1、08050805园艺植物生物技术园艺植物生物技术 第一批作业 论述题名词解释 1、cDNA 文库 参考答案：指将某生物某一发育时期所转录的mRNA 经反转录形成的 DNA 片段与某种载体连接 而形成的克隆的集合。 论述题 名词解释 3、鉴别寄主 参考答案：植物病毒具有有一定的寄主范围，并在某些寄主植物上表现特定的症状，这种能鉴别某种病毒 的植物称为鉴别寄主。 论述题 名词解释 4、抗体 参考答案：指在抗原物质刺激下，免疫动物机体内所产生的可与该抗原物质发生特异性结合反应的免疫球 蛋白。 论述题 名词解释 5、愈伤组织 参考答案：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞 原生质体
2、：指采用机械或酶解法去掉了细胞壁的裸露的且具有活力的细胞。 论述题 名词解释 6、原生质体融合 参考答案：也称体细胞杂交，是指不同种类的原生质体不经过有性阶段，在一定条件下融合创造杂种的过 程。 论述题 名词解释 7、植物组织培养 参考答案：指通过无菌操作，把植物体的器官、组织、细胞甚至原生质体，接种于人工配制的培养基上， 在人工控制的环境条件下进行培养，使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。 填空题 3、DNA 在生物体内的复制方式是 参考答案：半保留复制 填空题7、 Ti 质粒和 Ri 质粒上存在一个特定的被称为 区段， 它能共价的插入并整合到 植物染色体组中。 参考答案：T- DNA
3、 填空题 10、 常见用于分子连锁遗传图谱构建的作图群体有临时群体和永久群体，其中的 DH 群体属于。 参考答案：永久群体 填空题 11、常用于琼脂糖凝胶电泳 DNA 显色的物质是。 参考答案：溴化乙啶 填空题 4、PCR 技术中常用的 DNA 聚合酶是。 参考答案：Taq DNA 聚合酶 填空题 1、 1953 年， 美国分子生物学家沃森 （Watson） 和英国分子生物学家克里克 （Crick） 根据 X 射线衍射分析提出了著名的。 参考答案：DNA 双螺旋学说 填空题 2、DNA 测序有两种经典手工测序方法，一是 Sanger 的酶学法(双脱氧法)，另一 种是 Gilbert 和 Max
4、am 的。 参考答案：化学法 填空题 5、RNA 提取过程中的关键是抑制的活性。 参考答案：RNA 酶 填空题 6、SSR 标记是（显性/共显性）标记。 参考答案：共显性 填空题 8、噬菌体载体有两种类型，即和置换型。 参考答案：插入型 填空题 9、病毒抗血清是用纯化的注射免疫动物获得的。 参考答案：病毒 填空题 12、常用于植物基因组 DNA 克隆的两种载体是细菌人工染色体和。 参考答案：酵母人工染色体 填空题 13、从生物技术角度看，园艺作物种苗的生产中利用最为广泛的技术 是。 参考答案： 离体快繁 填空题 15、德国植物生理学家Haberlandt（哈布兰特）提出了学说。 参考答案： 细
5、胞全能 填空题14、从原生质体和酶的活性两方面考虑，原生质体分离的酶解温度一般设定 为。 参考答案：24-26。 填空题16、对培养基的灭菌一般采用湿热高温高压灭菌法，灭菌的温度为 。 参考答案：121 填空题 17、对维生素、蛋白质、多肽、生长因子等无法用高温高压灭菌的物质，一般用 过滤的方式灭菌，过滤器所使用滤膜的孔径为的滤膜可以除去细菌和霉 菌。 参考答案：0.22m 填空题 18、发根农杆菌侵染植物后，会诱使植物细胞产生许多。 参考答案： 发状根 填空题19、基因文库主要包括基因组文库和 两种。 参考答案：cDNA 文库 填空题20、基因芯片按用途可分为 和 DNA 测序芯片 参考答案
6、：表达谱芯片 填空题 21、经济发展合作组织(OECD)1993 年提出了食品安全性评价的原则。 参考答案：实质等同性 填空题22、 茎尖培养脱病毒的原理是病毒在植物体内分布不均匀， 在顶端生长点的 病 毒浓度低，大部分细胞不带病毒 参考答案：分生组织 论述题 名词解释 2、基因组文库 参考答案：指将某生物的全部基因组 DNA 切割成一定长度的 DNA 片段克隆到某种载体上形成的文库。 第二批作业 填空题6、农杆菌介导的植物遗传转化主要使用来源于 和发根农杆菌的工程载 体。 参考答案：根癌农杆菌 填空题 23、原生质体主要的培养方法有三种：液体浅层培养法、固体培养法和 参考答案：固液双层培养法
7、 填空题 8、配子-体细胞融合可以获得无籽的植株。 参考答案：三倍体 填空题24、与 pBR322 等环状质粒不同，噬菌体为 双链 DNA 分子。 参考答案：线状 填空题26、植物原生质体是指不含 的植物细胞。 参考答案：细胞壁 填空题 25、原生质体诱发融合包括 NaNO3法、高 pH-高钙法、PEG 法、及微融合。 参考答案：电击法 填空题27、最早记载的植物病毒是。 参考答案：郁金香杂色病 填空题 1、净化工作台无菌风送风方式主要有垂直送风和。 参考答案： 水平送风 填空题2、离体培养的植物材料常用的碳源是 。 参考答案： 蔗糖 填空题 3、连锁图谱构建的理论基础是。 参考答案：染色体的
8、交换与重组 填空题 4、目前植物离体培养中最常用和使用范围最广的一种培养基是。 参考答案：MS 论述题 名词解释 1、转基因生物安全 参考答案：是指防范由转基因生物技术的开发和应用对人类、动植物、微生物以及生态环境构成的危险或 潜在风险。 论述题 名词解释 2、转基因植物 参考答案：指通过基因转移技术，将有益基因转移到植物细胞内，改变其遗传组成，使之获得有益的生物 特征而培育出来的高产、优质、多抗的植物新品种。 论述题 名词解释 3、核心种质 参考答案：用一定的方法选择整个种质资源的一部分，以最小的资源数量名词解释和遗传重复最大限度地 代表整个遗传资源的多样性。 论述题 名词解释 4、基因芯片
9、 参考答案：把大量基因探针或基因片段按特定的排列方式固定在硅片、玻璃、塑料或尼龙膜等载体上，形 成致密、有序的 DNA 分子点阵，并可利用核酸杂交原理来检测未知分子。 论述题 名词解释 5、分子标记 参考答案：直接反映 DNA 核苷酸序列多态性的标记，属于遗传标记的一种。 论述题 名词解释 6、继代培养 参考答案：对来自于外植体所增殖的培养物(包括细胞、组织或其切段)通过更换新鲜培养基及不断切割或 分离，进行连续多代的培养，就称为继代培养。 填空题5、 年，世界首例转基因植物培育成功。 参考答案： 1983 填空题9、热处理脱毒的原理是利用病毒类病原与植物的 不同。 参考答案：耐热性 填空题
10、10、人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞称 为。 参考答案：愈伤组织 填空题 11、人生物体外进行 DNA 的复制采用的方法是。 参考答案：PCR 填空题 12、世界上第一例通过植物花药培养获得单倍体植株是由印度科学家培养 植物花药得以实现。 参考答案： 曼佗罗 填空题13、世界上首例转座子是在玉米中发现的 。 参考答案：AC/DS 填空题 14、世界上转基因植物种植面积最大的国家是。 参考答案：美国 填空题 15、体细胞杂种中叶绿体的遗传行为主要有三种：单亲传递、共存及重组，其中 较为常见的遗传方式是。 参考答案：单亲传递 填空题16、通过花粉培养可以获得 植株，在植物育
11、种中具有重要价值。 参考答案：单倍体 填空题17、 图位克隆法需要对目的基因进行定位， 定位的主要途径是通过 技术。 参考答案：分子标记 填空题18、我国颁布的第一部与转基因植物有关的条例是 。 参考答案：基因工程安全管理办法 填空题19、我国首例商品化生产的转基因园艺植物是 。 参考答案：番茄-百日鲜 填空题20、血清学检测病毒的原理是 。 参考答案：抗原-抗体反应 填空题21、用农杆菌转化植物时，需要在植物再生培养基中添加 ，防止细菌过度生长 而产生污染。 参考答案：抑菌性抗生素 填空题22、由免疫动物的单细胞系所产生的抗体称为 参考答案：单克隆抗体 填空题 7、农杆菌用于植物遗传转化时，
12、适合用于类型的植物的转化。 参考答案：双子叶 第三批作业 填空题判断题 19：随机扩增多态性 DNA(RAPD)标记采用两条引物进行PCR 扩增。 参考答案：错误 填空题判断题 22：原生质体的分离目前主要采用一步法”酶处理获得。 参考答案：正确 填空题判断题 21：荧光素双醋酸酯(FDA)检测原生质体活性时，具有活力的原生质体在紫 外线照射下发出绿色荧光。 参考答案：正确 填空题判断题 2：pUC 质粒载体可以容忍插入比噬菌体载体更长的外源DNA 片段。 参考答案： 错误 填空题判断题 3：RAPD 标记是指简单重复序列标记，主要检测真核生物的基因组中普遍 存在着二核苷酸、三核苷酸或四核苷酸
13、的简单串联重复序列尤其是(CA)重复序列。 参考答案：错误 填空题判断题 11：基因组文库和 cDNA 文库的概念是等同的。 参考答案：错误 填空题判断题 12：将病毒注射到动物体内后会刺激动物机体产生免疫反应物质，该产生的 物质称为抗原。 参考答案：错误 填空题判断题 16：生物安全概念实际上就是指的转基因生物安全。 参考答案：错误 填空题判断题 18：双子叶植物的基因转化一般用含 Ti 质粒的农杆菌转化法进 行。 参考答案：正确 论述题简答题 2:简述影响原生质体培养及植株再生的因素。 参考答案：答：(1) 原生质体来源。分离原生质体所用外植体的生理状态与原生质体的质量 对其后的分裂频率之
14、间有着密切的关系。 （2）基因型。同一植物不同基因型的原生质体脱分 化与再分化所要求的条件不一样， 造成不同品种在相同条件下的再生能力也会不同。 (3) 培 养基。来源于同一种基因型的原生质体，在不同培养基中的再生能力也不一样。 （4）培养基 附加成分。包括培养基中的内源、 外源激素以及其他添加成分也会对培养产生影响。 (5) 培 养条件和培养方法。主要是培养环境的光质会影响到原生质体细胞壁再生。 （6）渗透压调节 剂。 （7）外界微电流处理。 论述题简答题 3:简述原生质体分离酶液的组成及作用。 参考答案： 答：（1）、 纤维素酶。从绿色木霉中提取的一种复合酶制剂，主要含有纤维素 酶 C1，
15、作用于天然的和结晶的纤维素，具有分解天然纤维素的作用，还含纤维 素酶 CX，作用于定形的纤维素，可分解短链纤维素。（2）、半纤维素酶。可以 降解半纤维素为单糖或单糖衍生物。（3）果胶酶。 降解联结细胞的中胶层，使 细胞从组织中分开，以及细胞与细胞分开。（4） 、离析酶。离析形成单细胞。 论述题 简答题 4:理想的遗传标记应具备的特点？ 参考答案：答： （1） 、 多态性高，标记数目多，提供的信息量大。 （2） 、共显性遗传，能区 分纯合基因型与杂合基因型。 （3） 、呈现中性，不影响目标性状表达，与不良性状无必然连 锁。 （4） 、表现稳定，不受植株内外环境的影响。 （5） 、经济方便，易于观
16、察记载。 论述题简答题 1:简述 AFLP 标记优缺点？ 参考答案： 答：（1）AFLP 标记优点：A、具有 RFLP 技术的可靠性与 PCR 技术的高效性。B、 与 RFLP 相比，AFLP 不需要 Southern 转移、分子杂交等步骤，故只需少量 DNA， 实验结果稳定可靠，信息量大。（2）AFLP 主要的缺点：A、对基因组 DNA 和限 制酶的质量要求高，酶切不完全可能会出现假阳性。B、操作步骤较多，对实验 技能要求高，成本也较高。C、大多数为显性标记，难于鉴别等位基因。D、该技 术已申请专利，只能用于非盈利性的科学研究。 填空题判断题 23：原生质体分离所使用的各种酶液配好后应进行高
17、温高压灭菌处理 参考答案：错误 填空题判断题 24：植物病毒都可通过嫁接传染。 参考答案：正确 填空题判断题 25：植物细胞全能性是组织培养的理论基础。 参考答案：正确 填空题判断题 26：植物组织培养中的培养基可用清洁的自来水配制。 参考答案：错误 填空题判断题 27： 质粒是寄生于细菌内、 独立于染色体外并能自我复制的小环状DNA 分子， 在细菌细胞分裂时能稳定传递给予代的遗传因子。 参考答案：正确 填空题判断题 1：细胞学说”是由德国植物生理学家Haberlandt（哈布兰特）于1902 年提 出的。 参考答案：错 填空题判断题 4：RFLP 分子标记多态性出现只能由限制性酶切位点的改变
18、所导致。 参考答案：错误 填空题 判断题 5：Western 杂交是针对转基因生物外源目的基因 RNA 转录水平的检测。 参考答案：错误 填空题判断题 6：White 首先建立了世界上第一例人工合成培养基。 参考答案：正确 填空题判断题 7：胞质杂种属于非对称杂种的一种形式。 参考答案：正确 填空题判断题 8：分子标记是遗传标记的一种形式。 参考答案：正确 填空题判断题 9：花粉培养可以获得单倍体植株。 参考答案：正确 填空题判断题 10：基因枪介导的基因遗传转化属于物理转化。 参考答案：正确 填空题判断题 13：将酶解的原生质体与蔗糖溶液(23-25)混合离心纯化原生质体的方 法称为下沉法纯
19、化。 参考答案：错误 填空题判断题 14：抗体与抗原的结合是特异性的，一种抗体分子只能与其对应的抗原结 合。 参考答案：错误 填空题判断题 17：世界上转基因植物种植面积最大的国家是阿根廷。 参考答案：错误 填空题判断题 20： 我国首例商品化生产的转基因园艺植物是耐贮藏的番茄-华番一号”。 参考答案：正确 第四批作业 论述题简答题 1.用于构建文库的 cDNA 载体应具有哪些共同的特性？ 参考答案： 答：（1）能在受体细胞内进行独立和稳定的DNA 自我复制。（2）易于从宿主细 胞中分离，并进行纯化。 （3）在其DNA 序列中，具有适当的限制性内切酶位点。 这些位点位于 DNA 复制的非必需区
20、内，可在这些位点上插入外源DNA，但不影响 载体自身 DNA 的复制。（4）具有能够观察的表型特征，在插入外源 DNA 后，这 些表型特征可以作为重组 DNA 的选择标志。 论述题简答题 2.园艺植物组织培养的作用体现在哪些方面？ 参考答案：答： （1） 、 快速繁殖。 离体培养方法已成为一些园艺植物良种繁育的一种有力手段， 可产生了明显的经济效益。 （2） 、脱毒种苗培养。 （3） 、提高育种效率，改良品种。A、培育 单倍体；B、胚与胚乳培养；C、与常规育种技术相结合，提高育种成效。 （4） 、种质资源保 存。 （5） 、进行生理生化，细胞学，遗传学等领域的基础研究。 论述题简答题 6.转基
21、因食品评价的内容包括哪些方面？ 参考答案：答： (1)、有毒物质。转基因食品不应比其他同种可食食物含有更多的毒素，必须 确保转入外源基因或基因产物对人畜无毒。 (2)、过敏源。主要分析基因的来源、目标蛋白 与已知过敏源的序列同源性、 目标蛋白与已知过敏患者血清中IgE 能否发生免疫反应， 另外 还要考虑营养物质和抗营养因子的含量等。 （3）营养问题。外源基因可能对食品的营养价值 产生无法预期的改变，其中有些营养降低而另一些营养增加。（4）对抗生素的抵抗作用。遗 传工程体中引入的抗生素抗性基因是否有可能转移到胃肠道的微生物或上皮细胞中， 并成功 地结合和表达，从而对抗生素产生抗性，影响到人或动物
22、的安全。 论述题简答题 4:植物原生质体培养主要用于哪些领域？ 参考答案：答：（1） 、种质资源保存。主要用于超低温保存。 （2） 、原生质体融合。通过不同 类型的原生质体融合克服传统育种方法所面临的生殖障碍，创造新的种质材料。 （3） 、筛选 突变体。由于原生质体在培养过程中能够产生体细胞无性系变异， 可以从中选出具有优 良性状的变异体， 因此可成为农作物改良的重要遗传资源。 （4） 、 遗传转化。 （5） 、基础研究。 原生质体为细胞生物学、 发育生物学、细胞生理学、病毒学等学科的基础理论研究提供了想 的实验体系。 论述题简答题 5.转基因沉默的原因及对策？ 参考答案： 答：转基因在受体植
23、物中往往不能稳定表达，有时甚至完全不表达，出现转基因 沉默现象。 转基因沉默的原因是多方面的， 根据外源基因失活或沉默的分子机制， 可将其分为三类：位置效应、转录水平的基因沉默（TGS)和转录后水平的基因沉 默(PTGS)。防止基因沉默的对策主要从以下方面实现：（1）转化载体中应尽量 避免使用相同的启动子及重复序列并保证载体上的构建序列在同一个方向阅读 以免产生异常或反义 RNA，尽量使用植物偏爱密码子。 （2） 使用去甲基化试剂。 （3）转基因的侧翼接上核基质结合序列(MAR)会在一定程度上避 免位置效应，提高基因表达。 （4）将外源 DNA 整合到染色体的特定位点上。 论述题简答题 3.在
24、植物病毒检测中将涉及到单克隆抗体的制备，简述制备的基本步 骤？ 参考答案：（1）免疫注射。 用病毒抗原免疫注射实验用小白鼠。 （2）细胞融合。取免疫小 白鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行共培养，使两者融合，获得杂交瘤细胞。（3）克隆化。 采 用稀释法，取单细胞在培养板中进行培养。 （4） 、 筛选。采用血清学方法，用已知的抗原病 毒对单细胞培养液中的抗体进行检测，保留抗体分泌阳性的单细胞系。（5）抗体生产。可用 一定浓度的杂交瘤细胞注射小白鼠腹腔，使其产生腹水，取腹水离心后获得含抗体的腹水。 或将所获的杂交瘤细胞株在盛有培养液的培养瓶中进行培养，获得含单克隆抗体的培养液。 第五批作业 论述题1、一个
25、完整的组织培养室由哪些部分所构成？ 参考答案： 答：（1）洗涤室。洗涤室用于组织培养用的玻璃器皿、塑料器皿和其他实验用 具清洗。（2）储存室。用于各类器皿和用具的存放与保管。配备各种规格的货 架、货柜、塑料框等。（3）培养基配制室。培养基配制室主要用来完成培养基 配制的各个环节的工作，如药品的称量、溶解，培养基的配制和分装等。（4） 灭菌室。灭菌室用于培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。（5）接种室。（6） 培养室。培养室要求卫生清洁、保温和隔热效果要好。窗户用双层玻璃，以利于 隔热保温，还可防止灰尘、昆虫及微生物的进入，达到清洁效果。 （7）研究室。 研究室用于对培养材料及培养结果进行观察、鉴
26、定、记录和分析。（8）温室或 苗圃。温室用来对培养的再生植株的驯化和移栽。 论述题4.如何对转入植物基因组中的外源目的基因进行检测？ 参考答案： 答：（1）对转入的目的基因序列片段进行检测。包括两种手段：一是 PCR 方法 检测外源基因；二是用 Southern 杂交方法，以目的基因 DNA 为探针，检测植物 基因组中与其同源的部分。 常见有Southern斑点杂交和Southern印迹杂交两种。 （2） 转入目的基因的 RNA 转录水平检测。 包括两种方式： 一是 Northern 杂交, 通 过总 RNA 或 mRNA 与探针的杂交来分析；二是 RT-PCR，以植物总 RNA 或 mRNA
27、 为 模板进行反转录，然后经 PCR 扩增目的基因特异条带。 （3）外源基因表达蛋白的检测。外源基因编码蛋白在转基因植物中能够正常表 达并表现出应有的功能乃是植物基因转化的最终目的。 外源基因表达蛋白检测主 要利用免疫学原理，主要采用 ELISA 检测、Western 杂交检测。ELISA 检测程序 包括抗体制备、抗体或抗原的包被、免疫反应及检出三个阶段。Western 杂交程 序包括转基因植株蛋白提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质、蛋白质条带 印迹、探针制备、杂交检出五个步骤。 论述题3、植物培养基由哪些成分构成，具有何作用？ 参考答案： 答：（1）、无机营养成分。主要包括氮、磷、硫
28、、钾、钙、镁、铁、锰、铜、 锌、硼、钼及碳、氢、氧等大量元素与微量元素。（2）、有机成分。为了不同 的培养目的往往要加入一些有机物如维生素类和氨基酸类等有机成分， 以利培养 材料的快速生长。 离体培养的植物材料常用的碳源是蔗糖。 （3） 、 生长激素。 植 物组织培养细胞分裂的启动、愈伤组织的生长以及根、 芽的分化或胚状体的发育 等必须辅以适当种类和适当浓度的植物激素。 生长素的生理作用主要是促进细胞 伸长和分裂。 在组织培养中常用于诱导根的分化和细胞分裂，与一定量的细胞分 裂素配合使用，可诱导不定芽的分化、侧芽萌发与生长以及诱导胚状体产生。细 胞分裂素主要是促进细胞分裂，诱导愈伤组织，促进器
29、官分化不定芽及解除顶端 优势促进腋芽萌发。(4) 琼脂、pH 及其他成分。 琼脂是一种由海藻获得的多糖 类物质，是固体培养最好的固化剂，本身并不提供任何营养。离体培养的植物材 料大多数要求弱酸性的环境，需要的 pH 在 50-60 之间。 在培养基中往往 因培养目的不同、植物材料不同，而加入一些成分，较常见的有活性炭、抗氧化 剂、抗生素、诱变剂等。 论述题2、分子标记主要在园艺植物哪些方面应用？ 参考答案： 答：（1）种质资源的遗传多样性分析及亲缘关系研究。采用比较植物学特征并 结合细胞学、 孢粉学和同工酶学等方法进行评价和分类都有其局限性。近十多年 来发展起来的分子标记技术为种质资源的遗传多样性分析及亲缘关系研究开辟 了广阔的前景。（2）遗传图的构建和基因定位。遗传图谱是遗传研究的重要内 容，又是种质资源、育种及基因克隆等许多应用研究的理论依据和基础。分子标 记为构建高饱和度的连锁图提供了有力的工具。（3）分子标记辅助选择育种， 提高育种效率。（4）核心种质筛选。分子标记可以在 DNA 水平上直接反映种质 资源的基因型和遗传结构，具有受环境影响较小、检测快速、多态性高等优点， 在园艺植物核心种质构建中得到了越来越多的应用。 （5）品种鉴定与纯度分析。 分子标记是在基因水平上的品种鉴定和种子纯度检验无组织器官特异性， 不受环 境的影响，准确度高、重复性好。
