1、教学资料范本高中生物专题2微生物的培养与应用测试卷1编 辑：_时 间：_专题2 微生物的培养与应用测试卷（二） (时间：60分钟满分：100分)一、选择题(共15小题，110小题每小题3分，1115小题每小题5分，共55分。每小题只有一个选项符合题意。)1下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是()A微生物培养前，需对培养基进行消毒B分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌；为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选
2、择培养的条件；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌；尿素分解菌中的脲酶能将尿素分解为氨，筛选分离时必须以尿素为唯一碳源。答案：A2下列关于细菌的叙述，错误的是()A硝化细菌能以NH3，作为氮源和能源物质B某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌解析：硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，氨含有氮元素可以提供氮源；蓝藻可以利用光能进行光合作用；生长因子是一类对微生物正常代谢必不可少
3、且不能用简单的碳源或氮源自行合成的有机物，它的需要量一般很少，生长因子一般有维生素、碱基、卟啉及其衍生物、氨基酸等，并不是所有的微生物都需要生长因子，某些微生物不能合成一些生长所必需的物质，必须从外界摄取这些营养物质；伊红和美蓝试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌。答案：D3下列有关微生物培养的说法，正确的是()A制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源C配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌解析：制备固
4、体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源；配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物的需要；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌。答案：B4关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是()A只能应用于固体培养基接种B都可以用于微生物的计数C接种培养后均可获得单菌落D接种用具都需进行严格灭菌解析：平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基上接种；稀释涂布平板法又称活菌计数，是由一个单细胞繁殖可成单个菌落这一培养特征设计的计数方法，可对微生物进行计数，而平板划线法不能用于计数；接种换上的
5、菌液经过连续划线或逐步稀释，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落；接种环和涂布器都必须经过灭菌才能使用。答案：B5关于微生物培养基的说法正确的是()A牛肉膏不能提供碳源B培养硝化细菌可以不加有机碳C刚果红使纤维二糖染色D酵母菌酿酒时需持续供氧解析：牛肉膏能给微生物提供碳源；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加有机碳；纤维素可以与刚果红染液反应呈红色；酵母菌酿酒时前期需要供氧，后期应该是严格的无氧发酵。答案：B6为探究大叶木姜子多糖的抑菌效果，研究人员将下列4种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡23小时的滤纸片，培
6、养一段时间后，测定各供试菌的抑菌圈直径，结果如下表，相关叙述，错误的是()多糖浓度/%金黄色葡萄球菌酵母菌灰绿曲霉黑曲霉10.02.83.32.61.25.02.73.11.80.92.52.32.71.00.31.01.40.30.51.2A.金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜B制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法C每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值D大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差解析：金黄色葡萄球菌属于细菌，原核生物，其余三种微生物都是真菌，真核生物，前者没有核膜包被的细胞核，后者都有；根据题干接种使用的是菌悬液，最好应该使用稀释涂布平板法接种；为避免实验误
7、差，每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值；黑曲霉在含有不同浓度的大叶木姜子多糖上产生的抑菌圈的直径最小，抑制效果最差。答案：B7有关平板划线操作不正确的是()A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B接种环在平板上划线位置是随机的C在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D最后将平板倒置，放入恒温箱中培养解析：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌；在平板划线时，要划35条平行线，而不是随机的；在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰；将平板倒置放在恒温箱。答案：B8如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中
8、LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是()A需要对活性污泥作灭菌处理B中LB培养基应以甲醛为唯一碳源C目的菌种异化作用类型为厌氧型D经处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养解析：活性污泥不需要进行灭菌处理；过程用完全培养基培养后，可以获得大量微生物，从而增加目的菌的菌群数量；过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，即培养出以甲醛为唯一碳源的细菌；目的菌种异化作用是需氧型；经处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养。答案：D9可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入伊红美蓝试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中
9、加入苏丹试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，如果有尿素分解菌可以呈红色；伊红美蓝试剂可以用来鉴别大肠杆菌；苏丹试剂可以用来检测脂肪；双缩脲试剂可以用来检测蛋白质。答案：A10分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是()A制备浸出液的土壤取自土壤的表层B涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒解析：制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大；涂布器未在酒精灯外焰上的烧灼灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素
10、分解菌的单菌落有关但影响不大；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对实验影响最大；接种操作的双手未用酒精进行消毒，可能会造成污染，但与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大。答案：C11甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是()粉状硫10 gK2HPO44 gFeSO40.5 g蔗糖10 g(NH4)2SO40.4 gH2O100 mLMgSO49.25 gCaCl20.5 gA.甲、乙、丙都是异养
11、微生物B甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物解析：从表中所列的三种培养基成分着手，培养基中缺少氮源，培养基中缺少有机碳，培养基中营养成分最全。由题意中所给的情况分析，只有甲能在培养基中生长，而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物。由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物。答案：D12某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5 cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对
12、土壤处理情况见下表。与此有关的叙述不正确的是()组别1组2组3组4组土壤灭菌不灭菌灭菌不灭菌处理湿润湿润较干燥较干燥A.探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用B预期结果是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解C为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理D该实验的自变量为土壤是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3解析：实验组2组和4组可以形成对照，变量是土壤的湿润程度，来研究土壤微生物对落叶的分解作用；该实验的变量有两个，一个是灭菌、不灭菌，一个是湿润、不湿润。自变量是灭菌、不灭菌，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条件下3、4形成对照，所以
13、1、3分别是两组对照实验的对照组；为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理，消除微生物的影响；1组和3组由于没有微生物，落叶不被分解，2组和4组由于有微生物，落叶不同程度地被分解。答案：D13通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌ABC D解析：根据题意，固氮细菌的生长不需要从培养基上获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长；加入青霉素的培养基上不能生长细
14、菌和放线菌，则可收获霉菌和酵母菌；加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长，而放线菌却能利用酚作原料合成自身的产物。答案：B14MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是()组别培养基中的添加物MRSA菌1100 g/mL蛋白质H生长正常220 g/mL青霉素生长正常32 g/mL青霉素100 g/mL蛋白质H死亡A.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的B第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌C实验还需设计用
15、2 g/mL青霉素做处理的对照组D蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素解析：细菌是原核生物，其细胞中无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定细菌的死亡与否；第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白质H可杀死MRSA菌；第3组缺少2 g/mL青霉素做处理的对照组；抗生素是由微生物产生的具有抗菌作用的物质，而蛋白质H是乳腺细胞产生，不属于抗生素。答案：C15如表为某培养基的配方，有关叙述正确的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1万单位适量1000 mLA.此培养基是天然鉴别培养基B能在此培养基上
16、生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因C此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中D此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准解析：此培养基属于鉴定大肠杆菌的半合成培养基，另外有青霉素还具有选择作用，A错误；能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，B错误；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌，此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，C正确；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准，D错误。答案：C二、非选择题(共5小题，共45分)16(7分)螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素
17、。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_色环带。(2)步骤X表示_。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_菌落。(3)在培养时，需将培养皿倒置并放在_中。若不倒置培养，将导致_。(4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的_分解为NH3和14CO2。解析：(1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶
18、的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基灭菌、倒平板接种培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。(3)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(4)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。答案：(1)红(2)接种涂布单(3)恒温培养箱无法形成单菌落(4)尿素17(10分)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高
19、效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。接种时所用的接种环通过_灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从_开始划线，该分离纯化方法称_法。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。答案：(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法灼烧上一次
20、划线的末端平板划线(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰18(7分)农作物秸秆中含有大量的纤维素，这些纤维素可以在纤维素分解菌的作用下被分解成葡萄糖，然后通过相关微生物的代谢活动转化为酒精或其他产物。请回答下列问题：(1)纤维素分解菌能产生分解纤维素的_酶，该酶是一种复合酶，一般认为它至少包括_三种组分。(2)从自然界中筛选纤维素分解菌时有两个关键的操作步骤：一是选择培养，二是鉴别纤维素分解菌。选择培养时培养基中添加的唯一碳源是_，选择培养的目的是_；鉴别纤维素分解菌时在鉴别培养基中加入了_染液，如果有纤维素分解菌存在，则培养基中以该菌落为中心的周围会出现_。(3)葡萄糖经过不同微生物的代谢可
21、以转化为不同的产物，如在_的作用下可以转化为酒精，在_的作用下可以转化为醋酸。解析：(1)纤维素分解菌能产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分。(2)选择培养指用纤维素作为唯一碳源的选择培养基培养微生物，在这种培养基上只有能够分解利用纤维素的微生物才能生长和繁殖。可以使用刚果红来鉴别是否存在纤维素分解菌，如果存在纤维素分解菌，则在培养基中该菌落周围会出现透明圈。(3)葡萄糖通过酵母菌的无氧呼吸可以转化成酒精，通过醋酸菌的有氧呼吸可以转化为醋酸。答案：(1)纤维素C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶(2)纤维素使能够分解利用纤维素的微生物在培养基上生长和繁
22、殖，从而淘汰不能分解利用纤维素的微生物刚果红透明圈(3)酵母菌醋酸菌19(8分)已知某细菌的两种突变类型细菌和细菌的营养条件和菌落特征都相同，但细菌能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图。(1)步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、 _等营养物质(至少写出3种)；该培养基是(多选)。A固体培养基 B液体培养基C通用培养基 D选择培养基(2)步骤一采用 _接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的 _，最终可能得到纯种的细菌；步骤二
23、各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是 _。(3)无论是培养基(液)，接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行 _ ；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是 _。(4)步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌和细菌，两者未分离。_。_。(5)经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都下降，瓶中同时存在两种细菌，未分离的情况，则应 _，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。解析：(1)牛肉膏蛋白胨培养基中含有细菌生长所需的水、碳源、氮源、
24、无机物、生长因子等营养物质；该培养基一般加琼脂制成固体培养基，并属于通用培养基。(2)由图可知，步骤一采用平板划线法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌。(3)无论是培养基(液)，接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行灭菌；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染。(4)若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌和细菌，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变
25、，则得到细菌；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌。(5)经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤一和步骤二再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。答案：(1)碳源、氮源、无机物、生长因子(任意三种，仅写出一种或两种即可)A、C(2)平板划线菌落筛选、分离两种类型的细菌(3)灭菌防止杂菌污染(4)A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌(5)重复步骤一和步骤二 20(13分).细菌常被应用于生产生活中，如有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同
26、学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌。(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 _为唯一碳源的固体培养基上。为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围清晰区域的大小。一般情况下，如图中清晰区域越大说明 _。.另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示：培养液成分繁殖一代所需的时间(分钟)甲乙丙A.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO443100B.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、8种氨基酸2840C.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、19种氨基酸252580注：“”表示细菌没有生长。(2)在A培养基
27、中增殖较快的细菌是_。丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因是 _。(3)由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的。如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质是 _(多选题)。A碳源B氮源C生长因子 D无机盐E水.下面是有关某细菌G的四项实验：实验1：将G接种于一般培养基上，结果出现菌落。实验2：用一定剂量的紫外线处理G，产生突变种g1。将g1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落。实验3：用另一剂量的紫外线处理G，得突变种g2，将g2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落。实验
28、4：将g1和g2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落。(4)细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了 _，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶。A基因突变B基因重组C染色体畸变D不可遗传变异(5)实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中，它们是作为 _加入一般培养基的。A碳源 B氮源 C生长因子 D无机盐(6)实验4中出现菌落的原因可能是 _。 解析：(1)从实验目的欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌，可以得出该培养基属于选择培养基，培养基的成分应以原油为唯一碳源。细菌可分解原油，分解能力越强，形成的透明圈越
29、大，透明度越高，一般清晰区域越大说明该菌株的降解能力强。(2)观察题图表格可以看出在A培养基中，能生长的细菌是甲和乙，甲繁殖一代需要的时间短，所以增殖较快。比较B、C培养基的成分可知，C培养基的氨基酸的种类比B培养基多，所以丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因可能是B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸。(3)如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质中不需要添加碳源和生长因子。(4)分析资料可知紫外线照射后发生了基因突变，突变后的g1不能合成甲物质，突变后的g2不能合成乙物质。所以细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了基因突变，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶。(5)实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物。在实验2和3中，它们是作为生长因子加入一般培养基的。(6)实验4中出现菌落的原因可能是细菌g1能够合成营养物质乙，g2能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必需的营养要素。答案：(1)原油该菌株的降解能力强(2)甲B培养液中缺乏丙细菌生长所必需的氨基酸(3)B、D、E(4)A(5)C(6)细菌g1能够合成营养物质乙，细菌g2能够合成营养物质甲，因此一起培养可以互相支持保证必需的营养要素16 / 16
