1、蛙离体神经干生物电信号蛙离体神经干生物电信号与兴奋性的检测与兴奋性的检测一、一、实验目的:实验目的:1.蛙离体神经干的制备蛙离体神经干的制备2.学习生物电信号的引导,观察并学习生物电信号的引导,观察并分析神经干复合动作电位波形。分析神经干复合动作电位波形。二、制备蛙离体坐骨神经干标本二、制备蛙离体坐骨神经干标本1.1.破坏脑脊髓破坏脑脊髓2.2.剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏:骶髂关节水平以骶髂关节水平以上上1cm1cm处剪断脊柱处剪断脊柱3.3.剥皮剥皮,并洗净手和用过的器械并洗净手和用过的器械4.4.游离坐骨神经游离坐骨神经,至至踝踝关节关节(神经分离干净、(神经分离干净、足够长、滴
2、加任氏液)足够长、滴加任氏液)5.仪器的连接:仪器的连接:12粗粗细细r1r2r3r4红红红红红红黑黑黑黑绿绿绿绿仪器连接RM6240C微机生物信号处理系统神经干标本盒。S+S-E R1-R1+R2-R2+神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道三三.实验观察项目实验观察项目1.引导双相动作电位;引导双相动作电位;阈强度、最大刺激阈强度、最大刺激强度强度(同步触发同步触发)2.神经干动作电位传导速度的测定神经干动作电位传导速度的测定3.神经兴奋性周期变化的检测神经兴奋性周期变化的检测(最大刺激强度)(最大刺激强度)4.单相动作电位单相动作电位1.引导双相动作电位引导双相动作
3、电位刺激伪迹AP刺激器放大器+地刺激电流i-i+R+R-地刺激伪迹刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。与刺激同步,随刺激强度增大而增大。双相动作电位原理?双相动作电位原理?-+-+-+-+R 1 =R 2R 1 R 2R 1 =R 2+-+-+-+-+-+R 1 R 2外外内内外外内内内内外外内内外外阈强度阈强度:对神经干而言,指神经干刚对神经干而言,指神经干刚好能产生动作电位的刺激强度好能产生动作电位的刺激强度(恰能诱发动作电位时的刺激强度)(恰能诱发动作电位时的刺激强度)最大刺激强度最大刺激强度:能产生最大动作电位能产生最大动作电位的最小刺激强度的最小刺激强度
4、(动作电位幅度不随刺激强度增大而增加)(动作电位幅度不随刺激强度增大而增加)阈强度、最大刺激强度阈强度、最大刺激强度0V0.25V0.3V0.4V0.5V0.6V0.7V0.8V0.9VAA1.“全全”或或“无无”2.不衰减传导不衰减传导3.脉冲性脉冲性复合动作电位复合动作电位单个细胞单个细胞AP胞外两点间电位差胞外两点间电位差细胞内外电位差细胞内外电位差阈强度阈强度最大刺激强度最大刺激强度阈强度阈强度无最大刺激强度无最大刺激强度为什么在一定范围内(阈上刺激),为什么在一定范围内(阈上刺激),刺激强度越大,神经干所形成的动作刺激强度越大,神经干所形成的动作电位越大?电位越大?这是因为随着刺激强
5、度的增加,神经这是因为随着刺激强度的增加,神经干上兴奋的神经纤维越来越多的缘故。干上兴奋的神经纤维越来越多的缘故。2.测定传导速度测定传导速度(自动自动/手动手动)V=S/t(m/s)S1S2r1r4r3r2S(cm)3.检测兴奋性周期变化检测兴奋性周期变化v绝对不应期绝对不应期v相对不应期相对不应期v超常期超常期v低常期低常期0随着波间隔的缩随着波间隔的缩小,越来越多神小,越来越多神经纤维在接受第经纤维在接受第二个刺激时已处二个刺激时已处于第一个刺激诱于第一个刺激诱发的兴奋不应期,发的兴奋不应期,所产生的复合动所产生的复合动作电位波幅就减作电位波幅就减小了。小了。S1S2r1r4r3r24.
6、单相动作电位单相动作电位(1)彻底夹伤)彻底夹伤r1与与r2之间神经干之间神经干(2)产生单相)产生单相AP原因原因兴奋不能传导至兴奋不能传导至B点点注意事项:注意事项:1 1)神经标本尽可能长,仔细除净附着于神经干)神经标本尽可能长,仔细除净附着于神经干上的结缔组织膜及血管,不能损伤牵拉神经干。上的结缔组织膜及血管,不能损伤牵拉神经干。2 2)神经干不可与标本盒壁接触,也不要把神经)神经干不可与标本盒壁接触,也不要把神经干两端折迭在电极上,以免影响动作电位波形。干两端折迭在电极上,以免影响动作电位波形。3 3)每次刺激后,应注意休息半分钟,再进行下)每次刺激后,应注意休息半分钟,再进行下次刺激。次刺激。4 4)保持标本湿润,但电极和神经上不能带有水)保持标本湿润,但电极和神经上不能带有水珠,以免短路。珠,以免短路。单刺激方式,刺激幅度单刺激方式,刺激幅度0.13V,刺激波宽,刺激波宽0.1ms,延迟,延迟5ms,同步触发。,同步触发。实验参数实验参数采样频率通道模式扫描速度灵敏度滤波频率时间常数为什么为什么AP1AP1较较AP2AP2出现早且波形幅度大呢?出现早且波形幅度大呢?粗粗细细