1、TB-PPTB-PP体内诊断试剂体内诊断试剂结核菌素试验结核菌素试验 结核菌素试验结核菌素试验（也称为芒图试验芒图试验、PPDPPD试验试验）是一种诊断结核的工具。它是世界上两个主要结核菌素皮肤试验之一。一、原理简介一、原理简介 结核菌素试验，是基于型变态 反应原理的一种皮肤试验，是迟 发型细胞超敏反应，用来检测机 体有无感染过结核杆菌。 凡感染过结核杆菌的机体，会产生 相应的致敏淋巴细胞，具有对结核 杆菌的识别能力。当再次遇到少量 的结核杆菌或结核菌素时，致敏 T淋巴细胞受相同抗原再次刺激会 引起变态反应性炎症，释放出多种可溶性淋巴因子，导致血管通透性增加，巨噬细胞在局部集聚，导致浸润。约在
2、4872小时内，局部出现红肿硬节的阳性反应。若受试者未感染过结核杆菌，则注射局部无变态反应发生。二、历史二、历史 1890年罗伯特科赫首先公布发现结核菌素。该年4月4日柯赫在第10届世界医学会上表示，发现一种可以预防豚鼠结核病，并有治疗作用的物质。 1891年柯赫明确这种物质是结核菌的培养滤液，并命名为结核菌素（OT）。 1908年芒图(C.Mantoux)发现结核菌素试验方法，也称为芒图试验、PPD试验。 1928年美国塞伯尔（P.B.Seibert）从结核菌培养液中制成了一种纯蛋白衍生物结核菌素(PPD)。 1939年，原苏联的MA林尼科娃创建了一种修改版的PPD，PPD-L。在1954年
3、，原苏联开始批量生产PPD-L。 1941年美国研制成功一种标准纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-S)。 1958年丹麦研制成了更纯、更浓的纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-RT23)，为WHO推荐制剂。（50年代中期，UNICEF（联合国国际儿童基金会）委托丹麦血清研究所生产一大批PPD-RT23,共有650.5g，其中500g约330亿人份供各国使用至今。）三、常用种类三、常用种类结核菌素是结核杆菌的菌体成分，有两种： 1、旧结核菌素（old tuberculin，OT）是罗伯特柯赫（R.Koch）首先发明的。是从生长过结核分枝杆菌的甘油肉汤培养基中提炼出来的结核菌代谢产物，经过灭菌、浓缩形成原液
4、，使用时再稀释成一定倍数（通常是2000倍），使每0.1ml含1U。 主要成分有：（1）结核分枝杆菌蛋白；（2）菌体自溶成分；（3）菌体代谢产物；（4）培养基成分。三、常用种类三、常用种类 2、结核菌素纯蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）则是由塞伯尔（Seibert）首先制备。PPD菌素是一种由结核菌培养滤液制成、只含结核菌蛋白、不含结核菌体的生物制品。 结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）更为精纯，为纯结素，不产生非特异性反应。其制作过程：菌株培养灭菌、滤过浓缩盐析、脱盐干燥、保存分装。 PPD-RT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用，已经取代OT。我国
5、从人型结核菌制成PPD（PPD-C；BT-PPD），又从卡介苗制成BCG-PPD。四、试验目的四、试验目的 （1）为接种卡介苗提供依据，如结核菌素试验阳性时，表明体内已感染过结核菌，无需再接种卡介苗。阴性者是卡介苗的接种对象。 （2）为测定免疫效果提供依据：一般在接种卡介苗3个月以后，应做结核菌素试验，了解机体对卡介苗是否产生免疫力。假如结核菌素阳性，表示卡介苗接种成功，反之需重新再进行卡介苗接种。 （3）用于诊断与鉴别诊断：结核菌素试验对青少年、儿童及老年人的结核病的诊断和鉴别有重要作用，是普遍运用的辅助检查手段，是测定是否感染结核菌的一种传统方法。四、试验目的四、试验目的 （4）结核菌素试
6、验还可作为婴幼儿结核病诊断的参考，测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能及在未接触过卡介苗的人群中调查结核病的流行情况。 结核菌素试验广泛应用于：结核菌感染的流行病学调查、结核病流行情况监测、寻找高发人群（主要是儿童、少年）、选择化学预防对象、考核卡介苗接种质量、了解机体细胞免疫功能等方面。 卡介苗：卡介苗：“出生第一针”。 接种的主要对象是新生婴幼 儿，接种后可预防发生儿童 结核病，特别是能防止那些 严重类型的结核病，如结核 性脑膜炎。如果出生时没能 及时接种，在1岁以内一定 要补种。五、试验程序五、试验程序 结核菌素试验方法很多，常用的是芒图（Mantoux）氏法，即将PPD用无菌生理盐水稀释
7、成不同浓度，取0.1毫升注射于左前臂掌侧前1/3中央皮内（注意：左手），72（48h96h）小时检查反应情况，应注意局部有无硬节，不可单独以红晕为标准。五、试验程序五、试验程序 我国规定以72小时为观察反应时间，48-96小时内皆可测量反应，常用的记录方法是将测得的硬结用平均直径（横径毫米数+纵径毫米数）2表示，如有水泡、硬结、坏死和淋巴结炎时，应作记录。五、试验程序五、试验程序 阴性反应：阴性反应：无硬结或硬结平均直径5mm，15mm。六、结果分析六、结果分析 测试结果的解释应慎重，因技术原因或有少数免疫力低下的人（约5%），试验也会出现假阴性或假阳性结果。1 1、阳性、阳性 结素试验阳性反
8、应仅表示机体对结核杆菌有变态反应，但不表示一定患病，它虽表明休内已有结核菌，但也说明机体对结核病已产生了一定免疫力。 我国城市成年居民的结核感染率在60%以上，故用5IU结素进行检查，其一般阳性结果意义不大。但如用高稀释度（1IU）作皮试呈强阳性者，常提示体内有活动性结核灶。 结素试验对婴幼儿的诊断价值比成年人大，因为年龄越小，自然感染率越低；对3岁以下的婴幼儿未接种过卡介苗而结素反应阳性者，应考虑有新近感染的活动性结核病，须给予治疗。 结素反应阳性也是接种卡介苗后所产生 变态反应的表现，在流行病学上常用来 考核卡介苗的接种效果。 成年人强阳性反应表明可能有活动性感 染，应进一步检查是否有结核
9、病。2 2、阴性、阴性 结素试验阴性反应除提示没有结核菌感染外，还见于以下情况： 结核菌感染后需48周有变态反应充分建立；在这变态反应前期，结素试验可为阴性。 在应用糖皮质激素等免疫抑制剂者，或营养不良及麻疹、百日咳等病人，结素反应也可暂时消失。 严重结核病和各种危重病人对结素无反应，或仅为弱阳性，这都是由于人体免疫力连同变态反应暂时受到抑制的结果；待病情好转，又会转为阳性反应。 其他如淋巴细胞免疫系统缺陷（如淋巴瘤、白血病、结节病、艾滋病等）病人和老年人的结素反应也常为阴性。 对3岁以下的婴幼儿未接种过卡介 苗而结素试验阴性，应予接种卡 介苗，促使机体产生对结核病的 抵抗能力，使结素试验阳转
10、。3 3、两步测试、两步测试 对于免疫功能健全的人来说，只要有一个结核菌进入肺泡内造成感染，则结素反应可呈阳性。反之，没有被结核菌感染的人几乎对结核菌没有抵抗能力，结素反应也就呈阴性。 有些以前感染结核病的人在感染后数年进行测试时可能呈阴性，因为免疫系统的反应可能会逐渐减弱。这一初步皮肤试验，虽然是阴性的，但可能刺激身体的免疫系统，使后来的测试结果呈阳性。 使用两个步骤进行初步测试，将确保今后如果试验呈阳性，可以解释为一个新的感染，而不是一个老的感染的简单的反应。 第一次注射后48至72小时检查结果 呈阳性，考虑感染者 呈阴性，在1至3周后给予第二次测试 第二次注射后48至72小时检查结果 呈
11、阳性，考虑以前的感染 呈阴性，考虑未感染七、结核菌素问答七、结核菌素问答1、提问：我的小孩现在是一岁 多了，前几天我发现她脖子 好象有长几个淋巴结，所以 带她去看医生。结果发现结 核菌素反应呈阳性，请问现 在有没有什么办法可以很好 地解决这个问题。我急切地 想知道答案，恳请医生能否 早日给我建议。 2、提问：我在怀孕35天时注射了结核菌素，是否会对婴儿有影响？ 3、提问：我的太子宝宝接种卡介苗后三个月要做结核菌素实验，是怎么做的？还有宝宝今天有点呼吸道感染，可以做实验吗？ 4、提问：我的孩子三个多月了，打第三个月疫苗针的时候医生也没告诉我们要做这个结核菌素实验。结果回家发现有这么一个小通知单说
12、满三个月要做这个实验，我不知道该不该再去做。七、结核菌素问答七、结核菌素问答5、提问：我的女儿在1岁接种卡介苗时做结核菌素试验呈阳性，说是已经感染了，我该注意些什么?我有必要去给孩子做相关的检查吗?6、提问：宝宝接种卡介苗前需要做实验吗？7、提问：卡介苗接种后没有成功怎么办？8、提问：为何一出生就要接种卡介苗？9、提问：出生时未接种卡介苗，现在2岁可 以接种吗？若不接种，可以吗？PPD皮试 有哪些注意事项？10、提问：新生儿什么情况不能打卡介苗？11、提问：小儿两岁半，近半年来因反复咳嗽，照了张X射线片，被疑为肺门淋巴结结核，医生要求再做PPD（结核菌素）试验，但本人从某些网站看到，接种过卡介苗的人，PPD试验都会呈阳性，既然如此，还有必要再做该项试验吗？12、提问：感染结核菌是不是一种病，会不会传染，要不要紧? 谢谢 谢谢 ！
