1、肿瘤免疫逃逸机制及治疗新思路肿瘤免疫逃逸机制及治疗新思路 免疫抑制免疫抑制 免疫耐受免疫耐受 免疫衰老免疫衰老n通过自分泌或旁分泌形通过自分泌或旁分泌形式分泌免疫抑制因子，式分泌免疫抑制因子，如：如：TGF-、PGE2等。等。n直接诱导机体产生免疫直接诱导机体产生免疫抑制性细胞，如：抑制性细胞，如：Th2细胞、细胞、CD4+CD25+Treg细胞等。细胞等。n肿瘤细胞通过肿瘤细胞通过Fas-FasL、PD-1/PD-2-配体等途径介配体等途径介导免疫效应细胞凋亡。导免疫效应细胞凋亡。n免疫效应细胞活化信号受抑制免疫效应细胞活化信号受抑制 在未成熟的在未成熟的T细胞表面，细胞毒性细胞表面，细胞毒
2、性T淋巴细胞抗原淋巴细胞抗原-4 (CTLA-4)表达水平很低，当表达水平很低，当TCR获得较强获得较强/持久的刺激后，持久的刺激后，CTLA-4可聚集到可聚集到T细胞表面，与细胞表面，与CD28竞争结合竞争结合CD28/CD86，影响，影响TCR通路信号传导，抑制通路信号传导，抑制T细胞活化。细胞活化。n免疫抑制细胞活化信号被激活免疫抑制细胞活化信号被激活 CTLA-4在免疫抑制细胞中发挥活化作用。在免疫抑制细胞中发挥活化作用。P Karolina, U Hideki, R Lee, et al. Dendritic cell subsets as vectors and targets f
3、or improved cancer therapy.n研发具免疫调节功能的单克隆抗体，是免疫治疗的一个新研发具免疫调节功能的单克隆抗体，是免疫治疗的一个新思路。这类抗体是通过激活机体内的免疫效应细胞，增强思路。这类抗体是通过激活机体内的免疫效应细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤效应，如其对肿瘤细胞的杀伤效应，如ADCC和和CDC效应。效应。n单克隆抗体类生物制剂的靶标既可以是免疫细胞，也可以单克隆抗体类生物制剂的靶标既可以是免疫细胞，也可以是肿瘤细胞，是肿瘤细胞，后者是肿瘤分子靶向治疗的主要手段后者是肿瘤分子靶向治疗的主要手段。nIpilimumab和和Tremelimumad，均为抗，均为抗CT
4、LA-4单抗。单抗。n研究显示，研究显示， Ipilimumab和和Tremelimumad能抑制能抑制T细胞中的细胞中的CTLA-4信号传导，逆转信号传导，逆转CTLA-4对效应对效应T细胞的抑制，同时也可阻断细胞的抑制，同时也可阻断CTLA-4对免疫抑制细胞的激活。对免疫抑制细胞的激活。A Francesca, Y Jianda, Y Arvin, et al. Modulation of CTLA-4 and GITR for cancer immunotherapy.n临床研究显示，临床研究显示， Ipilimumab和和Tremelimumad在恶性黑色素瘤以及前列腺在恶性黑色素瘤以
5、及前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌中均有一定疗效。癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌中均有一定疗效。A Francesca, Y Jianda, Y Arvin, et al. Modulation of CTLA-4 and GITR for cancer immunotherapy.南方医院肿瘤中心南方医院肿瘤中心n杀瘤机制：杀瘤机制：细胞毒颗粒、穿孔素、细胞毒颗粒、穿孔素、Ca2+；细胞因；细胞因子；协同增强子；协同增强NK细胞、细胞、 M杀伤肿瘤细胞。杀伤肿瘤细胞。nCIK治疗在基础和临床应用中得到推广和改进。治疗在基础和临床应用中得到推广和改进。n杀瘤活性强、杀瘤谱广、不良反应轻微，广泛用杀
6、瘤活性强、杀瘤谱广、不良反应轻微，广泛用于肿瘤的辅助治疗。于肿瘤的辅助治疗。n指自体或同种异体外周血淋巴细胞经细胞因子（以IL-2为主）活化后获得的免疫杀伤细胞。n对肾细胞癌、恶性黑色素瘤、鼻咽癌、非霍奇金淋巴瘤等肿瘤疗效较好。n对于控制微小残留灶以及恶性胸（腹）水的治疗效果较为显著。n提取DC，体外经各种免疫调节剂的激活，和/或用各种形式抗原修饰DC （肿瘤抗原肽、细胞性抗原、DNA或RNA等），然后回输体内，激活细胞 ，产生强大的抗肿瘤免疫反应，从而解决因DC功能缺陷造成的肿瘤免疫逃逸。研究纳入512例内分泌治疗无效的转移性前列腺癌患者(无症状或症状轻微)，按2:1比例随机分为Proven
7、ge (n=341)或安慰剂治疗组(n=171)，主要终点为总生存期(OS)。Kantoff PW, Higano CS, Shore ND, et al. N Engl J Med 2010.治疗方案：治疗方案：获取患者外周血单个核细胞 PAP-GM-CSF体外活化APCs3天后回输细胞（每两周回输1次，共回输3次）。结果显示：结果显示：Provenge治疗组死亡风险下降22.5%（P = 0.032）；中位OS显著延长（25.8 mo vs. 21.7 mo） 。Provenge组中位生存时间显著延长（25.8m vs. 21.7m, P=0.03） 亚组分析亚组分析PROVENGE治疗耐
8、受性好；常见的不良反应有：寒颤、发热、头痛等；可于回输前30 min给予对乙酰氨基酚类药物和抗组胺类药物；每次回输持续时间约为60 min。PROVENGESV40p5 Her-2 NeoTR TR BA46 proteinAAV/BA46CD419.6%CD48.6%CD8 54.91%CD8 71.2%CD8 69.7%CD8 56.3%CD560.9%CD566.1%CD Markers of T Cells Stimulated by AAV/BA46 Virus-DC1) Ag protein (bacteria)2) AAV/Ag/Neo3) 293 cell lysateGM-C
9、SF T cell addition IL-4IL-2IL-7Chromium release assayprimingday 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12Mo DC lysate AAV/Neo wt AAV AAV/BA46/Neo AAV/BA46/Neo + anti-class I80604020 0 % CTL killingH578T Brst CA line pulsing technique:M1M112% Dc only13 % Dc + AVV23% Dc+ AVV+ Neo92% Dc +AVV E7+E640 % Dc E7+ E6M1M1
10、M1lysate-DC, 11% wt AAV-DC, 10%GST-BA46 prot AAV/BA46/Neo-DClipof-DC, 29% 92%High efficiency delivery of the antigen into DC by an rAAV virus81%44%Compare of IL-12 p70 Expression Level by FACS AnalysisIL-12 is a significant type 1-promoting cytokine, and a potent inducer of IFN- production. It exert
11、s a powerful positive regulatory influence on the development of Th1 cell immune response and CTL differentiation and functions In addition, IL-12 is crucial for polarizing CD4+ and CD8+ T-cells at the time of pulsing toward a Th1 phenotype. While with maturation, the DC can produce large amounts of
12、 IL-12 and become resistant to the suppressive effects of antigen-presenting function by IL-10 . BA46 proteinAAV/BA46 K562 +anti-class I fullyautologous70605040302010 0 % CTL killingA B A B r-AAV/Her-2 Her-2 proteinr-AAV/Her-2 pulsing of DC results in a high killing of Breast cancer cell (two patien
13、ts)52%48%48%43%K-cells A Liver B C B-cells D Lung r-AAV/BA46-pulsing of DC results in a high killing of primary breast cancer cell (A, B, C & D patients)DC：AAV/GM-CSF、AAV/IL-4 、AAV/TNF-、AAV/IL-12CTL：AAV/IL-7、AAV/IL-2 、AAV/IFN-GM-CSF secretion700600300200100 0hrs 48 24 48 72 24 48 72 1000 ul AAV/GFP/
14、Neo 500 ul 1000 ul ctrl AAV/GM-CSF/Neo virus DC T-cellCompare DC Infected with AAV/GM-CSF, AAV/IL-4 & AAV/TNF- to Exogenous Cytokines-pulsed DC for Their Ability to Elicit T-cell Proliferative Responses504846444240 std exog cytok AAV/IL-2 AAV/IL-7 AAV/GM-CSF AAV/IFN-% killing of Breast CellsAAV deli
15、very of antigen plus cytokine genesAAV/Her-2 plus结结 语语n近年来，肿瘤免疫治疗的循证医学近年来，肿瘤免疫治疗的循证医学证据逐渐增多，证据逐渐增多，PROVENGE等的成等的成功令人鼓舞！功令人鼓舞！n然而，各种肿瘤免疫逃逸机制形成然而，各种肿瘤免疫逃逸机制形成了一个复杂的网络，免疫治疗也应采了一个复杂的网络，免疫治疗也应采取联合治疗策略，避免局限于某类抗取联合治疗策略，避免局限于某类抗原肽、某个因子、某种细胞。原肽、某个因子、某种细胞。n此外，随着肿瘤免疫学的不断发展，此外，随着肿瘤免疫学的不断发展，也希望能够寻找到免疫治疗疗效预测也希望能够寻找到免疫治疗疗效预测因子。因子。
