1、灭菌技术概述灭菌技术概述 灭菌操作是为了保证杂菌不进入工业发酵系统。（一）灭菌项目（一）灭菌项目（二）灭菌方法（二）灭菌方法（三）灭菌的矛盾之处（三）灭菌的矛盾之处（四）具体的灭菌技术（四）具体的灭菌技术（一）灭菌项目（一）灭菌项目 1、在投入生产之前，必须对设备、管道进行彻底清洗、和严格灭菌。2、对通入的培养基、通入的空气进行先行灭菌。（二）灭菌方法（二）灭菌方法2、化学法1、加热法3、辐射法4、过滤法（三）灭菌的矛盾之处（三）灭菌的矛盾之处对杀灭细菌的同时 1、培养基中的营养成份也随之遭到分解和破坏。2、杀死杂菌的同时也杀死了工程细菌。（四）具体的灭菌技术（四）具体的灭菌技术 可分为6种技
2、术：1 1、间歇灭菌法、间歇灭菌法 2 2、加热灭菌法、加热灭菌法 3 3、连续灭菌法、连续灭菌法 4 4、空气加热灭菌法、空气加热灭菌法 5 5、空气过滤灭菌法、空气过滤灭菌法 6 6、营养物质瞬时高温杀菌法、营养物质瞬时高温杀菌法1：间歇灭菌法：间歇灭菌法 又称为分批灭菌，是指将培养基放在发酵罐内，然后连罐加热到规定的灭菌温度。（1 1）灭菌方法）灭菌方法（2 2）注意事项）注意事项（3 3）间歇灭菌法的优点）间歇灭菌法的优点（1 1）灭菌方法）灭菌方法 间歇灭菌的操作过程分为3个过程：加热-保温维持-冷却。这些不同的阶段，均能够起到灭菌的作用。然而，在灭菌过程中，保温杀菌的作用是主要的，
3、冷却杀菌的作用最小。（2 2）注意事项）注意事项 应当避免过长的加热时间，否则常常会破坏培养基中的营养物质。系统经过灭菌操作之后，必须达到不留1个杂菌，否则，只要经过1昼夜的增殖，1个杂菌就会增加到272个杂菌，最后会导致整批发酵液的失败。（3 3）间歇灭菌法的优点）间歇灭菌法的优点 设备造价低廉。便于进行手动操作。2 2：加热灭菌法：加热灭菌法 隧道灭菌箱设备3 3：连续灭菌法：连续灭菌法（1 1）定义）定义（2 2）技术分类）技术分类（3 3）连续灭菌法的优点）连续灭菌法的优点（4 4）连续灭菌法的不足）连续灭菌法的不足（1 1）定义）定义 连续灭菌法是指灭菌的操作的加热、保温维持、冷却这
4、三个过程，在同一时间内进行。因此，在连续灭菌系统中，需要分别设置加热设备、保温维持设备、冷却设备。（2 2）技术分类）技术分类 连续灭菌法可以分为2种：（）加热、冷却缓慢交替进行方法。（）迅速升温+闪急冷却方法-这种方法称为HTST方法，这对于保证营养物质极为有利。（3 3）连续灭菌法的优点）连续灭菌法的优点（）可减少培养剂中营养物质的损失、提高产物收率。（）由于操作条件恒定，可以获得稳定的灭菌质量。（）容易实现自控操作。（）能够避免系统的反复加热和冷却，可提高热利用率。是目前很多制药厂经常采用的方法。（4 4）连续灭菌法的不足）连续灭菌法的不足 A、投资较大，B、需要同时设置加热、冷却装置。
5、4 4：空气加热灭菌法：空气加热灭菌法 利用空气压缩时产生的高温，使得微生物体内的蛋白质变性，而达到杀菌目的，这种方法称为空气加热灭菌法。不同温度下的空气细菌存活时间：200/15.1s，250/5.1s，300/2.1s，350/1.05s。干热杀菌的流程通常是：先采用废热，将空气预热到60-70，然后进入压缩机压缩，并在200以上的温度维持一段时间。以便杀死杂菌，然后再进入发酵罐之中。5 5：空气过滤灭菌法：空气过滤灭菌法 是指让空气通过过滤介质，以阻截空气中所含的微生物，取得无菌空气的目的。空气过滤分为2种：（1 1）绝对过滤）绝对过滤（2 2）深层过滤）深层过滤陶瓷过滤机（1 1）绝对
6、过滤）绝对过滤 如超滤膜过滤就属于绝对过滤 是指所用滤膜的孔径小于空气中的固体颗粒。从而把颗粒截留。（2 2）深层过滤）深层过滤 是凭借滤层内的曲折通道，而将颗粒截留的方法。它不要求滤膜的孔径小于空气中的固体颗粒。这是目前发酵工业常用的过滤除菌方法。深层过滤所用的过滤介质-棉花、活性碳、玻璃纤维、合成纤维、各种有机或无机的烧结材料（烧结金属、烧结陶瓷、烧结塑料、蒙乃尔合金粉烧结板）、超细玻璃纤维、超细玻璃纤维过滤纸，微孔聚合物（聚乙烯醇PVA过滤板、PVA烧结板等已经在日本的发酵工业中广泛应用）。6 6：营养物质瞬时高温杀菌法：营养物质瞬时高温杀菌法 一般来说，当温度升高时，微生物死亡速率的增加营养物质遭到破坏的速率。因此，对于瞬时的高温，细菌常常被杀死，而营养物质则破坏得不多。根据这一原理，可以采用营养物质瞬时高温杀菌法进行杀菌操作。
