1、园艺植物生物技术园艺植物生物技术 复习题 （课程代码课程代码 392383） 一、 单项选择题（本大题共 60 小题） 1. 可作为植物外植体的表面消毒剂是（） A. 水 B. 聚乙二醇 C. 氯化汞 D. 氯化钠 参考答案：C 2. 大多数植物组织培养最适温度一般为（） A. 37 1 B. 25 1 C. 16 1 D. 4 1 参考答案：B 3. 在适宜的培养条件下，还可以使愈伤组织长期传代生存下去，这种培养成为（） A. 继代培养 B. 再分化培养 C. 胚状体培养 D. 驯化 参考答案：A 4. 大多数植物组织培养培养基最适pH 是（） A. 5.0-5.4 B. 5.8-6.2 C
2、. 1.0-3.0 D. 7.0-8.0 参考答案：B 5. 外植体褐变的原因是（） A. 外植体中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 B. 外植体中的磷酸化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 C. 外植体中的三磷酸腺苷酶被激活，使细胞的代谢发生变化。 D. 外植体中的磷酸化酶被激活，使细胞的代谢发生变化 参考答案：A 6. 植物组织培养初代接种易污染的最可能原因是（） A. 材料过敏 B. 材料过老 C. 接种材料过大 D. 每瓶接种数量太少 参考答案：C 7. 在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（） A. 利用基因工程培育抗虫番茄。 B. 利用细胞工程技术培育“番茄-马铃薯
3、”杂种植株。 C. 利用花药离体培养得到单倍体植株。 D. 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株。 参考答案：D 8. 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养，又可以分化成根、芽等器官，这一过程称为（） A. 脱分化 B. 去分化 C. 再分化 D. 脱分化或去分化 参考答案：C 9. 下来哪种在 MS 培养基中不起促进生长作用（） A. 氨基酸 B. 肌醇 C. 维生素 D. 琼脂 参考答案：D 10. 下列哪种不是无性繁殖的器官（） A.种子 B. 枝条 C. 块茎 D. 块根 参考答案：A 11. 下列有关细胞全能性的含义，正确的是（） A. 每个生物体内的所有细胞都具
4、有相同的功能 B. 生物体内每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 C. 生物体内任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 D. 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程 参考答案：B 12. 下列不属于活性炭在组织培养中的作用是（） A. 吸附有毒物质 B. 减少褐变，防止玻璃化 C. 创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长 D. 增加培养基中的养分 参考答案：D 13. 第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（） A.Morel B. Hanberland C. Schleiden D. White 参考答案：B 14. 下来不属于大量元素的盐是（）
5、A.NH4NO3 B. KNO3 C. ZnSO4 D. MgSO4 参考答案：C 15. 下列培养基中（）无机盐的浓度最低 A.MS 培养基 B. B5 培养基 C. White 培养基 D. N6 培养基 参考答案：C 16. 同一植株下列（）部位病毒的含量最低 A. 叶片细胞 B. 茎尖生长点细胞 C. 根部细胞 D. 茎节细胞 参考答案：B 17. 适合花粉培养的最适时期是（） A. 单核早期 B. 单核靠边期 C. 二核期 D. 三核期 参考答案：B 18. 能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是（） A. GA3 B. IAA C. NAA D. ZT 参考答案：A
6、 19. 赤霉素需要用（）法灭菌 A. 灼烧灭菌 B. 干热灭菌 C. 过滤灭菌 D. 高压湿热灭菌 参考答案：B 20. 适合外植体材料表面消毒的方法是（） A. 高压蒸汽灭菌 B. 适宜浓度的消毒剂浸泡 C. 紫外线消毒 D. 熏蒸灭菌 参考答案：B 21. 经高温灭菌后，培养基的pH 会（） A. 降低 B. 升高 C. 不变 D. 不能确定 参考答案：A 22. 下列不属于生长素类的植物激素是（） A.6-BA B. IAA C. NAA D. IBA 参考答案：A 23. 植物组织培养本质上属于是（） A. 有性繁殖 B. 无性繁殖 C. 配子繁殖 D. 孢子繁殖 参考答案：B 24
7、. 植物组织培养初代培养建立后，培养材料的各种养分都是靠（）得到 A. 自养 B. 异养 C. 寄生 D. 腐生 参考答案：B 25. 植物组织培养是指将（） A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B. 愈伤组织培育成植株 C. 离体的植物器官、组织或细胞哦诶样成完整植物体 D. 愈伤组织形成高度液泡化组织 参考答案：C 26. 植物细胞全能性的必要条件是（） A. 给予适宜的营养和外界条件 B. 脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件 C. 导入其他植物细胞的基因 D. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 参考答案：B 27. 植物组织培养过程中的脱分化是指（） A. 植物体的分生组织
8、通过细胞分裂产生新细胞 B. 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C. 植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D. 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 参考答案：C 28. 植物组织培养中，由愈伤组织产生的芽叫（ ） A. 不定根 B. 不定芽 C. 丛生芽 D. 以上都是参 考答案：B 29. 用于组织培养中的植物器官或组织，称为（ ） A. 组织切片 B. 原生质体 C. 外植体 D. 愈伤组织 参考答案：C 30. 植物组织培养的培养基的灭菌时间为（） A. 10min-12min B. 15min-20min C. 25min-30min D. 30min 以上 参
9、考答案：C 31. 植物组织培养的培养基的灭菌温度（ ） A. 111 B. 121 C. 131 D. 141 参考答案：B 32. 一般情况下植物根段培养中根的直接增殖培养条件是（ ） A. 光培养，25-27 B. 暗培养 25-27 C. 光培养 15-17 D. 暗培养 15-17 参考答案：B 33. 病毒随植物种子和无性繁殖材料传播而扩大分布属于（） A. 介体传播 B. 非介体传播 C. 外力传播 D. 自然传播 参考答案：A 34. 1/2MS 培养基中指的是（） A. 所有药品、物质的用量都减少一半 B. 维生素类减少一半 C. 矿物质元素物质用量减少一半 D. 矿物质、维
10、生素类减少一半，蔗糖、琼脂量不减少，生长调节剂根据需要添加 参考答案：C 35. 一般情况下植物组织培养基所添加的糖类重量为（ ） A. 10g/L15g/L B. 20g/L30g/L C. 35g/L45g/L D. 60g/L70g/L 参考答案：B 36. 植物组织培养基中不添加的糖类物质是（ ） A. 淀粉 B. 葡萄糖 C. 果糖 D. 蔗糖 参考答案：A 37. 外植体的修剪和清洗在（ ）中进行 A. 在田间和实验室 B. 田间和超净工作台 C. 田间 D. 超净工作台 参考答案：A 38. 外植体的表面灭菌在（ ）中进行 A. 准备室 B. 人工培养箱 C. 田间 D. 超净工
11、作台 参考答案：D 39. 叶片做外植体进行固体培养时，一般情况下（）与培养基接触。 A. 叶片正面 B. 叶片反面 C. 叶片埋入培养基内 D. 以上都不对 参考答案：A 40. 诱导愈伤组织时培养基的生长素与细胞分裂素类的比例为（） A. 生长素与细胞分裂素的比例适中 B. 生长素类与细胞分裂素类的比例高 C. 生长素类与细胞分裂素类的比例低 D. 以上都不对 参考答案：A 41. 进行芽诱导时培养基的生长素类与细胞分裂素类的比例为（ ） A. 生长素与细胞分裂素的比例适中 B. 生长素类与细胞分裂素类的比例高 C. 生长素类与细胞分裂素类的比例低 D. 以上都不对 参考答案：C 42.
12、进行根诱导时培养基的生长素类与细胞分裂素类的比例为（ ） A. 生长素与细胞分裂素的比例适中 B. 生长素类与细胞分裂素类的比例高 C. 生长素类与细胞分裂素类的比例低 D. 以上都不对 参考答案：B 43. 下列药品中不是细胞分裂素类生长调节剂的是( ) A. KT B. ZT C. GA D. 6-BA 参考答案：C 44. 在组织培养中，一般取生理年龄（B ）的培养材料为外植体。 A. 大 B. 小 C. 大、小都可以 D. 以上都对 45. 为了防止培养基变褐，常往培养基中加入的物质是（ ） A. 活性炭或维生素C B. 活性炭或甲醛 C. 维生素C 或甲醛 D. 盐酸或氢氧化钠 参考
13、答案：A 46. 外植体在没有铁元素的培养基中诱导、生长，诱导产物会发生（ ）现象 A. 污染 B. 矮化 C. 玻璃化 D. 黄化 参考答案：D 47. 下列培养材料是组织的为（ ） A. 茎尖 B. 幼嫩果实 C. 幼嫩种子 D. 幼根 参考答案：A 48. 糖类在植物在植物组织培养中不具有的作用是（ ） A. 提供能量 B. 提供碳源 C. 调节渗透压 D. 调节维生素吸收 参考答案：D 49. 进行固体培养时，外植体必须（ ） A. 全部埋入培养基中 B. 部分与培养基接触 C. 以上都对 D. 以上都不对 参考答案：B 50. 使用净化工作中时，紫外线灯必须照射（ ） A. 5min
14、 B. 10min C. 15min D. 25min 参考答案：C 51. 下列不属于现代生物技术研究的内容是（） A. 有性杂交 B. 组织培养 C. 基因克隆 D. 遗传转化 参考答案：A 52. 植物胚胎培养的最终目的是（） A. 繁殖稀有种子 B. 克服远缘杂交的不亲和性 C. 克服种子休眠 D. 获得愈伤组织再生成植株 参考答案：B 53. 胚乳培养产生的再生植株，较多的是（） A. 单倍体 B. 二倍体 C. 三倍体 D. 四倍体 参考答案：C 54. 影响植物组织培养效果的最主要因素是（） A. 培养基成分 B. 培养基相对湿度 C. CO2浓度 D. 培养器皿 参考答案：A
15、55. 植物组织培养适宜湿度是（） A. 50-60% B. 60-70% C. 70-80% D. 80-90% 参考答案：C 56. 6-BA 是指（） A. 苄基腺嘌呤 B. 激动素 C. 萘乙酸 D. 吲哚乙酸 参考答案：A 57. 下列材料遗传上最稳定的是（） A. 茎尖分生组织 B. 不定芽 C. 体细胞胚 D. 愈伤组织 参考答案：A 58. 下列有关生长素说法错误的是（） A. 诱导愈伤组织的产生 B. 诱导体细胞胚的产生 C. 试管苗生根 D. 促进茎增粗 参考答案：D 59. 有关细胞分裂素说法错误的是（） A. 促进细胞分裂与分化 B. 促进细胞脱分化 C. 促进侧芽生长
16、 D. 增强蛋白质合成 参考答案：B 60. 植物组织培养第二个突破是（） A. 胡萝卜髓细胞培养成完整直追 B. 酶法分离原生质体成功 C. 兰花产业化 D. 花药培养获得再生植株 参考答案：A 二、判断题（本大题共 30 小题） 1、胚培养可以拯救杂种败育胚（） 参考答案： 2、培养基中加入活性炭是为了向植物提供碳源（） 参考答案： 3、叶片接种是将背叶面朝下放置（） 参考答案： 4、珠心胚为单性生殖的一种（） 参考答案： 5、花粉植物细胞均为单倍体（） 参考答案： 6、条件培养基是针对性加入某种营养物质的培养基（） 参考答案： 7、原生质体培养必须加渗透稳定剂（） 参考答案： 8、愈伤组
17、织培养可以达到脱毒效果（） 参考答案： 9、植物组织培养可以用食糖代替蔗糖（） 参考答案： 10、固体培养基可以加活性炭来增加通气度，以利于发根（） 参考答案： 11、一般来说，光照强度较强，幼苗容易引起徒长，而光照强度较弱幼苗生长粗壮。 参考答案： 12、二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织（） 参考答案： 13、幼嫩组织比成熟的老组织脱分化难（） 参考答案： 14、未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，不易培养。 参考答案： 15、环境相对湿度过低容易使培养基丧失大量水分，湿度过高时，则易造成污染。 参考答案： 16、有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其
18、叶片乃至全株上表现特有的病斑，把这 种植物称为病毒敏感植物闳指示植物。 参考答案： 17、培养基中当生长素与细胞分裂素的比例高时，仅形成愈伤组织（） 参考答案： 18、由性细胞发育而成的胚叫胚状体，而由体细胞发育而成的胚加合子胚（） 参考答案： 19、培养基最常用的糖是葡萄糖（） 参考答案： 20、花药培养时，花粉发育的最适宜时期是单核前期（） 参考答案： 21、IAA 通过高温高压灭菌其活性容易受到极大的影响（） 参考答案： 22、进行植物组织培养基本的前提条件是给予充足的营养 参考答案： 23、在组织培养中，不耐热的物质用过滤灭菌法进行灭菌 参考答案： 24、增殖困难是组织培养中三大不易解
19、决问题中的其中之一（） 参考答案： 25、1902 年是由德国科学家White 首先提出植物细胞具有全能性的理论概念（） 参考答案： 26、大多数植物组织培养需要的pH 环境是 5.8-6.2 之间（） 参考答案： 27、NAA 是细胞分裂素（） 参考答案： 28、通常植物的茎尖分生组织部位所含的病毒很低甚至没有 参考答案： 29、一个已分化的细胞若要表现全能性，首先要经历脱分化这个过程（） 参考答案： 30、用于外植体、手、超净工作台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好（） 参考答案： 三、名词解释（本大题共 15 小题） 1、植物组织培养 参考答案：是指在无菌和人工控制的环境下，利用适当
20、的培养基，对离体的植物器官、 组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。 2、细胞全能性 参考答案：指每一个植物细胞都携带该植物的全部遗传信息，在适当条件下发育成完整植 物的潜在能力。 3、脱分化 参考答案：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去 原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无特定结构和功能的细胞团或愈伤组织的过程。 4、母液 参考答案：在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称 量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需要的各种成分分别配制成 比需要量大若干倍的浓缩母液。 5、外植体 参考答案：把由活
21、植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。 6、愈伤组织 参考答案：没有特定结构和功能的细胞团。 7、灭菌 参考答案：是指使用物理或者化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及 芽孢。使之达到无菌的水平 8、玻璃化现象 参考答案：是指试管苗的一种生长失调症状。当植物材料进行离体繁殖的时候，有些培 养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明和水渍状，这种现象称为玻璃化。 9、无病毒苗 参考答案：指不含该种植物主要危害病毒的苗木。 10、胚状体 参考答案：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚 状类似物，此现象无论在体细胞培养还是生殖细胞培养中均可以看到，
22、因而统称为体细胞 胚或胚状体。 11、单倍体 参考答案：只含有配子染色体组数的植株。 12、再分化 参考答案：离体培养的植物细胞或组织经脱分化重新进行分化，形成愈伤组织或完整植物 的过程。 13、人工种子 参考答案：指植物培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚 乳和人工种皮中每次哦那个人形成能发芽出苗的颗粒状。 14、指示植物 参考答案：是指对病毒反应蜜柑、整张特征显著的植物。 15、植物器官培养 参考答案：主要是指植物的根、茎、叶、花和幼小果实的无菌培养。 四、简答题（本大题共 15 小题） 1、植物组织培养的三大难题是什么，并加以阐述。 答：植物组织培养的三大难题是
23、污染、褐变和玻璃化。 污染是指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。 褐变是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成 棕褐色的醌类物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散致使培养基逐渐变成褐色，而且会抑 制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐死亡的现象。 玻璃化是指培养的植物会生长出肿胀、扭曲的叶片，这种叶片不可逆地变成半透明状 并最终坏死，这种情况下会导致苗的死亡。 2、为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂？ 答：因为幼胚是异养型，处于这一时期的幼小胚完全依赖和吸收周围组织的有机营养 物质，而成熟胚则为自养型，这一时期
24、胚能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身代谢作用合 成所必须的物质，所以在进行培养时，幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂。 3、外植体成苗途径有哪些？ 答：第一种：先形成愈伤组织，再分化成完整植株； 第二种：在组织培养中再生植株可通过胚状体途径形成完整植株； 第三种：外植体经诱导后直接形成根或芽，发育成完整植株。 4、植物组织培养有哪些特点？ 答 ： （1）培养条件可以人为控制； （2）植物生长周期短，繁殖系数高； （3）管理方便， 不受季节环境条件影响，有利于工厂化生产和自动化控制。 5、植物组织培养技术主要包括哪些环节？各环节的工作内容是什么？ 答 ： （1）培养基配制技术：包括培养的选择
25、、母液配制、培养基配制与灭菌 （2） 培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择，外植体的选择和处理 （3） 无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超近工 作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。 （4） 培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件 及培养基组成、pH、渗透压等各种化学环境条件。 6、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌？ 答:（1）培养基和培养器皿一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解， 则可采用过滤灭菌。 （2）植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：A）外植体的预 处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并
26、将外植体用流水冲洗干净。B）用 75% 酒精浸润材料 30s 左右。C）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时摇动，使植物材料与灭菌剂有 良好的接触，若灭菌过程中夹肉数滴吐温，则灭菌效果更好。D）植物材料用无菌水冲洗 3-5 次， 以除去灭菌剂。 7、无菌操作时应注意哪些事项？ 答 ： （1）若接种室长期没有使用，应提前用甲醛熏蒸接种室；（2）在接种前15-20min， 打开超近工作台的风机以及台上的紫外灯； （3）接种员先洗净双手，在缓冲间换号专用实验 服等；（4）上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，特别是指甲处，然后 70%酒精喷雾降尘， 并擦拭工作台面；（5）接种工具蘸 95%酒精，灼烧；（6）接种时
27、将试管倾斜，使试管口在 酒精灯火焰上转动，灼烧数秒钟。接完种后，将管口在火焰上再灼烧数秒钟。 （7）接种时， 接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等； （8）接种完毕后要清理干净并用酒 精擦拭工作台面。 8、在植物组织培养中，通过哪些途径可以得到完整的植株？ 答： （1）外植体-愈伤组织-根、芽 - 试管苗 先长芽，再长根；先长根，再长芽 （2） 外植体-胚状体 - 试管苗 （3） 外植体-根、芽 - 试管苗 9、与常规苗相比，试管苗具有哪些特点？ 答 ： （1）生长细弱；（2）光合作用差；（3）叶片气孔数目少，活性差；（4）根的吸收 功能弱；（5）对逆境的适应和抵抗能力差。 10、
28、一般组织培养的操作程序是什么？ 答： （1）培养器皿的清洗； （2）培养基的配制，分装盒高压灭菌； （3）无菌操作 - 材 料的表面灭菌和接种； （4） 将培养物放到培养室培养； （5）试管苗的驯化、移栽和初期管理。 11、请说明生长素和细胞分裂素在组织培养中的作用，并列举常见的种类？ 答 ： （1）生长素类：主要被用于诱导愈伤组织形成，促进细胞脱分化，促进细胞伸长， 诱导根的分化，促进生根，如IAA，NAA,IBA 和 2，4-D。 （2）细胞分裂素：诱导芽的分化促进侧芽萌发；促进细胞分裂与扩大；抑制根的分化； 抑 制衰老，减少叶绿素分解，有保鲜效果。如6-BA，KT 和 ZT 等。 12、
29、茎尖脱毒的基本原理是什么？ 答 ： （1）病毒在植物体内分布不均匀，越接近顶端分生组织，病毒浓度越低；（2）病 毒 DNA 分子与细胞分裂蛋白质合成存在竞争，在迅速合成的植物细胞中正常合成的蛋白质占 优势；（3）通常认为生长素浓度过高会抑制病毒的生长，而顶端分生组织区域往往具有较高浓 度的生长素；（4）如果植物体内存在病毒钝化区域，那么通常就是顶端分生组织区域。 13、 人工种子的优点有哪些？ 答 ： （1）使自然条件下不易结实或种子昂贵的材料能快速繁殖和保存；（2）繁殖速度快 ； （3）为基因工程技术应用于生产提供桥梁； （4）固定杂种优势；（5）提高植物抗逆性； （5） 取代天然种子，节约
30、粮食。 14、请比较花药培养与花粉培养的异同？ 答：相同点：（1）目的都是培育单倍体植株；（2）成苗途径相同，既有胚状体成苗也 有愈伤组织再分化成苗两条途径。 不同点：（1）花药培养属于器官培养，而花粉培养则属于细胞培养；（2）花粉培养没 有药壁组织干扰，可计数小孢子产胚率；可观察雄核发育的全过程；单倍体产量高吗，但技 术更复杂。 15、简述花粉分离的方法？ 答 ： （1）自然散落法：将花药接种在预处理液或液体培养基上，待花粉自动散落后， 收集培养；（2）挤压法：在烧杯或研钵中挤压花药，将花粉挤出后收集培养；（3）机械游离 A）磁搅拌法：用磁力搅拌器搅拌培养液中的花药，使花粉游离出来；B）超速
31、旋切法：通 过搅拌器中的高速旋转刀具破碎花蕾、穗子、花药，使小孢子游离出来。 五、论述题（本大题共 6 小题） 1、植物组织培养主要应用于哪些方面？ 答 ： （1）快速繁殖：运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个 植株；（2）种苗脱毒：针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培 育出大量的无病毒种苗； （3）培育和创制新品种：利用组织培养可以使难度很大的远缘 杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种； （4）大量产生次生代谢产物：通过植物细 胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下 50 多个大类，其中 已有 30 多种次生物质含量在人工培养时已达
32、到或超过亲本植株的水平； （5）植物种质 资源的离体保存：植物组织培养结合超低温保存技术，可以给植物种质资源保存带来一 次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子，但所占的空间仅为原来的几万分 之一，而且在-186的液氮中可以长时间保存，不像种子那样需要年年更新或经常更新 ； （6）人工种子：人工种子便于贮藏和运输，适合机械化播种；繁殖速度快，不受季节 和环境限制，有利于工厂化生产；体细胞胚胎由无性繁殖体系产生，可以固定杂种优势。 2、论述离体培养污染产生的原理及预防措施？ 答：污染：污染原因从病源来源主要有细菌和真菌两大类。 原 因 ： （1）外植体材料消毒不彻底； （2）培养基灭菌不
33、彻底； （3）操作环节不洁净； （4）操作人员操作不规范、不熟练。 预防措施：（1）减少或防止材料带菌； （2）外植体灭菌要彻底； （3）培养基灭菌要 彻底；（4）玻璃器皿和金属器皿的灭菌要彻底； （5）无菌室的消毒要彻底； （6）操作人 员一定要严格按照无菌操作的程序进行接种。 3、配制1L 培养基，配方为MS + 0.05mg/L NAA + 0.1 mg/L 6-BA + 30g/L 蔗糖 + 0.6% 琼 脂。MS 母液的浓度分别是：大量元素 20 倍，微量元素 500 倍，铁盐 100 倍，有机物 50 倍 ，0.1mg/mL NAA 和 0.1 mg/mL 6-BA。请叙述该培养基
34、的配制过程（包括计算过程） 。 答：大量元素：1000/20=50mL 微量元素：1000/500=20mL 铁盐：1000/100=10mL 有机物：1000/50=20mL 6-BA： （0.1mg/L 1L）/1mg/mL=0.1mL NAA： （0.05mg/L 1L）/1mg/mL=0.05mL 糖：30g/L1L=30g 琼脂：0.6%1000=6g 准备好需要的各种器物并放于试验台上，称量好琼脂和蔗糖放入准备好蒸馏水中， 并进行熬制。同时按要求量取各种上面计算的母液，加入适量的蒸馏水中，混合后倒入 融化的琼脂和蔗糖溶液中，最终定容至 1L，并调节 pH 为 5.8-6.2 之间。
35、 4、某地区的草莓多年无性繁殖后，植株变的矮小，产量和品质都下降，请你用你所学 的生物技术只是分析原因，并设计一个解决方案。 答：可能是由于草莓感染了病毒，造成品种退化。 解决方案：可通过草莓茎尖培养脱毒来解决这个问题。 草莓茎尖培养脱毒程序： （1） 外植体的选择 （A）进行脱毒培养的材料，通常可以直接从大田里取； （B）如为了减少污染可按 下面的方法进行：将草莓苗移栽到生长箱内生长，待抽出匍匐茎后摘取其匍匐茎用于茎尖 剥离。 （2） 消毒 由于茎尖分生组织受彼此重叠的叶片严密保护，基本不带菌，因此消毒相对简单， 只需茎芽进行表面消毒。 （3） 接种：在超净工作台上，在解剖镜下，用解剖针和镊
36、子等工具，将叶片和叶 原基剥离，露出半圆形的顶端分生组织，用解剖刀切下，接种到培养基上。 （4） 培养：一般常用的培养基为 MS 培养基。最好在培养基中再加入一些植物生 长调节物质。一般茎尖培养的培养基配方为 MS+0.04 mg/L KT+ 0.5mg/L IAA+0.1mg/L GA3+3%蔗糖，但可根据实际情况进行调整。培养温度 22，光照 1000-2000Lx，16h/d。 （5） 脱毒苗鉴定：可采用直接检测法、指示植物法、抗血清鉴定法、电镜鉴定法 等方法对脱毒苗进行鉴定。 （6） 脱毒苗再经过快繁可进行田间栽培。 5、通过对园艺植物生物技术的学习，谈谈生物技术在园艺科学中的应用与展
37、望？ 答： （1）细胞工程的应用 良种快繁、脱毒、种质创新（花药培养获得单倍体， 胚乳培养获得三倍体，离体诱变获得突变体，原生质体融合） 、种质保存、有用物质生 产。 （2） 基因工程应用 获得抗病虫材料、获得抗除草剂材料、延迟果实成熟、获得 抗逆材料、获得独特材料。 （3） 分子标记应用 生物多样性和亲缘关系研究、数量性状多重效应、环境因素 的影响、对育种材料的分析评价、卿本的选择选配、选育种材料的检测与早期鉴定等， 均可利用分子标记开展研究。 6、植物脱毒的主要方法有哪些？其主要原理是什么？ （ 1 ） 热处理脱毒 利用病毒和植物组织对高温的耐受性有差异，植物组织处于高于正 常温度的环境中
38、，组织内部的病毒受热后部分或者全部钝化，增殖减缓或停止，以致病毒含量 不断降低从而失去病毒的侵染能力。 （ 2 ） 微茎尖培养脱毒 病毒在植物体内分布不均匀性，即根尖和芽尖的分生组织（约 0.2-0.4mm 区域）含病毒少或不含病毒。 （ 3 ） 茎尖与热处理相结合的方法 能克服单独茎尖培养时，茎尖过小成活率太低， 茎尖太大又脱除不掉病毒的缺点。 （ 4 ） 愈伤组织培养脱毒 病毒在植物器官、组织和细胞群落分布不均匀，愈伤组织 中那些无病毒的细胞增殖后，产生的植物即为脱毒苗；愈伤组织中，病毒的复制能力衰退， 复制速度赶不上细胞的增殖速度；有些细胞通过突变获得了抗病毒的抗性。 （ 5 ） 珠心组织培养脱毒 珠心组织和维管束系统无直接联系，病毒因此不能进入。 （ 6 ） 茎尖微体嫁接脱毒 将无病毒茎尖（0.4-1.0mm）嫁接在培养基上培养的实生砧 木上，以获得脱毒苗木的技术。
