原则使用方法使用方法注意事项注意事项2 2、自动加样器自动加样器分类(固定式、可调式)分类(固定式、可调式)使用方法使用方法注意事项注意事项注意事项注意事项吸量管保持垂直吸量管保持垂直视线与液面应保持水平视线与液面应保持水平尽量不使用管尖部分液体尽量不使用管尖部分液体注意分辨注意分辨“吹吹”与与“不吹不吹”
17、使用方法使用方法左手持洗耳球,右手持吸管左手持洗耳球,右手持吸管插入溶液插入溶液12cm12cm用洗耳球将液体吸至用洗耳球将液体吸至“0 0”刻度线以上刻度线以上用食指控制流速用食指控制流速擦去管外余液擦去管外余液控制液面至控制液面至“0 0”刻度线刻度线控制流速至所需刻度控制流速至所需刻度余液放回试剂瓶余液放回试剂瓶微微量量可可调调式式移移液液器器的的使使用用移液头移液头第一档第一档第二档第二档使用方法使用方法调节旋钮至所需体积调节旋钮至所需体积套上移液头,旋紧套上移液头,旋紧按下大拇指至第一档按下大拇指至第一档将移液头插入溶液内将移液头插入溶液内12mm12mm,松开大拇指。,松开大拇指。
18、排放时,将大拇指按下,至第一档后,继续排放时,将大拇指按下,至第一档后,继续至第二档以排空至第二档以排空按移液头排放钮排放吸液头按移液头排放钮排放吸液头注意事项注意事项移液头需旋紧移液头需旋紧移液速度需缓慢移液速度需缓慢排放至第二档排放至第二档更换移液头更换移液头二、二、常用玻璃仪器的清洗常用玻璃仪器的清洗合成洗涤剂合成洗涤剂:重铬酸钾洗液重铬酸钾洗液:配方:重铬酸钾配方:重铬酸钾50g50g,蒸馏水,蒸馏水50ml50ml,浓硫酸,浓硫酸500ml500ml。30%30%硝酸硝酸:45%45%尿素尿素:10%EDTANa10%EDTANa2 2:1 1、常用洗涤剂的种类和用途常用洗涤剂的种类和用途新购买的(新购买的(2%2%盐酸浸泡盐酸浸泡2626小时)小时)使用过的(清洗程序)使用过的(清洗程序)具传染性的(具传染性的(5g/L5g/L过氧乙酸浸泡过夜后再清洗)过氧乙酸浸泡过夜后再清洗)2 2、玻璃器皿的清洗玻璃器皿的清洗3 3、玻璃器皿的干燥玻璃器皿的干燥自然干燥(倒置)自然干燥(倒置)烘烤干燥(玻璃容器)烘烤干燥(玻璃容器)