1、克隆技术复习植物的克隆1.植物克隆的技术基础是植物组织培养2.植物细胞全能型是指 遗传上的全能性潜能3.具有全能性的原理是全部遗传信息4.全能性表达条件 完整的细胞结构处于离体状态提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件 受精卵生殖细胞体细胞(与细胞分化程度成反比)5.全能性大小比较植物组织培养程序适当配比的营养物质和植物生长调节剂离体的植物组织、器官或细胞愈伤组织胚状体或根、芽试管苗无菌条件脱分化再分化光已分化的细胞经过诱导后失去其特有的结构和功能而转变成相对未分化细胞的过程叫脱分化。菊花的组织培养 由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。愈伤组织细胞高度液泡化、呈无定形状态,体积小,细
2、胞核大。愈伤组织:将含有愈伤组织培养物的试管放在摇床上,通过液体悬浮培养可以分散成单细胞(胚性细胞)胚性细胞的特征:细胞质丰富、液泡小、细胞核大植物细胞全能性的体现1.实践表明,植物体的几乎所有组织的细胞,通过诱导都可再生新植株。2.由于不同种类植物或同种植物的不同基因型个体间遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同。3.在长期培养中,培养物的胚胎发生和器官形成能力下降培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因有1.染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等,其结果不可逆。2.细胞或组织中激素平衡被打破,或细胞对外源生长物质的敏感性发生改变。3.随着时间推移,由于其他各种原因产生了缺乏成胚性的
3、细胞系。细胞培养和器官培养单细胞细胞团球形胚心形胚胚状体完整植株通过平衡的植物激素配比进行调控原生质体培养与植物细胞工程植物原生质体获得方法:在0.5-0.6mol/L的甘露醇(较高渗透压)下用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,将细胞壁消化除去,获得球形的原生质体。原生质体培养成功标志着植物细胞工程技术又向前迈进了一步。植物细胞工程的操作过程植物细胞(包括原生质体)导入培养转基因细胞新植株显微注射基因工程方法或外源遗传物质或或培养细胞融合显微注射细胞融合电刺激、聚乙二醇诱导等酶解法植物细胞培养、器官培养和原生质体培养的关系离体组织脱分化愈伤组织再分化 器官(器官培养)幼胚幼体悬浮培养处理单个细胞(细胞培养)胚状体除去细胞壁 原生质体(原生质体培养)完整的植株可用于导入外源基因和体细胞杂交()()()()植物组织培养的用途1.植株快速繁殖2.脱毒植株的培育3.制造人工种子4.生产药物、杀虫剂等5.转基因植物的培育人工种子B2.C3.营养物质激素植物细胞的全能性有丝分裂分化培养基、器械细胞中叶绿素的合成需要光照条件选择性表达D4.